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重组大肠杆菌全细胞催化合成4-羟基异亮氨酸被引量：2: 1; 作者 Umutumwa Eric Principe 乔郅钠 +5 位作者龙梦飞邵明龙徐美娟杨套伟张显饶志明《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期26-35,共10页; 4-羟基异亮氨酸(4-HIL)是一种很有前景的药物,它具有促进胰岛素分泌、改善外周组织对胰岛素的抵抗性和调节血脂异常等作用,而L-异亮氨酸羟化酶(IDO)常用于4-HIL的生产。首先,克隆了苏云金芽孢杆菌来源的L-异亮氨酸羟化酶,实现了其在E.co... 展开更多; 关键词 L-异亮氨酸 L-异亮氨酸羟化酶 4-羟基异亮氨酸定点突变酶学性质催化体系; 在线阅读下载PDF 职称材料

组成型过表达ido基因对4-羟基异亮氨酸合成的影响及其发酵培养基的响应面优化被引量：2: 2; 作者何继龙李英滋 +4 位作者韩世宝满德恩郭脉海战俊杰张成林《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第14期91-98,共8页; 为考察组成型过表达异亮氨酸羟化酶(isoleucine dioxygenase,IDO)基因ido对4-羟基异亮氨酸合成的影响,构建ido组成型表达质粒pXM01-ido及菌株HIL017,其ido转录量及IDO活性较诱导型过表达菌株HIL016显著提升,4-羟基异亮氨酸产量较HIL016... 展开更多; 关键词 4-羟基异亮氨酸异亮氨酸羟化酶谷氨酸棒杆菌组成型过表达响应面法; 在线阅读下载PDF 职称材料

两阶段溶氧控制及FeSO4添加对谷氨酸棒杆菌合成4-羟基异亮氨酸的影响被引量：2: 3; 作者孟静芦楠 +4 位作者朱福周董解荣王子申陈宁张成林《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1-6,共6页; 优化4-羟基异亮氨酸发酵过程中溶氧水平及FeSO4添加量,以提高其发酵水平。结合菌株Corynebacterium glutamicum HIL18及4-羟基异亮氨酸合成特点,首先考察不同溶氧水平及两阶段溶氧控制对4-羟基异亮氨酸发酵的影响。然后考察FeSO4添加对... 展开更多; 关键词 4-羟基异亮氨酸谷氨酸棒杆菌溶氧异亮氨酸羟化酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

大肠杆菌合成4-羟基异亮氨酸的代谢工程研究: 4; 作者王浚哲闫倩玉 +2 位作者徐皓然孟燕张成林《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第4期46-52,共7页; 为进一步提高大肠杆菌(Escherichia coli)合成4-羟基异亮氨酸的性能,以前期构建的重组菌株Escherichia coli IEOH-9为出发菌株进行代谢工程改造。首先,过表达解除反馈抑制作用的天冬氨酸激酶编码基因lysCC1055T以强化L-异亮氨酸代谢通量... 展开更多; 关键词大肠杆菌 4-羟基异亮氨酸基因敲除过表达 L-异亮氨酸羟化酶 L-异亮氨酸 Α-酮戊二酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组大肠杆菌全细胞催化合成4-羟基异亮氨酸被引量：2: 1; 作者 Umutumwa Eric Principe 乔郅钠龙梦飞邵明龙徐美娟杨套伟张显饶志明; 机构江南大学生物工程学院/工业生物技术教育部重点实验室江南大学(如皋)食品生物技术研究所; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期26-35,共10页; 基金国家自然科学基金项目(31770058,31870066) 教育部重点研究项目(113033A) +1 种基金国家轻工技术与工程一流学科自主课题(LITE2018-06)。; 文摘 4-羟基异亮氨酸(4-HIL)是一种很有前景的药物,它具有促进胰岛素分泌、改善外周组织对胰岛素的抵抗性和调节血脂异常等作用,而L-异亮氨酸羟化酶(IDO)常用于4-HIL的生产。首先,克隆了苏云金芽孢杆菌来源的L-异亮氨酸羟化酶,实现了其在E.coli BL21(DE3)中的异源表达。其次,通过同源建模和蛋白质结构分析,本着将与底物氨基酸侧链结合的氨基酸残基从亲水性或长链疏水性结构突变成丙氨酸Ala的原则,对I156位点进行了定点突变,以增大底物结合口袋,扩宽底物通遒进而提高4-HIL的产量。