基于干细胞因子/C-kit信号通路探讨鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12的润肠通便作用

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作者 项芳琴 李玉星 李柏良 《食品科学》 EI CAS 北大核心 2025年第3期20-26,共7页

目的:基于干细胞因子(stem cell factor,SCF)/C-kit信号通路探讨鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12的润肠通便作用。方法:雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组以及鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12低剂量(1.5×10^(6)CFU/只)、中剂量(1.5×10^(7... 目的:基于干细胞因子(stem cell factor,SCF)/C-kit信号通路探讨鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12的润肠通便作用。方法:雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组以及鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12低剂量(1.5×10^(6)CFU/只)、中剂量(1.5×10^(7)CFU/只)和高剂量(1.5×10^(8)CFU/只)组,各组小鼠分别连续灌胃相应的药物15 d后,灌胃盐酸洛哌丁胺混悬液(4 mg/kg)建立便秘模型,测定各组小鼠的体质量、首粒黑便排出时间、5 h内黑便排出数量及质量、小肠推进率、血清中胃肠调节肽和炎性细胞因子水平及小鼠结肠组织SCF、C-kit转录水平,并观察结肠病理结构。结果:与模型组相比,中、高剂量的鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12均能缩短小鼠的首粒黑便排出时间(P<0.001),增加小鼠5 h内排黑便的粒数和质量(P<0.01、P<0.001),提高小肠内的墨汁推进率(P<0.001);升高小鼠血清中胃动素、胃泌素、P物质和白细胞介素(interleukin,IL)10的质量浓度,降低内皮素1、生长抑素、血管活性肠肽和IL-6的质量浓度;增加结肠组织中SCF和C-kit mRNA相对表达量(P<0.01、P<0.001);修复受损结肠屏障。结论:鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12能够通过调节SCF/C-kit通路,进而影响胃肠调节肽和炎性细胞因子的释放,发挥其促进胃肠蠕动的功能,改善便秘症状。 展开更多

关键词 鼠李糖乳酪杆菌Glory LG12 便秘 润肠通便效果 炎性细胞因子 胃肠调节肽 干细胞因子/c-kit信号通路

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柚皮素调控叉头转录因子1/β-连环蛋白通路对过氧化氢诱导的人牙周膜干细胞氧化损伤的保护作用研究

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作者 张丽 彭世元 +3 位作者 唐飞扬 蹇静薇 袁硕声 徐晓梅 《华西口腔医学杂志》 北大核心 2025年第4期559-569,共11页

目的探究柚皮素(NAR)对氧化应激状态下人牙周膜干细胞(hPDLSCs)成骨潜能的保护作用及其相关机制。方法用过氧化氢(H_(2)O_(2))建立hPDLSCs氧化损伤模型,然后加入不同浓度的NAR及0.5μmol/L的叉头转录因子1(FOXO1)抑制剂AS1842856对其进... 目的探究柚皮素(NAR)对氧化应激状态下人牙周膜干细胞(hPDLSCs)成骨潜能的保护作用及其相关机制。方法用过氧化氢(H_(2)O_(2))建立hPDLSCs氧化损伤模型,然后加入不同浓度的NAR及0.5μmol/L的叉头转录因子1(FOXO1)抑制剂AS1842856对其进行干预。利用细胞计数试剂盒法(CCK8)筛选出H_(2)O_(2)及NAR的最适作用浓度。通过碱性磷酸酶(ALP)染色和实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组hPDLSCs中ALP、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)的表达情况,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和活性氧荧光探针(DCFH-DA)染色检测各组hPDLSCs中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)以及乳酸脱氢酶(LDH)的表达情况。同时,使用qRT-PCR和蛋白印迹法(Western blot)分别检测各组FOXO1和β-连环蛋白(β-catenin)的基因与蛋白表达水平。结果H_(2)O_(2)暴露导致hPDLSCs氧化损伤增加,细胞内ROS水平上升,MDA、LDH表达升高(P<0.05);成骨分化降低,ALP染色变浅和成骨分化相关基因ALP、RUNX2、OCN的信使核糖核酸(mRNA)表达水平降低(P<0.05)。NAR共处理可缓解H_(2)O_(2)所致的hPDLSCs氧化损伤并提升其抗氧化能力、恢复其成骨能力。FOXO1抑制剂AS1842856可下调β-catenin的表达(P<0.05),明显减弱NAR的抗氧化作用及恢复成骨的能力(P<0.05)。结论NAR可以通过激活hPDLSCs内的FOXO1/β-catenin信号通路从而提升hPDLSCs的抗氧化能力,减轻氧化应激损伤及其所致的成骨能力丧失。 展开更多

关键词 牙周膜干细胞 叉头转录因子1/β-连环蛋白信号通路 氧化应激 柚皮素 成骨分化

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外源性肿瘤坏死因子刺激基因6对炎症环境下人牙髓干细胞成牙/成骨分化的影响

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作者 董稳航 张雪 +2 位作者 何巍 李锐 王颖 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期167-172,共6页

