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人骨髓间充质干细胞/细胞外基质复合体用于骨缺损再生修复的研究 被引量:4
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作者 张舟 梁想 +3 位作者 崔浩 朱羿霏 屠军波 那思家 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期372-378,共7页
目的:评估人骨髓间充质干细胞/细胞外基质复合体(C-BMSC)的骨缺损再生修复能力。方法:体外构建C-BMSC,通过大体观察、HE染色、扫描电镜进行组织形态学检测;TUNEL染色法检测细胞凋亡水平;免疫荧光染色和PCR法检测成骨相关因子的表达水平... 目的:评估人骨髓间充质干细胞/细胞外基质复合体(C-BMSC)的骨缺损再生修复能力。方法:体外构建C-BMSC,通过大体观察、HE染色、扫描电镜进行组织形态学检测;TUNEL染色法检测细胞凋亡水平;免疫荧光染色和PCR法检测成骨相关因子的表达水平;大鼠颅骨缺损模型评估C-BMSC体内骨缺损再生修复能力。结果:组织形态学显示5 d组C-BMSC的细胞外基质(ECM)最丰富,ECM将细胞完全包裹,ECM纤维粗壮,小分子物质附着;TUNEL染色结果提示3 d与5 d组细胞凋亡数量接近,而7 d时细胞凋亡显著增加(P<0.001);PCR结果表明C-BMSC对ALP、COL-1、Runx2和OCN表达均高于细胞膜片(P<0.05);免疫荧光结果显示C-BMSC中ECM对ALP、COL-1、BSP表达均呈阳性;大鼠颅骨移植实验结果表明C-BMSC组骨体积与软组织体积比显著高于空白组。结论:本研究证明C-BMSC具有良好的成骨分化能力,这为骨缺损再生修复提供了一种新的策略。 展开更多
关键词 骨髓间充干细胞 干细胞/细胞外基质复合体 细胞膜片 骨缺损再生修复
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脐带间充质干细胞外泌体对子宫内膜基质细胞氧化损伤和炎症因子表达的影响
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作者 王琳 米旭光 +7 位作者 林秀英 付建华 刘磊 王爱乔 杜茜 张文琦 范美娇 方艳秋 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期2153-2160,共8页
目的:探讨脐带间充质干细胞外泌体(hUCMSCs-Exo)对双酚AF(BPAF)诱导的子宫内膜基质细胞(hESCs)氧化损伤和炎症因子释放的影响。方法:将hESCs分为Control组、BPAF组(25μmol/L BPAF处理)、BPAF+Exo组(25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo处理)、B... 目的:探讨脐带间充质干细胞外泌体(hUCMSCs-Exo)对双酚AF(BPAF)诱导的子宫内膜基质细胞(hESCs)氧化损伤和炎症因子释放的影响。方法:将hESCs分为Control组、BPAF组(25μmol/L BPAF处理)、BPAF+Exo组(25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo处理)、BPAF+Exo+LY组(25μmol/L BPAF+hUCMSCs-Exo+10μmol/L LY294002处理)。MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS水平以及线粒体膜电位水平;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3及PI3K/AKT信号通路蛋白表达;RT-qPCR检测炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达。结果:与对照组相比,随着BPAF(≥25μmol/L)浓度升高,hESCs存活率逐渐降低(P<0.01),细胞凋亡率逐渐升高。与对照组相比,BPAF组ROS水平升高,线粒体膜电位水平下降,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达明显增多,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达明显减少。与BPAF组相比,BPAF+Exo组细胞存活率升高(P<0.01),ROS水平降低,线粒体膜电位水平升高,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达减少,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达增加。与BPAF+Exo组相比,BPAF+Exo+LY组细胞Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT蛋白表达减少。与对照组相比,BPAF组炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达明显上调(P<0.01),与BPAF组相比,BPAF+Exo组炎症因子mRNA表达明显下调(P<0.05)。结论:BPAF(≥25μmol/L)可抑制hESCs增殖,促进细胞凋亡,hUCMSCs-Exo通过PI3K/AKT信号通路抑制BPAF诱导的hESCs氧化损伤和炎症因子表达。 展开更多
