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龙胆苦甙上调大鼠LC3Ⅱ表达促进自噬缓解非酒精性脂肪性肝炎 被引量:1
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作者 丁洁 刘思奇 +8 位作者 王艺颖 王霖 施承宏 王芳 常国楫 华丽娟 陈华憶 李生浩 王晴晴 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第16期2022-2028,共7页
目的明确龙胆苦甙对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的疗效,并初步探讨LC3Ⅱ基因及自噬在其中所起的作用及机制。方法建立SD大鼠NASH模型,分为:正常对照组、模型对照组、龙胆苦甙组、龙胆苦甙+3-MA组、二... 目的明确龙胆苦甙对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的疗效,并初步探讨LC3Ⅱ基因及自噬在其中所起的作用及机制。方法建立SD大鼠NASH模型,分为:正常对照组、模型对照组、龙胆苦甙组、龙胆苦甙+3-MA组、二甲双胍阳性对照组,每组8只大鼠。给予相应治疗和处理4周后,通过q-PCR及Western blot分别检测大鼠肝组织LC3Ⅱ、LC3Ⅰ的mRNA和蛋白质表达,HE染色检测肝组织病理学情况,结合大鼠血清的血脂(CHOL和TG)、谷丙转氨酶以及炎症因子(IL-1β和TNF-α)水平的变化,评价龙胆苦甙对大鼠NASH的治疗效果,并初步探讨LC3Ⅱ及自噬在这一过程中所起的作用和机制。结果(1)正常对照组肝小叶结构正常,未见脂肪变及炎症损伤;模型对照组肝细胞索结构紊乱,出现严重肝脂肪变及炎症损伤,并可见点、片状坏死形成;龙胆苦甙组、二甲双胍阳性对照组肝脂肪变及炎症损伤均有所减轻;龙胆苦甙+3-MA组肝脂肪变和炎症损伤较龙胆苦甙组明显加重,肝小叶结构紊乱,坏死增多。(2)模型对照组ALT、CHOL、TG、IL-1β、TNF-α水平均较正常对照组升高,龙胆苦甙组、二甲双胍阳性对照组的ALT、CHOL、TG、IL-1β、TNF-α水平一定程度上得到逆转,而龙胆苦甙+3-MA组ALT、CHOL、TG、IL-1β、TNF-α水平又较龙胆苦甙组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)模型对照组大鼠肝组织LC3ⅡmRNA和蛋白质表达较正常对照组明显下调,这一趋势在龙胆苦甙组和二甲双胍阳性对照组中出现逆转,而龙胆苦甙+3-MA组的LC3ⅡmRNA和蛋白质表达又明显下调,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论龙胆苦甙可缓解大鼠NASH相关肝损伤,其机制可能与龙胆苦甙上调肝组织LC3Ⅱ表达从而促进了自噬有关。 展开更多
关键词 龙胆苦甙 管相关蛋白1轻链3 管相关蛋白1轻链3Ⅰ 自噬 非酒精性脂肪性肝炎
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自噬相关基因LC3和ATG5在胃癌中的表达及临床意义 被引量:12
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作者 许祥云 陈书昌 +3 位作者 孔德九 侯欣欣 陈强 陈静 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第14期1939-1945,共7页
目的探讨自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和自噬相关基因-5(autophagy related gene-5,ATG5)在胃癌细胞发生发展不同阶段的表达情况并分析其临床意义。方法选取胃黏膜正常细胞、... 目的探讨自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和自噬相关基因-5(autophagy related gene-5,ATG5)在胃癌细胞发生发展不同阶段的表达情况并分析其临床意义。方法选取胃黏膜正常细胞、胃黏膜不典型增生细胞、胃癌细胞共58例,分别记为正常组(17例)、不典型组(19例)、胃癌组(22例),采用qRT-PCR、Western Blot、免疫组织化学法检测每组中自噬相关基因LC3和ATG5的mRNA及蛋白表达水平,应用SPSS 23.0软件分析正常组、不典型组、胃癌组3组间LC3和ATG5的mRNA及蛋白表达情况,并分析LC3和ATG5蛋白表达的相关性以及LC3和ATG5蛋白表达与胃癌患者临床病理学参数的关系。结果正常组、不典型组、胃癌组中LC3和ATG5 mRNA及蛋白表达水平逐渐升高,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。LC3蛋白表达情况与性别、年龄、浸润深度、分化程度及淋巴结状态均不存在相关性。ATG5蛋白表达情况与浸润深度、分化程度及淋巴结状态均有相关性。LC3和ATG5蛋白在3组中均呈正相关(P<0.05)。结论细胞自噬可促进胃癌的发生发展,其机制可能与LC3、ATG5过度表达有关。LC3、ATG5在促进胃癌的发生发展中起相互协同的作用。 展开更多
关键词 胃癌 自噬 管相关蛋白1轻链3(lc3) 自噬相关基因-5(ATG5)
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新风胶囊通过调节自噬相关蛋白的表达改善佐剂关节炎大鼠的肺功能 被引量:5
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作者 万磊 刘健 +4 位作者 黄传兵 张晓军 王亚黎 孙玥 刘磊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期1-6,共6页
