幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白DNA疫苗的构建及其免疫保护作用 被引量：4

1

作者 孙波 杨骅 +3 位作者 满晓华 李兆申 屠振兴 龚燕芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期842-845,共4页

目的:构建携带幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp neutrophil-activating protein,Hp-NAP)基因(napA)活减毒鼠伤寒沙门菌重组DNA疫苗,初步观察其对慢性Hp感染的免疫保护作用。方法:应用基因工程技术扩增全长napA,测序并经同源性分析后,... 目的:构建携带幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(Hp neutrophil-activating protein,Hp-NAP)基因(napA)活减毒鼠伤寒沙门菌重组DNA疫苗,初步观察其对慢性Hp感染的免疫保护作用。方法:应用基因工程技术扩增全长napA,测序并经同源性分析后,将其亚克隆入真核表达载体pIRES,鉴定正确后将重组质粒转化活减毒鼠伤寒沙门菌构建Hp-NAP口服DNA疫苗。口服Hp-SS1建立SS1长期感染小鼠模型,30周后随机均分为3组,每组各5只。治疗组予10 9 cfu／0.4 ml疫苗菌灌胃,1次／周×3周;2个对照组分别予等体积生理盐水或空白质粒。末次免疫4周后行快速尿素酶检测,ELISA测定血清抗体效价。结果:重组真核表达质粒pIRES-napA成功转化活减毒鼠伤寒沙门菌SL7207;所克隆napA与GenBank中SS1-napA核苷酸和蛋白质的同源性均>98％。免疫后4周治疗组75％(3／4)小鼠快速尿素酶检测阴性,对照组均阳性,差异显著(P<0.05);治疗组血清抗Hp-NAP抗体效价明显升高。结论:成功构建了具有较好免疫保护作用的Hp-NAP口服重组DNA疫苗,为进一步研制多价抗Hp核酸疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 螺杆菌 幽门 中性粒细胞激活蛋白 疫苗 DNA

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幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因napA克隆及序列分析 被引量：2

2

作者 康巧珍 段广才 +1 位作者 范清堂 郗园林 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2004年第5期743-745,共3页

目的 :从幽门螺杆菌 (H .pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法 :提取H .pylori郑州分离株MEL HP2 7基因组DNA作模板 ;根据H .pyloriJ99全基因组序列设计napAPCR引物 ,高保真酶扩增napA片断 ;限制性内切酶切PC... 目的 :从幽门螺杆菌 (H .pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法 :提取H .pylori郑州分离株MEL HP2 7基因组DNA作模板 ;根据H .pyloriJ99全基因组序列设计napAPCR引物 ,高保真酶扩增napA片断 ;限制性内切酶切PCR产物和pNEB193空质粒 ,T4DNA酶连接酶切产物 ,重组质粒转化E .coliTB1工程菌 ,蓝白斑试验筛选阳性克隆 ;提取质粒经酶切鉴定后测序并利用生物学软件进行序列分析。结果 :DNA限制性内切酶可从重组质粒pNEB napA的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间切出一个 4 35bp的DNA片断 ,测序结果与J99napA同源性为 96 .5 % ,与H .pylori其他菌株的同源性为 92 %～ 97%。结论 :成功构建H .pylori中性白细胞激活蛋白基因的重组质粒pNEB napA ;序列分析表明HP napA是一类高度保守的原核型基因 ,可作为H .pylori疫苗候选基因。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 中性白细胞激活蛋白 基因 克隆

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成人慢性特发性中性粒细胞减少症与幽门螺杆菌感染的临床相关性研究 被引量：6

3

作者 封蔚莹 罗婷 +2 位作者 钟永根 罗洪强 傅佳萍 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期476-479,共4页