关键词 子宫内膜细胞 内分泌干扰物 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 炎症因子
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外泌体复合脱细胞真皮基质水凝胶在创面修复中作用的实验研究
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作者 任力 王芳 +1 位作者 彭倩 杨智勇 《中国临床解剖学杂志》 北大核心 2025年第5期564-572,577,共10页
目的探究外泌体复合脱细胞真皮基质水凝胶对大鼠皮肤创面愈合的影响及作用机制。方法取第4~6代大鼠皮肤成纤维细胞,分4组处理:PBS组、水凝胶组、外泌体组、外泌体-水凝胶组,CCK-8检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,RT-qPCR检测Ⅰ型胶... 目的探究外泌体复合脱细胞真皮基质水凝胶对大鼠皮肤创面愈合的影响及作用机制。方法取第4~6代大鼠皮肤成纤维细胞,分4组处理:PBS组、水凝胶组、外泌体组、外泌体-水凝胶组,CCK-8检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,RT-qPCR检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、α-平滑肌肌动蛋白的mRNA表达。建立SD大鼠背部全层皮肤缺损创面,将大鼠分为空白对照组、水凝胶组、外泌体组、外泌体-水凝胶组,观察创面愈合情况,HE染色与Masson染色观察创面组织病理变化,Western blot检测创面组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达。结果与PBS组相比,外泌体组比较,外泌体-水凝胶组成纤维细胞增殖与迁移能力显著增强(P<0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、α-平滑肌肌动蛋白的mRNA表达量升高(P<0.05)。与外泌体组相比,外泌体-水凝胶组成纤维细胞增殖与迁移能力显著增强(P<0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、α-平滑肌肌动蛋白的mRNA表达量升高(P<0.05)。与空白对照组相比,水凝胶组、外泌体组、外泌体-水凝胶组创面新生上皮组织完整,新生胶原密度大,创面愈合更快,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达升高(P<0.05)。与水凝胶组、外泌体组相比,外泌体-水凝胶组创面厚度增大,胶原分布更加均匀,新生上皮创面愈合更快,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达升高(P<0.05)。结论外泌体-脱细胞真皮基质水凝胶可通过促进成纤维细胞的增殖、迁移及分泌Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、血管内皮生长因子、α-平滑肌肌动蛋白等因子表达来促进创面的修复。 展开更多
关键词 皮肤损伤 创面修复 细胞真皮 水凝胶
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骨膜水凝胶负载脂肪间充质干细胞来源外泌体治疗骨关节炎
4
作者 章竞 常恬 +3 位作者 刘欣 张诗晗 刘阳 霍强 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第13期993-999,共7页
