CdTe量子点与微囊藻毒素-LR抗体的偶联及其相互作用的研究 被引量：1

1

作者 李莹 孙嘉笛 +1 位作者 孙秀兰 张银志 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期463-471,共9页

以巯基乙酸作为稳定剂制备了水溶性CdTe量子点,将纯化后的量子点与微囊藻毒素-LR抗体偶联,通过分析紫外-可见吸收光谱和荧光光谱,研究了不同温度下CdTe量子点与微囊藻毒素-LR抗体的相互作用,得到了量子点与抗体之间的表观结合常数Kapp(8... 以巯基乙酸作为稳定剂制备了水溶性CdTe量子点,将纯化后的量子点与微囊藻毒素-LR抗体偶联,通过分析紫外-可见吸收光谱和荧光光谱,研究了不同温度下CdTe量子点与微囊藻毒素-LR抗体的相互作用,得到了量子点与抗体之间的表观结合常数Kapp(84.3M-1),SternVolmer猝灭常数KSV(6.74×104(298 K),6.11×104(304 K),5.93×104(310 K)),结合位点n和结合常数K。此外,还研究了量子点与抗体之间相互作用的热力学参数△H(<0),△G(<0)和△S(>0),经实验数据发现,量子点与抗体之间的作用力以静电相互作用为主,氢键、范德华力也起到了一定的作用。 展开更多

关键词 量子点 微囊藻毒素-lr抗体 光谱 热力学参数

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聚胸腺嘧啶-铜纳米簇/适体-金纳米粒子荧光探针用于微囊藻毒素-LR传感分析

2

作者 蒙化 阿华英 +5 位作者 罗平馨 张艳丽 高连训 王红斌 杨文荣 庞鹏飞 《高等学校化学学报》 北大核心 2025年第5期11-18,共8页

采用DNA模板法合成了聚胸腺嘧啶-铜纳米簇[poly(T)-CuNCs]/适体-金纳米粒子(aptamer-AuNPs)荧光探针,用于微囊藻毒素-LR(MC-LR)的高灵敏传感检测.设计了3条DNA核苷酸链:MC-LR适体链(aptamer)和2条聚胸腺嘧啶单链DNA[poly(T)S 1和(poly(T... 采用DNA模板法合成了聚胸腺嘧啶-铜纳米簇[poly(T)-CuNCs]/适体-金纳米粒子(aptamer-AuNPs)荧光探针,用于微囊藻毒素-LR(MC-LR)的高灵敏传感检测.设计了3条DNA核苷酸链:MC-LR适体链(aptamer)和2条聚胸腺嘧啶单链DNA[poly(T)S 1和(poly(T)S 2].以poly(T)S 1和poly(T)S 2为模板,利用抗坏血酸(AA)还原Cu^(2+),合成了具有粉红色荧光的poly(T)S 1-CuNCs和poly(T)S 2-CuNCs.两端巯基标记的aptamer通过Au-S键与AuNPs相连形成AuNPs-aptamer-AuNPs共轭物,后者与poly(T)-CuNCs杂交形成dsDNA-CuNCs,双链结构中CuNCs与AuNPs之间由于荧光共振能量转移(FRET)导致体系荧光猝灭.加入目标物MC-LR后,MC-LR会与dsDNA-CuNCs中的aptamer特异性结合,引起双链结构解体,poly(T)-CuNCs释放至溶液中,体系荧光得以恢复.基于此,构建了一种“off-on”型荧光探针用于MC-LR检测,该方法对MC-LR的线性范围为1 ng/L~500μg/L,检出限为0.3 ng/L(S/N=3).Poly(T)-CuNCs/aptamer-AuNPs荧光适体探针制备简单、选择性高,可用于实际水样中MC-LR定量分析. 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 聚胸腺嘧啶-铜纳米簇 适体-金纳米粒子 荧光探针

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肠道灌注微囊藻毒素对凡纳对虾肝胰腺转录组的影响

3

作者 袁海晴 金荣胜 +3 位作者 王宝燃 陈代强 张双勇 常志强 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第3期170-182,共13页

