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环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR方法的建立及应用 被引量:4
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作者 王素华 袁淑辉 +4 位作者 吴绍强 吕继洲 帅江冰 张晓峰 赵治国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期53-57,共5页
为建立一种快速、敏感检测牛环形泰勒虫的方法,本研究根据GenBank中登录的牛环形泰勒虫Tams1基因序列,设计合成1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测牛环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。研究结果显示,该方法可以特异... 为建立一种快速、敏感检测牛环形泰勒虫的方法,本研究根据GenBank中登录的牛环形泰勒虫Tams1基因序列,设计合成1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了检测牛环形泰勒虫SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。研究结果显示,该方法可以特异地检测牛环形泰勒虫,而对牛巴贝斯虫、反刍动物艾立希体和弓形虫检测均为阴性;该方法的灵敏度可达到180拷贝/μL,比常规PCR敏感10倍;组内和组间变异系数均小于1.0%。对15份临床血液样品和20只璃眼蜱进行检测,SYBR Green I荧光定量PCR和常规PCR的阳性检出率分别为42.86%和28.57%。本研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法具有特异性强、敏感性高的特点,可准确、高效检测牛环形泰勒虫,为牛环形泰勒虫病防控提供技术支持。 展开更多
关键词 牛环形泰勒虫 Tams1基因 SYBR Green I荧光定量PCR 建立及应用
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猪防疫体系的建立及应用初探
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作者 刘彩云 权光国 《吉林畜牧兽医》 2023年第8期39-40,共2页
随着养猪体系的不断完善,猪病成为阻碍养猪行业前进与发展的重要因素。基于此,积极地推进猪病防治举措、建立猪防疫体系是十分有必要的。这一举措不仅可以减少很多不必要的经济损失,还能提升养猪行业的质量与效率。本文展开了一系列的... 随着养猪体系的不断完善,猪病成为阻碍养猪行业前进与发展的重要因素。基于此,积极地推进猪病防治举措、建立猪防疫体系是十分有必要的。这一举措不仅可以减少很多不必要的经济损失,还能提升养猪行业的质量与效率。本文展开了一系列的分析与讨论,并结合养猪行业猪防疫体系的实际情况提出了与之对应的建议与意见。 展开更多
关键词 防疫体系 猪病防治 养猪行业 建议与意见 质量与效率 经济损失 建立及应用 分析与讨论
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类NADC30与类NADC34 PRRSV双重qPCR检测方法的建立与应用
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作者 马明洋 余文轩 +7 位作者 安川叶 张晶晶 杨紫烨 殷笑妍 杜叶 朱瑞冰 韩冬梅 刘冠慧 《中国动物检疫》 CAS 2024年第12期89-94,共6页
近年来,类NADC3O和类NADC34猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给养猪业带来了严重经济损失。为实现类NADC30和类NADC34 PRRSV的同时检测,针对PRRSV经典毒株、高致病性毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株ORF5基因的明显差异区域序列,设计引... 近年来,类NADC3O和类NADC34猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给养猪业带来了严重经济损失。为实现类NADC30和类NADC34 PRRSV的同时检测,针对PRRSV经典毒株、高致病性毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株ORF5基因的明显差异区域序列,设计引物与探针,经优化引物和探针浓度及退火温度,建立了类NADC30和类NADC34 PRRSV双重qPCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估,比较该方法与文献报道方法对临床样本检测结果的一致性。结果显示:本研究建立的双重qPCR方法仅对类NADC30和类NADC34 PRRSV核酸扩增呈阳性,而对其他常见猪病病原均无扩增,且类NADC30与类NADC34 PRRSV检测方法之间无交叉反应;对类NADC30和类NADC34 PRRSV核酸的最低检测限分别为1和10 copies/uL,组内及组间试验变异系数均小于2%;该方法与文献报道方法对类NADC30和类NADC34 PRRSV检测结果的符合率分别为89.5%和92.9%。结果表明,本研究建立的双重qPCR方法特异性好、灵敏度高、稳定性佳,能够有效区分类NADC30和类NADC34 PRRSV,为猪繁殖与呼吸综合征诊断和流行病学调查提供了技术支撑。 展开更多
关键词 类NADC30 PRRSV 类NADC34 PRRSV 双重qPCR 建立及应用
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山羊副流感病毒3型感染MDBK细胞和BECs后7种ISGs mRNA变化分析 被引量:2
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作者 肖芳 嵇辛勤 +5 位作者 李基棕 廖政 毛立 李文良 孙敏 刘茂军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1147-1153,共7页
为探究山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染MDBK细胞和气管上皮细胞(BECs)后的抗病毒免疫应答,本研究针对7种干扰素刺激基因(ISGs):IFI6、ISG15、OAS1Y、OAS1Z、Mx1、Mx2及RSAD2的基因序列设计特异性引物,经优化建立了检测7种ISGs的SYBR Gree... 为探究山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染MDBK细胞和气管上皮细胞(BECs)后的抗病毒免疫应答,本研究针对7种干扰素刺激基因(ISGs):IFI6、ISG15、OAS1Y、OAS1Z、Mx1、Mx2及RSAD2的基因序列设计特异性引物,经优化建立了检测7种ISGs的SYBR Green I荧光定量PCR方法。利用所建立的方法检测CPIV3JS2013株感染MDBK细胞和BECs 24 h、48 h和72 h后7种ISGs的m RNA转录水平。结果显示,在MDBK细胞中,CPIV3感染时间越长,7种ISGs的转录水平上调倍数越高,其中ISG15、Mx1、Mx2和RSAD2的m RNA转录水平上调量持续高于IFI6、OAS1Y和OAS1Z;而在BECs中,CPIV3感染后虽然IFI6、ISG15、OAS1Y、OAS1Z、Mx1、Mx2和RSAD2 m RNA转录水平均出现上调,但ISG15、Mx2和RSAD2的m RNA转录水平上调量高于IFI6、OAS1Y、OAS1Z和Mx1。结果表明,CPIV3 JS2013株可以刺激MDBK细胞和BECs中这7种ISGs的大量转录,本研究为进一步探究其抗病毒功能提供了实验依据。 展开更多
关键词 干扰素刺激基因 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 山羊副流感病毒3型 建立及应用
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