目的:制备了一种骨膜细胞外基质(periosteum extracellular matrix, PECM)水凝胶负载脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes of adipose mesenchymal stem cells, AdMSC-Exo),评价其对内侧半月板失稳术(destabilization of medial meni... 目的:制备了一种骨膜细胞外基质(periosteum extracellular matrix, PECM)水凝胶负载脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes of adipose mesenchymal stem cells, AdMSC-Exo),评价其对内侧半月板失稳术(destabilization of medial meniscus, DMM)构建的骨关节炎大鼠模型的治疗效果。方法:采用超速离心法提取AdMSC-Exo并进行表征。PECM通过脱细胞和酶降解工艺制备。以制得的水凝胶负载外泌体得到PECM@AdMSC-Exo。SD雄鼠随机分为假手术(Sham)组、DMM+Saline组、DMM+PECM组、DMM+AdMSC-Exo组、DMM+PECM@AdMSC-Exo组。通过关节腔注射药物进行体内药效实验,观察其对骨关节炎的治疗作用。结果:表征实验结果表明,成功制备了AdMSC-Exo、PECM和PECM@AdMSC-Exo。体外实验表明,AdMSC-Exo对损伤的软骨细胞具有修复作用。体内药效实验结果表明,与对照组相比,PECM@AdMSC-Exo可以有效修复软骨,对大鼠骨关节炎具有较好的治疗作用,且对大鼠的体重无明显影响。结论:本研究成功制备了PECM@AdMSC-Exo,对大鼠软骨损伤具有较好的修复效果,为骨关节炎的治疗提供了一种新策略。 展开更多
关键词 骨膜细胞水凝胶 间充干细胞 软骨修复 骨关节炎
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高糖微环境通过重塑细胞外基质影响牙髓损伤修复的研究
5
作者 杜桂林 刘肖晨 张旗 《口腔医学研究》 北大核心 2025年第10期856-866,共11页
目的:探究高糖微环境中牙髓细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的变化及其对牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)迁移能力与牙髓损伤修复的影响。方法:选取8周龄雄性Wistar大鼠和GK大鼠,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin,HE... 目的:探究高糖微环境中牙髓细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的变化及其对牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)迁移能力与牙髓损伤修复的影响。方法:选取8周龄雄性Wistar大鼠和GK大鼠,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin,HE)观察牙髓形态;马松染色和免疫组化染色检测牙髓ECM中胶原纤维含量与交联情况;生物型原子力显微镜检测牙髓ECM的刚度。建立牙髓损伤修复模型,Micro-CT扫描重建和H&E染色评估牙髓损伤修复情况;CD146和STRO-1免疫荧光共染定位DPSCs。免疫荧光染色、划痕实验及Transwell实验检测葡萄糖交联ECM中hDPSCs的形态、迁移能力及力学信号分子的表达。构建ALT-711抑制ECM葡萄糖交联的体内外模型,检测牙髓损伤修复情况与hDPSCs的形态、迁移能力及力学信号分子的表达。结果:高糖组牙髓截面面积缩小;胶原纤维含量增多、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL 1)与晚期糖基化终末产物(advanced glycation end-products,AGEs)表达上调;刚度增加。牙髓损伤后,高糖组未形成修复性牙本质桥、髓腔异位钙化显著,CD146+STRO-1+DPSCs远离损伤部位分布。葡萄糖交联ECM中的hDPSCs面积与形状因子减小、迁移能力下降、ITG-α5β1(integrin alpha 5 beta 1)及Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)表达增加。ALT-711干预后,高糖组形成修复性牙本质桥、异位钙化减少,CD146+STRO-1+DPSCs于损伤部位附近分布,hDPSCs形态与迁移能力改善、力学信号减弱。结论:高糖微环境诱发牙髓ECM胶原异常沉积与过度交联,进而通过激活ITG-YAP力学信号轴导致DPSCs迁移能力障碍及牙髓损伤修复受阻。靶向抑制ECM葡萄糖交联可挽救DPSCs受损的迁移能力和异常的力学信号,并促进牙髓损伤修复。 展开更多
关键词 高糖微环境 细胞 牙髓损伤修复 牙髓干细胞 迁移
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藻酸钙海绵复合转基因骨髓基质干细胞的体外培养
6
作者 张海宁 侯筱魁 汤亭亭 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期374-377,共4页
