ER α-甘露糖苷酶表达降低引起大鼠肝脏上皮细胞微绒毛减少变短

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作者 赵方萄 李瞡 +2 位作者 史耕先 刘音 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期52-55,共4页

目的观察蛋白质糖基化改变对大鼠肝脏上皮细胞WB-F344表面微绒毛及在培养中生长的影响。方法构建含正义或反义6A8DNA的重组pAGX(+)质粒,用脂质体法将重组质粒或空载质粒转染WB-F344细胞,作G418筛选,以有限稀释法作细胞克隆,进行PCR检测... 目的观察蛋白质糖基化改变对大鼠肝脏上皮细胞WB-F344表面微绒毛及在培养中生长的影响。方法构建含正义或反义6A8DNA的重组pAGX(+)质粒,用脂质体法将重组质粒或空载质粒转染WB-F344细胞,作G418筛选,以有限稀释法作细胞克隆,进行PCR检测新霉素抗性(neoR)基因以确定转染DNA在细胞基因组中的整合;用P-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside作底物检测细胞匀浆上清中ERα-甘露糖苷酶的活性;采用扫描电镜观察细胞表面的微绒毛,并做生长曲线检测。结果转染反义6A8的各WB-F344克隆细胞株的匀浆上清中,ERα-甘露糖苷酶活性有不同程度降低,其中以克隆AS1与AS2的降低最明显。克隆AS1与ConA结合增强,表面微绒毛减少、变短,细胞增殖减慢。结论大鼠肝脏ERα-甘露糖苷酶表达抑制所致的蛋白质糖基化改变,可导致大鼠肝脏上皮细胞WB-F344微绒毛减少、变短,细胞生长速度减慢。 展开更多

关键词 糖基化 微绒毛α-甘露糖苷酶

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N-聚糖合成通路中内质网α-1,2甘露糖苷酶和α-甘露糖苷酶Ⅱ基因对家蚕胚胎滞育的调控作用

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作者 阿依努尔·亚森 樊丙炎 +7 位作者 陈艳花 宁阳威 王东岳 吴赛 朱娟 王梅仙 唐顺明 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期106-115,共10页

家蚕滞育是基因与环境协同作用的结果,其调控网络十分复杂,至今仍未完全阐明。为了解家蚕N-聚糖生物合成通路是否参与胚胎滞育调控,调查家蚕不同化性品系蛹期、胚胎发育早期以及滞育激素(DH)、蜕皮激素(20E)处理后BmN细胞中内质网α-1,... 家蚕滞育是基因与环境协同作用的结果,其调控网络十分复杂,至今仍未完全阐明。为了解家蚕N-聚糖生物合成通路是否参与胚胎滞育调控,调查家蚕不同化性品系蛹期、胚胎发育早期以及滞育激素(DH)、蜕皮激素(20E)处理后BmN细胞中内质网α-1,2甘露糖苷酶基因(BmMAN1B)和α-甘露糖苷酶Ⅱ基因(BmMAN2)的转录水平。qRT-PCR结果显示:这2个基因在不同化性品系中的转录水平存在较大差异,蛹晚期的转录水平高于早期;分别用100 nmol/L DH和10 ng/mL 20E处理BmN细胞,BmMAN1B和BmMAN2的转录水平都极显著上调,提示2个基因与家蚕滞育密切相关。对BmN细胞和家蚕二化性品系秋丰165℃催青产非滞育卵组(QFLT)蛹期2 d雌蛹进行BmMAN1B和BmMAN2基因的RNA干扰,结果发现滞育相关基因BmDH、BmDHR-1、BmTRE2和BmSDH-2a等的转录水平发生了变化;当在个体水平进行BmMAN1B和BmMAN2基因的共同干扰时,382%的子代卵由非滞育转变为滞育。结果表明,BmMAN1B和BmMAN2在家蚕胚胎滞育中具有重要的调控作用。 展开更多

关键词 家蚕 滞育 N-糖基化 内质网α-1 2甘露糖苷酶 α-甘露糖苷酶Ⅱ

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α-甘露糖苷酶研究进展 被引量：12

3

作者 王姗姗 徐向军 +6 位作者 路浩 赵宝玉 荣杰 庞龙 宋岩岩 张樑 温伟利 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期92-97,共6页