目的研究成人慢性特发性中性粒细胞减少症(ACIN)患者与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系,并探讨ACIN患者的Hp感染与脾肿大、血清炎症因子、超敏C反应蛋白(hsCRP)的关系。方法选取88例ACIN患者(ACIN组),40名健康体检者(对照组),采用14 C呼气试... 目的研究成人慢性特发性中性粒细胞减少症(ACIN)患者与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系,并探讨ACIN患者的Hp感染与脾肿大、血清炎症因子、超敏C反应蛋白(hsCRP)的关系。方法选取88例ACIN患者(ACIN组),40名健康体检者(对照组),采用14 C呼气试验检测Hp感染,B超检测并计算矫正脾指数(CSI),双抗体夹心ELISA法测定血清IL-6、IL-8、IL-10,颗粒增强免疫沉淀法测定血清hsCRP。ACIN组Hp阴性患者单以利可君治疗,Hp阳性患者联用利可君和三联抗Hp治疗(奥美拉唑+克拉霉素+阿莫西林)。结果①ACIN组Hp感染率60.23%,明显高于对照组35.00%(P<0.05)。②ACIN组Hp阳性患者抗Hp联合治疗后,抗粒细胞减少治疗总有效率77.36%,1年随访复发率20.69%,与Hp阴性患者51.43%、75.00%比较差异有统计学意义(均P<0.05)。③ACIN组及对照组Hp阳性患者CSI值明显高于同组内阴性患者;随访满1年的38例Hp阳性ACIN组未复发患者CSI值较其治疗前明显下降(P<0.05)。④ACIN组及对照组Hp阳性患者血清IL-6、IL-8、IL-10、hsCRP水平均明显高于同组内阴性患者(均P<0.05);ACIN组Hp阳性患者IL-6明显高于对照组Hp阳性患者,IL-10则明显下降(均P<0.05);ACIN组Hp阴性患者IL-6、IL-8、IL-10、hsCRP与对照组Hp阴性患者差异无统计学意义。随访满1年的38例Hp阳性ACIN组未复发患者IL-6、IL-10恢复至Hp阴性对照组水平。⑤ACIN组中性粒细胞计数与IL-6水平呈显著负相关,与IL-10水平呈显著正相关。结论 Hp感染可能是部分ACIN的病因,抗Hp联合治疗疗效好。Hp感染可能通过脾肿大及血清IL-6、IL-10变化诱发ACIN。 展开更多

关键词 中性粒细胞减少 幽门螺杆菌 超敏C反应蛋白

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球部粘膜幽门螺杆菌根除对中性粒细胞浸润的影响

4

作者 王盛根 王寿九 涂金兰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期225-225,共1页

球部粘膜幽门螺杆菌根除对中性粒细胞浸润的影响２１００１５南京解放军第４１４医院王盛根王寿九涂金兰①关键词螺杆菌，幽门；球部；中性粒细胞；十二指肠溃疡；愈合；质量中国图书资料分类号Ｒ５７３．１球部ＨＰ阳性的十二指肠溃疡... 球部粘膜幽门螺杆菌根除对中性粒细胞浸润的影响２１００１５南京解放军第４１４医院王盛根王寿九涂金兰①关键词螺杆菌，幽门；球部；中性粒细胞；十二指肠溃疡；愈合；质量中国图书资料分类号Ｒ５７３．１球部ＨＰ阳性的十二指肠溃疡（ＤＵ），其边缘粘膜常伴活动性炎症... 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 中性粒细胞 十二指肠溃疡

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外周血嗜酸性粒细胞水平与合并幽门螺杆菌感染的急性心肌梗死的关系 被引量：4

