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牛源抗金黄色葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白单链抗体的筛选及其体外抑菌的研究
1
作者
闫洁新
张波
+5 位作者
张凡庆
管玉
王曼
张蕾
程曼玲
朱建国
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2023年第2期145-150,共6页
由金黄色葡萄球菌(S.aureus)引发的奶牛乳腺炎是造成国内外奶牛产业经济损失的重要疾病之一。为了获得牛源抗S.aureus弹性纤维结合蛋白N端蛋白(nEbpS)的单链抗体(scFv),本研究利用噬菌体展示技术,将原核表达的nEbpS包被到固相载体酶标板...
由金黄色葡萄球菌(S.aureus)引发的奶牛乳腺炎是造成国内外奶牛产业经济损失的重要疾病之一。为了获得牛源抗S.aureus弹性纤维结合蛋白N端蛋白(nEbpS)的单链抗体(scFv),本研究利用噬菌体展示技术,将原核表达的nEbpS包被到固相载体酶标板上,以实验室前期构建好的抗牛源S.aureus噬菌体库为原始文库进行筛选,得到1株靶向nEbpS的高亲和力scFv,将得到的scFv构建原核质粒进行原核表达,获得了高纯度scFv蛋白,将其与S.aureus ATCC25923在含有Zn2+的Luria-Bertani培养基中共同孵育后发现,50μg/mL scFv组菌液浓度显著小于生理盐水组(P<0.05),结果表明,针对nEbpS的牛源scFv具有良好的抑菌能力,浓度为50μg/mL时即可显著抑制S.aureus ATCC25923的生长。本研究为S.aureus所导致的奶牛乳腺炎提供了一种新型免疫制剂,也为进一步研究nEbpS抗原的功能奠定了基础。
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关键词
奶牛乳腺炎
金黄色葡萄球菌
弹性纤维结合蛋白
单链抗体
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职称材料
牛乳中致病性金黄色葡萄球菌快速检测胶体金免疫层析方法研究
被引量：
8
2
作者
布日额
任晓峰
+5 位作者
吴金花
锡林高娃
王学理
刘燕
孙立杰
刘洋
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期907-911,共5页
为建立快速检测牛乳中致病性金黄色葡萄球菌(S.aureus)的胶体金免疫层析方法,本研究将鼠抗S.aureus IgG进行胶体金标记,并喷涂于玻璃纤维上制备金标垫,分别以兔抗S.aureus nEBPS重组蛋白IgG和羊抗鼠IgG作为检测线和质控线,组装制备快速...
为建立快速检测牛乳中致病性金黄色葡萄球菌(S.aureus)的胶体金免疫层析方法,本研究将鼠抗S.aureus IgG进行胶体金标记,并喷涂于玻璃纤维上制备金标垫,分别以兔抗S.aureus nEBPS重组蛋白IgG和羊抗鼠IgG作为检测线和质控线,组装制备快速检测牛乳中致病性S.aureus胶体金免疫层析试纸条。结果表明:试纸条对致病性S.aureus具有高度特异性,与沙门氏菌、大肠杆菌、布氏杆菌无交叉反应;试纸条最低检出1.0×105cfu/mL的S.aureus。试纸条批内及批间检测试验均具有良好的重复性。试纸条与S.aureus分离鉴定法符合率为90.0%、与PCR试剂盒符合率为83.3%。表明本研究建立的牛乳中致病性S.aureus免疫层析检测方法具有特异、敏感、稳定、操作简单、快捷等特点,适合于牛乳中致病性S.aureus的现场快速检测。
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关键词
牛乳
致病性金黄色葡萄球菌
弹性纤维结合蛋白
胶体金免疫层析试纸条
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职称材料
题名
牛源抗金黄色葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白单链抗体的筛选及其体外抑菌的研究
1
作者
闫洁新
张波
张凡庆
管玉
王曼
张蕾
程曼玲
朱建国
机构
上海交通大学农业与生物学院上海兽医生物技术重点实验室
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2023年第2期145-150,共6页
基金
国家重点研发计划重点专项(2018YFD0501600)。
文摘
由金黄色葡萄球菌(S.aureus)引发的奶牛乳腺炎是造成国内外奶牛产业经济损失的重要疾病之一。为了获得牛源抗S.aureus弹性纤维结合蛋白N端蛋白(nEbpS)的单链抗体(scFv),本研究利用噬菌体展示技术,将原核表达的nEbpS包被到固相载体酶标板上,以实验室前期构建好的抗牛源S.aureus噬菌体库为原始文库进行筛选,得到1株靶向nEbpS的高亲和力scFv,将得到的scFv构建原核质粒进行原核表达,获得了高纯度scFv蛋白,将其与S.aureus ATCC25923在含有Zn2+的Luria-Bertani培养基中共同孵育后发现,50μg/mL scFv组菌液浓度显著小于生理盐水组(P<0.05),结果表明,针对nEbpS的牛源scFv具有良好的抑菌能力,浓度为50μg/mL时即可显著抑制S.aureus ATCC25923的生长。本研究为S.aureus所导致的奶牛乳腺炎提供了一种新型免疫制剂,也为进一步研究nEbpS抗原的功能奠定了基础。
关键词
奶牛乳腺炎
金黄色葡萄球菌
弹性纤维结合蛋白
单链抗体
Keywords
Bovine mastitis
Staphylococcus aureus
elastin-binding protein
scFv
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
牛乳中致病性金黄色葡萄球菌快速检测胶体金免疫层析方法研究
被引量：
8
2
作者
布日额
任晓峰
吴金花
锡林高娃
王学理
刘燕
孙立杰
刘洋
机构
内蒙古民族大学生命科学学院
内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所
东北农业大学动物医学院
内蒙古民族大学动物科技学院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期907-911,共5页
基金
内蒙古自治区科技厅科技创新引导计划项目(20111802
2012年
2013年)
文摘
为建立快速检测牛乳中致病性金黄色葡萄球菌(S.aureus)的胶体金免疫层析方法,本研究将鼠抗S.aureus IgG进行胶体金标记,并喷涂于玻璃纤维上制备金标垫,分别以兔抗S.aureus nEBPS重组蛋白IgG和羊抗鼠IgG作为检测线和质控线,组装制备快速检测牛乳中致病性S.aureus胶体金免疫层析试纸条。结果表明:试纸条对致病性S.aureus具有高度特异性,与沙门氏菌、大肠杆菌、布氏杆菌无交叉反应;试纸条最低检出1.0×105cfu/mL的S.aureus。试纸条批内及批间检测试验均具有良好的重复性。试纸条与S.aureus分离鉴定法符合率为90.0%、与PCR试剂盒符合率为83.3%。表明本研究建立的牛乳中致病性S.aureus免疫层析检测方法具有特异、敏感、稳定、操作简单、快捷等特点,适合于牛乳中致病性S.aureus的现场快速检测。
关键词
牛乳
致病性金黄色葡萄球菌
弹性纤维结合蛋白
胶体金免疫层析试纸条
Keywords
diary milk
pathogenic Staphylococcus aureus
nEBPS
immunochromatographic strip
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛源抗金黄色葡萄球菌弹性纤维结合蛋白N端蛋白单链抗体的筛选及其体外抑菌的研究
闫洁新
张波
张凡庆
管玉
王曼
张蕾
程曼玲
朱建国
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2023
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
牛乳中致病性金黄色葡萄球菌快速检测胶体金免疫层析方法研究
布日额
任晓峰
吴金花
锡林高娃
王学理
刘燕
孙立杰
刘洋
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
8
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