目的研究微小RNA(miR)-483-3p减轻大鼠心肌纤维化的作用,探讨其机制与细胞自噬的关系。方法选取24只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、空白转染组和高表达组,每组6只,通过尾静脉注射异丙肾上腺素建立心肌纤维化模型。空白转染组及...目的研究微小RNA(miR)-483-3p减轻大鼠心肌纤维化的作用,探讨其机制与细胞自噬的关系。方法选取24只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、空白转染组和高表达组,每组6只,通过尾静脉注射异丙肾上腺素建立心肌纤维化模型。空白转染组及高表达组通过尾静脉分别单次注射腺相关病毒(AAV)-空白转染、AAV-miR-483-3p(5×10^(11)vg)进行预处理。14 d后,假手术组经尾静脉注射0.9%的氯化钠溶液[2.5 ml/(kg·d)],持续14 d;模型组、空白转染组和高表达组通过尾静脉注射异丙肾上腺素[2.5 ml/(kg·d),2 mg/ml],持续14 d。检测大鼠心肌病理损伤程度、心肌纤维化程度、胶原蛋白Ⅰ(Collagen-Ⅰ)表达量以及心肌细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)、细胞自噬相关蛋白5(Atg5)和自噬降解底物(P62)的表达。结果与假手术组比较,模型组心肌纤维化面积、Collagen-Ⅰ阳性表达量、Atg5及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著增加,P62蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,高表达组心肌纤维化面积、Collagen-Ⅰ阳性表达量、Atg5及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低[(13.64±1.51)%vs(27.47±1.55)%,(13.48±3.07)%vs(30.91±2.45)%,0.98±0.17 vs 1.24±0.28,0.66±0.05 vs 1.26±0.09,P<0.05],P62蛋白表达水平显著增高(0.91±0.11 vs 0.74±0.06,P<0.05)。结论miR-483-3p可减轻大鼠心肌纤维化,其机制可能与抑制心肌细胞自噬有关。展开更多
目的探讨微小RNA(miR)-483-3p在原发性高血压患者血清中的水平及诊断价值。方法选取2021年1月至2023年3月于三亚中心医院心内科就诊并确诊为原发性高血压的患者180例作为研究组,选取同期来我院体检且与研究组一般资料匹配的健康志愿者16...目的探讨微小RNA(miR)-483-3p在原发性高血压患者血清中的水平及诊断价值。方法选取2021年1月至2023年3月于三亚中心医院心内科就诊并确诊为原发性高血压的患者180例作为研究组,选取同期来我院体检且与研究组一般资料匹配的健康志愿者160例作为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应检测2组血清miR-483-3p水平。结果与对照组比较,研究组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、收缩压、舒张压水平升高(P<0.01)。研究组血清miR-483-3p水平高于对照组(2.15±0.57 vs 1.00±0.05,P<0.01)。研究组中高血压1级、2级、3级患者血清miR-483-3p水平呈明显升高趋势(1.44±0.45 vs 1.79±0.58 vs 3.35±0.64,P<0.05)。相关性分析显示,研究组血清miR-483-3p水平与高血压分级呈正相关(r=0.745,P=0.000);研究组血清miR-483-3p水平与TC、TG、LDL-C、收缩压、舒张压水平均呈正相关(P<0.01)。miR-483-3p、TC、LDL-C、收缩压、舒张压是原发性高血压的独立影响因素(P<0.05,P<0.01)。血清miR-483-3p水平预测原发性高血压的曲线下面积为0.923(95%CI:0.890~0.949)。结论miR-483-3p在原发性高血压患者血清中的水平随病情严重程度的加重呈上升趋势,对原发性高血压有较高的诊断价值。展开更多
目的·探究miR-128-3p/瘦素(leptin,LEP)轴对银屑病中角质形成细胞过度增殖及炎症反应的调控作用。方法·选取BALB/c小鼠,分为对照组(n=10)及模型组(n=10)。模型组小鼠背部行咪喹莫特软膏连续涂抹以构建银屑病小鼠模型。构建miR...目的·探究miR-128-3p/瘦素(leptin,LEP)轴对银屑病中角质形成细胞过度增殖及炎症反应的调控作用。方法·选取BALB/c小鼠,分为对照组(n=10)及模型组(n=10)。模型组小鼠背部行咪喹莫特软膏连续涂抹以构建银屑病小鼠模型。构建miR-128-3p过表达和干扰质粒、LEP干扰质粒分别转染人永生化角质形成细胞HaCaT细胞。经实时定量聚合酶链反应检测miR-128-3p及LEP的mRNA,Western blotting检测LEP蛋白表达;酶联免疫吸附实验检测培养液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β的含量;MTT实验检测细胞相对活力;EdU实验检测细胞增殖;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-128-3p与LEP的靶向关系。结果·与对照组小鼠比,模型组小鼠miR-128-3p表达下调,Lep的基因表达及蛋白水平升高(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实LEP是miR-128-3p下游靶点。与模拟物阴性对照(negative control of mimic,NC mimic)组相比,miR-128-3p模拟物(miR-128-3p mimic)组miR-128-3p表达上调,LEP的基因表达及蛋白降低;miR-128-3p mimic组TNF-α、IL-6、IL-1β显著低于NC mimic;miR-128-3p上调后细胞相对活力、EdU阳性细胞率均降低(均P<0.05)。与抑制物阴性对照(negative control of inhibitor,NC inhibitor)组相比,miR-128-3p抑制物(miR-128-3p inhibitor)组miR-128-3p表达下调,LEP的基因表达及蛋白水平增加;miR-128-3p下调后细胞TNF-α、IL-6、IL-1β升高;miR-128-3p表达下调导致细胞相对活力和EdU阳性细胞率增加(均P<0.05)。进一步实验结果显示:与LEP抑制物(LEP inhibitor)组相比,miR-128-3p inhibitor+LEP inhibitor组LEP表达上调,而TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高,细胞相对活力及EdU阳性细胞率增加(均P<0.05)。结论·miR-128-3p靶向沉默LEP抑制角质形成细胞增殖及炎症反应,抑制银屑病发生发展。展开更多