α-甘露糖苷酶多具有糖苷水解酶38、47家族保守序列,目前已测序的α-甘露糖苷酶基因序列超过2000多种,根据α-甘露糖苷酶基因保守序列可将其分为三类,即Ⅰ类α-甘露糖苷酶、Ⅱ类α-甘露糖苷酶和未分类α-甘露糖苷酶。α-甘露糖苷酶主要... α-甘露糖苷酶多具有糖苷水解酶38、47家族保守序列,目前已测序的α-甘露糖苷酶基因序列超过2000多种,根据α-甘露糖苷酶基因保守序列可将其分为三类,即Ⅰ类α-甘露糖苷酶、Ⅱ类α-甘露糖苷酶和未分类α-甘露糖苷酶。α-甘露糖苷酶主要参与蛋白质糖基化修饰和糖蛋白聚糖水解修饰。其代谢异常可以引起多种疾病,目前研究较多的是由α-甘露糖苷酶功能障碍引起的先天性红细胞生成异常性贫血Ⅱ型和α-甘露糖苷贮积症。论文主要对α-甘露糖苷酶的分类及其在糖基化过程中的作用,以及与之有关的疾病进行介绍,以期为苦马豆素毒性作用机制研究提供理论参考。 展开更多

关键词 α-甘露糖苷酶 糖基化 苦马豆素

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高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在胃癌中的表达及其与E-cadherin、Galectin-3的关系 被引量：9

4

作者 杨雅莹 李艳青 +2 位作者 易永芬 何婷婷 肖钟 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1313-1317,共5页

目的:探讨胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)、E-cadherin、Galectin-3的表达及其与胃癌发生发展的关系。方法:应用免疫组化SP法检测65例胃癌,20例正常胃黏膜组织中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的表达情况。结... 目的:探讨胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)、E-cadherin、Galectin-3的表达及其与胃癌发生发展的关系。方法:应用免疫组化SP法检测65例胃癌,20例正常胃黏膜组织中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的表达情况。结果:65例胃癌中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的阳性表达率分别为85%(55/65)、40%(26/65)、74%(48/65)。20例胃正常切缘中GMⅡ、E-cadherin、Galectin-3的阳性表达率分别为50%(10/20)、100%(20/20)、40%(8/20)。GMⅡ、Galectin-3在浸润程度深及有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显高于浸润程度浅及无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。而E-cadherin则在分化程度低,浸润程度深及有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显低于分化程度高,浸润程度浅及无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。统计学分析GMⅡ与E-cadherin之间呈负相关(P<0.05),与Galectin-3无相关性(P>0.05)。结论:GMⅡ、Galectin-3在胃癌中高表达,且与癌组织的浸润和转移明显相关。同时GMⅡ与E-cadherin呈负相关,提示GMⅡ可能通过下调E-cadherin的表达来促进胃癌的发展。 展开更多

关键词 胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ E-CADHERIN GALECTIN-3 胃癌 免疫组化

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6A8α-甘露糖苷酶表达减弱和表达正常鼻咽癌细胞间的差异基因表达 被引量：8

5

作者 陈双玲 时岩 +3 位作者 靳玉兰 刘音 赵方萄 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期305-310,共6页

目的发现因转导反义6A8cDNA致恶性生物学行为减弱的人鼻咽癌细胞CNE-2L2(AS)和野生型细胞(W)间的差异表达基因。方法用DNA微列阵方法比较AS细胞和W细胞基因表达的差异。用Northern印迹和RT-PCR验证所得结果的可靠性。结果与W细胞相比,A... 目的发现因转导反义6A8cDNA致恶性生物学行为减弱的人鼻咽癌细胞CNE-2L2(AS)和野生型细胞(W)间的差异表达基因。方法用DNA微列阵方法比较AS细胞和W细胞基因表达的差异。用Northern印迹和RT-PCR验证所得结果的可靠性。结果与W细胞相比,AS细胞有34个基因的表达上调,有42个基因的表达下调。其表达增强可能对肿瘤恶性行为有抑制作用的基因有P130mRNAfor130Kprotein、TGF-betaIIRalpha、GABBR1、TGFBR1、TNFAIP1、STANIN、E-CADHERIN、CTNNA1、CTNNA2、RFX2及TMPO等,其表达减弱可能对肿瘤恶性行为有抑制作用的基因有CD44、NDRG1、TGFB1、RPS5、LEGUMAI、CBS、CD59及SNRPA1等。Northern印迹和RT-PCR验证了DNA微列阵方法检测的结果。结论与W细胞相比,AS细胞有34个基因表达上调,有42个基因表达下调,某些基因表达的改变可能与AS细胞恶性生物学行为的减弱相关。 展开更多

