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链霉菌高拷贝质粒pIJ101 DNA的研究 I.在大肠杆菌中的启动子活性 被引量:1
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作者 邓子新 Tobias Kieser David A.Hopwood 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期37-46,共10页
用大肠杆菌转座子Tn5上去除了自身启动子区域的卡那霉素抗性基因(neo) 作为指示标记来探测广寄主、高拷贝的链霉菌质粒pIJ101上DNA的启动子活性所做的基因融合试验揭示,pIJ101上至少有两个可在大肠杆菌中行使启动子功能的DNA片段。基因... 用大肠杆菌转座子Tn5上去除了自身启动子区域的卡那霉素抗性基因(neo) 作为指示标记来探测广寄主、高拷贝的链霉菌质粒pIJ101上DNA的启动子活性所做的基因融合试验揭示,pIJ101上至少有两个可在大肠杆菌中行使启动子功能的DNA片段。基因融合后所产生的杂合质粒能够赋予大肠杆菌ED8767较高的卡那霉素抗性。对含质粒菌株在液体培养基中的生长动力学分析揭示,这种菌株在从无药物向有药物的生长环境中过渡时,生长并不受到暂时的抑制。说明这种启动子活性不是pIJ101DNA上DNA的突变所引起。用大肠杆菌的启动子探针载体pKK232-8所做的体外亚克隆试验更进一步证实了这项观察,并把两个启动子功能区分别缩小到0.54kb和1.18kb的范围内。这项试验成功地组建了质粒pIJ101的亚克隆库,便于对这个重要的链霉菌质粒进行精细的分子生物学研究。 展开更多
关键词 重组DNA 异源基因表达 链霉菌 高拷贝 质粒 药物 大肠杆菌 启动子
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嗜极菌的极端酶的若干研究进展 被引量:1
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作者 王健鑫 《浙江海洋学院学报(自然科学版)》 CAS 2003年第2期158-162,共5页
综述了近年来国内外关于嗜极菌的极端酶研究的若干新进展,初步分析了极端酶在极端环境中保持稳定性及活性的结构特性,并介绍了当前极端酶的生物技术进展及其广阔的应用前景。
关键词 极端酶 嗜极菌 异源基因表达 极端环境
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TAR克隆技术及其在微生物次级代谢产物研究中的应用 被引量:2
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作者 童瑞年 吴旭日 陈依军 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期129-135,共7页
微生物次级代谢产物结构多样、种类丰富,是新药发现的重要来源。微生物次级代谢产物由特定生物合成基因簇编码合成,通常与微生物的生长繁殖无关。由于实验室可培养微生物的数量较少,而且多数可培养微生物存在基因簇沉默的现象,严重阻碍... 微生物次级代谢产物结构多样、种类丰富,是新药发现的重要来源。微生物次级代谢产物由特定生物合成基因簇编码合成,通常与微生物的生长繁殖无关。由于实验室可培养微生物的数量较少,而且多数可培养微生物存在基因簇沉默的现象,严重阻碍了微生物来源药物的研究和开发。微生物生物合成基因簇的异源表达及生物合成相应的次级代谢产物已逐渐成为发现新颖活性化合物的有效手段之一。作为研究微生物次级代谢产物的重要工具,基于TAR(transformation associated recombination)克隆技术的异源表达策略可实现绝大多数基因簇的完整异源表达。本文从TAR克隆技术的原理、应用和策略改进3个方面,总结了基于TAR克隆技术的微生物次级代谢产物异源生物合成的研究进展,为研究和开发新型微生物来源药物提供方法学借鉴。 展开更多
关键词 TAR克隆技术 生物合成基因 次级代谢产物 基因异源表达 微生物药物
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