目的采用不同方法制备藻酸钙海绵,观察其与细胞的复合情况。方法将藻酸钠与CaCl-2或葡萄糖酸钙混合交联,采用慢速冷冻、酒精脱水或快速冷冻、真空干燥的方法制备藻酸钙海绵,与人胰岛素样生长因子(hIGF-I)基因转染的骨髓基质干细胞复合培... 目的采用不同方法制备藻酸钙海绵,观察其与细胞的复合情况。方法将藻酸钠与CaCl-2或葡萄糖酸钙混合交联,采用慢速冷冻、酒精脱水或快速冷冻、真空干燥的方法制备藻酸钙海绵,与人胰岛素样生长因子(hIGF-I)基因转染的骨髓基质干细胞复合培养,观察标记基因和目的基因的表达。结果CaCl2制备、酒精脱水的藻酸钙海绵韧性与强度最高,孔隙大,分布均匀;葡萄糖酸钙制备、酒精脱水组强度低,孔径小,冻干后质脆,弹性欠佳。复合培养后有增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达。培养基中hIGF-I分泌浓度各组互有差异。结论冷冻脱水制备的藻酸钙海绵强度增高,与细胞复合后细胞存活并有目的基因和标记基因表达。 展开更多
关键词 藻酸钙 海绵 骨髓干细胞 培养
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间充质干细胞及其外泌体在药物性肝损伤治疗中的作用
7
作者 邢国静 罗龙龙 +4 位作者 王丽菲 王顺娜 郑晓凤 卢利霞 张久聪 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期633-638,共6页
药物性肝损伤(DILI)的发生率呈逐年上升趋势且损伤机制并不明确,针对DILI的治疗药物、肝脏支持系统及肝移植均有一定的局限性。因此,寻找更安全有效的治疗方法已成为当下研究的热点。间充质干细胞及其外泌体可通过减轻肝脏炎症反应,促... 药物性肝损伤(DILI)的发生率呈逐年上升趋势且损伤机制并不明确,针对DILI的治疗药物、肝脏支持系统及肝移植均有一定的局限性。因此,寻找更安全有效的治疗方法已成为当下研究的热点。间充质干细胞及其外泌体可通过减轻肝脏炎症反应,促进肝细胞增殖及再生、抗肝细胞凋亡,改善氧化应激和免疫调节等机制减轻肝损伤。本文就间充质干细胞及其外泌体在药物性肝损伤治疗中的作用进行简要综述,以期为进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 干细胞 药物性肝损伤
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体外诱导骨髓基质细胞向神经干细胞和成熟神经细胞分化的实验研究 被引量:11
8
作者 戴宜武 徐如祥 +4 位作者 姜晓丹 邹雨汐 刘智良 杜谋选 蔡颖谦 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期704-705,F004,共3页
探索骨髓基质细胞(BMSCs)分化为神经干细胞和成熟神经细胞的可行性 ,为BMSCs在神经科学领域的应用提供依据。以犬的BMSCs为实验对象 ,利用bFGF、RA、GDNF等作为增殖或分化诱导因子 ,对各阶段细胞进行免疫细胞化学鉴定。结果发现 ,增殖培... 探索骨髓基质细胞(BMSCs)分化为神经干细胞和成熟神经细胞的可行性 ,为BMSCs在神经科学领域的应用提供依据。以犬的BMSCs为实验对象 ,利用bFGF、RA、GDNF等作为增殖或分化诱导因子 ,对各阶段细胞进行免疫细胞化学鉴定。结果发现 ,增殖培养2 4~ 72h见细胞分裂像和克隆单位 ;诱导培养 3天 ,部分细胞开始表达NSE或GFAP ,继续增殖培养仍可见细胞克隆 (干细胞特性 ) ;诱导培养第 10天有成熟神经细胞形成 (成分鉴定证实 )。说明BMSCs在体外培养条件下 ,经过多种因子的“程序性”作用 ,可以向神经干细胞、成熟神经元及胶质细胞方向分化。提示BMSCs可作为“种子细胞”在神经科学领域加以利用。 展开更多
关键词 诱导 神经干细胞 骨髓细胞 细胞分化 神经元 成熟神经细胞
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恒河猴骨髓基质细胞体外诱导分化成神经干细胞的实验研究 被引量:8
9
作者 王伟 姜晓丹 +2 位作者 徐如祥 李钢 邹雨汐 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期950-952,W003,共4页
