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大尺寸弱阴离子交换晶胶层析一步法分离ATP的实验研究 被引量:8
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作者 沈哲明 沈绍传 +1 位作者 贠军贤 姚克俭 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期768-773,共6页
使用一种新型的大尺寸弱阴离子交换晶胶柱从酵母细胞发酵液中一步分离纯化广泛应用于临床治疗的高能化合物三磷酸腺苷(ATP)。该晶胶柱高150mm,直径140mm,柱体体积达到2300mL。实验测定了晶胶柱的孔隙率和等板高度等基本性能参数。层析... 使用一种新型的大尺寸弱阴离子交换晶胶柱从酵母细胞发酵液中一步分离纯化广泛应用于临床治疗的高能化合物三磷酸腺苷(ATP)。该晶胶柱高150mm,直径140mm,柱体体积达到2300mL。实验测定了晶胶柱的孔隙率和等板高度等基本性能参数。层析过程以去离子水为冲洗液,分别用0.03、0.4和1mol·L-1NaCl溶液在2cm·min-1流速下进行洗脱。发现0.03mol·L-1NaCl溶液能把大部分杂质洗脱,0.4mol·L-1NaCl溶液洗脱后能获得纯度较高的ATP。洗脱下来的ATP样品通过高效液相色谱(HPLC)定量分析,回收的ATP纯度达95%~97%,总回收率49.1%。与其它已有方法相比,本法耗时少,工艺简单,降低了ATP变性的风险;在层析过程中以去离子水代替酸液作为冲洗剂和洗脱液溶剂,降低分离过程成本。 展开更多
关键词 大尺寸 弱阴离子交换晶胶介质 ATP 层析分离
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阳离子交换纳晶胶分离乳过氧化物酶的研究
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作者 张颂红 赵欣怡 +2 位作者 楼小玲 沈绍传 贠军贤 《化工学报》 EI CSCD 北大核心 2024年第7期2574-2582,共9页
乳过氧化物酶(lactoperoxidase,LP)因具有重要的生物学功能及广谱的抑菌活性而在食品、医药和化工等领域受到广泛关注。针对目前LP分离纯化方法中普遍存在的选择性差、成本高以及分离材料易污染等问题,以甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)及聚甲... 乳过氧化物酶(lactoperoxidase,LP)因具有重要的生物学功能及广谱的抑菌活性而在食品、医药和化工等领域受到广泛关注。针对目前LP分离纯化方法中普遍存在的选择性差、成本高以及分离材料易污染等问题,以甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)及聚甲基丙烯酸缩水甘油酯纳凝胶(PGN)为复合基材,利用低温冷冻聚合和结晶致孔原理制备了pHEMA/PGN纳晶胶基质,然后接枝功能单体2-丙烯酰氨基-2-甲基-1-丙磺酸(AMPSA)得到具有阳离子交换功能的pHEMA/PGN纳晶胶介质,以用于从乳清中层析分离LP。考察了纳晶胶介质的基础性能,并重点探究了缓冲液pH对层析性能的影响。结果表明:制备所得纳晶胶介质具有分布均匀的超大孔结构、优良的渗透性能和传质性能,对模型蛋白溶菌酶的吸附容量为4.41 mg·ml^(-1);在最优分离条件下所得目标蛋白LP纯度约为96.0%,比活力为27.03 U·mg^(-1),酶活性回收率为86.5%,分离效果良好,表明该纳晶胶介质在层析分离方面具有较大的应用潜力。 展开更多
关键词 乳过氧化物酶 介质 分离 离子交换
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离子交换晶胶层析分离甘草多糖的研究 被引量:5
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作者 刘月娜 程秀红 +2 位作者 沈绍传 贠军贤 代斌 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1507-1512,共6页
甘草多糖是甘草提取物中的重要活性组分,具有免疫调节和抗氧化等多种药理作用,对其进行分离纯化的研究具有重要意义。研究探索了一种利用晶胶介质分离甘草多糖的新途径。以预处理和水提甘草根粉末得到的粗多糖为原料,用甲基丙烯酸二甲... 甘草多糖是甘草提取物中的重要活性组分,具有免疫调节和抗氧化等多种药理作用,对其进行分离纯化的研究具有重要意义。研究探索了一种利用晶胶介质分离甘草多糖的新途径。以预处理和水提甘草根粉末得到的粗多糖为原料,用甲基丙烯酸二甲氨乙酯接枝聚丙烯酰胺晶胶基质制备得到的阴离子交换晶胶介质,对甘草多糖进行了快速层析分离,得到了精制的甘草多糖,确定了适宜的工艺条件。结果表明,阴离子晶胶介质可以吸附甘草多糖,其层析分离迅速;以去离子水为床柱平衡、冲洗及洗脱液配置的基础液,在流速1 cm·min-1条件下,晶胶介质对甘草多糖的吸附容量达670μg·m L-1晶胶,说明晶胶层析可作为天然药用多糖快速分离的一种新方法。 展开更多
关键词 超大孔连续床 介质 离子交换 分离 甘草多糖
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超大孔聚丙烯酰胺晶胶微球的制备及其生物相容性和吸附性能 被引量:6
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作者 鲁丹萍 占晓勇 +1 位作者 林东强 姚善泾 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期2350-2356,共7页