为探究微囊藻毒素亮氨酸–精氨酸异构体(microcystins-LR,MC-LR)处理下凡纳对虾(Penaeus vannamei)的基因表达特征与调控机制,本研究对凡纳对虾进行了MC-LR染毒处理。传统的急性攻毒实验多采用注射法,但此方法存在给对虾造成机体创伤的... 为探究微囊藻毒素亮氨酸–精氨酸异构体(microcystins-LR,MC-LR)处理下凡纳对虾(Penaeus vannamei)的基因表达特征与调控机制,本研究对凡纳对虾进行了MC-LR染毒处理。传统的急性攻毒实验多采用注射法,但此方法存在给对虾造成机体创伤的弊端,本研究首次采用肠道灌注的染毒方式,完成感染并规避了创伤导致的影响。同时,采用高通量测序技术对肝胰腺组织进行转录组测序与组装、功能注释与分类、差异基因筛选与分析,并采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术对转录组测序结果进行验证。结果显示,MC-LR诱导后的肝胰腺中显著变化基因数为1994个。MC-LR胁迫后,凡纳对虾肝胰腺差异表达基因代谢通路主要富集到核糖体生物合成、脂质和动脉粥样硬化、内质网中的蛋白质加工等通路中。差异基因统计显示,多个锌指蛋白基因显著下调,推测锌指蛋白参与了凡纳对虾MC-LR的应答反应。本研究结果为揭示凡纳对虾对MC-LR侵染的响应和分子调控机制提供了数据支撑,同时也为对虾染毒实验方法提供了参考。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 凡纳对虾 肠道灌注 肝胰腺 转录组

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α-硫辛酸在微囊藻毒素-LR诱导草鱼卵巢细胞损伤中的作用

4

作者 王辉 何丽 +3 位作者 阮记明 梁惜梅 李福贵 隗黎丽 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期527-534,共8页

为研究α-硫辛酸(Alpha lipoic acid,α-LA)在微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR,MC-LR)诱导水生动物毒性效应中的保护作用,本研究以草鱼卵巢(Grass carp ovary,GCO)细胞为研究对象,检测分析了不同浓度α-LA以及α-LA与MC-LR共同暴露对GCO... 为研究α-硫辛酸(Alpha lipoic acid,α-LA)在微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR,MC-LR)诱导水生动物毒性效应中的保护作用,本研究以草鱼卵巢(Grass carp ovary,GCO)细胞为研究对象,检测分析了不同浓度α-LA以及α-LA与MC-LR共同暴露对GCO细胞活力的影响,随后根据测定的结果设置对照组(不添加MC-LR和α-LA)、125μmol·L^(-1)α-LA组、24μmol·L^(-1)MC-LR组及125μmol·L^(-1)α-LA+24μmol·L^(-1)MC-LR组,检测分析了α-LA在缓解MC-LR对GCO细胞活性、氧化应激以及炎症方面的影响。结果表明:与对照组相比,24μmol·L^(-1)MC-LR可诱导乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量显著上升,同时显著抑制谷胱甘肽(GSH)活性(P<0.05),当MC-LR处理组中加入125μmol·L^(-1)α-LA后,与MC-LR单独暴露组相比,LDH活性和MDA含量均显著下降(P<0.05),但GSH活性却显著上升(P<0.05)。对氧化相关基因分析发现,与对照组相比,24μmol·L^(-1)MC-LR可显著降低SOD1、CAT和GST基因的表达量(P<0.05),当125μmol·L^(-1)α-LA与24μmol·L^(-1)MC-LR共同作用于GCO细胞后,与MC-LR单独暴露组相比,联合暴露组的GST基因的表达量显著上升(P<0.05),但SOD1和CAT两个基因的表达变化不显著(P>0.05)。此外,对炎症因子进行分析发现,MC-LR单独暴露组TNFα和IL11基因的相对表达水平显著高于对照组(P<0.05),但联合暴露组中的TNFα和IL11基因的相对表达水平却显著低于MC-LR单独暴露组(P<0.05)。研究结果表明,α-LA可缓解MC-LR诱导的氧化应激,提高细胞活力,抑制GCO细胞炎症的发生,从而减弱MC-LR对GCO细胞的损伤。 展开更多

关键词 草鱼卵巢细胞 Α-硫辛酸 微囊藻毒素-lr 氧化应激 炎症反应

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微囊藻毒素-LR对草鱼组织病理和Prkrip1基因表达的影响

