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IgH基因重排在多发性骨髓瘤自体造血干细胞移植后微小残留病监测中的价值
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作者 程平 关军 +4 位作者 周英 王秋香 王兰兰 张婷 程辉 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期164-170,共7页
目的:探讨免疫球蛋白重链(IgH)基因重排在多发性骨髓瘤(MM)自体造血干细胞移植(auto-HSCT)后微小残留病监测中的价值。方法:收集2018年-2022年于武汉市第一医院血液内科接受auto-HSCT的26例MM患者的临床资料,通过多重PCR联合毛细管电泳... 目的:探讨免疫球蛋白重链(IgH)基因重排在多发性骨髓瘤(MM)自体造血干细胞移植(auto-HSCT)后微小残留病监测中的价值。方法:收集2018年-2022年于武汉市第一医院血液内科接受auto-HSCT的26例MM患者的临床资料,通过多重PCR联合毛细管电泳片段分析法检测IgH重排来评价微小残留病(MRD),对疾病的转归进行相关统计学分析。结果:全部26例MM患者中,男性18例,女性8例,中位年龄59(41-70)岁,移植后中位随访时间33(7-52)个月。与骨髓IgH重排阴性组(17例)比较,移植前骨髓IgH重排阳性(9例)患者移植后3个月达到CR和sCR疗效的比例更低(1/9 vs 14/17),移植后缓解持续的时间(DOR)更短(10.78±4.35 vs 15.88±5.22个月),两组DOR差异有统计学意义(P<0.05);与外周血干细胞采集物IgH重排阴性组(21例)比较,外周血干细胞采集物IgH重排阳性(5例)患者移植后3个月达到CR和sCR的比例更低(0/5 vs 15/21),移植后缓解持续的时间(DOR)更短(9.60±4.83 vs 15.19±5.11个月),两组DOR差异有统计学意义(P<0.05)。在随访期内,移植前骨髓IgH重排阳性的患者有5例(5/9)死亡,IgH重排阴性患者均存活;外周血干细胞采集物IgH重排阳性患者有4例(4/5)死亡,IgH重排阴性患者有1例死亡(1/21)。无论是骨髓还是外周血干细胞采集物标本,IgH重排阳性患者移植后生存时间较IgH重排阴性患者更短(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,性别、疾病分期、初诊时骨髓涂片浆细胞比例、干细胞动员方案、移植前疗效评价(≥CR和<CR)、CD34+细胞计数对移植前骨髓及干细胞采集物IgH重排均无影响(P>0.05)。结论:通过检测接受auto-HSCT的MM患者IgH重排,可以进一步评价MRD的深度,对疾病的疗效及预后判断有一定的指导意义。 展开更多
关键词 IgH重排 多发性骨髓瘤 自体造血干细胞移植 微小残留病
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儿童急性髓系白血病早期流式微小残留病检测与预后相关性的临床研究
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作者 卢文婕 熊昊 +6 位作者 杨李 龙飞 陈智 陶芳 孙鸣 王卓 罗琳琳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1343-1348,共6页
目的:探索应用多参数流式细胞术(MFC)监测儿童急性髓系白血病(AML)诱导化疗后骨髓微小残留病(MRD)对预测预后的价值。方法:回顾性分析2015年8月-2022年12月武汉儿童医院血液科97例初诊AML患儿接受诱导化疗第Ⅰ周期和第Ⅱ周期后采用MFC... 目的:探索应用多参数流式细胞术(MFC)监测儿童急性髓系白血病(AML)诱导化疗后骨髓微小残留病(MRD)对预测预后的价值。方法:回顾性分析2015年8月-2022年12月武汉儿童医院血液科97例初诊AML患儿接受诱导化疗第Ⅰ周期和第Ⅱ周期后采用MFC检测骨髓MRD的结果,并分析其与预后的相关性。结果:97例AML患儿诱导治疗Ⅰ后57名患儿MRD阳性(MRD1^(+),58.8%),诱导治疗Ⅱ后仍有19名患儿MRD阳性(MRD2^(+),19.6%)。Kaplan-Meier生存分析结果显示37例(64.9%)MRD1^(+)接受移植治疗患儿预计3年总生存(OS)率明显高于20例(35.1%)未接受移植治疗患儿(84.6%vs 40.0%,P=0.0001)。35例MRD1^(+)MRD2^(-)患儿中,接受移植的25例患儿3年OS率高于10例未移植患儿(87.2%vs 70.0%,P=0.3229)。19例MRD1^(+)MRD2^(+)患儿3年OS率低于35例MRD1^(+)MRD2^(-)患儿(57.4%vs 81.8%,P=0.059)。12例MRD2^(+)移植治疗患儿3年OS率高于MRD2+7例未移植患儿(80.8%vs 14.3%,P=0.0007)。12例MRD1^(+)MRD2^(+)移植患儿和25例MRD1^(+)MRD2-移植患儿3年OS差异无统计学意义(80.8%vs 87.2%,P=0.8868)。7例MRD1^(+)MRD2^(+)未移植患儿3年OS明显低于10例MRD1^(+)MRD2^(-)未移植患儿(14.3%vs 70.7%,P=0.0114)。进一步多因素分析结果显示MRD2^(+)和移植治疗是患儿预后的独立影响因素(P=0.031,0.000),MRD1^(+)对预测97例患儿总体生存无统计学差异(P=0.902)。结论:诱导化疗Ⅱ后MRD阳性是AML患儿预后不良的独立危险因素。MRD2^(+)预示着更差的预后,可筛选出需接受移植的患儿。MRD2^(+)不是患儿移植治疗禁忌症尽早移植明显改善高危患儿的预后。 展开更多
