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猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立
1
作者
刘助红
王静
+4 位作者
李秀珍
尹雪琴
张钰
郭鹏举
黄韧
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017年第9期17-23,共7页
目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间...
目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间。采取GST树脂纯化目标蛋白,包被磁珠,建立流式免疫荧光微球检测技术,用于临床样本的检测。结果重组蛋白以可溶的上清液进行表达,诱导的最佳时间为4 h。包被磁珠后,成功建立流式免疫荧光微球检测技术,对阳性血清稀释81倍仍可检测为阳性,对猴类其他病原的阳性血清无交叉反应,特异性强,与ELISA法同时对24份临床样本进行检测,其中3份样品的流式免疫荧光微球检测结果为阳性,ELISA检测结果为2份阳性,1份阴性,两种方法的检测结果符合率为96%。结论成功表达猴D型逆转录病毒p27蛋白,并运用该蛋白建立了灵敏度高,特异性强,样本需求少的流式免疫荧光微球检测技术,为后续推广应用多重流式免疫荧光微球检测技术奠定了基础。
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关键词
猴D型逆转录病毒
P27基因
原核表达
流式免疫荧光
微球检测
技术
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职称材料
微通道电阻生物传感装置设计与鲜味物质检测
2
作者
冯耀泽
潘胜
+4 位作者
周扬
王益健
孔丽琴
贾桂锋
朱明
《农业工程学报》
北大核心
2025年第13期312-320,共9页
微通道电阻生物传感检测技术通过检测溶液中聚苯乙烯(polystyrene,PS)微球浓度实现目标物的定量分析,因其低成本和高灵敏度的特性在农产品检测领域具有广阔的应用前景。针对该技术对自动化、高稳定、高精度、抗干扰的装备需求,该研究开...
微通道电阻生物传感检测技术通过检测溶液中聚苯乙烯(polystyrene,PS)微球浓度实现目标物的定量分析,因其低成本和高灵敏度的特性在农产品检测领域具有广阔的应用前景。针对该技术对自动化、高稳定、高精度、抗干扰的装备需求,该研究开发了一种集成微通道、硬件控制系统与人机交互界面的自动化检测装置。通过微纳3D打印加工微通道板,并结合嵌入式控制技术,实现装置的自动进样、清洗和换样功能;设计人机交互界面控制装置驱动,并应用中值滤波算法去噪,增强系统的抗干扰性。以变异系数为评价指标,分析内径、长度、流速等因素对信号检测稳定性的影响,进行参数优化试验,得到微通道最优的工作参数组合为内径100μm、长度2 mm、流速2 mL/min。对PS微球溶液进行检测时,连续7 d测得的最大变异系数仅为1.13%,3组微通道测得的最大变异系数仅为1.8%,表明该装置具有较好的检测稳定性和可重复性,对微球的检测线性范围为1~1×10^(6)pg/mL,检出限为0.76 pg/mL,具有较高检测精度。此外,以谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)为例,利用该装置对实际物质进行了检测,线性检测范围为1~1×10^(4)pg/mL,检测限为0.24 pg/mL,优于现有的颗粒计数器、绿色分光光度法和高效液相色谱法检测结果,验证了装备的实用性。研究结果为农产品品质和安全快速、稳定检测提供了新的装备支撑。
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关键词
微
通道
生物传感
微
纳3D打印
微球检测
鲜味物质
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职称材料
口腔扁平苔藓患者外周血Th1/Th2型细胞因子表达及意义
被引量：
10
3
作者
罗亮
王冬平
+1 位作者
蔡扬
张洛
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期743-746,共4页
目的：了解口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP）患者外周血中Th1、Th2型细胞因子表达水平,探讨Th1/Th2平衡在OLP发病中的作用及意义。方法：采用流式细胞术（cytometric bead array,CBA）检测51例OLP患者（网纹型23例,充血糜烂型28...