最后,对野生酶及突变酶的酶学性质、突变酶的羟基化反应体系进行研究,在最优催化条件下,分批补料转化底物进行4-HIL的生产。酶学性质结果显示,野生酶及突变酶I156A的最适温度均为25℃,最适pH均为7.0;突变酶I156A比酶活比野生酶提高了1.9倍,L-ILe转化率提高了28%。羟基化反应体系的最优转化条件为:20 mmol/L L-ILe,20 mmol/Lα-酮戊二酸,8 mmol/L Fe^(2+),30 mmol/L抗坏血酸和HEPES(50 mmol/L,pH 7.0)缓冲液。在最优转化条件下,重组菌E.coli BL21/pET28a-ido^(I156A)进行分批补料转化底物,时间间隔为4 h,32 h后得到77.3 mmol/L 4-HIL,底物最高转化率98.35%e。; 关键词 L-异亮氨酸 L-异亮氨酸羟化酶 4-羟基异亮氨酸定点突变酶学性质催化体系; Keywords L-isoleucine L-isoleucine hydroxylase 4-hydroxyisoleucine site-directed mutation enzymatic properties catalytic system; 分类号 Q819 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名组成型过表达ido基因对4-羟基异亮氨酸合成的影响及其发酵培养基的响应面优化被引量：2: 2; 作者何继龙李英滋韩世宝满德恩郭脉海战俊杰张成林; 机构天津科技大学生物工程学院菱花集团有限公司; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第14期91-98,共8页; 基金国家自然科学基金青年科学基金项目(31300069) 国家自然科学基金面上项目(31770053) +3 种基金 2018T110662) 天津科技大学青年教师创新基金项目(2016LG07); 文摘为考察组成型过表达异亮氨酸羟化酶(isoleucine dioxygenase,IDO)基因ido对4-羟基异亮氨酸合成的影响,构建ido组成型表达质粒pXM01-ido及菌株HIL017,其ido转录量及IDO活性较诱导型过表达菌株HIL016显著提升,4-羟基异亮氨酸产量较HIL016提高19.4%。为进一步提高4-羟基异亮氨酸产量,通过Plackett-Burman试验确定HIL017发酵培养基中玉米浆、谷氨酸和FeSO4·7H2O用量为主要影响因素,利用最陡爬坡试验和响应面法确定其最优用量为玉米浆34.1 mL/L、谷氨酸2.98 g/L、FeSO4·7H2O 0.016 7 g/L,此时4-羟基异亮氨酸理论产量为5.57 g/L。验证实验结果表明,最佳条件下4-羟基异亮氨酸产量为5.53 g/L,较优化前提高19.7%。; 关键词 4-羟基异亮氨酸异亮氨酸羟化酶谷氨酸棒杆菌组成型过表达响应面法; Keywords 4-hydroxyisoleucine isoleucine dioxygenase Corynebacterium glutamicum constitutive overexpression response surface methodology; 分类号 Q939.97 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名两阶段溶氧控制及FeSO4添加对谷氨酸棒杆菌合成4-羟基异亮氨酸的影响被引量：2: 3; 作者孟静芦楠朱福周董解荣王子申陈宁张成林; 机构天津科技大学生物工程学院菱花集团有限公司; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1-6,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31300069,31770053) 中国博士后科学基金项目(2017M611170,2018T110662) +1 种基金天津科技大学青年教师创新基金项目(2016LG07); 文摘优化4-羟基异亮氨酸发酵过程中溶氧水平及FeSO4添加量,以提高其发酵水平。结合菌株Corynebacterium glutamicum HIL18及4-羟基异亮氨酸合成特点,首先考察不同溶氧水平及两阶段溶氧控制对4-羟基异亮氨酸发酵的影响。然后考察FeSO4添加对其发酵的作用。20%溶氧有利于4-羟基异亮氨酸的合成。