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开花调控基因BpMADS4无抗性表达载体的构建
1
作者
李玉生
吴永杰
+3 位作者
赵艳华
吴雅琴
程和禾
陈龙
《河北农业科学》
2012年第1期51-57,共7页
为了构建含有报告基因GFP基因和BpMADS4基因的无抗性双元表达载体pCAMBIA1302-GFP-Bp,参考已发表的欧洲白桦(Betula pendula)开花调控基因(BpMADS4)序列,利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从欧洲白桦的幼嫩花序中克隆得到促进开花的BpM...
为了构建含有报告基因GFP基因和BpMADS4基因的无抗性双元表达载体pCAMBIA1302-GFP-Bp,参考已发表的欧洲白桦(Betula pendula)开花调控基因(BpMADS4)序列,利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从欧洲白桦的幼嫩花序中克隆得到促进开花的BpMADS4基因。将该基因替换pCAMBIA1302载体中的潮霉素抗性基因,构建含有报告基因GFP基因和BpMADS4基因的无抗性双元表达载体pCAM-BIA1302-GFP-Bp。结果表明:成功构建了无抗性双元表达载体pCAMBIA1302-GFP-Bp。该表达载体在苹果遗传转化中不使用抗生素筛选,可以解决抗生素抗性筛选降低苹果转基因转化效率的问题以及转基因苹果中选择标记基因造成的生物安全性问题,用该载体转化苹果可以缩短苹果童期,有效提高其育种效率。本研究为筛选对环境安全的、具有易成花特性的苹果新种质奠定了基础。
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关键词
开花
调控
基因
(
bpmads
4
)
GFP
基因
转
基因
表达载体构建
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职称材料
洋葱AcSCL4的克隆及其功能分析
2
作者
张旭
吴小旭
+3 位作者
张智慧
胡云捷
秦蕾
王勇
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024年第2期127-134,共8页
【目的】初步探讨AcSCL4在洋葱成花中的功能,为解析洋葱成花分子调控机制提供理论基础。【方法】以长日生态型洋葱品系SB2为试验材料,根据已有的洋葱转录组数据,通过qRT-PCR筛选目的基因AcSCL4后进行基因克隆,并对其进行生物信息学分析...
【目的】初步探讨AcSCL4在洋葱成花中的功能,为解析洋葱成花分子调控机制提供理论基础。【方法】以长日生态型洋葱品系SB2为试验材料,根据已有的洋葱转录组数据,通过qRT-PCR筛选目的基因AcSCL4后进行基因克隆,并对其进行生物信息学分析;构建AcSCL4基因的过表达载体pB221-3300-AcSCL4并转化农杆菌,采用花序浸染法浸染拟南芥,并对T_(3)代纯系转基因植株进行表型分析和开花相关基因表达量分析。【结果】洋葱AcSCL4基因CDS长1515 bp,编码504个氨基酸;AcSCL4蛋白N端高度变异,C端有GRAS结构域。聚类分析发现,AcSCL4与石刁柏和棉花的SCL4蛋白亲缘关系较近。与野生型拟南芥相比,AcSCL4过表达植株表现晚花表型。荧光定量PCR结果表明,与野生型拟南芥相比,AcSCL4过表达植株开花调控基因CO和FT的表达量极显著下降。【结论】AcSCL4通过调控CO及FT基因表达来抑制洋葱开花。
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关键词
洋葱
AcSCL
4
基因
克隆
开花
调控
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职称材料
题名
开花调控基因BpMADS4无抗性表达载体的构建
1
作者
李玉生
吴永杰
赵艳华
吴雅琴
程和禾
陈龙
机构
河北省农林科学院昌黎果树研究所
出处
《河北农业科学》
2012年第1期51-57,共7页
基金
河北省自然科学基金项目(C2012301001)
文摘
为了构建含有报告基因GFP基因和BpMADS4基因的无抗性双元表达载体pCAMBIA1302-GFP-Bp,参考已发表的欧洲白桦(Betula pendula)开花调控基因(BpMADS4)序列,利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从欧洲白桦的幼嫩花序中克隆得到促进开花的BpMADS4基因。将该基因替换pCAMBIA1302载体中的潮霉素抗性基因,构建含有报告基因GFP基因和BpMADS4基因的无抗性双元表达载体pCAM-BIA1302-GFP-Bp。结果表明:成功构建了无抗性双元表达载体pCAMBIA1302-GFP-Bp。该表达载体在苹果遗传转化中不使用抗生素筛选,可以解决抗生素抗性筛选降低苹果转基因转化效率的问题以及转基因苹果中选择标记基因造成的生物安全性问题,用该载体转化苹果可以缩短苹果童期,有效提高其育种效率。本研究为筛选对环境安全的、具有易成花特性的苹果新种质奠定了基础。
关键词
开花
调控
基因
(
bpmads
4
)
GFP
基因
转
基因
表达载体构建
Keywords
Flowering regulatory gene (
bpmads
4
)
GFP gene
Transgene
Construction of expression vector
分类号
S661.1 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
洋葱AcSCL4的克隆及其功能分析
2
作者
张旭
吴小旭
张智慧
胡云捷
秦蕾
王勇
机构
东北农业大学农业农村部东北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室
东北农业大学园艺园林学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024年第2期127-134,共8页
基金
黑龙江省重点研发计划项目(GA21B012)
黑龙江省自然科学基金联合引导项目(LH2020C012)。
文摘
【目的】初步探讨AcSCL4在洋葱成花中的功能,为解析洋葱成花分子调控机制提供理论基础。【方法】以长日生态型洋葱品系SB2为试验材料,根据已有的洋葱转录组数据,通过qRT-PCR筛选目的基因AcSCL4后进行基因克隆,并对其进行生物信息学分析;构建AcSCL4基因的过表达载体pB221-3300-AcSCL4并转化农杆菌,采用花序浸染法浸染拟南芥,并对T_(3)代纯系转基因植株进行表型分析和开花相关基因表达量分析。【结果】洋葱AcSCL4基因CDS长1515 bp,编码504个氨基酸;AcSCL4蛋白N端高度变异,C端有GRAS结构域。聚类分析发现,AcSCL4与石刁柏和棉花的SCL4蛋白亲缘关系较近。与野生型拟南芥相比,AcSCL4过表达植株表现晚花表型。荧光定量PCR结果表明,与野生型拟南芥相比,AcSCL4过表达植株开花调控基因CO和FT的表达量极显著下降。【结论】AcSCL4通过调控CO及FT基因表达来抑制洋葱开花。
关键词
洋葱
AcSCL
4
基因
克隆
开花
调控
Keywords
onion
AcSCL
4
gene cloning
flowering regulation
分类号
S633.203.3 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
开花调控基因BpMADS4无抗性表达载体的构建
李玉生
吴永杰
赵艳华
吴雅琴
程和禾
陈龙
《河北农业科学》
2012
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
洋葱AcSCL4的克隆及其功能分析
张旭
吴小旭
张智慧
胡云捷
秦蕾
王勇
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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