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用RT-PCR法对猪瘟病毒检测的研究
被引量：
11
1
作者
乔军
陈创夫
+1 位作者
高丰
贾桂珍
《塔里木农垦大学学报》
2001年第4期25-27,共3页
用异硫氰酸胍 -酚 -仿一步抽提法提取病料细胞总RNA并进行反转录 ,再以此产物为模板对CSFV可疑病料进行了PCR扩增。结果用CSFV特异性引物扩增能得到与设计片段大小相同的产物 (2 72bp) ,并且不扩增猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒的核酸 ;...
用异硫氰酸胍 -酚 -仿一步抽提法提取病料细胞总RNA并进行反转录 ,再以此产物为模板对CSFV可疑病料进行了PCR扩增。结果用CSFV特异性引物扩增能得到与设计片段大小相同的产物 (2 72bp) ,并且不扩增猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒的核酸 ;其敏感性要高于猪瘟荧光抗体染色法、猪瘟强弱毒酶标单克隆抗体染色法和电镜负染法 ,为临床上猪瘟的诊断提供了一个快速、有效的诊断方法。
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关键词
RT
-
PCR法
猪瘟病毒
检测
诊断
异硫氰酸胍-酚-仿一步抽提法
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职称材料
利用不同方法从深加工牦牛肉产品中提取基因组DNA效果的比较
被引量：
11
2
作者
何建文
韩建林
罗玉柱
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期162-167,共6页
为了从深加工牦牛肉产品中获得片段较大、数量较多的基因组DNA,以用于分子追溯的检测,尝试并系统地比较了异硫氰酸胍法、酚-氯仿抽提法和试剂盒提取法的提取效果。通过定量分析、凝胶电泳和PCR片段大小梯度扩增等手段,对利用3种方法提...
为了从深加工牦牛肉产品中获得片段较大、数量较多的基因组DNA,以用于分子追溯的检测,尝试并系统地比较了异硫氰酸胍法、酚-氯仿抽提法和试剂盒提取法的提取效果。通过定量分析、凝胶电泳和PCR片段大小梯度扩增等手段,对利用3种方法提取的基因组DNA的数量和质量进行了比较。结果显示,利用酚-氯仿抽提法提取的基因组DNA质量不佳,异硫氰酸胍法和试剂盒提取法的提取效果相当,PCR可以扩增出730 bp左右的核外基因细胞色素b,而核内基因只能扩增出300bp左右的核基因DNA片段(内乳铁蛋白基因,271 bp;BoLA-DRB3基因,302 bp)。综合考虑提取时间、费用、数量和质量等各方面的因素,认为异硫氰酸胍法操作简便、快速、廉价、有效,是较好的从动物深加工肉产品中提取基因组DNA的方法。
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关键词
异硫氰酸
胍
法
酚
-
氯
仿
抽
提法
试剂盒方法
深加工牦牛肉产品
基因组DNA
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职称材料
题名
用RT-PCR法对猪瘟病毒检测的研究
被引量：
11
1
作者
乔军
陈创夫
高丰
贾桂珍
机构
塔里木农垦大学动物科技学院
石河子大学动物科技学院
解放军军需大学动物科技学院
出处
《塔里木农垦大学学报》
2001年第4期25-27,共3页
基金
新疆生产建设兵团课题
文摘
用异硫氰酸胍 -酚 -仿一步抽提法提取病料细胞总RNA并进行反转录 ,再以此产物为模板对CSFV可疑病料进行了PCR扩增。结果用CSFV特异性引物扩增能得到与设计片段大小相同的产物 (2 72bp) ,并且不扩增猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒的核酸 ;其敏感性要高于猪瘟荧光抗体染色法、猪瘟强弱毒酶标单克隆抗体染色法和电镜负染法 ,为临床上猪瘟的诊断提供了一个快速、有效的诊断方法。
关键词
RT
-
PCR法
猪瘟病毒
检测
诊断
异硫氰酸胍-酚-仿一步抽提法
Keywords
classical swine fever virus(CSFV)
RT
-
PCR
diagnosis
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
利用不同方法从深加工牦牛肉产品中提取基因组DNA效果的比较
被引量：
11
2
作者
何建文
韩建林
罗玉柱
机构
甘肃农业大学动物科学与技术学院
中国农业科学院国际家畜研究所畜禽牧草遗传资源联合实验室
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期162-167,共6页
基金
“十一五”国家科技支撑计划项目(2007BAD52B05)
CAAS-ILRI联合研究项目(2008-CI-03)
文摘
为了从深加工牦牛肉产品中获得片段较大、数量较多的基因组DNA,以用于分子追溯的检测,尝试并系统地比较了异硫氰酸胍法、酚-氯仿抽提法和试剂盒提取法的提取效果。通过定量分析、凝胶电泳和PCR片段大小梯度扩增等手段,对利用3种方法提取的基因组DNA的数量和质量进行了比较。结果显示,利用酚-氯仿抽提法提取的基因组DNA质量不佳,异硫氰酸胍法和试剂盒提取法的提取效果相当,PCR可以扩增出730 bp左右的核外基因细胞色素b,而核内基因只能扩增出300bp左右的核基因DNA片段(内乳铁蛋白基因,271 bp;BoLA-DRB3基因,302 bp)。综合考虑提取时间、费用、数量和质量等各方面的因素,认为异硫氰酸胍法操作简便、快速、廉价、有效,是较好的从动物深加工肉产品中提取基因组DNA的方法。
关键词
异硫氰酸
胍
法
酚
-
氯
仿
抽
提法
试剂盒方法
深加工牦牛肉产品
基因组DNA
Keywords
Guanidine thiocyanate method Phenol
-
chloroform extraction Commercial DNA extraction kit Highly processed yak meat product Genomic DNA
分类号
S823 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用RT-PCR法对猪瘟病毒检测的研究
乔军
陈创夫
高丰
贾桂珍
《塔里木农垦大学学报》
2001
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
利用不同方法从深加工牦牛肉产品中提取基因组DNA效果的比较
何建文
韩建林
罗玉柱
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
11
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