关键词 流式细胞术 微小残留病 急性髓系白血 儿童 预后 移植
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微小残留病检测方法及其临床应用 被引量:13
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作者 朱勇梅 陈赛娟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期1131-1136,共6页
尽管目前白血病的诊治水平已显著提高,但复发仍不可避免。近10年来研究认为,患者体内微小残留病(MRD)与白血病复发密切相关。传统形态学检测由于敏感度较低限制了其在MRD检测中的应用。随着分子检测手段的不断改进,尤其是近年来实时定量... 尽管目前白血病的诊治水平已显著提高,但复发仍不可避免。近10年来研究认为,患者体内微小残留病(MRD)与白血病复发密切相关。传统形态学检测由于敏感度较低限制了其在MRD检测中的应用。随着分子检测手段的不断改进,尤其是近年来实时定量RTPCR的出现为MRD检测提供了准确、敏感、快速的手段。大量临床研究已证实,MRD的有无及其高低不但反映了个体对治疗的反应情况,而且与预后非常相关,其在白血病早期复发的预示中有显著作用。MRD检测还能用于评价不同治疗方案的疗效,为寻找最佳治疗手段提供了依据。本文对MRD检测方法及其临床应用做一综述,相信随着标准化MRD检测体系的建立必将对白血病复发的预防起重要作用。 展开更多
关键词 微小残留病 微小残留病检测 白血
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流式细胞术动态监测急性白血病完全缓解后微小残留病与预后的关系 被引量:12
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作者 孙楠楠 甘思林 +3 位作者 孙慧 张秋堂 刘延方 谢新生 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期339-342,共4页
本研究探讨多参数流式细胞术(FCM)动态监测急性白血病(AL)完全缓解(CR)后微小残留病(MRD)与预后的关系。选择2010年10月至2012年5月我院血液科收治的58例AL患者,其中45例为急性髓细胞白血病(AML)患者和13例为急性淋巴细胞白血病(ALL)患... 本研究探讨多参数流式细胞术(FCM)动态监测急性白血病(AL)完全缓解(CR)后微小残留病(MRD)与预后的关系。选择2010年10月至2012年5月我院血液科收治的58例AL患者,其中45例为急性髓细胞白血病(AML)患者和13例为急性淋巴细胞白血病(ALL)患者,定期用FCM检测患者骨髓MRD,同时检测骨髓细胞形态学的变化,追踪至复发或随访截止日期。平均随访9个月(3-21个月)得出完全缓解患者MRD平均水平,并对CR后不同时间点MRD水平在评估AL患者预后中的价值进行分析和总结。定义MRD≥1%为阳性,否则为阴性。结果表明:45例AML患者,测得CR后MRD最大值9.57%,最小值0.01%,平均值0.67%;13例ALL患者,测得CR后MRD最大值7.9%,最小值0.0016%,平均值0.99%;共测得44份AL诱导缓解后的骨髓MRD水平,MRD(+)组复发率53.3%(8/15),MRD(-)组复发率10.3%(3/29),MRD(+)组复发率高于MRD(-)组(χ2=7.58,P=0.006);共测得58份AL巩固治疗1个疗程后的骨髓MRD水平,MRD(+)组复发率62.5%(5/8),MRD(-)组复发率16.0%(8/50),MRD(+)组复发率高于MRD(-)组(χ2=6.11,P=0.013)。结论:多参数流式细胞术检测急性白血病CR后MRD差异较大,10-6-10-2,不能作为评价完全缓解的单一指标。诱导缓解后及巩固治疗1个疗程后MRD≥1%时复发率高,MRD可以作为预后评价的敏感指标。 展开更多
关键词 微小残留病 流式细胞术 急性白血 完全缓解 复发
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CD123在急性早幼粒细胞白血病微小残留病检测中的应用 被引量:13
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作者 王亚哲 常艳 +8 位作者 主鸿鹄 秦亚溱 李金兰 付家瑜 李玲娣 陈珊珊 黄晓军 陆道培 刘艳荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期427-432,共6页