目的:观察外源性肿瘤坏死因子刺激基因6(TSG-6)对炎症环境下人牙髓干细胞(hDPSC)成牙/成骨分化的影响及可能机制。方法:取拔除的健康、阻生智齿,从牙髓中分离培养hDPSC,鉴定后分组。正常对照组用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养96 h,... 目的:观察外源性肿瘤坏死因子刺激基因6(TSG-6)对炎症环境下人牙髓干细胞(hDPSC)成牙/成骨分化的影响及可能机制。方法:取拔除的健康、阻生智齿,从牙髓中分离培养hDPSC,鉴定后分组。正常对照组用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养96 h,矿化诱导组用矿化诱导液培养96 h,炎症因子组用含50μg/L TNF-α的矿化诱导液培养96 h,炎症因子+TSG-6组先用含20μg/L TSG-6的DMEM培养48 h,再用含TNF-α的矿化诱导液培养48 h,中和抗体组先与TSG-6、CD44中和抗体共培养48 h后再用含TNF-α的矿化诱导液培养48 h。采用Western blot法分别检测成牙/成骨标志物[牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白1(DMP-1)、RUNX家族转录因子2(RUNX2)]及P65、p-IκB、IκB蛋白的表达水平。采用免疫荧光染色观察炎症因子+TSG-6组和中和抗体组细胞核因子κB(NF-κB)的核转运水平。12只2日龄SD大鼠分4组,每组3只。麻醉后处死,取下颌骨,分别置于含二甲基亚砜的培养液、矿化诱导液、含TNF-α的矿化诱导液、含TNF-α和TSG-6的矿化诱导液中培养10 d,用HE和Masson三色染色法评价各组牙组织的矿化能力。结果:与正常对照组比较,矿化诱导组DSPP、DMP-1和RUNX2蛋白的表达水平升高(P<0.05);与矿化诱导组比较,炎症因子组上述蛋白的表达水平降低(P<0.05);与炎症因子组比较,炎症因子+TSG-6组上述蛋白的表达水平升高(P<0.05)。与正常对照组比较,炎症因子组P65、p-IκB蛋白的表达水平升高(P<0.05);与炎症因子组比较,炎症因子+TSG-6组P65、p-IκB蛋白的表达水平降低(P<0.05)。与炎症因子+TSG-6组比较,中和抗体组DSPP、DMP-1和RUNX2蛋白的表达水平降低,P65、p-IκB蛋白的表达水平升高,发生NF-κB核转运的细胞增多。动物实验表明TSG-6处理可促进炎症环境下大鼠下颌骨中前期牙本质的形成。结论:外源性TSG-6可增强炎症环境下hDPSC的成牙/成骨分化能力,其机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。 展开更多

关键词 牙髓干细胞 TNF-α 肿瘤坏死因子刺激基因6 NF-ΚB信号通路 成牙/成骨分化

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骨髓间充质干细胞成骨分化相关信号通路 被引量：1

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作者 张苏尧 蒋炳浩 蒋涛 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2024年第5期513-523,共11页

骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)离体培养可诱导分化为软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞等,广泛参与骨再生和修复,维持骨代谢平衡。BMSCs成骨分化是一个涉及多系统、多基因、多信号通路的复杂生理过程,包括Notch、ERK、Hed... 骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)离体培养可诱导分化为软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞等,广泛参与骨再生和修复,维持骨代谢平衡。BMSCs成骨分化是一个涉及多系统、多基因、多信号通路的复杂生理过程,包括Notch、ERK、Hedgehog等信号通路。本文综述这些信号通路在BMSCs成骨分化过程中各自的组成及传导机制,以期为骨质疏松症及骨缺损等疾病的基因辅助治疗筛选关键性的基因靶点,并探索新的治疗思路。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 信号通路 因子

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肿瘤坏死因子-α对牙周膜干细胞骨向分化及Notch信号通路的影响 被引量：20

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作者 马玉 李淑慧 +1 位作者 丁欣欣 吴佩玲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期184-189,共6页

目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对牙周膜干细胞(PDLSCs)骨向分化及Notch信号通路的影响,初步探讨在TNF-α影响下Notch信号通路对PDLSCs成骨分化的调控作用。方法采用酶消化结合组织块法获得PDLSCs,通过流式细胞仪检测间充质干细胞(MS... 目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对牙周膜干细胞(PDLSCs)骨向分化及Notch信号通路的影响,初步探讨在TNF-α影响下Notch信号通路对PDLSCs成骨分化的调控作用。方法采用酶消化结合组织块法获得PDLSCs,通过流式细胞仪检测间充质干细胞(MSCs)表面标记物CD105、CD90、CD146、CD45、CD31的表达,将PDLSCs分为实验组(10ng·mL^(-1)TNF-α)和对照组(不含TNF-α),使用CCK-8法检测PDLSCs增殖能力;通过碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色、实时定量聚合酶链反应(PCR)检测TNF-α对PDLSCs成骨能力的影响;实时定量PCR检测Notch信号通路受体Notch1、Notch2、Notch3,配体JAG1、JGA2、DLL1,细胞内效应分子Hes-1的表达。结果流式细胞仪检测结果显示CD105、CD90及CD146表达阳性,CD45、CD31表达阴性;CCK-8法结果显示TNF-α能够促进PDLSCs增殖能力(P<0.05);ALP活性检测结果显示,实验组与对照组相比,ALP活性降低(P<0.05);茜素红染色结果显示,与对照组相比,实验组矿化结节减少;实时定量PCR结果显示,与对照组相比,成骨标志基因牙骨质附着蛋白(CAP)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)表达量明显降低(P<0.05);Notch信号通路相关分子中Notch1、Notch2、JAG1、JGA2、Hes-1的表达水平显著降低(P<0.05),而Notch3、DLL1的表达水平增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α能够促进PDLSCs增殖而抑制其骨向分化,同时抑制Notch信号通路的表达,说明Notch信号通路对PDLSCs骨向分化具有一定的调控作用。 展开更多