为研究恒河猴骨髓基质细胞 (BMSC)体外培养及诱导分化为神经干细胞的可行性 ,分离恒河猴BMSC ,在体外应用神经干细胞培养液和细胞因子进行诱导分化 ,利用免疫细胞化学方法进行鉴定。结果发现 ,恒河猴BMSC能在体外培养中增殖、分化和表... 为研究恒河猴骨髓基质细胞 (BMSC)体外培养及诱导分化为神经干细胞的可行性 ,分离恒河猴BMSC ,在体外应用神经干细胞培养液和细胞因子进行诱导分化 ,利用免疫细胞化学方法进行鉴定。结果发现 ,恒河猴BMSC能在体外培养中增殖、分化和表达干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (Nestin) ,并最终能分化为胶质细胞样细胞和神经元样细胞 ;免疫细胞化学检测可见有神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质原性纤维酸性蛋白 (GFAP)抗原表达 ;未发现维甲酸 (RA)、表皮生长因子 (EGF)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对骨髓基质干细胞的诱导分化具有明显影响作用。提示恒河猴BMSC是具有较强的自我更新能力和多分化潜能的细胞 ,在一定条件下 ,可分化为表达神经系细胞 (神经元和神经胶质细胞)抗原的细胞 ,可作为神经细胞的种子细胞。 展开更多
关键词 诱导分化 神经干细胞 实验研究 骨髓细胞 细胞培养 培养 免疫细胞化学法
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食蟹猴骨髓基质干细胞体外诱导分化的实验研究 被引量:13
10
作者 李钢 柯以铨 +3 位作者 姜晓丹 徐如祥 王伟 邹雨汐 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期956-958,W004,共4页
为观察食蟹猴骨髓基质干细胞 (BMSC)体外培养及诱导分化情况 ,分离食蟹猴的BMSC ,以神经干细胞培养液和分化诱导因子进行体外培养和诱导分化。结果发现 ,分离得到的食蟹猴BMSC能在体外培养中增殖、分化 ,这些具有克隆能力的BMSC能表达... 为观察食蟹猴骨髓基质干细胞 (BMSC)体外培养及诱导分化情况 ,分离食蟹猴的BMSC ,以神经干细胞培养液和分化诱导因子进行体外培养和诱导分化。结果发现 ,分离得到的食蟹猴BMSC能在体外培养中增殖、分化 ,这些具有克隆能力的BMSC能表达神经干细胞特异性抗原Nestin,并能进一步诱导分化出胶质细胞样细胞和神经元样细胞 ,免疫细胞化学检测可见有GFAP和NSE抗原表达。提示灵长类BMSC是多分化潜能细胞 ,具有较强的自我更新和多分化能力 ,在适当的诱导分化条件下可形成具有神经系细胞 (神经元和神经胶质细胞)特征的细胞 ; 展开更多
关键词 诱导分化 实验研究 骨髓细胞 细胞培养 培养 免疫细胞化学法
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体外诱导骨髓基质干细胞向神经元分化的机制研究 被引量:8
11
作者 闫彬彬 王莉莉 +4 位作者 乔俊峰 鹏海生 曹京艳 李呼伦 金连弘 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期301-304,308,共5页
目的:探讨神经细胞形成的体外微环境,诱导骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcell,BMSC)向神经元分化的机制。方法:从SD大鼠骨髓中提取BMSC进行体外培养、扩增,并用免疫组化染色进行鉴定。以绿色荧光染料PKH67标记BMSC后,将BMSC与神经细... 目的:探讨神经细胞形成的体外微环境,诱导骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcell,BMSC)向神经元分化的机制。方法:从SD大鼠骨髓中提取BMSC进行体外培养、扩增,并用免疫组化染色进行鉴定。以绿色荧光染料PKH67标记BMSC后,将BMSC与神经细胞共培养以及用双层培养皿联合培养8d后,用免疫荧光检测BMSC是否分化为神经元。结果:将BMSC与神经细胞共培养后,BMSC出现神经元的形态特点,且有(32.72±2.56)%的神经元表达特异性烯醇化酶(neuron specificenolase,NSE),与BMSC自然分化组(对照组)相比较差异非常显著(P<0.05);但用双层培养皿联合培养时,只有(4.87±0.79)%的BMSC表达NSE,与对照组相比较差异不显著(P>0.05),但与BMSC和神经细胞共培养组相比较差异显著(P<0.05)。结论:体外培养时,神经细胞形成的局部微环境可促进BMSC向神经元方向分化,并且细胞间的紧密接触是诱导BMSC向神经元分化的重要条件。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 胎脑神经细胞 共培养 微环境
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狗骨髓基质干细胞体外分化为肌源性细胞的初步观察 被引量:4
12
作者 崔继福 赵学 +2 位作者 吴宗贵 张玲珍 仲人前 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期436-437,T002,共3页