为了探讨CD123联合应用其它免疫标志检测急性早幼粒细胞白血病(APL)中微小残留病(MRD)的作用及意义,采用四色流式细胞术(FCM)分析了186例初诊APL患者的免疫表型特点及20例正常骨髓中与APL细胞表型相同的细胞所占比例,并应用以CD34/CD117... 为了探讨CD123联合应用其它免疫标志检测急性早幼粒细胞白血病(APL)中微小残留病(MRD)的作用及意义,采用四色流式细胞术(FCM)分析了186例初诊APL患者的免疫表型特点及20例正常骨髓中与APL细胞表型相同的细胞所占比例,并应用以CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的4色抗体组合对172份标本进行MRD检测并与实时定量PCR结果相比较。172份标本包括19例连续随访APL患者的116份骨髓或外周血标本和47例距初诊3个月至2年不等的非连续随访患者的56份骨髓标本,其中形态学完全缓解(CR)后117份,CR前55份标本。对18份标本同时加做抗体组合CD9/CD117/CD34/CD33检测。结果表明:初诊APL患者除高表达CD9、CD33、CD117和低表达CD34、HLA-DR外,CD123的阳性表达率为100%(30/30);正常骨髓中CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞和CD117+CD34-CD9+CD33+细胞在有核细胞中的比例分别为(0.066±0.012)%和(0.089±0·066)%,与APL患者相比相差4个对数级;随访期内,19例患者全部获得形态学CR,中位时间为4周(3-6周),13例FCM结果转阴的中位时间为7.5周(5-11周),11例PCR结果转阴的中位时间为8周(5-12周);形态学CR后随访的117份标本中41份FCM检测MRD呈阳性,8份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例>5%,中位值为9.02%(5.26%-18.14%),33份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例<5%,中位值为0·48%(0.02%-4.70%);CD117+CD34-细胞中CD123+HLA-DR-细胞的中位相对比例分别为86.77%(63.29%-92.62%)和63.59%(15.11%-98.36%);FCM与PCR同时检测MRD结果显示,FCM(+)标本中95.9%(93/97)PCR为阳性,FCM的假阳性率为4.1%(4/97),PCR的假阴性率为8.75%(7/93)。FCMMRD(-)标本中,92%(69/75)PCR阴性,8%(6/75)为PCR阳性。连续随访的116份标本和形态学CR后的117份标本显示,CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例与实时定量PCR检测的mRNA水平基本一致,两者均有一定的相关性(r=0.824,P<0.001和r=0.754,P<0.001)。结论:应用CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的2组4色抗体组合检测APL患者中的MRD简单可行,可与PCR检测相互补充。 展开更多
关键词 CD123 急性早幼粒细胞白血 微小残留病 流式细胞术
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微小残留病在儿童急性B淋巴细胞白血病预后中的意义 被引量:9
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作者 薛玉娟 陆爱东 +3 位作者 王毓 贾月萍 左英熹 张乐萍 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期321-326,共6页
目的探讨在微小残留病(MRD)指导治疗下,不同时间点MRD水平在儿童B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)预后中的意义。方法回顾分析417例初诊B-ALL患儿在治疗第15、33、90及180天MRD水平,并探究其与预后的关系。结果417例患儿中,男240例、女17... 目的探讨在微小残留病(MRD)指导治疗下,不同时间点MRD水平在儿童B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)预后中的意义。方法回顾分析417例初诊B-ALL患儿在治疗第15、33、90及180天MRD水平,并探究其与预后的关系。结果417例患儿中,男240例、女177例,中位年龄5.0(3.0~10.0)岁,中位生存时间44.0(33.7~56.2)月,3年总生存(OS)及无事件生存(EFS)率为(90.9±1.4)%和(85.2±1.7)%。417例患儿中,第15、33、90和180天4个时间点分别有336、415、414、414例接受了骨髓MRD检测。治疗第15天,MRD≥10%组的3年OS及EFS率均低于其他MRD水平组;治疗第33天,MRD≥1%组的3年OS及EFS率均低于其他MRD水平组;第90天或180天,MRD≥0.1%组的3年OS及EFS率均低于其他MRD水平组,差异均有统计学意义(P<0.05)。白细胞(WBC)≥50×109/L组3年OS及EFS率均低于WBC<50×109/L组,3个时间点MRD均阴性组的3年OS及EFS率均高于3个时间点MRD至少1次阳性组,高危组的3年OS及EFS率均低于标危和中危组,差异均有统计学意义(P<0.05)。COX分析显示,第33天MRD≥0.1%和第180天MRD≥0.01%均是影响OS和EFS的独立危险因素(P均<0.05)。结论B-ALL患儿治疗第33和180天的MRD水平是提示预后的敏感指标。连续监测MRD在儿童B-ALL的治疗中至关重要。 展开更多
关键词 微小残留病 流式细胞术 急性淋巴细胞白血 预后 儿童
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221例急性早幼粒细胞白血病免疫表型特点与微小残留病检测及基因标志的关系 被引量:10
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作者 王亚哲 秦亚溱 +8 位作者 江滨 主鸿鹄 常艳 郝乐 李金兰 李玲娣 陈珊珊 黄晓军 刘艳荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期271-276,共6页