利用反相悬浮结合溶剂结晶致孔法制备了具有超大孔隙、球形度良好的聚丙烯酰胺晶胶微球,晶胶微球平均粒径为234.1μm,孔径约为10~50μm。采用原位接枝法,将2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙烷磺酸(AMPSA)接枝到晶胶微球孔隙表面上,得到... 利用反相悬浮结合溶剂结晶致孔法制备了具有超大孔隙、球形度良好的聚丙烯酰胺晶胶微球,晶胶微球平均粒径为234.1μm,孔径约为10~50μm。采用原位接枝法,将2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙烷磺酸(AMPSA)接枝到晶胶微球孔隙表面上,得到了带有磺酸基团的阳离子交换晶胶微球。考察了晶胶微球的生物相容性和吸附蛋白质及重金属离子Cu2+的性能,结果表明:在大肠杆菌培养液中,添加晶胶微球,对大肠杆菌的生长影响不大。接枝了AMPSA的晶胶微球表现出更强的吸附Cu2+的能力,吸附容量达到1.14 mmol·g-1。同时,接枝后的晶胶微球也具有一定吸附蛋白质的能力,溶菌酶的吸附容量达到54.5 mg·g-1。因此,该大孔晶胶可望在微生物固定化、生物分离和重金属离子吸附中会发挥更大的作用。 展开更多
关键词 多孔介质 聚合物 微球 离子交换 原位接枝 生物相容性 吸附
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晶胶固载副干酪乳杆菌及合成苯乳酸的实验研究 被引量:2
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作者 许娜 关今韬 +3 位作者 张颂红 贠军贤 关怡新 姚善泾 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期143-148,共6页
针对生物法合成苯乳酸存在成本高、高产菌株缺乏、工业化困难,稳定性低等问题,利用阴离子交换晶胶对副干酪乳杆菌的吸附作用,在发酵过程中形成复合生物催化剂,用于苯乳酸发酵和转化合成。对复合催化剂微观结构、形成过程特性、发酵和转... 针对生物法合成苯乳酸存在成本高、高产菌株缺乏、工业化困难,稳定性低等问题,利用阴离子交换晶胶对副干酪乳杆菌的吸附作用,在发酵过程中形成复合生物催化剂,用于苯乳酸发酵和转化合成。对复合催化剂微观结构、形成过程特性、发酵和转化性能进行了测定。结果表明:发酵时投入晶胶可形成固载细胞的超大孔复合生物催化剂,不仅促进菌体生长,使生物量达7.10 mg·mL^-1,是同条件下无晶胶时的2.5倍,而且通过减轻底物抑制,将苯乳酸产量由0.71 mg·mL^-1提高到0.95 mg·mL^-1;以浓度0.5、1和2 mg·mL^-1的苯丙氨酸为底物,采用复合催化剂转化生成苯乳酸的产量是相应全细胞催化剂时的3、2.5和1.5倍。 展开更多
关键词 生物催化剂 苯乳酸 阴离子交换
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海带褐藻糖胶的分离纯化及其抗氧化活性测定 被引量:5
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作者 李荣蓉 付燕红 +3 位作者 赵紫涵 阮新 付学军 孙利芹 《农产品加工》 2022年第2期47-51,56,共6页
为更好地开发海带资源,分别采用DEAE-Sepharose FF弱阴离子交换柱层析、高效液相凝胶色谱对海带褐藻糖胶粗品进行分离纯化,结果表明,2种方法均可用于褐藻糖胶的分离,均分离出3个组分,离子交换层析分离出的组分命名为D-1,D-2,D-3。高效... 为更好地开发海带资源,分别采用DEAE-Sepharose FF弱阴离子交换柱层析、高效液相凝胶色谱对海带褐藻糖胶粗品进行分离纯化,结果表明,2种方法均可用于褐藻糖胶的分离,均分离出3个组分,离子交换层析分离出的组分命名为D-1,D-2,D-3。高效液相凝胶色谱分离的3种组分命名为H-1,H-2,H-3,其分子量分别为193.148,74.407,44.452 kD。对D-1,D-2,D-33种组分进行抗氧化活性测定,3种组分对DPPH自由基和·OH均表现出一定的清除能力,且分子量越小,清除自由基能力越强,体外抗氧化活性越好。 展开更多
关键词 海带 褐藻糖 高效液相凝色谱 阴离子交换柱层析 抗氧化活性
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用KTA explorer 10蛋白纯化系统分离纯化家蚕类免疫球蛋白 被引量:3
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作者 杜瑶瑶 刘玲玲 +2 位作者 王鉴 舒建洪 张耀洲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期732-738,共7页
类免疫球蛋白(Hemolin)是昆虫的先天性免疫蛋白。为了获取纯度高、具有天然活性的家蚕Hemolin,将被家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染的家蚕蛹进行匀浆处理,离心后对上清液进行DEAE弱阴离子交换层析,进而利用Superdex 200凝胶过滤层析获得... 类免疫球蛋白(Hemolin)是昆虫的先天性免疫蛋白。为了获取纯度高、具有天然活性的家蚕Hemolin,将被家蚕核型多角体病毒(BmNPV)感染的家蚕蛹进行匀浆处理,离心后对上清液进行DEAE弱阴离子交换层析,进而利用Superdex 200凝胶过滤层析获得家蚕Hemolin的初级纯化产物,经质谱鉴定验证后再利用Superdex 75凝胶过滤层析对初级产物做进一步分离纯化。获得的纯化产物采用SDS-PAGE和Western blot检测到单一的大小约45 kD的蛋白质条带。采用该层析技术与条件能有效制备出纯度较高的具有天然活性的家蚕Hemolin。 展开更多
关键词 家蚕蛹 类免疫球蛋白 家蚕核型多角体病毒 阴离子交换层析 过滤层析
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