关键词 DNA微列阵 基因表达 肿瘤 6A8 α-甘露糖苷酶

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苦马豆素抑制α-甘露糖苷酶的剂量效应关系 被引量：7

6

作者 孔祥雅 荆新堂 +2 位作者 张丽慧 李勤凡 郭伟 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第1期43-46,共4页

根据苦马豆素(Sw)抑制α-甘露糖苷酶(AMA)的特点,建立了SW抑制AMA的剂量效应关系曲线和酶法测定SW溶液浓度的方法。SW溶液浓度范围在5×10-8mol/L^5×10-6mol/L时,SW溶液浓度的负对数与其抑制AMA活性百分比呈线性关系,线性方程Y... 根据苦马豆素(Sw)抑制α-甘露糖苷酶(AMA)的特点,建立了SW抑制AMA的剂量效应关系曲线和酶法测定SW溶液浓度的方法。SW溶液浓度范围在5×10-8mol/L^5×10-6mol/L时,SW溶液浓度的负对数与其抑制AMA活性百分比呈线性关系,线性方程Y=0.026X+5.167 4,R2=0.994 7。建立了酶法测定SW溶液浓度的方法,为疯草的进一步研究提供技术支持。 展开更多

关键词 苦马豆素 α-甘露糖苷酶 活性

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小花棘豆中毒对大鼠睾丸α-甘露糖苷酶的影响 被引量：5

7

作者 贾琦珍 陈根元 +1 位作者 吴书奇 王帅 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期6-12,共7页

旨在探讨小花棘豆对大鼠睾丸α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,揭示小花棘豆的毒性作用机理。将72只大鼠随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加150g/kg(含苦马豆素30mg/kg)、Ⅱ组添加300g/kg(含苦马豆素60m... 旨在探讨小花棘豆对大鼠睾丸α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,揭示小花棘豆的毒性作用机理。将72只大鼠随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加150g/kg(含苦马豆素30mg/kg)、Ⅱ组添加300g/kg(含苦马豆素60mg/kg)、Ⅲ组添加450g/kg(含苦马豆素90mg/kg)的比例制作混合饲料,饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后每7d每组随机采集2只大鼠的睾丸,检测大鼠睾丸AMA活性及表达的变化。结果显示,在63d的试验过程中,试验组及对照组大鼠睾丸高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(AMA1)和溶酶体α-甘露糖苷酶(AMA2)均有表达,但各试验组表达转录水平与对照组差异显著,试验Ⅰ组大鼠AMA1和AMA2的表达与对照组差异不显著(P>0.05),但试验Ⅲ组大鼠AMA1和AMA2的表达均显著低于对照,随着试验的进行,抑制效果愈加明显。说明,小花棘豆中毒可影响大鼠睾丸AMA的活性及其基因的转录表达。 展开更多

关键词 小花棘豆 苦马豆素 α-甘露糖苷酶 大鼠 睾丸

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6A8α-甘露糖苷酶酶解p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside 被引量：5

8

作者 王壮志 李琳 +3 位作者 史耕先 刘音 赵方萄 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期423-427,共5页

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后... 目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后的cDNA片段经测序完全符合6A8cDNA碱基顺序。转染重组表达载体pCDI-6A8的COS-7细胞的匀浆对p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside的酶解作用为转染空载体pCDI的细胞及野生型细胞的3～4倍,且这种酶解作用不能被swainsonine所抑制。Westernblot检测显示在相对分子质量(Mr)120000处有一明显蛋白带,此带的显影于转染pCDI-6A8cDNA的细胞明显深于转染空载pCDI及野生型细胞。结论6A8cDNA编码的蛋白质确为一种α-甘露糖苷酶,属于Ⅱ类α-甘露糖苷酶。 展开更多

