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酿酒葡萄铵转运体AMT1;1基因的克隆与功能分析
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作者 曾蕊 朱骏驰 +5 位作者 徐俐琴 刘秀云 韩菲菲 唐美玲 唐艳雯 宋志忠 《中外葡萄与葡萄酒》 北大核心 2025年第5期1-9,共9页
从酿酒葡萄‘马瑟兰’中克隆获得一个铵离子(NH_(4)^(+))转运蛋白编码基因VvAMT1;1。VvAMT1;1与桃PpeAMT1;1、梨PbrAMT1;1、水稻OsAMT1;1、拟南芥AtAMT1;1、AtAMT1;2和AtAMT1;3同源蛋白的氨基酸序列一致性高达76.10%,系统发育树分析表明... 从酿酒葡萄‘马瑟兰’中克隆获得一个铵离子(NH_(4)^(+))转运蛋白编码基因VvAMT1;1。VvAMT1;1与桃PpeAMT1;1、梨PbrAMT1;1、水稻OsAMT1;1、拟南芥AtAMT1;1、AtAMT1;2和AtAMT1;3同源蛋白的氨基酸序列一致性高达76.10%,系统发育树分析表明,VvAMT1;1与桃AMT1;1在遗传进化关系上较近。VvAMT1;1基因在‘马瑟兰’果实发育不同时期中的表达量差异较大,其表达在幼果期、硬核期和转色期果实中较高,在第二次膨大期和成熟期果实中显著降低,虽然新生叶片和根中VvAMT1;1的表达量分别低于同一时期果实中的,但其表达量在‘马瑟兰’整个果实发育时期相对稳定;VvAMT1;1基因在不同砧穗组合果实的表达量存在差异,其在‘马瑟兰/SO4’嫁接苗果实中的显著高于‘马瑟兰/1103P’嫁接苗和‘马瑟兰’自根苗果实。酵母突变体功能互补和^(15)N同位素示踪吸收动力学分析表明,VvAMT1;1是一个典型的高亲和性的铵转运体,其Km为35.67μmol·L^(-1),且Vmax值为2.85μmoles·min^(-1)·μg^(-1)cells,具有吸收NH_(4)^(+)的功能。此外,甲基胺(MeA^(+))显著降低了VvAMT1;1介导NH_(4)^(+)吸收的Vmax值,且VvAMT1;1能介导酵母细胞吸收和利用微量的MeA^(+),L-甲硫氨酸亚砜亚胺(L-MSX)显著降低了VvAMT1;1介导NH_(4)^(+)吸收的Vmax值,而VvAMT1;1介导的NH_(4)^(+)吸收过程可受到体内NH_(4)^(+)的积累水平的反馈抑制。 展开更多
关键词 酿酒葡萄 铵转运体 果实发育 酵母突变体功能互补 底物反馈抑制
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