5

作者 陈蕾蕾 王德昭 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1185-1189,共5页

目的:研究外周血嗜酸性粒细胞(EOS)水平与合并幽门螺杆菌(Hp)感染的急性心肌梗死(AMI)的关系,比较外周血EOS的水平在合并有Hp(+)与Hp(-)的AMI患者中的不同,探讨Hp(+)在其中可能的作用及作用机制。方法:回顾性分析2015-09至2016-05在我... 目的:研究外周血嗜酸性粒细胞(EOS)水平与合并幽门螺杆菌(Hp)感染的急性心肌梗死(AMI)的关系,比较外周血EOS的水平在合并有Hp(+)与Hp(-)的AMI患者中的不同,探讨Hp(+)在其中可能的作用及作用机制。方法:回顾性分析2015-09至2016-05在我院住院治疗的冠心病患者共662例,其中AMI患者269例(AMI组),稳定性心绞痛(SAP)患者393例(SAP组)。所有患者均行13C呼气试验,再分为Hp(+)组(n=276,Hp感染值≥4.0)和Hp(-)组(n=386,Hp感染值<4.0)。收集患者临床资料,比较Hp(+)和Hp(-)AMI患者外周血EOS的水平,分析Hp(+)AMI患者外周血EOS水平与超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的关系。结果:AMI组Hp(+)阳性率为46.5%,高于SAP组的38.4%,差异有统计学意义(P=0.024)。Hp(+)组中AMI患者外周血EOS水平明显低于SAP患者,hs-CRP水平高于SAP患者,差异均有统计学意义(P均=0.000)。Hp(+)AMI患者外周血EOS与hs-CRP呈负相关(r=-0.202,P=0.024,P<0.05)。结论:Hp(+)AMI患者外周血EOS水平明显减低、hs-CRP水平升高,EOS与hs-CRP之间呈负相关。考虑Hp(+)可能通过加重AMI的炎症反应影响外周血中EOS水平,EOS可能在血栓形成中发挥重要作用。 展开更多

关键词 心肌梗死 幽门螺杆菌 嗜酸性粒细胞 C反应蛋白质

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幽门螺杆菌UreB-NAP-HpaA三价DNA疫苗的构建及免疫原性初步研究 被引量：3

6

作者 孙波 杨骅 +3 位作者 李兆申 屠振兴 龚燕芳 杜奕奇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期636-638,共3页

目的:构建幽门螺杆菌(Hp)尿素酶亚单位B(UreB)、中性粒细胞激活蛋白(NAP)及黏附素A(HpaA)三价重组DNA疫苗并研究其抗原性,为Hp疫苗的开发奠定基础。方法:PCR扩增UreB、NAP、HpaA全长序列,分别克隆入pMD18T载体,测序并鉴定方向后依次连接... 目的:构建幽门螺杆菌(Hp)尿素酶亚单位B(UreB)、中性粒细胞激活蛋白(NAP)及黏附素A(HpaA)三价重组DNA疫苗并研究其抗原性,为Hp疫苗的开发奠定基础。方法:PCR扩增UreB、NAP、HpaA全长序列,分别克隆入pMD18T载体,测序并鉴定方向后依次连接,构建融合基因UNH,然后将其亚克隆入真核表达载体pIRES,以此转染COS7细胞,Western印迹检测表达蛋白的抗原性。结果:PCR分别获得约1707、432和750bp产物,与GenBank中相关序列具有高度同源性,三者融合后获得一约2901bp目的基因。重组质粒pIRES-UNH转染COS7细胞后表达相对分子质量约107000的蛋白质,Western印迹显示该重组蛋白可为UreB、NAP、HpaA抗血清特异识别,具有良好的抗原性。结论:成功构建了具有良好免疫原性的UreB-NAP-HpaA三价重组DNA疫苗,为进一步探讨其免疫保护性及Hp疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 尿素酶 中性粒细胞激活蛋白 黏附素 疫苗 DNA

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氢溴酸槟榔碱对幽门螺杆菌生长和空泡毒素A表达和活性的影响 被引量：6

7

作者 刘丹 廖顺花 +1 位作者 王莉新 王易 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1163-1167,共5页