关键词 6A8 α-甘露糖苷酶 COS-7细胞 瞬时表达

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6A8 cDNA编码一种α-甘露糖苷酶 被引量：4

9

作者 史耕先 马凤蓉 +4 位作者 朱立平 张立新 赵方萄 刘音 王讯 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期439-443,共5页

目的　探讨6A8cDNA编码的蛋白质的性质。方法　依据ConA的配体是甘露糖,而α-甘露糖苷酶的作用是修剪细胞糖蛋白聚糖中甘露糖的原理,采用细胞免疫荧光染色法以及激光共聚焦显微镜观察经转染6A8cDNA正义或反义重组表达载体后,细胞结合Con... 目的　探讨6A8cDNA编码的蛋白质的性质。方法　依据ConA的配体是甘露糖,而α-甘露糖苷酶的作用是修剪细胞糖蛋白聚糖中甘露糖的原理,采用细胞免疫荧光染色法以及激光共聚焦显微镜观察经转染6A8cDNA正义或反义重组表达载体后,细胞结合ConA的强弱,验证6A8cDNA编码的蛋白质是否为一种α-甘露糖苷酶。结果　COS-7细胞和人鼻咽癌细胞株CNE-2L2转染pRc/CMV-正义6A8cDNA后与ConA结合减弱,而与单抗6A8染色增强;CNE-2L2细胞转染pRc/CMV-反义6A8cDNA后,与ConA结合增强,而与单抗6A8染色减弱。结论　6A8cDNA编码的蛋白质可能为一种α-甘露糖苷酶,它可被单抗6A8识别。 展开更多

关键词 6A8cDNA α-甘露糖苷酶 ConA结合

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小花棘豆苦马豆素对小白鼠肝脏α-甘露糖苷酶基因相对表达的影响 被引量：15

10

作者 张建军 韩敏 +1 位作者 王宇 白颖 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期50-54,共5页

本试验旨在研究不同剂量苦马豆素(SW)胃内灌服小白鼠,检测其对肝脏α-甘露糖苷酶(AMA)基因在不同时间转录表达的影响。采用动物组织总RNA试剂盒提取肝脏组织总RNA,酶标仪法测定RNA纯度,凝胶电泳检测RNA完整性,实时荧光定量PCR技术检测AM... 本试验旨在研究不同剂量苦马豆素(SW)胃内灌服小白鼠,检测其对肝脏α-甘露糖苷酶(AMA)基因在不同时间转录表达的影响。采用动物组织总RNA试剂盒提取肝脏组织总RNA,酶标仪法测定RNA纯度,凝胶电泳检测RNA完整性,实时荧光定量PCR技术检测AMA基因的转录表达水平。结果显示,试验组及对照组AMA基因均有表达,但各试验组中转录表达水平不同,与对照组相比,低剂量SW能促进肝脏AMA基因的表达,且随着试验的进行促进效果更加明显,高剂量和中等剂量SW初期也能提高AMA基因的相对表达,长时间却能严重抑制AMA基因的表达,随着试验的进行抑制效果愈明显。结果表明,不同剂量SW能在不同时间、不同程度地影响小白鼠肝脏AMA基因的转录表达。 展开更多

关键词 苦马豆素 α-甘露糖苷酶基因 实时荧光定量PCR

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耐贮性不同桃果实采后软化过程中α-甘露糖苷酶活性变化 被引量：4

11

作者 罗川 曹丽军 +1 位作者 赵彩平 韩明玉 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期116-119,共4页