关键词 牙周膜干细胞 NOTCH信号通路 肿瘤坏死因子-Α 成骨分化

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锶对脂肪干细胞成骨分化中血管内皮生长因子及Notch1信号通路相关蛋白表达的影响

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作者 赵崇如 郭澍 +3 位作者 吕梦竹 陈欣 王婷 朱梦茹 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期696-700,共5页

目的探究锶(Sr)上调脂肪干细胞(ADSCs)成骨分化过程中血管内皮生长因子(VEGF)的表达与Notch1信号通路的关系。方法分别用氯化锶和γ-分泌酶抑制剂(DAPT)干预成骨分化诱导的ADSCs,运用Western blotting方法检测Notch1信号通路蛋白(NICD)... 目的探究锶(Sr)上调脂肪干细胞(ADSCs)成骨分化过程中血管内皮生长因子(VEGF)的表达与Notch1信号通路的关系。方法分别用氯化锶和γ-分泌酶抑制剂(DAPT)干预成骨分化诱导的ADSCs,运用Western blotting方法检测Notch1信号通路蛋白(NICD)及VEGF的蛋白表达。结果与空白对照组相比,Sr组的NICD蛋白表达水平显著升高,DAPT组的NICD蛋白表达水平显著降低;与Sr组相比,Sr+DAPT组的NICD蛋白表达显著降低。与空白对照组相比,Sr组的VEGF蛋白表达水平显著升高,DAPT组的VEGF蛋白表达水平显著降低;与Sr组相比,Sr+DAPT组的VEGF蛋白表达显著降低。结论 Sr能上调ADSCs成骨分化过程中VEGF表达。在Sr促ADSCs成骨分化过程中,Notch1信号通路被激活,并对VEGF的表达起正向调控作用。 展开更多

关键词 脂肪干细胞 锶 NOTCH信号通路 血管内皮生长因子 成骨

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ERK1/2信号通路在IGF-1诱导新生小鼠海马神经干细胞增殖分化中的作用 被引量：2

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作者 朱裕华 胡安康 +4 位作者 陈仁金 彭长凌 吴连连 袁红花 朱孝荣 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期609-614,共6页

目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路在胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)诱导新生小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化中的作用。方法:取新生C57BL/6J小鼠海马体外分离、培养NSCs,分别... 目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路在胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)诱导新生小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化中的作用。方法:取新生C57BL/6J小鼠海马体外分离、培养NSCs,分别加入终浓度100 ng/ml的IGF-1和20μmol/L的抑制剂U0126。CCK-8试剂盒检测IGF-1对NSCs增殖的影响;免疫荧光细胞染色法检测IGF-1对细胞分化的影响;Western blot检测ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表达,并对各组进行比较。结果:CCK-8测定细胞增殖,第3 d U0126组相对OD值显著低于IGF-1组,第7 d时IGF-1组OD值则显著高于对照组和U0126组(P<0.05)。倒置荧光显微镜下可观察到IGF-1组βⅢTubulin和GFAP阳性分化率均明显高于对照组和U0126组(P<0.05)。Western blot结果显示:IGF-1组蛋白表达量显著高于对照组和U0126组(P<0.05),IGF-1促进ERK磷酸化,U0126则抑制ERK的活化。结论:IGF-1可显著诱导NSCs的增殖和分化,ERK1/2信号通路可能具有重要作用,同时IGF-1可能参与ERK1/2的活化。 展开更多

关键词 ERK1 2信号通路 胰岛素样生长因子-1 神经干细胞 增殖和分化 小鼠

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巨噬细胞集落刺激因子过表达对信号通路中破骨相关因子的影响 被引量：4

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作者 王佳 张文静 +2 位作者 韩祥祯 周琦琪 何惠宇 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第11期1089-1093,共5页