本研究探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的免疫表型特点与微小残留病(MRD)检测及基因标志之间的关系。采用四色流式细胞术(FCM)分析了221例初诊APL患者的免疫表型,其中87例加做CD123抗体,196例同时运用PCR检测特异融合基因pml-rarα... 本研究探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的免疫表型特点与微小残留病(MRD)检测及基因标志之间的关系。采用四色流式细胞术(FCM)分析了221例初诊APL患者的免疫表型,其中87例加做CD123抗体,196例同时运用PCR检测特异融合基因pml-rarα。结果发现:初诊APL患者中CD123、CD33和CD9的阳性表达率分别为100%、99.1%和96.0%,阳性患者中平均阳性细胞比例均在90%左右;虽然CD117、CD13、CD38及CD64的阳性表达率均高于96%,但阳性患者中阳性细胞比例分布不一致,平均阳性细胞比例在70%左右;部分患者表达CD15、CD56和CD11b,多数患者不表达CD34和HLA-DR,阳性患者中阳性细胞的平均比例均较低。196例初诊APL患者中,pml-rarα基因的不同转录本bcr1、bcr2和bcr3所占比例分别为63.3%、4.6%和32.1%。bcr3型基因与CD34的阳性表达相关,以20%为界时bcr3和bcr1型中CD34+患者的比例分别为15.4%(10/65)和3.3%(4/121)(p<0.05);以10%为阳性界限,bcr3和bcr1型中CD34+患者的比例分别为47.7%(31/65)和5.8%(7/121)(p<0.001);其余抗原的表达无明显区别。APL细胞中CD34为阳性且表现为非高侧向角(NL-SSC)时高度提示基因为bcr3型。结论:APL患者的免疫表型具有独特特征,CD123、CD33和CD9更适用于APL的MRD检测,CD34的阳性表达、NL-SSC与bcr3基因亚型相关,CD34的阳性界限设为10%更能提示基因类型与抗原表达的关系。 展开更多
关键词 急性早幼粒细胞白血 免疫表型 微小残留病
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实时定量PCR监测多发性骨髓瘤患者自体造血干细胞移植后微小残留病 被引量:7
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作者 林法迎 侯健 +3 位作者 谭龙益 丁思奇 王皓 王东星 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期516-520,共5页
为了探讨应用实时定量PCR方法在监测多发性骨髓瘤患者造血干细胞移植后微小残留病 (minimalresid ualdisease ,MRD)中的作用 ,利用SYBRGreenⅠ荧光染料 ,采用实时定量PCR方法 ,以IgH为标志 ,对 8例多发性骨髓瘤和 1例Waldenstr m巨球蛋... 为了探讨应用实时定量PCR方法在监测多发性骨髓瘤患者造血干细胞移植后微小残留病 (minimalresid ualdisease ,MRD)中的作用 ,利用SYBRGreenⅠ荧光染料 ,采用实时定量PCR方法 ,以IgH为标志 ,对 8例多发性骨髓瘤和 1例Waldenstr m巨球蛋白血症患者自体外周血干细胞移植 (autologousperipheralbloodstemcelltrans plantation ,APBSCT)前后的IgH(immunoglobulinheavychain ,IgH)基因重排进行定量分析。结果发现 ,IgH基因重排拷贝数在APBSCT前后分别为 3 10 8± 10 43 ,594± 660 ,两者差异有显著性 (P <0 .0 5) ,与患者骨髓浆细胞比值和外周血M蛋白量成正相关 (r =0 .86,P <0 .0 5) ,并对 1例复发患者进行连续检测 ,结果与临床相符。结论 :实时定量PCR方法对IgH基因重排定量分析 ,可以作为判断多发性骨髓瘤治疗疗效的一种检测方法 。 展开更多
关键词 实时定量PCR 免疫球蛋白重链 微小残留病 自体外周血干细胞移植 多发性骨髓瘤
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急性髓系白血病微小残留病的多色流式细胞术检测 被引量:4
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作者 何琛 张秋堂 +1 位作者 汤平 孙慧 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期341-345,共5页
目的:建立本实验室急性髓系白血病微小残留病检测的十色抗体组合方案,探讨其临床应用价值。方法:根据初发急性髓系白血病患者白血病细胞的抗原表达特征,采用多参数流式细胞术检测骨髓微小残留病,并将检测结果与骨髓细胞形态学和PCR结果... 目的:建立本实验室急性髓系白血病微小残留病检测的十色抗体组合方案,探讨其临床应用价值。方法:根据初发急性髓系白血病患者白血病细胞的抗原表达特征,采用多参数流式细胞术检测骨髓微小残留病,并将检测结果与骨髓细胞形态学和PCR结果进行比较,确定本实验室微小残留病检测的十色抗体组合方案。结果:分析郑州大学第一附属医院392例初诊急性髓系白血病患者的免疫表型特点,其中出现异常免疫表型的有357例(占91.07%)。异常免疫表型主要有跨系表达、跨阶段表达、抗原表达缺失或强度异常、其他异常表达。根据白血病细胞异常免疫表型特征建立的本实验室十色抗体组合方案应用于156例急性髓系白血病患者的微小残留病检测,阳性率(43.6%)高于骨髓细胞形态学(26.8%),与PCR检测结果符合度高(96.49%),且阳性者复发率(86.96%)显著高于阴性者(5.75%),可真实反映体内白血病负荷,提示病情变化。结论:多参数流式细胞术可检测出急性髓系白血病的多种异常免疫表型,根据白血病细胞抗原表达特点建立的本实验室十色抗体组合方案能很好地检测白血病微小残留病,预测复发。 展开更多