5

作者 金舒怡 孙飞扬 +1 位作者 李夏 覃江凤 《现代农业科技》 2024年第24期152-156,共5页

鱼类养殖水体易出现富营养化,其中的微囊藻毒素会严重影响渔业生产力的发展。因此,开展鱼类免疫相关基因的研究意义重大。基于此,以草鱼为试验对象,根据注射微囊藻毒素-LR(MC-LR)时间(0.5、1.0、3.0、6.0、12.0、24.0 h)不同共分6个染毒... 鱼类养殖水体易出现富营养化,其中的微囊藻毒素会严重影响渔业生产力的发展。因此,开展鱼类免疫相关基因的研究意义重大。基于此,以草鱼为试验对象,根据注射微囊藻毒素-LR(MC-LR)时间(0.5、1.0、3.0、6.0、12.0、24.0 h)不同共分6个染毒组,以注射等体积生理盐水作为对照组。草鱼腹腔注射100μg/kg BW MC-LR后,采用常规石蜡切片技术和qPCR技术对各样品进行分析。结果表明:利用光学显微镜对石蜡切片进行观察,MC-LR导致肾脏和脾脏的病理损伤严重,各染毒组都有出血的现象,MC-LR注射时间越长,出血症状越严重;通过qPCR技术分析,草鱼注射MC-LR后,各染毒组Prkrip1基因的表达都显著上扬。以上结果说明,草鱼感染MC-LR后,肾脏和脾脏会受到严重损伤,但鱼体可以通过调节Prkrip1基因的表达以抵抗和减弱组织损伤效应。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 草鱼 组织病理 Prkrip1基因 表达

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微囊藻毒素-LR阻抗型电化学免疫传感器的研究 被引量：9

6

作者 石慧 孙秀兰 +2 位作者 王洪新 张银志 李在均 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期633-637,共5页

基于1，6-己二硫醇自组装技术和纳米金吸附作用相结合的方法固定微囊藻毒素抗体，采用循环伏安法及交流阻抗法研究了该修饰电极的电化学性质，并优化了微囊藻毒素-LR（MC—LR）的测定条件。结果表明，在优化条件下，阻抗变化值与MC—LR... 基于1，6-己二硫醇自组装技术和纳米金吸附作用相结合的方法固定微囊藻毒素抗体，采用循环伏安法及交流阻抗法研究了该修饰电极的电化学性质，并优化了微囊藻毒素-LR（MC—LR）的测定条件。结果表明，在优化条件下，阻抗变化值与MC—LR标准品质量浓度分别在0．25～2．0μg/L和2．0—95μg/L范围内呈良好的线性关系，其线性相关系数分别为0．9944和0．9972，检出限达0．085μg／L（S／N=3）；电极的重现性及稳定性较好，连续测定12次，相对标准偏差为7．8％；4℃下储存60d后阻抗响应信号无明显变化；应用于饮用水中MC—LR的测定，样品的回收率为93％～118％；检测时间为15min。该传感器无需标记、灵敏度高、稳定性好，可用于快速检测饮用水源水中的MC—LR。 展开更多

关键词 免疫传感器 微囊藻毒素-lr 1 6-己二硫醇 纳米金 交流阻抗谱

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微囊藻毒素-LR对小鼠毒性机制的研究 被引量：4

7

作者 李哲 边爱 +1 位作者 沈丽珍 胥传来 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第1期247-250,共4页

目的:探讨微囊藻毒素-LR(MC-LR)引起小鼠机体损伤可能的作用机制。方法:通过腹腔注射单次给予小鼠30μg/kgbw剂量的MC-LR,测定其在给药后1、4、8h的脏器系数和一些血液生化指标。结果:短时间内(给药后4h)肝脏系数显著增加,肾脏系数变化... 目的:探讨微囊藻毒素-LR(MC-LR)引起小鼠机体损伤可能的作用机制。方法:通过腹腔注射单次给予小鼠30μg/kgbw剂量的MC-LR,测定其在给药后1、4、8h的脏器系数和一些血液生化指标。结果:短时间内(给药后4h)肝脏系数显著增加,肾脏系数变化不明显;血液CAT含量显著上升,BUN先显著上升再显著下降;CAT活力显著上升;SOD变化不明显。结论:MC-LR首先攻击肝细胞,产生大量的自由基,破坏细胞膜,进而损伤了肝细胞,影响氨基酸的代谢,使肝脏充血、肿胀;接着又引发肾功能不全,使肾小管过滤能力降低;最后,随着时间的推移,对机体造成了潜在的永久伤害,但机体的修复功能使这种伤害表观上不可见,即MC-LR对机体造成的损害在一定程度上是可逆的。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 作用机制 脏器系数 血液生化指标