目的：了解口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP）患者外周血中Th1、Th2型细胞因子表达水平,探讨Th1/Th2平衡在OLP发病中的作用及意义。方法：采用流式细胞术（cytometric bead array,CBA）检测51例OLP患者（网纹型23例,充血糜烂型28例）Th1型细胞因子（TNF-α、IFN-γ、IL-2）及Th2型细胞因子（IL-4、IL-6、IL-10）表达水平,并分析其与OLP临床特征相关性。结果：1OLP患者血清中Th2型细胞因子的IL-6与IL-10的表达水平明显高于正常对照组（P〈0.05）,但Th1型细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2及Th2型细胞因子IL-4表达水平与正常组差异无统计学意义（P〉0.05）;2Th2型细胞因子IL-6的表达水平与OLP临床类型、临床体征、临床症状均成正相关,IL-10的表达水平与OLP临床类型、临床体征均成正相关（相关系数0.285~0.364;P〈0.05）。结论：OLP患者外周血中Th1型细胞因子的表达水平与正常对照组Th1型细胞因子表达水平差异无明显改变,而Th2型细胞因子升高,表现为Th2占优势的免疫应答;Th2型细胞因子IL-6、IL-10表达与OLP患者病情严重程度呈正相关,对OLP免疫治疗有一定指导意义。
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关键词
口腔扁平苔藓
辅助性T细胞
细胞因子
微球检测
技术
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职称材料
题名
猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立
1
作者
刘助红
王静
李秀珍
尹雪琴
张钰
郭鹏举
黄韧
机构
广东省实验动物监测所广东省实验动物重点实验室
出处
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017年第9期17-23,共7页
基金
广东省科技计划项目(编号:2016A040403059,2014A040401035,2014B070706006)
国家科技支撑计划项目(编号:2015BAI07B01)
文摘
目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间。采取GST树脂纯化目标蛋白,包被磁珠,建立流式免疫荧光微球检测技术,用于临床样本的检测。结果重组蛋白以可溶的上清液进行表达,诱导的最佳时间为4 h。包被磁珠后,成功建立流式免疫荧光微球检测技术,对阳性血清稀释81倍仍可检测为阳性,对猴类其他病原的阳性血清无交叉反应,特异性强,与ELISA法同时对24份临床样本进行检测,其中3份样品的流式免疫荧光微球检测结果为阳性,ELISA检测结果为2份阳性,1份阴性,两种方法的检测结果符合率为96%。结论成功表达猴D型逆转录病毒p27蛋白,并运用该蛋白建立了灵敏度高,特异性强,样本需求少的流式免疫荧光微球检测技术,为后续推广应用多重流式免疫荧光微球检测技术奠定了基础。
关键词
猴D型逆转录病毒
P27基因
原核表达
流式免疫荧光
微球检测
技术
Keywords
Simian type-D retrovirus
p27 gene
Prokaryotic expression
Flow microsphere immunofluorescence assay
分类号
R33 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
微通道电阻生物传感装置设计与鲜味物质检测
2
作者
冯耀泽
潘胜
周扬
王益健
孔丽琴
贾桂锋
朱明
机构
华中农业大学工学院
农业农村部水产养殖设施工程重点实验室
华中农业大学深圳营养与健康研究院
中国农业科学院深圳农业基因组研究所
出处
《农业工程学报》
北大核心
2025年第13期312-320,共9页
基金
国家重点研发计划项目(2022YFF0607902)
湖北省重点研发计划项目(2023BBB038,2022BBA0057)
华中农业大学-深圳营养与健康研究院合作基金项目(SZYJY2021028)。
文摘