关键词 微小残留病 急性髓系白血 多参数流式细胞术 免疫表型
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CD10在儿童期B-急性淋巴细胞白血病中的表达特点及其在微小残留病检测中的意义 被引量:3
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作者 赵惠君 徐翀 +7 位作者 陈静 吴政宏 薛惠良 汤静燕 潘慈 李莉 顾龙君 沈立松 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期350-354,共5页
本研究的目的是观察CD10在儿童期B 急性淋巴细胞白血病 (B ALL)中的表达情况 ,并探讨CD10在白血病微小残留病检测中的应用价值。用流式细胞术分析 5 8例儿童期急性淋巴细胞白血病表型 ,观察CD10在B ALL病例骨髓细胞中的表达特点 ,并将C... 本研究的目的是观察CD10在儿童期B 急性淋巴细胞白血病 (B ALL)中的表达情况 ,并探讨CD10在白血病微小残留病检测中的应用价值。用流式细胞术分析 5 8例儿童期急性淋巴细胞白血病表型 ,观察CD10在B ALL病例骨髓细胞中的表达特点 ,并将CD10抗体与其它多种抗体构成四色组合用于B ALL的微小残留病检测 ,评价其所起到的作用。结果表明 ,6 5 .5 % (38/5 8)的B ALL具有CD10过强表达 (CD10 bright)的特点 ,而且CD10 bright与CD34的阳性表达率有关———CD10 bright多出现于CD34阳性率高的B ALL中。CD10 bright在微小残留病检测中 ,与其它异常表达的抗原形成的组合能够在双参数点图上很好地区分出白血病细胞群与正常细胞群。即使在其他抗原表达无异常时 ,也可因CD10的过强表达而使白血病细胞群与正常细胞群区分开。结论 :CD10 bright与B ALL中CD34的高比例表达相关 ,CD10 bright也是微小残留病检测的一个很好的指标 ,CD10的表达与其他用于微小残留病检测的抗原表达的应用有互补作用。 展开更多
关键词 B-急性淋巴细胞白血 微小残留病 CDl0 流式细胞术
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Wilms瘤基因WT1表达与急性白血病微小残留病的检测 被引量:3
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作者 傅建新 王玲 +1 位作者 王玮 陈子兴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期211-215,共5页
近年来发现急性髓性白血病 (AML)有Wilms瘤抑制基因WT1的异常表达 ,且表达水平与预后呈负相关 ,提示其可作为一种新的白血病标志。为探讨WT1能否作为急性白血病微小残留病 (minimalresidualdisease ,MRD)的标志 ,我们采用巢式逆转录聚... 近年来发现急性髓性白血病 (AML)有Wilms瘤抑制基因WT1的异常表达 ,且表达水平与预后呈负相关 ,提示其可作为一种新的白血病标志。为探讨WT1能否作为急性白血病微小残留病 (minimalresidualdisease ,MRD)的标志 ,我们采用巢式逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)测定了WT1基因的灵敏度 ,并与肿瘤特异性标志基因进行比较。所有样本RNA的质量均用内对照c abl基因证实。以两轮RT PCR扩增WT1和肿瘤特异性融合基因检测白血病细胞的极限在NB4细胞分别为 10 -4 和 10 -5,而在K5 62细胞分别为 10 -3- 10 -4 和高于 10 -6 ;在 2 9例供血员的外周血单个核细胞 (MNC)均未检测到WT1基因表达 ,但在 2 1例非恶性疾病患者骨髓MNC中有 8例呈WT1基因阳性 (38.1% )。本研究提示 ,监测WT1表达可用于AML的疗效评价及MRD随访 。 展开更多
关键词 WT1基因 NB4细胞系 微小残留病 白血
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以免疫球蛋白和T细胞受体基因重排为标志定量检测MLL基因重排儿童急性淋巴细胞白血病的微小残留病和预后关系 被引量:4
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作者 高超 李伟京 +4 位作者 崔蕾 赵晓曦 刘曙光 吴敏媛 李志刚 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2013年第6期458-462,共5页