目的:探讨巨噬细胞集落刺激因子(monocyte colony-stimulating factor,M-CSF)在SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达对破骨细胞分化形成相关细胞因子在信号通路中表达的影响。方法:构建过表达质... 目的:探讨巨噬细胞集落刺激因子(monocyte colony-stimulating factor,M-CSF)在SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达对破骨细胞分化形成相关细胞因子在信号通路中表达的影响。方法:构建过表达质粒载体上调M-CSF基因表达,使用增强型绿色荧光蛋白确定最佳转染剂量,并将质粒转染至BMSCs。采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测破骨分化特异标志物M-CSF、核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-kappaB ligand,RANKL)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-24(interleukin-24,IL-24)的mRNA表达水平。结果:流式鉴定BMSCs表面标记物CD29、CD44阳性率为91.4%、85.7%;CD45阳性率为2%;每孔5μL LTX为最佳转染效率;RT-PCR检测结果显示,实验组BMSCs中M-CSF mRNA表达显著升高(P<0.001);BMSCs破骨分化特异标志物RANKL、TNF-α、IL-1、IL-24 mRNA表达均显著增高(P<0.001),IL-6 mRNA表达降低(P<0.001),实验组与对照组比较差异有统计学意义。结论:M-CSF过表达增强BMSCs向破骨细胞分化的能力,对破骨细胞形成分化的早中晚期均存在影响。此外,M-CSF高表达质粒将外源基因导入BMSCs,是一种强有力的骨再生的基因治疗工具。 展开更多

关键词 巨噬细胞集落刺激因子 破骨细胞相关因子 破骨信号通路 骨髓间充质干细胞 骨组织工程

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身痛逐瘀汤联合骨髓间充质干细胞干预膝骨关节炎大鼠机制研究

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作者 易腾达 蒋志滨 +4 位作者 李晓刚 崔国宁 裴天丽 杨瑞玲 周静 《世界中医药》 北大核心 2025年第14期2500-2508,共9页

目的:本研究旨在探讨身痛逐瘀汤调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/核因子κB(NF-κB)信号通路干预膝骨关节炎(KOA)模型大鼠的作用机制。方法:采用胶原酶注射法建立KOA模型大鼠,并随机分为4组:空白组、对照组、身痛逐瘀汤组和... 目的:本研究旨在探讨身痛逐瘀汤调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/核因子κB(NF-κB)信号通路干预膝骨关节炎(KOA)模型大鼠的作用机制。方法:采用胶原酶注射法建立KOA模型大鼠,并随机分为4组:空白组、对照组、身痛逐瘀汤组和身痛逐瘀汤+BMSC组。身痛逐瘀汤组给予身痛逐瘀汤,身痛逐瘀汤+BMSC组给予身痛逐瘀汤+骨髓间充质干细胞(BMSC),对照组给予生理盐水,均连续给药14 d。治疗结束后,检测BMSC的增殖率和凋亡指数,苏木精-伊红染色观察膝关节滑膜形态。利用蛋白质印迹法(WB)、酶联免疫吸附剂测定(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测各组大鼠Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶1(GAPDH-1)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶2(GAPDH-2)、碱性磷酸酶3(AKP3)、NF-κB、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)的表达水平。结果:与对照组比较,身痛逐瘀汤组身痛逐瘀汤+BMSC组的BMSC增殖率提高、凋亡指数降低(P<0.01),且身痛逐瘀汤+BMSC组的增殖率高于身痛逐瘀汤组、凋亡指数低于身痛逐瘀汤组(P<0.05)。身痛逐瘀汤组身痛逐瘀汤+BMSC组的TLR2和TLR4蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.01),而身痛逐瘀汤+BMSC组的TLR2和TLR4蛋白表达水平低于身痛逐瘀汤组(P>0.05)。身痛逐瘀汤组和身痛逐瘀汤+BMSC组的GAPDH-1和GAPDH-2蛋白含量均高于对照组(P<0.05),但2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,身痛逐瘀汤组身痛逐瘀汤+BMSC组的AKP3含量均降低(P<0.05,P<0.01);身痛逐瘀汤组身痛逐瘀汤+BMSC组的PI3K、AKT表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05);身痛逐瘀汤组身痛逐瘀汤+BMSC组的NF-κB含量明显低于对照组(P<0.01)。结论:身痛逐瘀汤联合BMSC通过抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路,下调TLR2、TLR4、APK3、NF-κB、IL-6和IL-10的表达,上调GAPDH-1和GAPDH-2的蛋白含量,从而增强BMSC的增殖活性,实现对KOA模型大鼠的治疗作用。 展开更多

关键词 身痛逐瘀汤 骨髓间充质干细胞 膝骨关节炎 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子κB信号通路 Toll样受体 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 碱性磷酸酶 机制

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TNF-α激活Wnt信号通路促进人结肠癌干细胞侵袭 被引量：11

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作者 魏笑 李昕 +4 位作者 孔飞飞 马璐 隋御 陈冬梅 徐方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期982-988,共7页