以较耐贮藏桃品种"秦王"和不耐贮藏桃品种"白丽"为试材,研究采后贮藏期间果实硬度、乙烯释放速率及α-甘露糖苷酶(α-man)活性的变化差异。结果表明,耐贮性较差的"白丽"果实在贮藏的第2天其乙烯释放和α-... 以较耐贮藏桃品种"秦王"和不耐贮藏桃品种"白丽"为试材,研究采后贮藏期间果实硬度、乙烯释放速率及α-甘露糖苷酶(α-man)活性的变化差异。结果表明,耐贮性较差的"白丽"果实在贮藏的第2天其乙烯释放和α-man活性便出现小高峰,此后在贮藏第4天出现乙烯释放峰值,到贮藏第5天伴随着α-man活性的迅速升高,果实硬度快速下降。耐贮藏的"秦王"果实乙烯释放和α-man活性峰值均出现在贮藏后第5天,然后下降,在贮藏末期又出现第2个峰值。此外,在整个贮藏期间,耐贮性较差的"白丽"果实α-man活性明显高于"秦王",在贮藏后期尤为显著。说明α-man活性高低可能显著影响桃果实的耐贮性。 展开更多

关键词 司桃 果实 成熟软化 α-甘露糖苷酶

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小花棘豆中毒对和田羊脑组织α-甘露糖苷酶的影响 被引量：2

12

作者 王帅 贾琦珍 +2 位作者 邓利 汪澜 陈根元 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期146-151,197,共7页

探讨小花棘豆中毒对和田羊脑组织α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将12只和田羊随机分为3组,即对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。试验组每日分别按每千克体质量10 g和20 g的剂量饲喂小花棘豆,饲喂至典型中毒症... 探讨小花棘豆中毒对和田羊脑组织α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将12只和田羊随机分为3组,即对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。试验组每日分别按每千克体质量10 g和20 g的剂量饲喂小花棘豆,饲喂至典型中毒症状出现为止。试验第35天屠宰后每组采集试验羊的全脑,检测和田羊不同脑区AMA活性及表达的变化。结果显示和田羊脑组织中高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(AMA1)和溶酶体α-甘露糖苷酶(AMA2)均有表达,但各试验组表达转录水平与对照组差异显著,试验Ⅰ组和田羊各脑区的AMA2的表达均与对照组差异不显著(P>0.05),试验Ⅱ组和田羊小脑AMA2的表达显著低于对照(P<0.05),其余脑区AMA2的表达均与对照组差异不显著(P>0.05);试验Ⅱ组和田羊小脑和丘脑AMA1的表达极显著低于对照(P<0.01),大脑AMA1的表达显著低于对照(P﹤0.05);试验Ⅰ组和田羊小脑AMA1的表达显著低于对照(P<0.05),其余脑区AMA1的表达均与对照组差异不显著(P>0.05)。结果表明不同剂量小花棘豆均可降低和田羊脑组织AMA活性及其mRNA表达量,小脑、大脑和丘脑是其主要作用的靶区,小花棘豆毒性成分可通过影响AMA活性导致和田羊发生中毒反应。 展开更多

关键词 小花棘豆 苦马豆素 α-甘露糖苷酶 脑 和田羊

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小花棘豆中毒对家兔卵巢α-甘露糖苷酶的影响 被引量：2

13

作者 王帅 陈根元 +2 位作者 贾琦珍 邓利 张玲 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第6期2793-2797,共5页

为了探讨小花棘豆对家兔卵巢α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将24只雌性家兔随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加15%(含苦马豆素30 mg/kg)、Ⅱ组添加30%(含苦马豆素... 为了探讨小花棘豆对家兔卵巢α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将24只雌性家兔随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加15%(含苦马豆素30 mg/kg)、Ⅱ组添加30%(含苦马豆素60 mg/kg)、Ⅲ组添加45%(含苦马豆素90 mg/kg)的比例制作混合饲料,饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后第14、35、70天每次每组随机采集2只家兔的卵巢,检测家兔卵巢AMA活性及表达的变化。试验组及对照组家兔卵巢高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(AMA1)和溶酶体α-甘露糖苷酶(AMA2)均有表达,但各试验组表达转录水平与对照组差异显著,试验Ⅰ组家兔AMA1、AMA2以及试验Ⅱ组AMA2的表达与对照组差异不显著(P﹥0.05),试验Ⅱ组AMA1以及试验Ⅲ组家兔AMA1、AMA2的表达均显著低于对照(P﹤0.05),第70天时试验Ⅲ组家兔AMA1活性和表达均极显著低于对照(P﹤0.01)。小花棘豆中毒可影响家兔卵巢AMA的活性及其基因的转录表达。 展开更多

