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人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体构建及其稳定表达细胞株的筛选
被引量：
2
1
作者
刘凯玉
蒋维
+2 位作者
王瑞娜
吴家雪
党永军
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2016年第3期1-4,共4页
构建并鉴定人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体,筛选CARABIN过表达的弥散性大B淋巴瘤细胞SUDHL-6的稳定细胞株。通过设计Carabin上下游引物,用同源重组的方法构建慢病毒载体pLENTI-c GFP-CARABIN,将其与psPAX2和pMD2.G包装质粒按3∶2∶1的...
构建并鉴定人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体,筛选CARABIN过表达的弥散性大B淋巴瘤细胞SUDHL-6的稳定细胞株。通过设计Carabin上下游引物,用同源重组的方法构建慢病毒载体pLENTI-c GFP-CARABIN,将其与psPAX2和pMD2.G包装质粒按3∶2∶1的比例用PEI Transfection Reagent共转染HEK293T细胞制备病毒,用病毒颗粒感染SU-DHL-6细胞2周后,用流式细胞仪分选GFP表达阳性的细胞,Western Blot检测CARABIN-GFP融合蛋白表达。成功构建pLENTI-c GFP-CARABIN慢病毒过表达载体。包装病毒颗粒并感染SU-DHL-6细胞后,荧光显微镜检测和流式细胞分选鉴定表达效率为26.5%,筛选出的GFP阳性细胞用Western Blot检测到CARABINGFP融合蛋白表达。成功构建了Carabin过表达慢病毒载体并筛选出了CARABIN-GFP稳定表达的细胞株。
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关键词
CARA
b
IN
过表达
稳定细胞株
弥散性大b淋巴瘤
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职称材料
题名
人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体构建及其稳定表达细胞株的筛选
被引量：
2
1
作者
刘凯玉
蒋维
王瑞娜
吴家雪
党永军
机构
复旦大学生命科学学院
复旦大学基础医学院
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2016年第3期1-4,共4页
基金
国家自然科学基金(21572038)
文摘
构建并鉴定人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体,筛选CARABIN过表达的弥散性大B淋巴瘤细胞SUDHL-6的稳定细胞株。通过设计Carabin上下游引物,用同源重组的方法构建慢病毒载体pLENTI-c GFP-CARABIN,将其与psPAX2和pMD2.G包装质粒按3∶2∶1的比例用PEI Transfection Reagent共转染HEK293T细胞制备病毒,用病毒颗粒感染SU-DHL-6细胞2周后,用流式细胞仪分选GFP表达阳性的细胞,Western Blot检测CARABIN-GFP融合蛋白表达。成功构建pLENTI-c GFP-CARABIN慢病毒过表达载体。包装病毒颗粒并感染SU-DHL-6细胞后,荧光显微镜检测和流式细胞分选鉴定表达效率为26.5%,筛选出的GFP阳性细胞用Western Blot检测到CARABINGFP融合蛋白表达。成功构建了Carabin过表达慢病毒载体并筛选出了CARABIN-GFP稳定表达的细胞株。
关键词
CARA
b
IN
过表达
稳定细胞株
弥散性大b淋巴瘤
Keywords
CARA
b
IN
over-expression
sta
b
le cell line
Diffuse Large
b
Cell Lymphomas（DL
b
CL）
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体构建及其稳定表达细胞株的筛选
刘凯玉
蒋维
王瑞娜
吴家雪
党永军
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2016
2
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