目的探讨炎症环境下Wnt信号通路对人结肠癌干细胞侵袭的影响。方法以人结肠癌细胞系HT29细胞为材料,用流式细胞荧光分选技术(FACS)分选CD44+CD133+的人结肠癌干细胞;流式细胞术及单细胞克隆形成实验对分选出的干细胞进行鉴定;肿瘤坏死... 目的探讨炎症环境下Wnt信号通路对人结肠癌干细胞侵袭的影响。方法以人结肠癌细胞系HT29细胞为材料,用流式细胞荧光分选技术(FACS)分选CD44+CD133+的人结肠癌干细胞;流式细胞术及单细胞克隆形成实验对分选出的干细胞进行鉴定;肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理CD44+CD133+HT29细胞建立炎症细胞模型,噻唑蓝(MTT)实验筛选TNF-α作用的最适剂量及最佳作用时间; Wnt信号通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)作用于CD44+CD133+HT29炎症细胞,实验分为空白组、TNF-α处理组、加DKK1的TNF-α处理组。MTT实验检测各组细胞增殖情况,Western blot法检测Wnt信号通路中相关蛋白β联蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、c-Myc及上皮间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达情况,TranswellTM侵袭实验检测各组细胞侵袭情况。结果流式细胞分选术成功分选出结肠癌CD44+CD133+HT29干细胞。MTT实验筛选出TNF-α作用的最适剂量为10 ng/m L,最佳作用时间为48 h。与空白组相比,TNF-α处理组中CD44+CD133+HT29细胞的相对存活率增加,TranswellTM穿膜的细胞数增加,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达升高,E-cadherin表达降低、vimentin表达升高;与TNF-α处理组相比,加DKK1的TNF-α处理组CD44+CD133+HT29细胞的相对存活率降低,TranswellTM穿膜细胞数减少,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达降低,E-cadherin表达升高、vimentin表达降低。结论TNF-α通过激活Wnt信号通路促进结肠癌干细胞的侵袭能力。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 肿瘤坏死因子α(TNF-α) WNT信号通路 HT29细胞 上皮间质转化(EMT)

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TNF-α通过ERK信号通路刺激骨髓间充质干细胞表达VCAM-1 被引量：5

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作者 陆紫媛 肖扬 +1 位作者 李力 王耀春 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1568-1571,共4页

本研究目的在于探讨TNF-α对人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)表达的影响及与ERK信号通路的关系。应用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离人... 本研究目的在于探讨TNF-α对人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)表达的影响及与ERK信号通路的关系。应用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离人BMMSC,并对其进行表面抗原表达及诱导分化鉴定。用不同浓度的TNF-α刺激BMMSC,流式细胞术检测其表面VCAM-1表达及ERK信号通路抑制剂U0126对BMMSC VCAM-1表达的影响,用Western blot检测ERK通路活性的变化。结果表明,分离培养的BMMSC表达CD29、CD69、CD44、CD105,不表达CD34、CD45;BMMSC可诱导分化为成骨细胞及脂肪细胞;BMMSC膜上的VCAM-1表达随着TNF-α浓度的增加而增加;经U0126预处理后TNF-α刺激的BMMSC膜上的VCAM-1表达减少;TNF-α增加BMMSC ERK信号通路的活化程度,U0126抑制TNF-α对ERK活性的作用。结论:TNF-α可能通过ERK信号通路刺激MSC表达VCAM-1。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 肿瘤坏死因子-Α 血管内皮黏附分子 ERK信号通路

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缺氧诱导因子经典通路的拓展与干细胞调控 被引量：1

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作者 耿书国 刘频健 +2 位作者 汪建样 胡文龙 殷明 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期290-294,共5页

缺氧诱导因子是在缺氧条件下被激活参与机体低氧适应性反应的一类核因子,对于低氧条件下维持机体生命活动起着不可或缺的作用,且与肿瘤的发生发展以及干细胞调控关系密切,本文综述缺氧诱导因子经典氧感通路信号轴和非经典信号通路以及... 缺氧诱导因子是在缺氧条件下被激活参与机体低氧适应性反应的一类核因子,对于低氧条件下维持机体生命活动起着不可或缺的作用,且与肿瘤的发生发展以及干细胞调控关系密切,本文综述缺氧诱导因子经典氧感通路信号轴和非经典信号通路以及其对干细胞调控的作用,讨论了非经典通路中沉默信息调节因子家族尤其是去乙酰化酶sirtuin-3(SIRT3)对HIFα的负性调控作用,以及M2型丙酮酸激酶(PKM2)对HIFα的激活作用。探讨了HIF1α对多种干细胞生物学的调控,发现HIF1α可抑制胚胎干细胞-外胚层干细胞(ESC-Epi SC)过渡期线粒体呼吸,从而驱使其向糖酵解代谢的转变,继而维持ESC的多能性;且HIF1α可介导间充质干细胞的定向分化,如向成骨细胞,软骨细胞,神经细胞,脂肪细胞,肌细胞等细胞的定向分化;并可促进神经干细胞增殖与迁移以及参与肿瘤干细胞的干性维持。目的阐明缺氧诱导因子经典与非经典信号通路轴及其对干细胞生物学的调控,为临床组织损伤修复组织工程乃至肿瘤的诊疗预防提供新的靶点。 展开更多

关键词 缺氧诱导因子 信号通路拓展 干细胞调控 沉默信息调节因子 PKM2

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骨髓间充质干细胞成骨分化相关信号通路 被引量：10

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作者 姜朝阳 谢兴文 +3 位作者 徐世红 李鼎鹏 柳博 林德民 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2020年第5期473-478,共6页