目的探讨MLL基因重排儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)与临床特征的关系及其对预后的指导作用。方法以2003年4月至2009年12月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心收治的MLL基因重排的ALL患儿为研究对象。以免疫球蛋白... 目的探讨MLL基因重排儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)与临床特征的关系及其对预后的指导作用。方法以2003年4月至2009年12月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心收治的MLL基因重排的ALL患儿为研究对象。以免疫球蛋白和T细胞受体基因重排、MLL融合转录本为标志,定量PCR方法监测MRD水平。以诱导治疗结束时MRD水平≥10-4为MRD阳性组,<10-4为MRD阴性组。卡方检验和Kaplan-Meier生存分析分别比较MRD阳性和阴性组临床特征和无事件生存率(EFS)的差异。结果 14例ALL患儿在诱导治疗结束时检测了MRD水平,MRD阳性组患儿初诊时外周血WBC计数显著高于MRD阴性组,对泼尼松实验治疗反应显著低于MRD阴性组。MRD阴性组5年EFS显著优于MRD阳性组,100%vs(37.5±17.1)%,P=0.022。结论诱导治疗结束时MRD水平有助于对MLL基因重排儿童ALL进行预后分组,指导个体化治疗、改善预后。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血 微小残留病 MLL基因重排 儿童
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实时定量PCR检测血液恶性肿瘤的微小残留病 被引量:7
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作者 林江 钱军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期277-281,共5页
实时定量PCR(RQ PCR)是近年出现的一种新的核酸定量技术 ,将常规PCR与探针杂交技术融为一体。在PCR反应体系中加入荧光探针 ,该探针与靶DNA/cDNA特异性结合。PCR反应延伸阶段 ,Taq酶发挥其 5′→ 3′外切酶活性将荧光探针切断 ,荧光信... 实时定量PCR(RQ PCR)是近年出现的一种新的核酸定量技术 ,将常规PCR与探针杂交技术融为一体。在PCR反应体系中加入荧光探针 ,该探针与靶DNA/cDNA特异性结合。PCR反应延伸阶段 ,Taq酶发挥其 5′→ 3′外切酶活性将荧光探针切断 ,荧光信号得以释放 ,荧光信号强度与PCR产物成正比。因此 ,通过实时监测PCR过程中荧光信号的变化 ,可以在一个密闭体系中对待测标本进行精确定量分析。RQ PCR成功地解决了常规PCR不能定量、扩增产物污染而导致假阳性、需进行PCR后处理等问题 ,为检测血液系肿瘤微小残留病提供了快速、简便、精确、敏感、可靠的工具。本文阐述了RQ PCR的基本原理以及在血液系统恶性肿瘤 ,如急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病。 展开更多
关键词 实时定量PCR 血液恶性肿瘤 微小残留病 白血 淋巴瘤
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流式细胞术检测急性白血病微小残留病的研究进展 被引量:11
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作者 景卉 冯茹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期847-851,共5页
近年来,随着新的化疗药物的出现,急性白血病在治疗上取得很大进展,患者的完全缓解率达50%-80%。尽管如此,从诊断开始的3-5年内仍有部分患者复发,目前认为其主要原因与微小残留病(MRD)的存在相关。多参数流式细胞术(FCM)是目前检测MRD的... 近年来,随着新的化疗药物的出现,急性白血病在治疗上取得很大进展,患者的完全缓解率达50%-80%。尽管如此,从诊断开始的3-5年内仍有部分患者复发,目前认为其主要原因与微小残留病(MRD)的存在相关。多参数流式细胞术(FCM)是目前检测MRD的有效方法之一。它通过多参数分析白血病细胞与正常细胞表面不同的免疫表型,将两种细胞区分,具有快速、灵敏度高、定量准确的优点。通过FCM对急性白血病MRD的监测,不仅有助于判断疗效、指导个体化治疗,对预测疾病复发也具有重大意义。本文将对FCM检测急性白血病MRD的优势、面临的挑战、临床意义及应用前景进行综述。 展开更多
关键词 微小残留病 流式细胞术 急性白血
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PCR扩增IgH和TCR_β基因重排在检测淋巴细胞白血病微小残留病中的应用 被引量:6
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作者 赵洪宁 黄志光 +2 位作者 朱梅刚 张素娟 董敬朋 《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第2期124-127,共4页