目的观察新风胶囊(XFC)对佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜、肺组织自噬相关基因(ATG)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)和beclin 1的影响。方法将大鼠随机分为正常对照(NC)组、模型对照(MC)组、来氟米特(LEF)组、XFC组,每组10只,除NC组外均将Freun... 目的观察新风胶囊(XFC)对佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜、肺组织自噬相关基因(ATG)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)和beclin 1的影响。方法将大鼠随机分为正常对照(NC)组、模型对照(MC)组、来氟米特(LEF)组、XFC组,每组10只,除NC组外均将Freund完全佐剂(0.1 m L/只)注射于每只大鼠右后足跖皮内以致炎,第10天在尾根部注射Freund完全佐剂0.05 m L加强免疫,复制AA模型。致炎后第13天给药。NC组、MC组给予生理盐水灌胃,每天1次;LEF、XFC组给予相应药物灌胃,每天1次,连续给药30 d。观察大鼠足跖肿胀度、关节炎指数、肺功能,ELISA检测血清细胞因子B细胞刺激因子(BAFF)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-4、IL-10表达,透射电镜观察滑膜、肺组织自噬小体,反转录PCR检测大鼠滑膜、肺组织ATG5、ATG7、ATG12 mRNA,Western blot法检测大鼠滑膜、肺组织LC3-Ⅱ、beclin 1的蛋白表达。结果 XFC组大鼠肺功能参数、血清IL-4、IL-10表达升高;滑膜、肺组织自噬体及自噬溶酶体较MC组增加;血清IL-1β、BAFF表达及滑膜组织ATG7、ATG12 mRNA降低,肺组织ATG5、ATG7 mRNA降低,ATG12 mRNA升高;滑膜组织、肺组织LC3-Ⅱ、beclin 1升高。结论 XFC通过调节AA大鼠滑膜、肺组织细胞自噬,改善肺功能。 展开更多
关键词 佐剂关节炎 肺功能 新风胶囊 自噬 自噬相关基因(ATG) 管相关蛋白1轻链3(map-1/lc3-) BECLIN 1
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刺山柑对类风湿关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 丁霞 昂沙尔·毕哈孜 霍新慧 《世界中医药》 CAS 2023年第2期191-194,199,共5页
目的:观察刺山柑果风湿止痛贴对类风湿关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响,并探究刺山柑治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法:将40只无特定病原体(SPF)级SD大鼠采用随机数字法分为正常组,模型组,阳性药组和刺山柑组,每组10... 目的:观察刺山柑果风湿止痛贴对类风湿关节炎大鼠滑膜组织自噬相关蛋白表达的影响,并探究刺山柑治疗类风湿关节炎(RA)的可能作用机制。方法:将40只无特定病原体(SPF)级SD大鼠采用随机数字法分为正常组,模型组,阳性药组和刺山柑组,每组10只,对造模的大鼠在足跖底部注射0.1 mL完全弗氏佐剂。模型组、阳性药组和刺山柑组分别于大鼠左后足跖部外敷空白凝胶、伤湿止痛膏以及刺山柑果风湿止痛贴,每组持续干预21 d。观测关节炎(AI)指数和足爪容积的指标,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白质印迹法检测滑膜组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin蛋白复合物-1(Beclin-1)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组和阳性药组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达均上升(P<0.05,P<0.01),刺山柑组LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.01),Beclin-1蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,阳性药组Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达差异无统计学意义,刺山柑组LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.01),Beclin-1蛋白表达升高(P<0.01)。结论:刺山柑果风湿止痛贴治疗AA大鼠比伤湿止痛膏疗效更加显著,从而为刺山柑治疗RA提供一定的科学依据,其相关机制可能与蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1表达有关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 刺山柑 佐剂性关节炎大鼠 自噬 肿瘤坏死因子-α 蛋白表达 管相关蛋白轻链3- Beclin蛋白复合物-1
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人肾小管上皮细胞necroptosis模型的构建
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作者 蒋芬 陈源汉 +6 位作者 梁馨苓 李东风 徐丽霞 谢红萍 胡鹏华 刘双信 史伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2301-2304,共4页