骨髓间充质干细胞是一类具有多项分化潜能的干细胞,在一定条件下可以向成骨细胞分化。而骨髓间充质干细胞成骨分化是多基因、多步骤的复杂过程,多种信号通路如Wnt/β-catenin、BMP/Smad、PI3K/Akt均参与其中,靶向研究相关信号通路及其... 骨髓间充质干细胞是一类具有多项分化潜能的干细胞,在一定条件下可以向成骨细胞分化。而骨髓间充质干细胞成骨分化是多基因、多步骤的复杂过程,多种信号通路如Wnt/β-catenin、BMP/Smad、PI3K/Akt均参与其中,靶向研究相关信号通路及其关联基因是目前解决以骨质疏松、骨折修复为代表的骨组织工程问题的关键。本文参考骨髓间充质干细胞成骨分化相关基因及信号通路的有关文献,将最新研究进展作一综述,旨在为骨组织工程的研究及应用提供新策略。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 信号通路 基因 因子

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PEDF基因修饰骨髓干细胞对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量：5

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作者 刘宇 石云 +3 位作者 张旭 高妍 王欢 王斌 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1091-1095,1099,共6页

目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)基因修饰骨髓干细胞(MSC)对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达的影响。方法SPF级SD大鼠40只,随机均为分4组:糖尿病组(DM组)、糖尿病心肌梗死模型组(... 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)基因修饰骨髓干细胞(MSC)对糖尿病心肌梗死大鼠心肌损伤的作用及其对Wnt/连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达的影响。方法SPF级SD大鼠40只,随机均为分4组:糖尿病组(DM组)、糖尿病心肌梗死模型组(DMI组)、给予沉默PEDF的MSC糖尿病心肌梗死组(PM组)以及给予沉默PEDF的MSC和Wnt/β-catenin通路抑制剂的糖尿病心肌梗死组(WPM组)。采用高脂喂养+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合结扎大鼠冠状动脉建立糖尿病心肌梗死模型。PM组于模型成功后移植PEDF-/MSC(50μL)。WPM组于模型成功后移植PEDF-/MSC(50μL),30 min后静脉注射HY-15597(8 mg/kg)。观察大鼠心功能情况;HE染色观察大鼠心脏的病理变化;免疫荧光检测各组大鼠心肌组织中血管生成因子VEGF、IGF-1、PDGF B的表达;Western blotting检测各组大鼠心肌组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。结果术后24 h,PM组CK、CK-MB、BNP水平明显低于DMI组(P<0.05),术后4周CK、CK-MB、BNP水平检测结果显示,与24 h结果比较DMI组和PM组各项指标均下降(P<0.05)。与DMI组比较,超声提示PM组大鼠左室射血分数(LVEF)明显升高(P<0.05);病理学检查PM组可见心肌细胞改善,损伤程度有所好转,心肌细胞形态尚完整,肌纤维排列有序,心肌组织充血、肿胀减轻。免疫荧光提示沉默PEDF的MSC可以促进血管生成因子表达,同时显著下调wnt3a、β-catenin、survivin的表达(P<0.05)。结论沉默PEDF的MSC可通过促进血管生成改善糖尿病大鼠心肌梗死的心功能,对心脏具有保护作用。 展开更多

关键词 色素上皮衍生因子 骨髓干细胞 糖尿病心肌梗死 大鼠 心肌损伤 信号通路

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HL-60细胞Nucleostemin表达下调对PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的影响 被引量：3

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作者 贾宇 魏园玉 +3 位作者 李曌博 张帆 刘帅 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1592-1596,共5页

目的:探讨HL-60白血病细胞中核干细胞因子Nucleostemin(NS)表达下调对其非依赖P53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR中相关蛋白表达是否有影响。方法:采用重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至P53缺失型HL-60细胞中干扰NS的表达。用Western... 目的:探讨HL-60白血病细胞中核干细胞因子Nucleostemin(NS)表达下调对其非依赖P53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR中相关蛋白表达是否有影响。方法:采用重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至P53缺失型HL-60细胞中干扰NS的表达。用Western blot技术评价转染后HL-60细胞NS蛋白的表达水平并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关蛋白水平的表达变化。结果:重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见到GFP荧光表达较强(<80%)。Western blot结果显示,NS蛋白表达明显下调,干扰表达有效;干扰HL-60细胞中NS的表达后AKT、p-AKT、p70s6k、p-p70s6k蛋白变化不明显(t_1=2.31,P=0.074;t_2=3.62,P=0.069;t_3=1.60,P=0.251;t_4=2.72,P=0.113),而mTOR复合物中的GβL蛋白表达明显下调(t=15.01,P=0.002)。结论:HL-60细胞中NS蛋白可影响mTOR复合物中GβL蛋白的表达,PI3K/AKT/mTOR通路可能为NS非依赖P53作用途径之一。 展开更多

关键词 核干细胞因子 PI3K/AKT/mTOR信号通路 HL-60细胞 P53缺失型

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RNA干扰人永生化食管上皮恶变细胞中核干细胞因子对PI3K/AKT表达的影响 被引量：2

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作者 胡梦竹 王娟 +5 位作者 王盼盼 张洪磊 张霞 张巧 高社干 张功员 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第6期700-703,共4页