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不同氧化剂对水中微囊藻毒素-LR(MC-LR)释放及降解的效果 被引量：3

8

作者 钱林 李伟英 +1 位作者 张骏鹏 张佳 《净水技术》 CAS 2015年第5期60-63,75,共5页

该文探讨了3种氧化剂（臭氧、高锰酸钾和次氯酸钠）对微囊藻毒素-LR（MC-LR）的降解效果，并研究了氧化剂处理铜绿微囊藻过程中对MC—LR的释放及其降解特性。结果表明3种氧化剂均可有效降解MC—LR。氧化处理铜绿微囊藻时，在臭氧投加速... 该文探讨了3种氧化剂（臭氧、高锰酸钾和次氯酸钠）对微囊藻毒素-LR（MC-LR）的降解效果，并研究了氧化剂处理铜绿微囊藻过程中对MC—LR的释放及其降解特性。结果表明3种氧化剂均可有效降解MC—LR。氧化处理铜绿微囊藻时，在臭氧投加速率为0．41mg／L·min、氧化反应5min和高锰酸钾投加量为2mg／L、氧化反应5—8min的条件下，均可将水中的MC—LR去除完全；此外，3种氧化剂处理含藻水的同时，可引起胞内藻毒素不同程度的释放，其中次氯酸钠处理含藻水将严重破坏藻细胞，致使产生大量的、常规水处理工艺无法有效去除的胞外溶解性MC—LR，导致饮用水水质存在安全隐患。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr(MC-lr) 氧化剂 臭氧 高锰酸钾 次氯酸钠 释放 降解

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在线固相萃取-二维高效液相-串联质谱法测定水中微囊藻毒素-LR 被引量：4

9

作者 施俭 景澍闽 +1 位作者 陆峰 向华 《净水技术》 CAS 2013年第3期52-54,58,66,共5页

建立了全自动化在线固相萃取-二维高效液相色谱-串联质谱法测定水中微囊藻毒素-LR的新方法。一维液相系统（上样泵）直接将100μL水样泵送入固相萃取柱富集，六通阀自动切换，另一维液相系统（分析泵）则将微囊藻毒素-LR冲洗至分析柱进... 建立了全自动化在线固相萃取-二维高效液相色谱-串联质谱法测定水中微囊藻毒素-LR的新方法。一维液相系统（上样泵）直接将100μL水样泵送入固相萃取柱富集，六通阀自动切换，另一维液相系统（分析泵）则将微囊藻毒素-LR冲洗至分析柱进行分离检测。试验结果表明，该方法快速、灵敏度高、精密度好。能够满足生活饮用水及其水源水中痕量微囊藻毒素-LR的检测要求，也非常适合突发水质污染时的应急检测。饮用水和水源水中高低两种浓度微囊藻毒素-LR的平均加标回收率分别为99．1％～106．0％和108．4％～108．8％，相对标准偏差为2．4％～7．0％和1．8％～9．4％，微囊藻毒素-LR的检出限为0．0026μg／L远低于国标0．06μg／L的检出限。 展开更多

关键词 在线固相萃取 微囊藻毒素-lr 多重反应监测 二维高效液相-串联质谱

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基因工程抗体在微囊藻毒素检测分析中的应用研究 被引量：2

10

作者 徐重新 刘媛 +1 位作者 李建宏 刘贤金 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期372-378,共7页