文摘目的研究微小RNA(miR)-483-3p减轻大鼠心肌纤维化的作用,探讨其机制与细胞自噬的关系。方法选取24只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、空白转染组和高表达组,每组6只,通过尾静脉注射异丙肾上腺素建立心肌纤维化模型。空白转染组及高表达组通过尾静脉分别单次注射腺相关病毒(AAV)-空白转染、AAV-miR-483-3p(5×10^(11)vg)进行预处理。14 d后,假手术组经尾静脉注射0.9%的氯化钠溶液[2.5 ml/(kg·d)],持续14 d;模型组、空白转染组和高表达组通过尾静脉注射异丙肾上腺素[2.5 ml/(kg·d),2 mg/ml],持续14 d。检测大鼠心肌病理损伤程度、心肌纤维化程度、胶原蛋白Ⅰ(Collagen-Ⅰ)表达量以及心肌细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)、细胞自噬相关蛋白5(Atg5)和自噬降解底物(P62)的表达。结果与假手术组比较,模型组心肌纤维化面积、Collagen-Ⅰ阳性表达量、Atg5及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著增加,P62蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,高表达组心肌纤维化面积、Collagen-Ⅰ阳性表达量、Atg5及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低[(13.64±1.51)%vs(27.47±1.55)%,(13.48±3.07)%vs(30.91±2.45)%,0.98±0.17 vs 1.24±0.28,0.66±0.05 vs 1.26±0.09,P<0.05],P62蛋白表达水平显著增高(0.91±0.11 vs 0.74±0.06,P<0.05)。结论miR-483-3p可减轻大鼠心肌纤维化,其机制可能与抑制心肌细胞自噬有关。
文摘目的探讨微小RNA(miR)-483-3p在原发性高血压患者血清中的水平及诊断价值。方法选取2021年1月至2023年3月于三亚中心医院心内科就诊并确诊为原发性高血压的患者180例作为研究组,选取同期来我院体检且与研究组一般资料匹配的健康志愿者160例作为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应检测2组血清miR-483-3p水平。结果与对照组比较,研究组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、收缩压、舒张压水平升高(P<0.01)。研究组血清miR-483-3p水平高于对照组(2.15±0.57 vs 1.00±0.05,P<0.01)。研究组中高血压1级、2级、3级患者血清miR-483-3p水平呈明显升高趋势(1.44±0.45 vs 1.79±0.58 vs 3.35±0.64,P<0.05)。相关性分析显示,研究组血清miR-483-3p水平与高血压分级呈正相关(r=0.745,P=0.000);研究组血清miR-483-3p水平与TC、TG、LDL-C、收缩压、舒张压水平均呈正相关(P<0.01)。miR-483-3p、TC、LDL-C、收缩压、舒张压是原发性高血压的独立影响因素(P<0.05,P<0.01)。血清miR-483-3p水平预测原发性高血压的曲线下面积为0.923(95%CI:0.890~0.949)。结论miR-483-3p在原发性高血压患者血清中的水平随病情严重程度的加重呈上升趋势,对原发性高血压有较高的诊断价值。
文摘目的·探究miR-128-3p/瘦素(leptin,LEP)轴对银屑病中角质形成细胞过度增殖及炎症反应的调控作用。方法·选取BALB/c小鼠,分为对照组(n=10)及模型组(n=10)。模型组小鼠背部行咪喹莫特软膏连续涂抹以构建银屑病小鼠模型。构建miR-128-3p过表达和干扰质粒、LEP干扰质粒分别转染人永生化角质形成细胞HaCaT细胞。经实时定量聚合酶链反应检测miR-128-3p及LEP的mRNA,Western blotting检测LEP蛋白表达;酶联免疫吸附实验检测培养液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β的含量;MTT实验检测细胞相对活力;EdU实验检测细胞增殖;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-128-3p与LEP的靶向关系。结果·与对照组小鼠比,模型组小鼠miR-128-3p表达下调,Lep的基因表达及蛋白水平升高(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实LEP是miR-128-3p下游靶点。与模拟物阴性对照(negative control of mimic,NC mimic)组相比,miR-128-3p模拟物(miR-128-3p mimic)组miR-128-3p表达上调,LEP的基因表达及蛋白降低;miR-128-3p mimic组TNF-α、IL-6、IL-1β显著低于NC mimic;miR-128-3p上调后细胞相对活力、EdU阳性细胞率均降低(均P<0.05)。与抑制物阴性对照(negative control of inhibitor,NC inhibitor)组相比,miR-128-3p抑制物(miR-128-3p inhibitor)组miR-128-3p表达下调,LEP的基因表达及蛋白水平增加;miR-128-3p下调后细胞TNF-α、IL-6、IL-1β升高;miR-128-3p表达下调导致细胞相对活力和EdU阳性细胞率增加(均P<0.05)。进一步实验结果显示:与LEP抑制物(LEP inhibitor)组相比,miR-128-3p inhibitor+LEP inhibitor组LEP表达上调,而TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高,细胞相对活力及EdU阳性细胞率增加(均P<0.05)。结论·miR-128-3p靶向沉默LEP抑制角质形成细胞增殖及炎症反应,抑制银屑病发生发展。
