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反相高效液相色谱-脉冲电化学检测法测定重组人生长激素中异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（英文）
被引量：
1
1
作者
王荔
林碧蓉
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期308-313,共6页
采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-脉冲电化学检测(PED)法测定了重组人生长激素(rhGH)中的诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)。rhGH样品经超滤离心后,用超纯水提取,经C18色谱柱分离,用脉冲电化学器检测。结果表明,样品中添加0.02~0.10...
采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-脉冲电化学检测(PED)法测定了重组人生长激素(rhGH)中的诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)。rhGH样品经超滤离心后,用超纯水提取,经C18色谱柱分离,用脉冲电化学器检测。结果表明,样品中添加0.02~0.10 mg/L的IPTG,其回收率为100%~102%,相对标准偏差(n=3)小于10%。在优化的条件下,IPTG的检出限可达1μg/L(0.1 pmol,25μL)。该方法简便高效,具有良好的灵敏度、回收率和重复性。
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关键词
反相高效液相色谱法
脉冲电化学检测
巯
基
含硫化学物
异丙基
-β-
d
-硫代
半
乳糖
苷
重组人生长激素
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职称材料
乳糖诱导葡萄球菌肠毒素A基因在大肠杆菌中的表达
被引量：
6
2
作者
丁岚
侯晓彦
+2 位作者
王小红
陈福生
张永霞
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期255-260,共6页
以乳糖作为诱导剂代替传统方法中的IPTG,分别从菌龄、诱导剂浓度、诱导时间及诱导剂的添加方式等方面,对乳糖诱导金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxins A,SEA)基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达进行了研究。结果表明,重组...
以乳糖作为诱导剂代替传统方法中的IPTG,分别从菌龄、诱导剂浓度、诱导时间及诱导剂的添加方式等方面,对乳糖诱导金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxins A,SEA)基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达进行了研究。结果表明,重组大肠杆菌表达SEA的优化条件为:在对数生长期(OD600约为0.6),一次性添加终浓度为0.5 mmol/L的乳糖诱导6 h。目标蛋白的表达量占菌体总蛋白质的36.9%,略低于以IPTG为诱导剂时38.1%的表达量。乳糖价格仅为IPTG的1%左右,因此,在SEA的大规模制备中,使用乳糖作为诱导剂可以大大节约成本。
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关键词
金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌肠毒素A
乳糖
异丙基--βd巯基半乳糖苷
基
因工程
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职称材料
谷氨酸脱羧酶工程菌的发酵工艺及酶学性质
被引量：
5
3
作者
陈争依
刘均忠
+1 位作者
刘茜
焦庆才
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期765-769,共5页
对谷氨酸脱羧酶(GAD)工程菌DM201的发酵及转化条件进行优化,分析了发酵过程中异丙基-β-D-巯基半乳糖苷(IPTG)诱导条件、转化体系pH、底物浓度和金属离子等因素对谷氨酸脱羧酶活力的影响。发酵过程中最佳IPTG诱导条件为:浓度0.4mmol/L...
