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题名测定化学物对乙酰胆碱酯酶抑制毒性的微板吸光法研究
被引量：10
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作者
陶珊珊
葛会林
袁宏球
阳辛凤
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机构
中国热带农业科学院分析测试中心海南省热带果蔬产品质量安全重点实验室
华中农业大学植物科学技术学院
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出处
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期201-209,共9页
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基金
国家自然科学基金(21607171)
海南省应用技术研发与示范推广专项(ZDXM2014047
+1 种基金
ZDXM20130043)
海南省自然科学基金(213027)
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文摘
随着化学污染物种类与数量的日益增多,高通量测试方法显得越来越重要。基于乙酰胆碱酯酶(ACh E)抑制法原理,以多功能酶标仪为测试设备,96孔微板为暴露反应载体,建立了测定化学物对ACh E抑制毒性的微板吸光法。系统研究了ACh E浓度、碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)浓度、二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)浓度对显色吸光度、吸光度变化速率、化学物测试毒性的影响。结果表明,随着ACh E、DTNB、ATCI的浓度增加,吸光度均增加;吸光度变化速率与ACh E浓度呈正相关,与DTNB浓度基本无关,与ATCI浓度呈现先增后减的双相关系;随着ATCI浓度增加,灭多威剂量-效应曲线(DRC)向右移动。最终建立的优化测试条件为DTNB 0.2 g·L^(-1)、ATCI 0.2 g·L^(-1)、ACh E 0.04 U·m L^(-1)、p H 6.8、反应温度29℃及暴露时间15 min;并与国标方法进行了对比与验证,发现试剂加样顺序对毒性测定结果有显著影响。基于ACh E的微板毒性测试结果表明,灭多威的DRC呈现良好的S型曲线,可用Weibull函数有效表征,拟合决定系数R2大于0.97,空白变异控制在了±10%以内。此方法可用于化学污染物的高通量毒性检测。
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关键词
灭多威
乙酰胆碱酯酶
剂量-效应曲线
微板吸光法
双相关系
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Keywords
methomyl
acetylcholinesterase
dose-response curve
microplate absorbance method
biphasic relationship
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分类号
X171.5
[环境科学与工程—环境科学]
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题名微板吸光法在藻类毒性分析中的应用
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作者
李适云
何裕坚
张宏涛
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机构
佛山市环境健康与安全评价研究中心
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出处
《农业与技术》
2015年第14期1-1,26,共2页
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基金
2013年佛山市院市合作项目(项目编号:2013HT100091)
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文摘
本文通过细致分析与探究微板吸光法用于测定环境毒物对藻生长的抑制效应,指出微板吸光法是1种以微藻为指示生物,置于96孔板培养,用酶标仪连续测定其吸光度,从而评价毒物毒性的方法。大量试验成果可证实该法具有所需样品量少、易于设置多浓度、节约时间、与标准锥形瓶法有良好一致性等优点,是1种切实可行的检测方法。因此,随着社会的发展,环境样品和有毒化学品检测数目的极速增长,该法仍具有继续扩大基础研究,强化实际应用性能的意义。
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关键词
微板吸光法
毒性试验
生态毒理
藻类
酶标仪
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分类号
X55
[环境科学与工程—环境工程]
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