用贴壁法体外分离骨髓基质干细胞 ,实验组 5 氮胞苷诱导 ,对照组加入等量培养基 ,用相差显微镜和免疫组织化学方法观察、鉴定培养细胞。探讨成年狗骨髓基质干细胞体外诱导分化为肌细胞的可行性 ,为心肌梗死和心力衰竭的细胞移植治疗提... 用贴壁法体外分离骨髓基质干细胞 ,实验组 5 氮胞苷诱导 ,对照组加入等量培养基 ,用相差显微镜和免疫组织化学方法观察、鉴定培养细胞。探讨成年狗骨髓基质干细胞体外诱导分化为肌细胞的可行性 ,为心肌梗死和心力衰竭的细胞移植治疗提供新的细胞系。结果表明 ,实验组诱导后 4周 ,多数培养细胞由梭形变为杆状 ,免疫组织化学检查结蛋白、平滑肌肌动蛋白和肌钙蛋白I染色阳性 ;对照组多数培养细胞为梭形 ,免疫组织化学检查结蛋白染色弱阳性 ,平滑肌肌动蛋白染色弱阳性 ,肌钙蛋白I染色阴性。结果提示 ,成年狗骨髓基质干细胞体外可诱导分化为肌源性细胞。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 分化 肌源性细胞 药物诱导
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体外定向诱导人骨髓基质干细胞内皮化 被引量:5
13
作者 胡昕婴 史剑慧 +1 位作者 牛玉宏 葛均波 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期336-339,F002,共5页
目的 探索体外定向诱导人骨髓基质干细胞 (humanbonemarrowstromalcell,hMSC)内皮分化的潜能与条件。方法 采用含多种生长因子的内皮细胞支持液EGM2 MV(Clonetics)作为体外内皮化诱导剂 ,观察形态学和细胞表面免疫标志的变化 ,研究h... 目的 探索体外定向诱导人骨髓基质干细胞 (humanbonemarrowstromalcell,hMSC)内皮分化的潜能与条件。方法 采用含多种生长因子的内皮细胞支持液EGM2 MV(Clonetics)作为体外内皮化诱导剂 ,观察形态学和细胞表面免疫标志的变化 ,研究hMSC体外内皮化的条件和诱导效果。结果 经 2 5 %EGM 2 MV诱导后 ,细胞生长良好 ,在多种生长因子的刺激下 ,原先长梭形的细胞缩短 ,出现鹅卵石样形态。诱导培养 10d后 ,经流式细胞学检测 ,内皮干细胞标志CD133阳性率明显升高 ,基质干细胞标志CD10 6阳性率下降。结论 hM SC具有向血管内皮细胞分化的潜能。利用含有多种生长因子的内皮细胞支持液EGM2 MV ,可在体外诱导hMSC向内皮细胞分化。本研究为利用自体MSC移植重建心脏血运提供实验依据。 展开更多
关键词 定向诱导 人骨髓干细胞 内皮化 内皮细胞 表面标志
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骨髓基质干细胞与冻干脱矿骨基质材料体外附着的实验研究 被引量:4
14
作者 阎俏梅 翁雨来 +3 位作者 崔磊 刘伟 张富强 曹谊林 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2003年第2期98-101,共4页
目的 :研究骨髓基质干细胞 (bonemarrowstromalcells,BMSCs)经诱导、扩增后与冻干脱矿骨基质 (freeze -drieddemineralizedbonematrix ,fdDBM)的相容性及体外附着规律 ,为进一步体内回植提供研究基础。方法 :抽取成年犬骨髓 ,用全骨髓... 目的 :研究骨髓基质干细胞 (bonemarrowstromalcells,BMSCs)经诱导、扩增后与冻干脱矿骨基质 (freeze -drieddemineralizedbonematrix ,fdDBM)的相容性及体外附着规律 ,为进一步体内回植提供研究基础。方法 :抽取成年犬骨髓 ,用全骨髓培养法获取单核细胞 ,经条件培养液体外诱导、扩增后 ,以不同浓度接种于制备的fdDBM上 ,通过倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞与材料的附着情况并以MTT实验了解适宜的接种浓度。结果 :当接种密度为 1.0× 10 6/cm2 时 ,细胞与支架材料之间有最大附着量。结论 :BMSCs能在fdDBM上粘附并生长 ,相容性良好 ,是理想的骨组织工程支架材料。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 冻干脱矿骨 相容性 附着 骨组织工程
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兔骨髓基质细胞体外成骨分化鉴定及与煅烧骨复合培养的实验研究 被引量:4
15
作者 杨成林 毕郑钢 +3 位作者 王玉学 祁权 付春江 陶天遵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第3期329-332,共4页