对谷氨酸脱羧酶(GAD)工程菌DM201的发酵及转化条件进行优化,分析了发酵过程中异丙基-β-D-巯基半乳糖苷(IPTG)诱导条件、转化体系pH、底物浓度和金属离子等因素对谷氨酸脱羧酶活力的影响。发酵过程中最佳IPTG诱导条件为:浓度0.4mmol/L、时间5h、温度30℃;转化温度45℃,pH=4.0,ρ(L-谷氨酸)≈110g/L,镁离子在50mmol/L和5mmol/L浓度时对谷氨酸脱羧酶酶活有稳定作用,铜锌离子对其酶活的抑制作用显著。
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关键词
谷氨酸脱羧酶
异丙基
-β—
d
-
巯
基
半
乳糖
苷
诱导
酶活
基
因工程
生物工程
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职称材料
题名
反相高效液相色谱-脉冲电化学检测法测定重组人生长激素中异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（英文）
被引量：
1
1
作者
王荔
林碧蓉
机构
复旦大学分析测试中心
上海张江生物技术有限公司
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期308-313,共6页
文摘
采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-脉冲电化学检测(PED)法测定了重组人生长激素(rhGH)中的诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)。rhGH样品经超滤离心后,用超纯水提取,经C18色谱柱分离,用脉冲电化学器检测。结果表明,样品中添加0.02~0.10 mg/L的IPTG,其回收率为100%~102%,相对标准偏差(n=3)小于10%。在优化的条件下,IPTG的检出限可达1μg/L(0.1 pmol,25μL)。该方法简便高效,具有良好的灵敏度、回收率和重复性。
关键词
反相高效液相色谱法
脉冲电化学检测
巯
基
含硫化学物
异丙基
-β-
d
-硫代
半
乳糖
苷
重组人生长激素
Keywords
reverse
d
-phase high performance liqui
d
chromatography （ RP- HPLC）
pulse
d
electrochemical
d
etection （PE
d
）
thiol
sulfur
isopropyljS-
d
-thiogalactopyranosi
d
e （IPTG）
recombinant human growth hor-mone （rhGH）
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
乳糖诱导葡萄球菌肠毒素A基因在大肠杆菌中的表达
被引量：
6
2
作者
丁岚
侯晓彦
王小红
陈福生
张永霞
机构
华中农业大学食品科技学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期255-260,共6页
基金
上海市科委重大科技攻关项目(07dz19508)
文摘
以乳糖作为诱导剂代替传统方法中的IPTG,分别从菌龄、诱导剂浓度、诱导时间及诱导剂的添加方式等方面,对乳糖诱导金黄色葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxins A,SEA)基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达进行了研究。结果表明,重组大肠杆菌表达SEA的优化条件为:在对数生长期(OD600约为0.6),一次性添加终浓度为0.5 mmol/L的乳糖诱导6 h。目标蛋白的表达量占菌体总蛋白质的36.9%,略低于以IPTG为诱导剂时38.1%的表达量。乳糖价格仅为IPTG的1%左右,因此,在SEA的大规模制备中,使用乳糖作为诱导剂可以大大节约成本。
关键词
金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌肠毒素A
乳糖
异丙基--βd巯基半乳糖苷
基
因工程
Keywords
Staphylococcus aureus
staphylococcal enterotoxins A（SEA）
lactose
Isopropyl beta-
d
-thiogalactopyranosi
d
e（IPTG）
genetic engineering
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
谷氨酸脱羧酶工程菌的发酵工艺及酶学性质
被引量：
5
3
作者
陈争依
刘均忠
刘茜
焦庆才
机构
南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室
出处
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期765-769,共5页
基金
国家技术创新基金(02CJ-13-01-16)~~
文摘
对谷氨酸脱羧酶(GAD)工程菌DM201的发酵及转化条件进行优化,分析了发酵过程中异丙基-β-D-巯基半乳糖苷(IPTG)诱导条件、转化体系pH、底物浓度和金属离子等因素对谷氨酸脱羧酶活力的影响。发酵过程中最佳IPTG诱导条件为:浓度0.4mmol/L、时间5h、温度30℃;转化温度45℃,pH=4.0,ρ(L-谷氨酸)≈110g/L,镁离子在50mmol/L和5mmol/L浓度时对谷氨酸脱羧酶酶活有稳定作用,铜锌离子对其酶活的抑制作用显著。
关键词
谷氨酸脱羧酶
异丙基
-β—
d
-
巯
基
半
乳糖
苷
诱导
酶活
基
因工程
生物工程
Keywords
glutamate
d
ecarboxylase （ GA
d
）
IPTG in
d
uction
activity
engineere
d
strain
biological engineering
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
反相高效液相色谱-脉冲电化学检测法测定重组人生长激素中异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（英文）
王荔
林碧蓉
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
乳糖诱导葡萄球菌肠毒素A基因在大肠杆菌中的表达
丁岚
侯晓彦
王小红
陈福生
张永霞
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
谷氨酸脱羧酶工程菌的发酵工艺及酶学性质
陈争依
刘均忠
刘茜
焦庆才
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2009
5
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职称材料
已选择
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