目的评价氢溴酸槟榔碱对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)的抑制作用及其对H.pylori空泡毒素A表达水平和活性的影响。方法使用平皿稀释固体法和脑心浸液液体法测定中药活性成分氢溴酸槟榔碱对H.pylori的最低抑菌浓度(MIC),以反... 目的评价氢溴酸槟榔碱对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)的抑制作用及其对H.pylori空泡毒素A表达水平和活性的影响。方法使用平皿稀释固体法和脑心浸液液体法测定中药活性成分氢溴酸槟榔碱对H.pylori的最低抑菌浓度(MIC),以反映药物对H.pylori的抑制作用。通过中性红摄入法评价药物干预后H.pylori培养上清中空泡毒素A对胃癌细胞BGC-823的毒性作用,并通过RT-PCR方法和Western blot方法检测经药物处理后H.pylori菌体及分泌上清中空泡毒素A mRNA和蛋白的表达水平,以反映药物对H.pylori空泡毒素A活性和表达的影响。结果高浓度氢溴酸槟榔碱对H.pylori具有抑制作用,MIC为:固体法和液体法均为1.25 g·L-1。低浓度氢溴酸槟榔碱可不同程度抑制H.pylori空泡毒素A的活性(P<0.01);抑制H.pylori菌体和分泌上清中空泡毒素A mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.05)的表达。结论氢溴酸槟榔碱在较高浓度(1.25 g·L-1)时具有抑制H.pylori生长作用,而在较低浓度(0.15 g·L-1)时,即可抑制H.pylori空泡毒素A的表达和活性。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 空泡毒素A 氢溴酸槟榔碱 中性红摄入实验 慢性活动性胃炎 消化性溃疡

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幽门螺杆菌napA基因克隆及高效表达与鉴定 被引量：1

8

作者 高原 邹全明 吴超 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期882-883,887,共3页

关键词 幽门螺杆菌 高效表达 基因克隆 中性粒细胞激活蛋白 胃及十二指肠溃疡 慢性浅表性胃炎 慢性活动性胃炎 胃黏膜炎症

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幽门螺杆菌粘附素的研究进展 被引量：1

9

作者 洪愉 邹全明 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期59-61,共3页

关键词 幽门螺杆菌 粘附素 研究进展 神经氨酰乳糖 纤维血凝素 中性粒细胞激活蛋白

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幽门螺杆菌感染与根除治疗对功能性消化不良影响的研究

10

作者 赵卫东 钟晓琴 +6 位作者 庄新英 纪红梅 李安庆 李鑫鑫 王瑞才 朱建友 李延青 《世界中医药》 CAS 2015年第A02期1563-1566,共4页