关键词 小花棘豆 苦马豆素 α-甘露糖苷酶 卵巢 家兔

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小花棘豆中毒对家兔脑组织α-甘露糖苷酶的影响 被引量：10

14

作者 贾琦珍 王帅 +2 位作者 张玲 郭武 陈根元 《塔里木大学学报》 2015年第1期18-23,共6页

探讨小花棘豆对家兔脑组织α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将24只家兔随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按试验Ⅰ组添加15%,试验Ⅱ组添加30%,试验Ⅲ组添加45%的比例制作混... 探讨小花棘豆对家兔脑组织α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将24只家兔随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。将小花棘豆全草粉碎后,按试验Ⅰ组添加15%,试验Ⅱ组添加30%,试验Ⅲ组添加45%的比例制作混合饲料,饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后第14、35、70 d每次每组随机采集2只家兔的全脑,检测家兔不同脑区AMA活性及表达的变化。结果显示,小花棘豆中毒可不同程度地导致家兔脑组织AMA活性和表达下降,从第14d起,所有试验组小脑AMA活性及mRNA表达量均显著低于对照组(P﹤0.05),试验Ⅲ组家兔大脑和丘脑AMA活性及mRNA表达量均显著低于对照组(P﹤0.05),但3个试验组海马和脑干AMA活性及mRNA表达量与对照差异均不显著(P﹥0.05)。结果表明,不同剂量小花棘豆均可降低家兔脑组织AMA活性及其mRNA表达量,小脑、大脑和丘脑是其主要作用的靶区,而且小脑的变化较大脑和丘脑明显。 展开更多

关键词 小花棘豆 α-甘露糖苷酶 中毒 家兔

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小花棘豆中毒对家兔丘脑-垂体-性腺轴α-甘露糖苷酶的影响 被引量：2

15

作者 王帅 陈根元 +2 位作者 贾琦珍 张玲 马春晖 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2016年第8期41-48,共8页

【目的】探讨小花棘豆中毒对家兔丘脑-垂体-性腺轴α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,揭示小花棘豆的毒性作用机理。【方法】将24只家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,对照组饲喂青干草,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂添加15%,30%和45%小花棘豆... 【目的】探讨小花棘豆中毒对家兔丘脑-垂体-性腺轴α-甘露糖苷酶(AMA)的影响,揭示小花棘豆的毒性作用机理。【方法】将24只家兔随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,对照组饲喂青干草,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂添加15%,30%和45%小花棘豆全草的混合饲料(其苦马豆素含量分别为30,60和90mg/kg),分别于攻毒后第14,35和70天时每组随机采集2只家兔的丘脑、垂体和性腺,检测AMA在家兔丘脑-垂体-性腺轴中的分布、活性及其基因mRNA的表达量。【结果】AMA在家兔丘脑、垂体和性腺中均有分布,小花棘豆中毒可导致家兔丘脑-垂体-性腺轴AMA活性和分布明显下降。试验组及对照组家兔丘脑-垂体-性腺轴高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(AMA1)和溶酶体α-甘露糖苷酶(AMA2)均有表达,但各试验组表达转录水平总体低于对照组,攻毒第70天时试验Ⅰ组家兔丘脑-垂体-性腺轴的AMA1和AMA2,试验Ⅱ组家兔丘脑-垂体-性腺轴及试验Ⅲ组家兔丘脑和垂体中AMA2的表达均与对照组差异不显著(P>0.05);试验Ⅲ组家兔丘脑-垂体-性腺轴和试验Ⅱ组家兔丘脑、垂体、睾丸中AMA1mRNA表达量均极显著低于对照组(P<0.01),试验Ⅱ组卵巢AMA1mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05),试验Ⅲ组家兔睾丸和卵巢AMA2mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05)。【结论】小花棘豆中毒可影响家兔丘脑-垂体-性腺轴AMA的活性及其基因的转录表达。 展开更多

关键词 小花棘豆 苦马豆素 α-甘露糖苷酶 丘脑-垂体-性腺轴

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6A8α-甘露糖苷酶表达低下致人鼻咽癌细胞CNE-2L2生长抑制 被引量：3

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作者 岳玮 史耕先 +1 位作者 白增亮 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期418-422,共5页