利用两阶段溶氧控制工艺(0~20h、20%溶氧;20~64h、30%溶氧)经64h发酵,4-羟基异亮氨酸产量达到38.7g/L,较未使用该工艺提高11.2%。采用两阶段FeSO4添加策略(初始浓度为65μmol/L、20h添加30μmol/L),4-羟基异亮氨酸的产量达到43.4g/L。采用优化后的工艺使得4-羟基异亮氨酸产量较优化前提高27.3%。获得了4-羟基异亮氨酸发酵过程中两阶段溶氧控制及FeSO4添加工艺。该结果为4-羟基异亮氨酸的高效发酵合成提供参考。; 关键词 4-羟基异亮氨酸谷氨酸棒杆菌溶氧异亮氨酸羟化酶; Keywords 4-hydroxyisoleucine Corynebacterium glutamicum dissolved oxygen isoleucine dioxygenase; 分类号 TQ922 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠杆菌合成4-羟基异亮氨酸的代谢工程研究: 4; 作者王浚哲闫倩玉徐皓然孟燕张成林; 机构天津科技大学生物工程学院; 出处《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第4期46-52,共7页; 基金国家自然科学基金项目(32170049) 国家重点研发计划(2021YFC210800) 大学生创新创业计划项目(202110057132,202110057314)。; 文摘为进一步提高大肠杆菌(Escherichia coli)合成4-羟基异亮氨酸的性能,以前期构建的重组菌株Escherichia coli IEOH-9为出发菌株进行代谢工程改造。首先,过表达解除反馈抑制作用的天冬氨酸激酶编码基因lysCC1055T以强化L-异亮氨酸代谢通量;然后,过表达吡啶核苷酸转氢酶编码基因pntAB以提高胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)水平;在此基础上,分别敲除丙酮酸激酶编码基因pykF和pykA以增强磷酸烯醇式丙酮酸合成草酰乙酸的代谢流;最后过表达柠檬酸合酶编码基因glt A以提高前体物α-酮戊二酸的供应。结果表明,基因lysCC1055T、pnt AB过表达菌株E. coli IEOH-10、E. coli IEOH-11的4-羟基异亮氨酸产量分别达到17.3 g/L、19.4 g/L;敲除基因pykF的效果优于pykA,基因pykF敲除菌株Escherichia coli IEOH-13的4-羟基异亮氨酸产量为21.5 g/L;过表达基因glt A菌株IEOH-14的4-羟基异亮氨酸产量增加至24.7 g/L,较出发菌株IEOH-9提高57.3%,生物量无明显差异(P>0.05)。; 关键词大肠杆菌 4-羟基异亮氨酸基因敲除过表达 L-异亮氨酸羟化酶 L-异亮氨酸 Α-酮戊二酸; Keywords Escherichia coli 4-hydroxyisoleucine gene knockout overexpression L-isoleucine dioxygenase L-isoleucine α-ketobutyrate; 分类号 TQ922 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重组大肠杆菌全细胞催化合成4-羟基异亮氨酸	Umutumwa Eric Principe 乔郅钠龙梦飞邵明龙徐美娟杨套伟张显饶志明	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	组成型过表达ido基因对4-羟基异亮氨酸合成的影响及其发酵培养基的响应面优化	何继龙李英滋韩世宝满德恩郭脉海战俊杰张成林	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2019	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	两阶段溶氧控制及FeSO4添加对谷氨酸棒杆菌合成4-羟基异亮氨酸的影响	孟静芦楠朱福周董解荣王子申陈宁张成林	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2019	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	大肠杆菌合成4-羟基异亮氨酸的代谢工程研究	王浚哲闫倩玉徐皓然孟燕张成林	《中国酿造》 CAS 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料