利用IgH和TCR_β克隆性基因重排原理,用多聚酶链反应(PolymeraseChainReaction.PCR)技术检测小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)骨髓和外周血共13例。结果:ALL初治的2例患儿PCR检测全部... 利用IgH和TCR_β克隆性基因重排原理,用多聚酶链反应(PolymeraseChainReaction.PCR)技术检测小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)骨髓和外周血共13例。结果:ALL初治的2例患儿PCR检测全部呈现阳性特异性单带。ALL完全缓解(CR)的11例患儿中阳性7例,阴性4例,其中2例骨髓移植(BMT)患儿移植前PCR阳性,移植后转为阴性。1例自体骨髓移植(auto-BMT)患儿于移植后2个月时PCR检测又重新出现阳性,但临床无复发现象。4例对照者PCR均为阴性。结果表明PCR技术具有简便、快速、敏感、特异性强等优点,在检测微小残留(MRD)中具有广阔前景。 展开更多
关键词 淋巴细胞 白血 微小残留病 合酶链反应
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小儿急性淋巴细胞性白血病微小残留病免疫治疗的初步研究 被引量:2
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作者 潘世扬 黄佩珺 +6 位作者 唐云章 龚海红 刘晓红 马金霞 文怡 宫道华 童明庆 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期492-495,共4页
目的 :研究利用体外培养的激活脐血造血干细胞 ( activated cord blood stem cell,ACBSC) ,对急性淋巴细胞性白血病( AL L )患儿微小残留病 ( MRD)进行免疫治疗的疗效。方法 :无菌枸橼酸 ( ACD)抗凝脐血收集 ,经 Percoll单个核细胞分离... 目的 :研究利用体外培养的激活脐血造血干细胞 ( activated cord blood stem cell,ACBSC) ,对急性淋巴细胞性白血病( AL L )患儿微小残留病 ( MRD)进行免疫治疗的疗效。方法 :无菌枸橼酸 ( ACD)抗凝脐血收集 ,经 Percoll单个核细胞分离与植物血凝素 ( PHA)培养 ,采用桥联免疫组化 ( APAAP)方法进行 PHA激活前后 CD3、CD4、CD8抗原测定 ;应用双抗体夹心 EL ISA法进行肿瘤坏死因子 ( TNF- α)检测 ;利用 PCR方法对克隆性重排的 T细胞受体 ( TCR)基因进行测定 ,检查外周血中 AL L MRD。结果 :1脐血单个核细胞以一定浓度 PHA( 2 0 mg/ L)培养激活后 ,其中表达 CD3、CD4、CD8抗原的淋巴细胞数增高。2未经 PHA激活的单个核细胞TNF-α分泌呈一过性 ,72 h后检测 <10 pg/ ml;经 PHA激活 4 8h后 ,分泌维持在一个较高水平 ,达 60 0 pg/ ml。 3 6例 AL L患儿输注前骨髓和外周血中 MRD测定全部阳性 ,4例经多次输注 ,半年后 MRD检测为阴性 ,骨髓中 MRD明显减少 ,其余 2例骨髓和外周血中 MRD检测均为阴性。结论 :ACBSC能够分泌抗肿瘤细胞因子及可能具有细胞毒 T淋巴细胞 ( CTL)样作用 ;可望通过利用脐血免疫治疗方法 ,对小儿 AL L的 MRD进行彻底清除 ;利用 ACBSC移植 ,可能是治疗小儿 AL L MRD安全有效的免疫治疗方法。 展开更多
关键词 脐血造血干细胞 急性淋巴细胞性白血 微小残留病 免疫治疗
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Wt1反义寡核苷酸阻断白血病微小残留病wt1基因表达的体外研究 被引量:1
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作者 杨璐 曹悦鞍 +3 位作者 彭朝胜 夏菁 张文洛 田力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期50-53,共4页
本研究通过wt1反义寡核苷酸(ASO)抑制wt1基因的表达,观察微小残留病模型及患者基因表达的变化。取56例复诊急性白血病完全缓解(CR)患者骨髓,用RT-PCR方法筛选出wt1基因表达阳性的骨髓标本。白血病细胞系微小残留病(MRD)模型及筛选出的wt... 本研究通过wt1反义寡核苷酸(ASO)抑制wt1基因的表达,观察微小残留病模型及患者基因表达的变化。取56例复诊急性白血病完全缓解(CR)患者骨髓,用RT-PCR方法筛选出wt1基因表达阳性的骨髓标本。白血病细胞系微小残留病(MRD)模型及筛选出的wt1阳性急性白血病CR患者骨髓标本进行了细胞培养并用wt1ASO处理细胞,观察wt1基因表达的变化。结果表明:wt1基因的敏感性是10-3-10-4;56例急性白血病CR患者骨髓wt1基因的表达阳性率为16%。用wt1ASO处理wt1表达阳性的K562、HL-60细胞系MRD模型以及9例存在MRD的急性白血病CR患者骨髓,发现wt1ASO组有效的阻断了wt1基因的表达,而正义寡核苷酸组和对照组wt1基因的表达仍为阳性。结论:wt1ASO体外能够阻断白血病MRD中残留白血病细胞wt1基因的表达。 展开更多
关键词 WT1 反义寡核苷酸 白血 微小残留病
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15例急性淋巴细胞性白血病微小残留病追踪检测结果分析 被引量:2
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作者 肖燕 梁欣荃 费洪宝 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期259-260,共2页