目的研究6A8α-甘露糖苷酶与CNE-2L2肿瘤细胞生长的关系。方法用腺相关病毒载体将反义6A8cDNA导入鼻咽癌细胞CNE-2L2。细胞中6A8α-甘露糖苷酶表达情况用单抗6A8a免疫荧光染色、α-甘露糖苷酶活性及ConA结合试验检测。以野生型细胞、转... 目的研究6A8α-甘露糖苷酶与CNE-2L2肿瘤细胞生长的关系。方法用腺相关病毒载体将反义6A8cDNA导入鼻咽癌细胞CNE-2L2。细胞中6A8α-甘露糖苷酶表达情况用单抗6A8a免疫荧光染色、α-甘露糖苷酶活性及ConA结合试验检测。以野生型细胞、转导了空载体或正义6A8的细胞作对照,以MTT、集落形成及裸鼠实验检测肿瘤细胞生长。结果转导反义6A8能抑制CNE-2L2细胞6A8α-甘露糖苷酶表达,6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的CNE-2L2细胞的MTT值、形成集落数及接种裸鼠皮下后所长肿瘤的重量均较对照显著降低或减小P<0.001。结论6A8α-甘露糖苷酶表达低下致人鼻咽癌细胞CNE-2L2生长抑制。 展开更多

关键词 6A8 α-甘露糖苷酶 CNE-2L2细胞 肿瘤生长 鼻咽癌

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α-甘露糖苷酶与木薯块根采后生理变质的关系 被引量：4

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作者 安飞飞 薛晶晶 +1 位作者 韦卓文 陈松笔 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第2期165-169,共5页

分析α-甘露糖苷酶与木薯块根采后生理变质(PPD)发生的关系,为有效控制木薯PPD发生提供新思路。采用RT-PCR分析α-甘露糖苷酶基因在块根PPD发生过程中的表达模式,ELISA检测α-甘露糖苷酶活性变化。SC9完整薯块储存5 d后开始出现PPD现象... 分析α-甘露糖苷酶与木薯块根采后生理变质(PPD)发生的关系,为有效控制木薯PPD发生提供新思路。采用RT-PCR分析α-甘露糖苷酶基因在块根PPD发生过程中的表达模式,ELISA检测α-甘露糖苷酶活性变化。SC9完整薯块储存5 d后开始出现PPD现象,20μmol/L几夫碱喷施木薯块根切片可显著延缓PPD的发生。随着PPD程度的加重,α-甘露糖苷酶活性显著增高,在储存9 d时达到最大值326.24 U/L。MeMNS1、MeMNS4、MeGMII的表达随着PPD过程而逐步增强,且MeGMII表达最显著,采后9 d SC9块根中MeGMII的表达量达到对照的28.05倍,而MeMNS3-1、MeMNS3-2、MeMNS5表达的变化与木薯块根PPD程度间无明显规律。α-甘露糖苷酶参与木薯块根PPD发生的过程,且α-甘露糖苷酶活性与PPD程度呈正相关,其中MeGMII可能是参与此过程的关键基因。 展开更多

关键词 木薯 块根 α-甘露糖苷酶 采后生理变质

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小花棘豆中毒对大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴α-甘露糖苷酶的影响 被引量：2

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作者 王帅 贾琦珍 +3 位作者 陈根元 程勇 张玲 马春晖 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2016年第1期70-76,共7页

将144只雌性大鼠随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组.将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加15%(含苦马豆素30 mg·kg-1)、Ⅱ组添加30%(含苦马豆素60 mg·kg-1)、Ⅲ组添加45%(含苦马豆素90 mg·kg-1)的比例制作混合饲料,饲... 将144只雌性大鼠随机分为4组,即对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组.将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加15%(含苦马豆素30 mg·kg-1)、Ⅱ组添加30%(含苦马豆素60 mg·kg-1)、Ⅲ组添加45%(含苦马豆素90 mg·kg-1)的比例制作混合饲料,饲喂至典型中毒症状出现为止.攻毒后每7 d每组随机采集4只大鼠的下丘脑、垂体和卵巢,检测其AMA活性及表达的变化.结果表明,试验及对照大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(AMA1)和溶酶体α-甘露糖苷酶(AMA2)均有表达,但各试验组表达转录水平与对照组差异显著,试验Ⅰ组大鼠HPOA的AMA1及AMA2的表达均与对照组差异不显著(P>0.05),但试验Ⅱ组大鼠HPOA的AMA1以及试验Ⅲ组大鼠HPOA的AMA1、AMA2相对表达均显著低于对照(P<0.05),而且随着试验的进行抑制效果愈加明显.结果表明,小花棘豆中毒可影响大鼠HPOA中AMA的活性及其基因的转录表达. 展开更多