目的研究兔骨髓基质细胞体外向成骨细胞分化的生物学特性及其与牛煅烧骨体外复合培养的生物相容性。方法将体外培养1周的兔骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化,于1、2、4周时提取RNA,采用RTPCR技术检测ALP和I型胶原mRNA表达,并对培养2周的... 目的研究兔骨髓基质细胞体外向成骨细胞分化的生物学特性及其与牛煅烧骨体外复合培养的生物相容性。方法将体外培养1周的兔骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化,于1、2、4周时提取RNA,采用RTPCR技术检测ALP和I型胶原mRNA表达,并对培养2周的细胞行VonKossa染色观察钙结节形成;另制备细胞煅烧骨复合物,继续培养1、7、14d后取出,扫描电镜观察及X射线衍射仪检测。结果体外诱导培养2、4周后,兔骨髓基质细胞成功表达ALT和I型胶原,VonKossa染色可见钙结节形成。扫描电镜及X射线衍射分析证实细胞在煅烧骨表面大量贴附成活,14d后细胞铺满支架表面,合成并分泌胶原纤维及钙盐。结论兔骨髓基质细胞体外可成功向成骨细胞诱导分化,成骨特性表达佳;与牛煅烧骨体外复合培养显示良好的生物相容性。 展开更多
关键词 骨髓细胞 成骨细胞 煅烧骨 生物相容性 骨髓细胞 复合培养 牛煅烧骨 成骨 分化鉴定 PCR技术检测 实验研 细胞诱导分化 mRNA表达
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体外诱导骨髓基质干细胞向内皮细胞分化的实验研究(英文) 被引量:1
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作者 杨立信 徐志云 +2 位作者 张宝仁 黄盛东 刘延玲 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1300-1304,共5页
目的:探讨成体骨髓基质干细胞体外定向诱导分化为内皮细胞的可行性,为心血管组织工程提供新的种子细胞来源。方法:骨髓穿刺抽取绵羊骨髓液,密度梯度离心法获取骨髓单个核细胞,通过贴壁培养纯化骨髓基质干细胞。以含EGF、bFGF、IGF和肝素... 目的:探讨成体骨髓基质干细胞体外定向诱导分化为内皮细胞的可行性,为心血管组织工程提供新的种子细胞来源。方法:骨髓穿刺抽取绵羊骨髓液,密度梯度离心法获取骨髓单个核细胞,通过贴壁培养纯化骨髓基质干细胞。以含EGF、bFGF、IGF和肝素的M199培养液培养原代细胞,并以VEGF诱导骨髓基质干细胞向内皮细胞分化。通过CD34、CD31流式细胞仪分析,免疫组化CD34、CD31、Ⅷ因子相关抗原染色鉴定内皮细胞,UEA结合实验及NO含量测定评价内皮细胞功能。结果:骨髓基质于细胞表达α-SMA,不表达CD34和CD31。体外定向诱导2周后分化为内皮细胞,呈梭形,表达CD34和CD31及Ⅷ因子相关抗原,UEA结合试验阳性,并具有分泌NO的功能。结论:体外培养条件下骨髓基质干细胞能够分化为内皮细胞,并具有成熟内皮细胞的生物学特性和功能。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 内皮细胞 实验 细胞分化 心血管 组织工程
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大鼠骨髓基质干细胞的改良培养方法及Hoechst体外标记研究 被引量:6
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作者 袁斌 马樱 +2 位作者 闫铭 叶正旭 罗卓荆 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期61-63,共3页
目的:改良大鼠骨髓基质干细胞全骨髓贴壁培养法,并进行Hoechst体外标记初步研究。方法:采用改良全骨髓贴壁法分离扩增大鼠骨髓基质干细胞,以MTT比色实验观察细胞生长状态并绘制生长曲线,行体外诱导向成骨细胞及脂肪细胞分化,以流式细胞... 目的:改良大鼠骨髓基质干细胞全骨髓贴壁培养法,并进行Hoechst体外标记初步研究。方法:采用改良全骨髓贴壁法分离扩增大鼠骨髓基质干细胞,以MTT比色实验观察细胞生长状态并绘制生长曲线,行体外诱导向成骨细胞及脂肪细胞分化,以流式细胞术检测细胞表面抗原。以Hoechst体外标记大鼠骨髓基质干细胞,荧光显微镜下计数并观察Hoechest对细胞生长状态的影响。结果:改良全骨髓贴壁培养法能够在较短时间内获得纯化并具备高活性的骨髓基质干细胞,并成功诱导其分化为成骨细胞及脂肪细胞。流式细胞术检测显示细胞表面CD29、CD90、CD44均为阳性,CD45、CD34均为阴性。荧光显微镜观察Hoechst能够在体外成功标记骨髓基质干细胞,并对细胞的生长无明显影响。结论:经改良后的全骨髓贴壁培养法是获得纯化骨髓基质干细胞的一种更为简捷、高效、经济的途径,Hoechst可作为体外标记大鼠骨髓基质干细胞的标记物。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 全骨髓贴壁培养法 诱导分化 Hoechst标记