微囊藻毒素是蓝藻水华过程中产生的一类小分子多肽生物毒素,能对人和动物的肝脏造成严重损伤,属于2B类致癌物质。由于全球性工业和生活废水的大量排放以及气候变暖等现实因素,蓝藻水华现象日趋频繁和加剧,使得微囊藻毒素在水体和土壤中... 微囊藻毒素是蓝藻水华过程中产生的一类小分子多肽生物毒素,能对人和动物的肝脏造成严重损伤,属于2B类致癌物质。由于全球性工业和生活废水的大量排放以及气候变暖等现实因素,蓝藻水华现象日趋频繁和加剧,使得微囊藻毒素在水体和土壤中大量蓄积,严重威胁生态环境和农产品质量安全。基于"抗体-抗原"识别原理的免疫学检测方法是当前生物毒素快速检测研究的热点,近年抗体创制技术突飞猛进,现已从传统的多克隆抗体和单克隆抗体逐渐发展到了新型的基因工程人工抗体创制阶段。该文系统阐述了微囊藻毒素产生的内外因素及其对生态系统、人和动物的主要危害风险;全面梳理了基因工程抗体创制技术及其在微囊藻毒素检测应用研究上的最新进展;并结合作者及所在科研团队最新研究成果,深入探讨了基因工程抗体在微囊藻毒素检测应用上的发展趋势、存在的问题以及拟解决的对策。 展开更多

关键词 基因工程抗体 微囊藻毒素 农产品 质量安全 免疫分析

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微囊藻毒素-LR降解菌的筛选 被引量：1

11

作者 葛淑敏 张淑华 +2 位作者 李巧 于源华 何秀霞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第12期5360-5361,共2页

[目的]为生物降解微囊藻毒素-LR(Microcystins,MC-LR)选择生物除污的方法。[方法]对长春南湖表层和深层水体中的微生物菌群降解MC-LR的能力进行初步比较,并对具有较强MC-LR降解能力的微生物进行分离纯化及降解能力的比较。[结果]无论是... [目的]为生物降解微囊藻毒素-LR(Microcystins,MC-LR)选择生物除污的方法。[方法]对长春南湖表层和深层水体中的微生物菌群降解MC-LR的能力进行初步比较,并对具有较强MC-LR降解能力的微生物进行分离纯化及降解能力的比较。[结果]无论是深层水体还是表层水体中都存在能够降解MC-LR的微生物菌群,但表层水体中的微生物菌群降解MC-LR的延迟期较长,约为3.5 d;而深层水体中微生物菌群降解MC-LR的延迟期较短,约为1.5 d,降解速率更大,说明其能够降解MC-LR的微生物菌种活性较强。成功筛选出了4种降解MC-LR能力不同的单克隆菌落,其中菌种A和菌种B降解能力比较强。[结论]为纯菌种的定性研究、环境污染治理及生态环境的保护奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 生物降解细菌 筛选

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微囊藻毒素-LR的分离纯化

12

作者 张淑华 王晴 +1 位作者 陈玉娟 葛淑敏 《长春理工大学学报（自然科学版）》 2013年第5期161-163,共3页

微囊藻毒素-LR(MC-LR)是淡水蓝藻产生的毒性极强的毒素,通过接触、饮用等途径对人体健康造成极大威胁。通过对产微囊藻毒素-LR的铜绿微囊藻进行培养,采用超声波破碎、溶剂萃取法进行萃取,并经高效液相色谱法进行纯化,最终获得微囊藻毒素... 微囊藻毒素-LR(MC-LR)是淡水蓝藻产生的毒性极强的毒素,通过接触、饮用等途径对人体健康造成极大威胁。通过对产微囊藻毒素-LR的铜绿微囊藻进行培养,采用超声波破碎、溶剂萃取法进行萃取,并经高效液相色谱法进行纯化,最终获得微囊藻毒素-LR纯品,为微囊藻毒素-LR的进一步研究奠定基础。 展开更多

关键词 铜绿微囊藻 微囊藻毒素-lr 溶剂萃取 高效液相色谱

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基于环状DNA-银纳米簇荧光探针对微囊藻毒素-LR的传感检测 被引量：2

13

作者 杨新杰 赖艳琼 +4 位作者 李秋旸 张艳丽 王红斌 庞鹏飞 杨文荣 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2021年第12期3600-3605,共6页