关键词 小花棘豆 苦马豆素 α-甘露糖苷酶 下丘脑-垂体-卵巢轴

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6A8α-甘露糖苷酶表达抑制致人鼻咽癌细胞CNE-2L2与层粘连蛋白粘附减弱及片状伪足减少 被引量：1

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作者 岳玮 赵方萄 +2 位作者 史耕先 刘音 朱立平 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期316-319,共4页

目的探讨6A8α-甘露糖苷酶表达抑制对CNE-2L2细胞与层粘连蛋白的粘附及细胞表面片状伪足的影响。方法Western印迹检测6A8α-甘露糖苷酶的表达。置细胞于层粘连蛋白(laminin)包被的培养板孔中,37℃孵育1h后,用结晶紫染色细胞,用0.1mol/L... 目的探讨6A8α-甘露糖苷酶表达抑制对CNE-2L2细胞与层粘连蛋白的粘附及细胞表面片状伪足的影响。方法Western印迹检测6A8α-甘露糖苷酶的表达。置细胞于层粘连蛋白(laminin)包被的培养板孔中,37℃孵育1h后,用结晶紫染色细胞,用0.1mol/L枸橼酸钠/50%乙醇溶解结合到细胞中的染料。测定540nm处的吸光度值(AT),按R=AT/A100×100%计算粘附率(A100为100%粘附值)。扫描电镜观察细胞表面的片状伪足。结果6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的2个克隆细胞株(AS1和AS2)对层粘连蛋白的相对粘附率分别为0.447±0.096与0.533±0.065,而6A8α-甘露糖苷酶表达正常的对照细胞(W、M和S)的相对粘附率分别为0.78±0.035、0.7±0.05和0.80±0.04。两者的差别有生物学意义(P<0.01)。6A8α-甘露糖苷酶表达正常的细胞表面片状伪足丰富,6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的细胞表面的片状伪足基本上消失。结论6A8α-甘露糖苷酶表达抑制可导致人鼻咽癌细胞CNE-2L2与层粘连蛋白粘附减弱及片状伪足减少。 展开更多

关键词 6A8 α-甘露糖苷酶 粘附性 片状伪足

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α-甘露糖苷酶法测定家兔血清中苦马豆素含量 被引量：3

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作者 王帅 吴书奇 +3 位作者 陈根元 胡建军 张玲 马春晖 《中国草食动物》 2012年第1期42-45,共4页

试验旨在建立以α-甘露糖苷酶法测定家兔血清中苦马豆素(SW)浓度的方法。SW对α-甘露糖苷酶活性的抑制程度与其浓度呈线性相关。以对硝基苯基-α-D-甘露糖苷为底物,通过分光光度法(405 nm)检测α-甘露糖苷酶水解产生的对硝基酚吸光度,... 试验旨在建立以α-甘露糖苷酶法测定家兔血清中苦马豆素(SW)浓度的方法。SW对α-甘露糖苷酶活性的抑制程度与其浓度呈线性相关。以对硝基苯基-α-D-甘露糖苷为底物,通过分光光度法(405 nm)检测α-甘露糖苷酶水解产生的对硝基酚吸光度,从而间接测定样品中SW浓度。结果显示:在0.107～1.730 mg/mL SW浓度范围内线性关系良好,加标平均回收率100.64%,RSD=2.743%(n=8)。试验期家兔血清SW含量随饲喂时间的延长而增高。该方法准确度较高、精密度较好、操作简便快速、特异性较好,可作为SW的微量定量检测方法。 展开更多

关键词 α-甘露糖苷酶 家兔 血清 苦马豆素

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