目的:研究抑制人永生化食管上皮恶变细胞(SHEEC)中核干细胞因子(NS)对PI3K/AKT信号转导通路中相关分子表达的影响。方法:将干扰试剂(NS-RNAi)转染至SHEEC中以抑制NS的表达,以SHEEC组、阴性对照组(NC组)和MOCK组为对照,采用RT-PCR和Weste... 目的:研究抑制人永生化食管上皮恶变细胞(SHEEC)中核干细胞因子(NS)对PI3K/AKT信号转导通路中相关分子表达的影响。方法:将干扰试剂(NS-RNAi)转染至SHEEC中以抑制NS的表达,以SHEEC组、阴性对照组(NC组)和MOCK组为对照,采用RT-PCR和Western blot方法检测干扰后PI3K/AKT通路中相关因子mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:NS-RNAi成功转染至SHEEC中。抑制SHEEC中NS的表达后PI3K和AKT mRNA的相对表达量为(0.460±0.207)和(0.492±0.233),与SHEEC组、NC组和MOCK组比较,差异有统计学意义(P均<0.05);干扰NS表达后PI3K和AKT蛋白的相对表达量为(0.353±0.361)和(0.312±0.068),与SHEEC组、NC组和MOCK组比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:抑制SHEEC中NS表达后PI3K/AKT信号通路中相关因子的表达均明显下降,PI3K/AKT信号通路可能是NS发挥作用的一种非依赖P53作用的信号途径。 展开更多

关键词 永生化食管上皮恶变细胞 核干细胞因子 RNA干扰 PI3K/AKT信号转导通路

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Notch信号在脂多糖诱导的骨髓间充质干细胞中的作用 被引量：2

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作者 王继荣 卢艳 +2 位作者 岳影星 代继桓 杨舟鑫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期308-313,共6页

目的:探讨Notch信号对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和趋化因子CXCL1分泌的影响。方法:全骨髓培养法制备BMSCs;采用q PC... 目的:探讨Notch信号对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和趋化因子CXCL1分泌的影响。方法:全骨髓培养法制备BMSCs;采用q PCR与Western blot实验比较LPS对BMSCs中Notch信号通路配体、受体及靶基因表达的变化;MTT法和活细胞计数检测Notch信号对细胞增殖的影响;并以ELISA法检测Notch信号通路抑制剂DAPT对IL-6和CXCL1分泌的调节作用。结果:经10μg/L、100μg/L和1 mg/L的LPS刺激后,BMSCs增殖和IL-6分泌呈现上升趋势(P<0.05或P<0.01)。q PCR与Western blot结果显示Notch信号通路受体和配体在BMSCs中均有表达,但LPS对其mRNA与蛋白水平并无明显影响,然而LPS可显著诱导Notch信号靶基因Hes1与Hey1的蛋白表达。Notch信号通路抑制剂DAPT可以降低LPS诱导的BMSCs活力的上升(P<0.01),同时对LPS诱导的BMSCs增殖有抑制作用。另外,LPS显著诱导BMSCs中IL-6与CXCL1的分泌,而抑制Notch信号通路可显著抑制LPS所诱导的IL-6与CXCL1的分泌(P<0.05)。结论:抑制Notch信号可以抑制LPS诱导的BMSCs增殖,并抑制IL-6与CXCL1的分泌。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 脂多糖 NOTCH信号通路 白细胞介素6 趋化因子CXCL1

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PKC-mTOR通路对糖尿病大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制

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作者 范秀娟 蔡英兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1797-1805,共9页

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路在糖尿病(diabetes)大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:将72只雌雄不分的SPF级4周龄SD大鼠随机分为正常对照(control)组、糖尿病组、diabetes+0.1μmol/L佛波酯(PMA... 目的:探讨蛋白激酶C(PKC)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路在糖尿病(diabetes)大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:将72只雌雄不分的SPF级4周龄SD大鼠随机分为正常对照(control)组、糖尿病组、diabetes+0.1μmol/L佛波酯(PMA)组、diabetes+0.2μmol/L PMA组、diabetes+0.5μmol/L PMA组、diabetes+2μmol/L双吲哚马来酰亚胺I(GF109203X)组、diabetes+5μmol/LGF109203X组和diabetes+10μmol/L GF109203X组,每组各9只。体外高糖环境下培养大鼠原代胃平滑肌细胞分为对照(CK)组、0.1μmol/L PMA处理组、0.2μmol/L PMA处理组、0.5μmol/L PMA处理组、2μmol/L GF109203X处理组、5μmol/L GF109203X处理组和10μmol/L GF109203X处理组。采用离体肌条实验技术检测胃窦平滑肌的自发性收缩,HE染色和流式细胞术检测大鼠胃平滑肌的病理变化及细胞凋亡,Western blot检测SCF、c-Kit、mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4E-BP1、p-4E-BP1、caspase-3、Bax和Bcl-2的蛋白表达变化。结果:(1)与control组相比,diabetes组胃窦平滑肌收缩性下降(P<0.05),胃平滑肌萎缩,细胞凋亡率增加(P<0.01),SCF、c-Kit和p-mTOR表达均下降(P<0.05或P<0.01)。(2)与diabetes组相比,diabetes+0.1μmol/L PMA组胃窦平滑肌自发性收缩无显著差异,diabetes+0.2μmol/L PMA组(P<0.05)和diabetes+0.5μmol/L PMA组(P<0.01)胃窦平滑肌自发性收缩显著增强,diabetes+0.2μmol/L PMA组和diabetes+0.5μmol/L PMA组mTOR、p70S6K(T421/S424)和p70S6K(T389)的磷酸化水平升高(P<0.05),diabetes+0.5μmol/L PMA组4E-BP1的磷酸化水平升高(P<0.05)。(3)与diabetes组相比,diabetes+2μmol/L GF109203X组胃窦平滑肌自发性收缩无显著差异,diabetes+5μmol/L GF109203X组(P<0.05)和diabetes+10μmol/L GF109203X组(P<0.01)胃窦平滑肌自发性收缩显著减弱,diabetes+5μmol/L GF109203X组和diabetes+10μmol/L GF109203X组mTOR、p70S6K(T389)的磷酸化水平下降(P<0.05),diabetes+10μmol/L GF109203X组p70S6K(T421/S424)的磷酸化水平下降(P<0.05),diabetes+GF109203X(2、5和10μmol/L)组4E-BP1的磷酸化水平均下降(P<0.05)。(4)与CK组相比,GF109203X(2、5和10μmol/L)处理组大鼠胃平滑肌细胞凋亡率增加(P<0.01),PMA(0.1、0.2和0.5μmol/L)处理组Bax和caspase-3表达均下降(P<0.05),Bcl-2的表达增加(P<0.05)。结论:在糖尿病大鼠胃平滑肌PKCmTOR信号通路的下调通过调节Bax/Bcl-2和caspase-3导致胃平滑肌细胞凋亡,并下调SCF和c-Kit,这可能会在糖尿病胃动力障碍中发挥重要的作用。 展开更多