微通道电阻生物传感检测技术通过检测溶液中聚苯乙烯(polystyrene,PS)微球浓度实现目标物的定量分析,因其低成本和高灵敏度的特性在农产品检测领域具有广阔的应用前景。针对该技术对自动化、高稳定、高精度、抗干扰的装备需求,该研究开发了一种集成微通道、硬件控制系统与人机交互界面的自动化检测装置。通过微纳3D打印加工微通道板,并结合嵌入式控制技术,实现装置的自动进样、清洗和换样功能;设计人机交互界面控制装置驱动,并应用中值滤波算法去噪,增强系统的抗干扰性。以变异系数为评价指标,分析内径、长度、流速等因素对信号检测稳定性的影响,进行参数优化试验,得到微通道最优的工作参数组合为内径100μm、长度2 mm、流速2 mL/min。对PS微球溶液进行检测时,连续7 d测得的最大变异系数仅为1.13%,3组微通道测得的最大变异系数仅为1.8%,表明该装置具有较好的检测稳定性和可重复性,对微球的检测线性范围为1~1×10^(6)pg/mL,检出限为0.76 pg/mL,具有较高检测精度。此外,以谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)为例,利用该装置对实际物质进行了检测,线性检测范围为1~1×10^(4)pg/mL,检测限为0.24 pg/mL,优于现有的颗粒计数器、绿色分光光度法和高效液相色谱法检测结果,验证了装备的实用性。研究结果为农产品品质和安全快速、稳定检测提供了新的装备支撑。
关键词
微
通道
生物传感
微
纳3D打印
微球检测
鲜味物质
Keywords
microchannel
biosensing
micro-nano 3D printing
microsphere detection
umami substances
分类号
S984.11 [农业科学—捕捞与储运]
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职称材料
题名
口腔扁平苔藓患者外周血Th1/Th2型细胞因子表达及意义
被引量：
10
3
作者
罗亮
王冬平
蔡扬
张洛
机构
贵阳医学院附属医院口腔内科
贵州省人民医院口腔科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期743-746,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:81460104)
贵州省优秀科技教育人才省长资金资助项目(编号:黔省专合字(2009)38号)
文摘
目的：了解口腔扁平苔藓（oral lichen planus,OLP）患者外周血中Th1、Th2型细胞因子表达水平,探讨Th1/Th2平衡在OLP发病中的作用及意义。方法：采用流式细胞术（cytometric bead array,CBA）检测51例OLP患者（网纹型23例,充血糜烂型28例）Th1型细胞因子（TNF-α、IFN-γ、IL-2）及Th2型细胞因子（IL-4、IL-6、IL-10）表达水平,并分析其与OLP临床特征相关性。结果：1OLP患者血清中Th2型细胞因子的IL-6与IL-10的表达水平明显高于正常对照组（P〈0.05）,但Th1型细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2及Th2型细胞因子IL-4表达水平与正常组差异无统计学意义（P〉0.05）;2Th2型细胞因子IL-6的表达水平与OLP临床类型、临床体征、临床症状均成正相关,IL-10的表达水平与OLP临床类型、临床体征均成正相关（相关系数0.285~0.364;P〈0.05）。结论：OLP患者外周血中Th1型细胞因子的表达水平与正常对照组Th1型细胞因子表达水平差异无明显改变,而Th2型细胞因子升高,表现为Th2占优势的免疫应答;Th2型细胞因子IL-6、IL-10表达与OLP患者病情严重程度呈正相关,对OLP免疫治疗有一定指导意义。
关键词
口腔扁平苔藓
辅助性T细胞
细胞因子
微球检测
技术
Keywords
oral lichen planus
T helper cells
cytometric bead array
分类号
R781.59 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立
刘助红
王静
李秀珍
尹雪琴
张钰
郭鹏举
黄韧
《中国比较医学杂志》
北大核心
2017
0
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职称材料
2
微通道电阻生物传感装置设计与鲜味物质检测
冯耀泽
潘胜
周扬
王益健
孔丽琴
贾桂锋
朱明
《农业工程学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
3
口腔扁平苔藓患者外周血Th1/Th2型细胞因子表达及意义
罗亮
王冬平
蔡扬
张洛
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
10
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职称材料
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