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生长抑素(SS)基因在pET-32表达系统中的高效表达
被引量：
3
1
作者
刘永庆
刘文波
+3 位作者
潘杰彦
杜念兴
陈溥言
赵国屏
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期61-65,共5页
分别将SS基因克隆至pET 32a和pET 32c表达系统中 ,得到重组质粒SS N/X和SS N/S。实验结果表明 ,SS N/X Thioredoxin (硫氧还原蛋白 )和SS N/S Thioredoxin融合蛋白在IPTG (异丙基硫代 β D半乳糖苷 )诱导 3h后(37℃ )表达产量最高 ,约...
分别将SS基因克隆至pET 32a和pET 32c表达系统中 ,得到重组质粒SS N/X和SS N/S。实验结果表明 ,SS N/X Thioredoxin (硫氧还原蛋白 )和SS N/S Thioredoxin融合蛋白在IPTG (异丙基硫代 β D半乳糖苷 )诱导 3h后(37℃ )表达产量最高 ,约占菌体总蛋白的 30 %左右。 0 0 5～ 1mmol·L-1IPTG对SS融合蛋白表达产量的影响并不太大 ,0 0 5mmol·L-1IPTG即可达到有效的诱导效果 ,但单位体积内的表达产量以 0 5mmol·L-1时为最高。乳糖诱导 4h(37℃ )的效果明显低于IPTG ,但当培养时间延长至 8h时 ,2 0mg·mL-1的乳糖可达到与IPTG同样的诱导效果 ,10和 5mg·mL-1的乳糖也可接近IPTG的诱导效果。SS N/X融合蛋白在 2 6℃表达时 ,主要以可溶性形式存在 ,占75 8% ,包涵体仅占 2 4 2 % ;而SS N/S融合蛋白则主要以包涵体形式存在 ,占 6 0 2 % ,可溶性蛋白仅占 39 8%。SS可溶性融合蛋白具有良好的SS抗原性。
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关键词
生长抑素
基因
pET
-
32表达系统
高效表达
异丙基
硫
代
-
β-d-
半
乳
糖苷
iptg
乳
糖
融合蛋白
动物生长
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职称材料
苹果响应钙信号转录因子MdbHLH2原核表达分析
2
作者
苟莎莎
安欣
+3 位作者
张玮玮
胡康棣
张华
姚改芳
《合肥工业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第2期232-235,共4页
转录因子MdbHLH2能响应钙信号且影响苹果采后贮藏的性能。为进一步探究其结构和功能,文章利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增MdbHLH 2基因的编码序列(coding sequence,CDS)全长,连接至pMAL-c2X原核表达载体,并将重...
转录因子MdbHLH2能响应钙信号且影响苹果采后贮藏的性能。为进一步探究其结构和功能,文章利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增MdbHLH 2基因的编码序列(coding sequence,CDS)全长,连接至pMAL-c2X原核表达载体,并将重组质粒转入表达菌株Rosetta(DE3);利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合MBP标签的MdbHLH2重组蛋白,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术检测出MdbHLH2-MBP的重组表达蛋白。该结果为进一步研究MdbHLH2的结构和功能提供了重要依据。
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关键词
苹果
转录因子MdbHLH2
原核表达
异丙基
-
β-d-
硫
代
半
乳
糖苷
(
iptg
)
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
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职称材料
题名
生长抑素(SS)基因在pET-32表达系统中的高效表达
被引量：
3
1
作者
刘永庆
刘文波
潘杰彦
杜念兴
陈溥言
赵国屏
机构
南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室
中国科学院上海生物工程研究中心
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期61-65,共5页
基金
国家 8 63项目中试项目
文摘
分别将SS基因克隆至pET 32a和pET 32c表达系统中 ,得到重组质粒SS N/X和SS N/S。实验结果表明 ,SS N/X Thioredoxin (硫氧还原蛋白 )和SS N/S Thioredoxin融合蛋白在IPTG (异丙基硫代 β D半乳糖苷 )诱导 3h后(37℃ )表达产量最高 ,约占菌体总蛋白的 30 %左右。 0 0 5～ 1mmol·L-1IPTG对SS融合蛋白表达产量的影响并不太大 ,0 0 5mmol·L-1IPTG即可达到有效的诱导效果 ,但单位体积内的表达产量以 0 5mmol·L-1时为最高。乳糖诱导 4h(37℃ )的效果明显低于IPTG ,但当培养时间延长至 8h时 ,2 0mg·mL-1的乳糖可达到与IPTG同样的诱导效果 ,10和 5mg·mL-1的乳糖也可接近IPTG的诱导效果。SS N/X融合蛋白在 2 6℃表达时 ,主要以可溶性形式存在 ,占75 8% ,包涵体仅占 2 4 2 % ;而SS N/S融合蛋白则主要以包涵体形式存在 ,占 6 0 2 % ,可溶性蛋白仅占 39 8%。SS可溶性融合蛋白具有良好的SS抗原性。
关键词
生长抑素
基因
pET
-
32表达系统
高效表达
异丙基
硫
代
-
β-d-
半
乳
糖苷
iptg
乳
糖
融合蛋白
动物生长
Keywords
somatostatin
pET 32 expression system
iptg
(isoproylthio β D galactoside)
lactose
SS fusion protein
分类号
S814.8 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
苹果响应钙信号转录因子MdbHLH2原核表达分析
2
作者
苟莎莎
安欣
张玮玮
胡康棣
张华
姚改芳
机构
合肥工业大学食品与生物工程学院
山东农业大学园艺科学与工程学院
出处
《合肥工业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第2期232-235,共4页
基金
国家重点研发计划资助项目(2019YFD1000103)
国家自然科学基金资助项目(31901993)
安徽省自然科学基金资助项目(1908085MC72)。
文摘
转录因子MdbHLH2能响应钙信号且影响苹果采后贮藏的性能。为进一步探究其结构和功能,文章利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增MdbHLH 2基因的编码序列(coding sequence,CDS)全长,连接至pMAL-c2X原核表达载体,并将重组质粒转入表达菌株Rosetta(DE3);利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合MBP标签的MdbHLH2重组蛋白,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术检测出MdbHLH2-MBP的重组表达蛋白。该结果为进一步研究MdbHLH2的结构和功能提供了重要依据。
关键词
苹果
转录因子MdbHLH2
原核表达
异丙基
-
β-d-
硫
代
半
乳
糖苷
(
iptg
)
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
Keywords
apple
transcription factor MdbHLH2
prokaryotic expression
isopropyl
-
β-d-
thiogalactopyranoside(
iptg
)
polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE)
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
生长抑素(SS)基因在pET-32表达系统中的高效表达
刘永庆
刘文波
潘杰彦
杜念兴
陈溥言
赵国屏
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
3
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职称材料
2
苹果响应钙信号转录因子MdbHLH2原核表达分析
苟莎莎
安欣
张玮玮
胡康棣
张华
姚改芳
《合肥工业大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025
0
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