关键词 胃平滑肌 糖尿病胃动力障碍 PKC-mTOR信号通路 干细胞因子 细胞凋亡

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紫草素对脑胶质瘤干细胞干性维持的相关研究 被引量：12

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作者 刘静 笪祖科 +4 位作者 李振 薛一雪 刘丽波 王萍 刘云会 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期49-54,共6页

目的研究紫草素对脑胶质瘤干细胞(GSCs)干性维持的影响及相关分子机制。方法应用免疫荧光方法对分离提取的细胞球进行干细胞表面标志性分子CD133和nestin的检测;紫草素(2μmol·L-1)处理GSCs 12、24和48 h后,光镜下观察紫草素对GSC... 目的研究紫草素对脑胶质瘤干细胞(GSCs)干性维持的影响及相关分子机制。方法应用免疫荧光方法对分离提取的细胞球进行干细胞表面标志性分子CD133和nestin的检测;紫草素(2μmol·L-1)处理GSCs 12、24和48 h后,光镜下观察紫草素对GSCs悬浮细胞球形态的影响;采用亚球形成实验评估紫草素对GSCs自我更新能力的影响;应用Western blot方法检测紫草素作用下GSCs干细胞标志分子CD133的表达变化,同时检测紫草素作用下,GSCs中PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt的表达变化;联合应用胰岛素样生长因子-1(IGF-1)后检测紫草素作用下,GSCs干性维持的改变。结果分离提取的细胞球表面CD133和nestin呈阳性表达;紫草素能够明显抑制GSCs悬浮细胞球的形态和二代细胞球的形成,同时能够降低CD133的表达;与对照组相比,紫草素作用下,GSCs中PI3K和Akt的表达无变化,pPI3K和p-Akt的表达呈现药物时间依赖性明显下降;此外,IGF-1能够明显改善紫草素对GSCs干性维持的抑制作用。结论紫草素能够明显抑制GSCs的干性维持,其机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多

关键词 紫草素 胶质瘤干细胞 干性维持 PI3K/AKT信号通路 胰岛素样生长因子-1 自我更新能力

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miRNA在干细胞成骨分化中的调控作用 被引量：5

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作者 王淼 罗小辑 +2 位作者 唐大刚 高天乐 张艳亮 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期104-106,共3页

MicroRNA(miRNA)即微小RNA,是广泛存在于真核生物中的一类非蛋白基因表达调控因子;干细胞的成骨分化是一系列基因程序表达、精确调控的结果;而近年来研究证明,干细胞的成骨分化受到miRNA的严格调控,干细胞成骨分化的主要信号通路及相关... MicroRNA(miRNA)即微小RNA,是广泛存在于真核生物中的一类非蛋白基因表达调控因子;干细胞的成骨分化是一系列基因程序表达、精确调控的结果;而近年来研究证明,干细胞的成骨分化受到miRNA的严格调控,干细胞成骨分化的主要信号通路及相关转录因子均受到miRNA的调控。本文就miRNA对BMPs/TGFβ、Wnt/β-catenin等干细胞成骨分化的主要信号通路的调控作用及机制、miRNA对Runx2、Osterix等成骨分化的特征性下游转录因子的调控机制作一综述。目前如何可控制地使干细胞定向成骨分化是组织工程医学的热点,而研究miRNA在成骨分化过程中的调控作用将为这一问题提供新的解决思路和策略。 展开更多

关键词 MIRNA 干细胞 成骨分化 信号通路 转录因子

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