以新型环状DNA为模板,制备了环状DNA-银纳米簇(Circular DNA-AgNCs)荧光探针,构建了一种无酶无标记检测微囊藻毒素-LR(MC-LR)的荧光传感分析方法.设计的环状DNA由MC-LR适体链(Apt)和适体链的互补链(cDNA)杂交形成,且cDNA可作为DNA模板... 以新型环状DNA为模板,制备了环状DNA-银纳米簇(Circular DNA-AgNCs)荧光探针,构建了一种无酶无标记检测微囊藻毒素-LR(MC-LR)的荧光传感分析方法.设计的环状DNA由MC-LR适体链(Apt)和适体链的互补链(cDNA)杂交形成,且cDNA可作为DNA模板用于合成AgNCs.利用透射电子显微镜(TEM)、紫外-可见光谱(UV-Vis)和荧光光谱(FL)表征了AgNCs的形貌和光学特性.结果表明,当存在目标物MC-LR时,由于MC-LR与环状DNA中Apt高特异性和高亲和力结合,导致环状DNA解体,释放出的cDNA-AgNCs在610 nm处呈现强荧光.在优化实验条件下,环状DNA-AgNCs荧光探针对MC-LR检测的线性范围为0.005~500μg/L,检出限为1.7 ng/L(S/N=3).该荧光探针具有制备简单、无需任何标记和灵敏度高等特点,为环境水样中微囊藻毒素-LR的快速和准确测定提供了一种简单、可靠和有效的方法. 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 环状DNA 银纳米簇 荧光探针

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抗微囊藻毒素单链抗体基因的构建、表达及初步鉴定 被引量：1

14

作者 宋丽敏 张维 +2 位作者 陈明 林敏 潘家荣 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期327-330,共4页

利用RT-PCR方法从抗微囊藻毒素-LR(MC-LR)单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增出抗体的V_H和V_L基因,构建了抗MC-LR分子的单链抗体(scFv)基因。SDS-PAGE和Western blot分析结果显示,该单链抗体基因在大肠杆菌Origami 2中特异性表达出分子量约... 利用RT-PCR方法从抗微囊藻毒素-LR(MC-LR)单克隆抗体的杂交瘤细胞中扩增出抗体的V_H和V_L基因,构建了抗MC-LR分子的单链抗体(scFv)基因。SDS-PAGE和Western blot分析结果显示,该单链抗体基因在大肠杆菌Origami 2中特异性表达出分子量约为30kD的融合蛋白。通过Ni-NTA金属亲和层析法对可溶性表达产物进行纯化,获得的目的蛋白浓度为0.115mg/mL。ELISA反应结果表明该单链抗体能与MC-LR特异性结合。此研究为制备多价高亲和力抗MC-LR抗体奠定了基础。 展开更多

关键词 微囊藻毒素(MC) 单链抗体 原核表达 ELISA

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微囊藻毒素-LR对猪体外成熟卵母细胞氧化损伤与凋亡的影响 被引量：2

15

作者 石凤垚 李文慧 +4 位作者 赵红宇 王阳 庄瑞雪 芮荣 剧世强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期98-106,共9页

旨在探讨微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)对体外成熟猪卵母细胞的毒性损伤及其潜在损伤机制。本研究从屠宰场所获得的猪卵巢中收集GV期卵母细胞,将其随机分为4组,在卵母细胞体外成熟培养液中分别添加0、20、40和60μg·mL~(-1)... 旨在探讨微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)对体外成熟猪卵母细胞的毒性损伤及其潜在损伤机制。本研究从屠宰场所获得的猪卵巢中收集GV期卵母细胞,将其随机分为4组,在卵母细胞体外成熟培养液中分别添加0、20、40和60μg·mL~(-1) MC-LR,研究MC-LR对卵母细胞第一极体(PbI)排出、纺锤体结构以及细胞内活性氧(ROS)、早期凋亡蛋白(Annexin V)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响,并采用RT-qPCR分析氧化应激和凋亡相关基因SOD1、SOD2、CAT、GSH-Px、Bax和Bcl2 mRNA的表达变化情况,试验重复3次。结果发现,MC-LR处理导致猪卵母细胞PbI排出率呈浓度依赖性下降,当MC-LR添加浓度达40μg·mL~(-1)以上时,卵母细胞成熟率极显著下降(P<0.01),且纺锤体结构异常率极显著升高(P<0.001);进一步研究发现,MC-LR处理后卵母细胞ROS水平极显著升高(P<0.01),而GSH-Px活性极显著降低(P<0.01),并伴随着抗氧化相关基因SOD1、CAT及GSH-Px mRNA表达极显著下调(P<0.01);细胞凋亡检测表明,MC-LR处理可导致卵母细胞早期凋亡率极显著增加(P<0.01),凋亡相关基因Bax/Bcl2比值极显著升高(P<0.001)。研究结果表明,MC-LR可诱导猪卵母细胞纺锤体结构异常,并引发氧化损伤与细胞凋亡,最终导致卵母细胞成熟能力下降。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 猪 卵母细胞 纺锤体 氧化应激 细胞凋亡