为探讨残留白血病细胞的存在与白血病患儿长期生存之间的关系,我们用非同位素的PCR-RNA转录本分子杂交法,选用T细胞抗原受体γ链(TCR_γ)重排基因为标志,检测了20例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,并对其中具有TCR_γ重排基因的15例患儿... 为探讨残留白血病细胞的存在与白血病患儿长期生存之间的关系,我们用非同位素的PCR-RNA转录本分子杂交法,选用T细胞抗原受体γ链(TCR_γ)重排基因为标志,检测了20例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,并对其中具有TCR_γ重排基因的15例患儿进行了追踪检测,结果显示:化疗后早期(<5月)大多数患儿都能检测到残留白血病细胞,长期缓解者微小残留病检测为阴性。结果表明,当临床达到完全缓解时,对每1例患者的残留白血病细胞进行监测是必要的。 展开更多
关键词 急性 淋巴细胞 白血 微小残留病 长期生存
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微小残留病阳性儿童B系急性淋巴细胞白血病的追踪分析 被引量:1
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作者 薛惠良 陈静 +6 位作者 徐翀 潘慈 汤静燕 周敏 董璐 王耀平 顾龙君 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期636-638,643,共4页
目的探讨儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿骨髓微小残留病(MRD)及检测,预测预后的可能性。方法应用四色荧光抗体标记法通过流式细胞仪检测儿童B-ALL的MRD。对41例MRD阳性患儿加强化疗强度,多次连续监测,进行追踪分析。结果41例MRD... 目的探讨儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿骨髓微小残留病(MRD)及检测,预测预后的可能性。方法应用四色荧光抗体标记法通过流式细胞仪检测儿童B-ALL的MRD。对41例MRD阳性患儿加强化疗强度,多次连续监测,进行追踪分析。结果41例MRD阳性患儿中复发6例,复发患儿的MRD均>0.1%,MRD出现阳性的时间均>3个月,临床分型都属高危型。MRD阳性患儿经1个疗程强烈化疗转阴27例,其中1例复发,其他均在随访中,中位随访时间24.8个月;MRD阳性2个疗程转阴14例,复发5例,缓解患儿中位随访时间22.8个月。结论MRD对B-ALL预后监测有重要意义,MRD阳性时间越长对预后越不利,加强对MRD阳性患儿的治疗对改善预后有积极作用。 展开更多
关键词 微小残留病 B系急性淋巴细胞白血 追踪 预后 儿童
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儿童T-ALL微小残留病的表现特点和两套四色荧光抗体组合的流式细胞术监测方法的探索 被引量:1
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作者 李莉 袁晓军 +2 位作者 徐翀 蒋黎敏 沈立松 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1103-1109,共7页
本研究旨在探索流式细胞术监测儿童急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)微小残留病(MRD)的方法,并探讨其临床应用价值。运用流式细胞术,以抗TdT/CD5/cCD3/HLA-DR+CD19+CD33和抗CD34/CD5/cCD3/HLA-DR+CD19+CD33两套四色荧光抗体组合检测32例T-AL... 本研究旨在探索流式细胞术监测儿童急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)微小残留病(MRD)的方法,并探讨其临床应用价值。运用流式细胞术,以抗TdT/CD5/cCD3/HLA-DR+CD19+CD33和抗CD34/CD5/cCD3/HLA-DR+CD19+CD33两套四色荧光抗体组合检测32例T-ALL初发患儿白血病细胞的免疫表型,同时对照10份正常骨髓标本的检测结果,把能够使白血病细胞在双参数电路图上出现的位置完全不同于正常骨髓细胞的位置的抗体组合作为有效组合,对患儿诱导治疗结束后的骨髓标本进行MRD检测。结果表明,32例T-ALL初治患儿用抗TdT/CD5/cCD3/HLA-DR+CD19+CD33和抗CD34/CD5/cCD3/HLA-DR+CD19+CD33两套荧光抗体各自的有效检出频率为90.6%和62.5%。两套抗体组合联合检测,32例T-ALL患儿都可找到适用的抗体组合进行MRD监测。32例T-ALL患儿诱导治疗缓解后的共计129次的流式细胞术MRD监测阳性率为19.4%(25/129),共检测出15例患儿MRD监测阳性;在监测的同时进行FAB形态学方法检测,阳性率为5.43%(7/129),检测出2例患儿阳性。流式细胞术MRD监测的阳性率明显高于FAB形态学检测的阳性率(P<0.01)。结论:以两套四色荧光抗体组合的流式细胞术能快速有效地对T-ALL进行MRD监测,该方法灵敏度高,对于T-ALL患儿的治疗、预后监测可能有重要意义。 展开更多
关键词 急性T淋巴细胞白血 微小残留病 流式细胞术
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