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siRNA干扰对鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF57基因表达的影响
被引量：
2
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作者
金李萍
潘晓艺
+7 位作者
蔺凌云
姚嘉赟
曹铮
尹文林
赖迎迢
陶家发
刘忆瀚
沈锦玉
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第4期537-544,共8页
研究通过在异育银鲫脊髓细胞系(Spinal cord tissue cell lines of Carassius auratus gibelio,CSC)中对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF57进行RNA干扰,以探究其对CyHV-2病毒复制的影响。首先,以FAM标记的异育银鲫β-...
研究通过在异育银鲫脊髓细胞系(Spinal cord tissue cell lines of Carassius auratus gibelio,CSC)中对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF57进行RNA干扰,以探究其对CyHV-2病毒复制的影响。首先,以FAM标记的异育银鲫β-actin的siRNA进行CSC细胞转染条件的优化,再将针对CyHV-2 ORF57基因设计的3条siRNA,转染CSC细胞,并进行病毒感染,评估siRNA对病毒复制和致细胞病变的影响。转染条件优化结果显示,在siRNA浓度为80 nmol/L,转染液维持24h后更换维持液,β-actin基因表达量最低且观察到的荧光点数量最多。而ORF57-siRNAs干扰结果显示,ORF57-siRNA-2组表现出了较强的抑制效果,在接毒48h时,ORF57-siRNA-2处理组的ORF57基因表达量降到相对于Mock组的33.55%(P<0.01),并且各ORF57-siRNA组都表现出了延缓CyHV-2致细胞病变的时间和强度,抑制时间可达120h。TCID_(50)结果显示,不同组的ORF57-siRNAs均能降低病毒滴度,其中ORF57-siRNA-2将病毒原液TCID_(50)108.487/mL下降至106.776/mL。研究结果表明,干扰ORF57的表达可大大降低CyHV-2的致细胞病变力和复制率,ORF57在CyHV-2复制与致细胞病变中起重要作用。本研究为CyHV-2基于siRNA技术的抗病毒治疗和弱毒株的改造提供了借鉴。
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关键词
鲤疱疹病毒Ⅱ型
RNA干扰
ORF57
小干扰RNA
异育银鲫脊髓细胞系
TCID_(50)
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职称材料
题名
siRNA干扰对鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF57基因表达的影响
被引量：
2
1
作者
金李萍
潘晓艺
蔺凌云
姚嘉赟
曹铮
尹文林
赖迎迢
陶家发
刘忆瀚
沈锦玉
机构
上海海洋大学水产与生命学院
浙江省淡水水产研究所
中国水产科学研究院珠江水产研究所
出处
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第4期537-544,共8页
基金
国家重点研发计划(2019YFD0900103)
浙江省重点研发计划(2019C02058)资助。
文摘
研究通过在异育银鲫脊髓细胞系(Spinal cord tissue cell lines of Carassius auratus gibelio,CSC)中对鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)ORF57进行RNA干扰,以探究其对CyHV-2病毒复制的影响。首先,以FAM标记的异育银鲫β-actin的siRNA进行CSC细胞转染条件的优化,再将针对CyHV-2 ORF57基因设计的3条siRNA,转染CSC细胞,并进行病毒感染,评估siRNA对病毒复制和致细胞病变的影响。转染条件优化结果显示,在siRNA浓度为80 nmol/L,转染液维持24h后更换维持液,β-actin基因表达量最低且观察到的荧光点数量最多。而ORF57-siRNAs干扰结果显示,ORF57-siRNA-2组表现出了较强的抑制效果,在接毒48h时,ORF57-siRNA-2处理组的ORF57基因表达量降到相对于Mock组的33.55%(P<0.01),并且各ORF57-siRNA组都表现出了延缓CyHV-2致细胞病变的时间和强度,抑制时间可达120h。TCID_(50)结果显示,不同组的ORF57-siRNAs均能降低病毒滴度,其中ORF57-siRNA-2将病毒原液TCID_(50)108.487/mL下降至106.776/mL。研究结果表明,干扰ORF57的表达可大大降低CyHV-2的致细胞病变力和复制率,ORF57在CyHV-2复制与致细胞病变中起重要作用。本研究为CyHV-2基于siRNA技术的抗病毒治疗和弱毒株的改造提供了借鉴。
关键词
鲤疱疹病毒Ⅱ型
RNA干扰
ORF57
小干扰RNA
异育银鲫脊髓细胞系
TCID_(50)
Keywords
Cyprinid herpesvirus 2
RNA interference
ORF57
siRNA
CSC cell line
TCID_(50)
分类号
S943 [农业科学—水产养殖]
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题名
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出处
发文年
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1
siRNA干扰对鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF57基因表达的影响
金李萍
潘晓艺
蔺凌云
姚嘉赟
曹铮
尹文林
赖迎迢
陶家发
刘忆瀚
沈锦玉
《水生生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
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