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农田水样中微囊藻毒素-LR拉曼检测方法的研究 被引量：2

16

作者 黄珊 孟辉 +1 位作者 曾昆 黄哲 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1862-1868,共7页

本研究建立了基于表面增强拉曼散射技术(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)的农田水样中微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR,MC-LR)的检测方法。采用柠檬酸钠还原法制备金种(Au nanoparticles,Au NPs),通过媒介增长法制备了刺状金纳... 本研究建立了基于表面增强拉曼散射技术(Surface-enhanced Raman scattering,SERS)的农田水样中微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR,MC-LR)的检测方法。采用柠檬酸钠还原法制备金种(Au nanoparticles,Au NPs),通过媒介增长法制备了刺状金纳米颗粒(Spiny gold nanoparticles,SGNPs),使用紫外-可见吸收光谱(Ultraviolet visible,UV-vis)、透射电镜(Transmission electron microscopy,TEM)和探针分子(对巯基苯甲酸,4-mercaptobenzoic acid,4-MBA)对SGNPs进行了表征及鉴定。研究以三角状金纳米颗粒作为基底,选择MC-LR在1007 cm-1和1309 cm-1处的特征峰作为定量峰,激光器激发波长为785 nm,积分时间20 s,建立检测方法。本研究建立的检测方法在1.0~100000μg·L-1的浓度范围内具有良好的线性关系,检测限(LOD)和回收率分别为1.0μg·L-1和80%~102%,使用本方法对镇江市内运粮河及古运河的灌溉水样进行检测,MC-LR的检出率为40%,含量最高达1.81μg·L-1,检测结果与LC-MS/MS比对,相关系数为0.84。本研究建立的方法快速准确,前处理简单,能满足农田水样中MC-LR的现场快速检测的要求。 展开更多

关键词 表面增强拉曼散射 刺状金纳米颗粒 微囊藻毒素-lr

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微囊藻毒素-LR对SD大鼠的短期毒效应研究 被引量：1

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作者 李秀娣 毛光明 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2013年第11期13-17,共5页

探讨微囊藻毒素-LR污染饮用水后,对大鼠机体的损伤和可能的作用机制。通过对大鼠的饮用的蒸馏水中添加低毒和高毒剂量的纯MC-LR,测定其在饲养1、7、14 d的体重、脏器系数、肝肾功能和氧化应激相关指标。高毒组饲养后体重显著低于对照组... 探讨微囊藻毒素-LR污染饮用水后,对大鼠机体的损伤和可能的作用机制。通过对大鼠的饮用的蒸馏水中添加低毒和高毒剂量的纯MC-LR,测定其在饲养1、7、14 d的体重、脏器系数、肝肾功能和氧化应激相关指标。高毒组饲养后体重显著低于对照组和低毒组。第7天和第14天肝脏系数、肾脏系数、ALT、AST、ALP、Cr、BUN均显著升高。CAT和SOD先显著升高再显著下降,MDA持续性显著升高。低毒组CAT和SOD先升高后维持高水平,MDA持续性显著升高。短期持续饮用含80μg/L MC-LR的饮用水,会导致抗氧化系统受抑制,从而出现细胞损伤,进而发展为肝肾功能的失代偿。短期持续饮用含8μg/L MC-LR的饮用水,会出现抗氧化系统受损,但可为机体代偿。MC-LR可在体内蓄积。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 脏器系数 大鼠 肝肾功能 氧化应激

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超高效液相色谱-三重四极杆质谱快速测定地表水中甲萘威、微囊藻毒素-LR、溴氰菊酯 被引量：7

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作者 叶燕慧 郭伟 +2 位作者 王东霞 刘阳春 黄振芳 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期281-286,共6页