目的观察FD病人H.pylori感染及根除治疗对症状评分及胃肠道嗜酸粒细胞的影响.方法：选择2011年3月至2012年8月符合Rome Ⅲ标准的FD患者215例.基线时分别进行腹部症状问卷调查、胃镜检查及粘膜活检、病理组织学检查、H.pylori检测.H.pyl... 目的观察FD病人H.pylori感染及根除治疗对症状评分及胃肠道嗜酸粒细胞的影响.方法：选择2011年3月至2012年8月符合Rome Ⅲ标准的FD患者215例.基线时分别进行腹部症状问卷调查、胃镜检查及粘膜活检、病理组织学检查、H.pylori检测.H.pylori感染者行四联根除治疗.第2周和第6周分别行腹部症状问卷调查,部分病人第6周末复查胃镜及病理学检查.计数资料比较采用χ2检验,两样本均数比较用t 检验,嗜酸粒细胞集簇率比较采用χ2检验.结果： Warthin-Starry 染色和14C呼气试验双阳性90例,双阴性77例.H.pylori阳性组病人H.pylori根除率为69.0% （58/84）.第6周末胃镜检查及病理活检患者H.pylori根除组36例、H.pylori未根除19例;基线时H.pylori阳性组与H.pylori阴性组临床症状评分差异无显著性,H.pylori根除组与H.pylori未根除组在基线、第2周及第6周三个时间点临床症状评分差异无显著性.两组以第2周症状评分与基线时和第6周比较症状评分均有明显改善;基线时H.pylori阳性组胃体及胃窦嗜酸粒细胞计数经胃镜检查显示较H.pylori阴性组比较呈明显增多,经检查显示在十二指肠球部及降部,H.pylori阳性组较H.pylori阴性组其嗜酸粒细胞计数未见显著增多.于第6周时胃镜检查显示H.pylori根除组在胃体和胃窦的嗜酸粒细胞计数与较H.pylori未根除组相比均有明显下降,十二指肠球部和降部两组间的嗜酸粒细胞计数差异无显著性;基线时H.pylori阳性组胃体、胃窦粘膜嗜酸粒细胞集簇现象发生率要显著高于H.pylori阴性组,两组病例间十二指肠球部或降部嗜酸粒细胞集簇现象发生率比较差异无显著性.另于第6周末复查胃镜及病理活检发现,H.pylori根除组与H.pylori未根除组两组比较,胃十二指肠4个部位嗜酸粒细胞集簇现象的发生率差异无显著性.另H.pylori根除组及H.pylori未根除组其胃十二指肠嗜酸粒细胞集簇现象在治疗前后均无差异.结论：H.pylori感染与FD病人胃粘膜嗜酸粒细胞增多存在相关性,但并不会对十二指肠嗜酸粒细胞水平造成影响.根除H.pylori能降低FD病人胃嗜酸粒细胞,但不对十二指肠嗜酸粒细胞水平造成影响.H.pylori感染与FD患者的消化不良症状评分并无相关性,且H.pylori是否成功根除与病人症状改善并无关联.FD病人经H.pylori根除治疗后,其消化不良症状改善与十二指肠嗜酸粒细胞水平无相关性. 展开更多

关键词 消化不良 嗜酸粒细胞 幽门螺杆菌 药物疗法

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HP-NAP对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用 被引量：1

11

作者 王晓东 康巧珍 +4 位作者 王小龙 李树芳 王婷 刘鑫 汲振余 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第5期595-598,共4页

目的:研究幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长抑制作用及可能机制。方法:构建p ET28a-NAP重组质粒,转入E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导HP-NAP的表达,Ni柱亲和层析法对其进行分离纯化。取BALB/c小鼠,皮下... 目的:研究幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长抑制作用及可能机制。方法:构建p ET28a-NAP重组质粒,转入E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导HP-NAP的表达,Ni柱亲和层析法对其进行分离纯化。取BALB/c小鼠,皮下注射H22细胞(2×106个/只)构建荷瘤模型,随机分为PBS组和HP-NAP组,以皮下瘤旁注射的方式给予PBS或HP-NAP,监测肿瘤体积和小鼠体重变化。1周后牺牲小鼠,取瘤体及各脏器称重,以ELISA法检测脾细胞IFN-γ分泌水平,实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达水平。结果:利用大肠杆菌原核表达系统成功制备了HP-NAP。HP-NAP可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,对小鼠体重和脏器指数无明显影响。与PBS组相比,HP-NAP组小鼠脾细胞IFN-γ的分泌水平及肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达水平均升高(P<0.05)。结论:HP-NAP可能通过上调IFN-γ的表达抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白 肝癌 H22细胞 IFN-Γ 小鼠

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氧化·疾病·抗氧化(Ⅷ) 被引量：2

12

作者 凌关庭 《粮食与油脂》 2004年第3期52-55,共4页

3氧化与衰老 衰老是人体各器官功能开始逐步降低一种生理现象,是一个缓慢渐进过程,是一种不可避免自然规律.但这过程可因氧化而加速(如吸烟等),也可因抗氧化而延缓.

关键词 嗜中性白细胞 HO 粒细胞 胃粘膜损伤 抗氧化作用 瑞巴派特 活性氧 工业气体 氧化胁迫 消除剂 幽门螺旋菌 幽门螺旋杆菌 螺旋菌属 SOD 叶琳症 过氧化脂质 再灌流 血管内皮细胞 表皮 皮肤 晒斑 伤害程度 光线性皮肤病

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