目的:以体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)为靶细胞,构建肾小管上皮细胞凋亡样坏死(necroptosis)的模型。方法:采用肿瘤坏死因子α(tumor nercosis factorα,TNF-α)诱导细胞凋亡,同时采用抗霉素A(antimycin A)耗竭ATP,构建肾小管... 目的:以体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)为靶细胞,构建肾小管上皮细胞凋亡样坏死(necroptosis)的模型。方法:采用肿瘤坏死因子α(tumor nercosis factorα,TNF-α)诱导细胞凋亡,同时采用抗霉素A(antimycin A)耗竭ATP,构建肾小管上皮细胞凋亡的模型,并以caspase-8抑制剂苄氧羰酰-缬氨酰-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮(benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethylketone,zVAD-fmk)阻断凋亡,用necroptosis的特异性抑制剂necrostatin-1(Nec-1)阻断necroptosis,观察细胞在不同的处理下形态学的变化,同时检测细胞存活率及标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)的表达。结果:(1)在TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A处理1 h时细胞及细胞器膨胀,电镜下细胞膜碎裂,线粒体变圆、肿胀,嵴逐渐模糊,胞浆中出现大量自噬小体,而Nec-1预处理后细胞的坏死程度较对照组明显改善。(2)在TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A1 h实验组,Nec-1预处理后细胞的存活率显著增加(P<0.05)。(3)TNF-α+zVAD-fmk+antimycin A干预1 h实验组在Nec-1预处理后LC3-Ⅱ的表达量明显下降(P<0.05)。结论:凋亡环境中阻断凋亡可以诱导肾小管上皮细胞necroptosis,抑制剂Nec-1能特异性阻断肾小管上皮细胞发生坏死。 展开更多
关键词 凋亡样坏死 肾小管上皮细胞 管相关蛋白1轻链3- Necrostatin 1
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高压干燥保存对小鼠供心冷缺血再灌注损伤中自噬及凋亡作用的影响 被引量:3
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作者 张瑞 黄帅 +5 位作者 富旗 郑少忆 郭惠明 陈寄梅 庄建 朱平 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第12期1236-1241,共6页
目的心脏移植是治疗终末期心脏病的有效手段,延长供心保存时间有助于解决供心紧缺的问题,文中旨在通过观察一氧化碳和氧气的高压干燥保存是否能够延长供心保存时间及其作用机制。方法选取SPF级C57BL/6雄性小鼠共84只,将4~6周龄48只供... 目的心脏移植是治疗终末期心脏病的有效手段,延长供心保存时间有助于解决供心紧缺的问题,文中旨在通过观察一氧化碳和氧气的高压干燥保存是否能够延长供心保存时间及其作用机制。方法选取SPF级C57BL/6雄性小鼠共84只,将4~6周龄48只供鼠随机分成4组(n=12):对照组(仅取供体心,不做移植)、即刻移植供体组(供心不经保存取下后即刻移植)、组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液(histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK)保存供体组(供心浸泡于HTK液中24 h)及高压干燥保存供体组[供心悬挂并置于高压气体罐中(氧分压:3200 h Pa,一氧化碳分压:800 h Pa),保存24 h]。将6~8周龄36只受鼠随机分为3组(n=12):即刻移植受体组、HTK保存受体组及高压干燥保存受体组。将各供体组的供心分别对应移植于各受体组,移植后2 h,对比观察各受体组复跳情况及供心功能。取对照组及各移植受体组供心组织,HE染色观察供心病理学改变,Tunnel染色观察心肌细胞凋亡情况,Western blot检测自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ及Bcl-2蛋白表达情况。结果即刻移植受体组与高压干燥保存受体组复跳率高于HTK保存受体组(P〈0.05)。高压干燥保存受体组、HTK保存受体组、即刻移植受体组移植后2 h供心功能评分分别为[2.5(2.0~2.9)、0.8(0.5~1.0)、4.5(4.0~4.5)分],组间两两比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。高压干燥保存受体组LC3-Ⅱ蛋白及Bcl-2蛋白表达量为(2.06±0.29、0.87±0.18)、即刻移植受体组为(1.24±0.20、2.07±0.32),均高于对照组(0.13±0.03、0.19±0.02)与HTK保存受体组(0.16±0.06、0.26±0.08),差异有统计学意义(P〈0.05)。HTK保存受体组Bcl-2蛋白表达量高于对照组(P〈0.05)。高压干燥保存受体组LC3-Ⅱ蛋白低于即刻移植受体组(P〈0.05)。HE染色结果显示:高压干燥保存受体组供心心肌细胞水肿、炎症细胞浸润等组织变化情况较对照组、即刻移植受体组明显,但较HTK保存受体组轻。与对照组、即刻移植受体组凋亡细胞指数[(1.08±0.56)、(2.13±1.71)%]比较,高压干燥保存受体组、HTK保存受体组[(5.04±1.77)、(26.72±5.23)%]升高(P〈0.01),而高压干燥保存受体组凋亡指数较HTK保存受体组降低(P〈0.01)。结论一氧化碳和氧气的高压干燥环境中可减轻小鼠供心冷缺血再灌注损伤,其机制可能与促进自噬,为细胞提供能量,抑制心肌细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 高压干燥 一氧化碳 离体供心保存 冷缺血再灌注损伤 心肌管相关蛋白1-轻链3- B细胞白血病/淋巴瘤-2 自噬 凋亡
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