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Activin A特异性对人胚胎干细胞向限定性内胚层诱导分化的促进作用
被引量：
1
1
作者
孙懿
周静
+1 位作者
林戈
卢光琇
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012年第6期13-18,共6页
【目的】研究Activin A对人胚胎干细胞(hESCs)向限定性内胚层(DE)诱导分化的促进作用及其信号通路分子,为hESCs向DE诱导分化体系的优化提供参考。【方法】在人饲养层体系培养的hESCs中,收集100ng/mL Activin A分别诱导0,6,12,24,48,72,9...
【目的】研究Activin A对人胚胎干细胞(hESCs)向限定性内胚层(DE)诱导分化的促进作用及其信号通路分子,为hESCs向DE诱导分化体系的优化提供参考。【方法】在人饲养层体系培养的hESCs中,收集100ng/mL Activin A分别诱导0,6,12,24,48,72,96,120h的细胞,用实时荧光定量RT-PCR检测原条标记Gsc和Mixl1、中内胚层共同前体标记Brachyury、内胚层标记Foxa2和Sox17、中胚层标记Flk1、外胚层基因Pax6、多能性相关基因Oct4与Nanog表达水平的变化,用细胞免疫荧光检测Brachyury和Sox17蛋白表达水平的变化。【结果】在人饲养层(HEF)培养体系上,高浓度Activin A能更快地促进中内胚层基因的表达并提高其表达水平;Brachyury和Sox17蛋白的细胞免疫荧光检测表明,Activin A诱导12和48h就可检测二者的表达明显增加,且二者的表达水平分别在诱导48和96h时达到高峰;hESCs高效分化为限定性内胚层细胞,DE细胞分化率为(81.7±5.4)%,并且体外的内胚层分化过程遵循从原条开始、经过中内胚层共同前体阶段、再到内胚层的发育过程,与体内发育规律相似。【结论】Activin A能特异性地诱导人胚胎干细胞向限定性内胚层分化,转录调控Brachyury和Sox17蛋白的表达。
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关键词
干细胞工程学
人胚胎
干细胞
限定性内胚层
ACTIVIN
A
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职称材料
题名
Activin A特异性对人胚胎干细胞向限定性内胚层诱导分化的促进作用
被引量：
1
1
作者
孙懿
周静
林戈
卢光琇
机构
中南大学生殖与干细胞研究所
国家干细胞工程研究中心
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012年第6期13-18,共6页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金新教师基金项目(200805331133)
国家"863"计划项目(2006AA02A102)
+3 种基金
国家自然科学基金项目(81101510
30800659)
湖南省自然科学基金青年基金项目(09JJ4009)
中央高校基本科研业务费青年教师助推基金项目(201012200219)
文摘
【目的】研究Activin A对人胚胎干细胞(hESCs)向限定性内胚层(DE)诱导分化的促进作用及其信号通路分子,为hESCs向DE诱导分化体系的优化提供参考。【方法】在人饲养层体系培养的hESCs中,收集100ng/mL Activin A分别诱导0,6,12,24,48,72,96,120h的细胞,用实时荧光定量RT-PCR检测原条标记Gsc和Mixl1、中内胚层共同前体标记Brachyury、内胚层标记Foxa2和Sox17、中胚层标记Flk1、外胚层基因Pax6、多能性相关基因Oct4与Nanog表达水平的变化,用细胞免疫荧光检测Brachyury和Sox17蛋白表达水平的变化。【结果】在人饲养层(HEF)培养体系上,高浓度Activin A能更快地促进中内胚层基因的表达并提高其表达水平;Brachyury和Sox17蛋白的细胞免疫荧光检测表明,Activin A诱导12和48h就可检测二者的表达明显增加,且二者的表达水平分别在诱导48和96h时达到高峰;hESCs高效分化为限定性内胚层细胞,DE细胞分化率为(81.7±5.4)%,并且体外的内胚层分化过程遵循从原条开始、经过中内胚层共同前体阶段、再到内胚层的发育过程,与体内发育规律相似。【结论】Activin A能特异性地诱导人胚胎干细胞向限定性内胚层分化,转录调控Brachyury和Sox17蛋白的表达。
关键词
干细胞工程学
人胚胎
干细胞
限定性内胚层
ACTIVIN
A
Keywords
stem cell engineering
human embryonic stem cell
definitive endoderm
Activin A
分类号
Q254 [生物学—细胞生物学]
Q813.11 [生物学—生物工程]
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作者
出处
发文年
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1
Activin A特异性对人胚胎干细胞向限定性内胚层诱导分化的促进作用
孙懿
周静
林戈
卢光琇
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2012
1
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