基于超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱技术(UPLC-MS/MS),建立了一种经简单过滤即可直接进样测定地表水中甲萘威、微囊藻毒素-LR、溴氰菊酯的分析方法。水样过0.22μm微孔滤膜后,经C18色谱柱(1.8μm,2.1 mm×50 mm),柱温40℃,流速0... 基于超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱技术(UPLC-MS/MS),建立了一种经简单过滤即可直接进样测定地表水中甲萘威、微囊藻毒素-LR、溴氰菊酯的分析方法。水样过0.22μm微孔滤膜后,经C18色谱柱(1.8μm,2.1 mm×50 mm),柱温40℃,流速0.3 mL/min,以甲醇和2 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱;采用电喷雾正离子电离(ESI+),多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量分析目标物。方法学验证结果表明3种目标物浓度在0.20~50.0μg/L范围线性关系良好,相关系数(R^(2))>0.9990,方法检出限为0.03~0.08μg/L,目标物平均加标回收率为89.3%~116%,相对标准偏差(RSD)为0.5%~9.6%(n=6)。所建立方法简便快捷、灵敏准确,适用于地表水中3种有机污染物同时快速测定。 展开更多

关键词 液相色谱 三重四极杆质谱 地表水 甲萘威 微囊藻毒素-lr 溴氰菊酯

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液相色谱-三重四级杆串联质谱法快速检测水中微囊藻毒素-LR 被引量：3

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作者 李芳 王颖 +2 位作者 李献刚 刘栋 宋晓昕 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第20期5423-5427,共5页

目的建立液相色谱-三重四级杆串联质谱法快速检测水中微囊藻毒素-LR (microcystin-LR,MC-LR)含量的分析方法。方法将水样直接过0.45μm滤膜,经色谱柱XDB-C_(18),以乙腈和0.1%的甲酸水为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.2 mL/min,外标法... 目的建立液相色谱-三重四级杆串联质谱法快速检测水中微囊藻毒素-LR (microcystin-LR,MC-LR)含量的分析方法。方法将水样直接过0.45μm滤膜,经色谱柱XDB-C_(18),以乙腈和0.1%的甲酸水为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.2 mL/min,外标法定量。结果在微囊藻毒素-LR浓度为0.2～20μg/L的范围内呈良好的线性关系(r^2=0.999)。平均加标回收率在96.8%～101.7%,相对标准偏差为0.21%～1.80%。检出限为0.2μg/L,定量限为0.5μg/L。结论该方法快速,准确,适用于水样中MC-LR的检测,为相关检测机构的监测工作提供参考。 展开更多

关键词 微囊藻毒素 微囊藻毒素-lr 快速检测 液相色谱-三重四级杆串联质谱法

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微囊藻毒素-LR HPLC/ESI-MS法检测与前处理条件优化 被引量：2

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作者 李婷 朱卫平 柳春晖 《中国测试》 CAS 北大核心 2015年第2期42-45,共4页

通过对前处理过程中关键环节进行单因素不同水平比较,选择出固相萃取柱、浓缩方式、氮气流量、水浴温度、质谱参数等因素的最优实验方案,建立一种简便省时及回收效果最佳的前处理流程。采用固相萃取液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法(HPL... 通过对前处理过程中关键环节进行单因素不同水平比较,选择出固相萃取柱、浓缩方式、氮气流量、水浴温度、质谱参数等因素的最优实验方案,建立一种简便省时及回收效果最佳的前处理流程。采用固相萃取液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法(HPLC/ESI-MS)检测微囊藻毒素-LR(MC-LR),选用0.2%甲酸甲醇溶液-0.2%甲酸水溶液梯度洗脱、选用HLB小柱、普通氮吹仪浓缩(氮气流量1.5 L/min、水浴温度38℃)平均回收率为89.3%。质谱优化结果表明:当定量离子质荷比995.8>135锥孔电压49,碰撞能量54;995.8>375.1锥孔电压49,碰撞能量50,MCYST-LR灵敏度高且响应值最大。所建立优化的前处理、检测方法,具有准确度高、灵敏度高、回收率高、分离效果更好的优点,可用于分析水体中痕量MCYST-LR。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-lr 电喷雾 质谱 前处理 优化

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