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YAP介导的能量代谢参与基质刚度调控的间充质干细胞成骨向分化
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作者 纳静 杨智杰 +6 位作者 石秋生 李驰宇 刘宇 宋亚欣 李心杨 樊瑜波 郑丽沙 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期191-191,共1页
目的细胞外基质刚度等微环境生物物理因素可调节干细胞的分化,而能量代谢对于干细胞谱系选择至关重要。本研究旨在探究细胞外基质刚度如何调节能量代谢来决定间充质干细胞的命运。方法采用不同刚度的聚丙烯酰胺水凝胶培养间充质干细胞,... 目的细胞外基质刚度等微环境生物物理因素可调节干细胞的分化,而能量代谢对于干细胞谱系选择至关重要。本研究旨在探究细胞外基质刚度如何调节能量代谢来决定间充质干细胞的命运。方法采用不同刚度的聚丙烯酰胺水凝胶培养间充质干细胞,通过能量代谢分析,转录组测序和Western blotting等方法,分析细胞代谢活性及相关基因和蛋白的表达;使用超分辨成像,活细胞成像,透射电镜成像和图像三维重构等方法分析线粒体形态和细胞骨架等的变化。结果与软基底相比,硬基底显著促进间充质干细胞的糖酵解、氧化磷酸化功能,并增强抗氧化能力。硬基底通过增加线粒体融合蛋白1和2的表达以及抑制动力蛋白相关蛋白1的活性来促进线粒体融合,从而促进成骨。力敏感蛋白YAP通过影响糖酵解、谷氨酰胺代谢、线粒体动力学和线粒体生物合成,进而调节刚度介导的成骨分化。此外,糖酵解反过来通过细胞骨架张力介导的细胞核形变来影响YAP活性。结论能量代谢可响应细胞外基质的刚度,并通过YAP将力学信号和能量代谢连接起来,促进间充质干细胞的成骨分化。这为力学调控干细胞命运提供了新的见解,并为骨组织工程支架的设计提供了重要的依据。 展开更多
关键词 氧化磷酸化功能 间充干细胞 细胞 聚丙烯酰胺水凝胶 糖酵解 成骨分化 生物物理 细胞骨架
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脂肪干细胞基质胶在糖尿病创面治疗中的研究进展
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作者 任永恒(综述) 苗春雷 +1 位作者 白南 陈远征(审校) 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第1期98-103,共6页
随着糖尿病发病率的增加,由慢性持续性高血糖所引起的难愈性创面长期困扰着糖尿病患者。脂肪细胞外基质/基质血管组分凝胶(SVF-gel)中因含有高度浓缩的细胞外基质和基质血管组分(SVF),在为细胞及细胞因子功能的发挥提供最适微环境的同时... 随着糖尿病发病率的增加,由慢性持续性高血糖所引起的难愈性创面长期困扰着糖尿病患者。脂肪细胞外基质/基质血管组分凝胶(SVF-gel)中因含有高度浓缩的细胞外基质和基质血管组分(SVF),在为细胞及细胞因子功能的发挥提供最适微环境的同时,具有促进创面血管新生、抑制炎症反应和刺激上皮细胞增殖分化等功能,最终达到修复难愈性创面的目的。文章主要就SVF胶的制备、成分以及在糖尿病创面治疗中的机制和应用进行综述。 展开更多
关键词 SVF胶 细胞 脂肪干细胞 糖尿病创面
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体外定向诱导人骨髓间质干细胞分化为成骨细胞的研究 被引量:23
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作者 张丽蓉 夏文杰 +4 位作者 项鹏 陈振光 张秀明 李艳 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期745-748,I001,共5页
目的 :建立体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为成骨细胞的模型。方法 :采用Ficoll-Paque淋巴细胞分离液分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达 ,应用地塞米松、β -甘油磷酸钠、vitaminC定向诱导MSC分化为... 目的 :建立体外定向诱导成人骨髓间质干细胞 (MSC)分化为成骨细胞的模型。方法 :采用Ficoll-Paque淋巴细胞分离液分离成人MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达 ,应用地塞米松、β -甘油磷酸钠、vitaminC定向诱导MSC分化为成骨细胞 ,检测碱性磷酸酶 (AP)活性、钙沉积、骨桥蛋白的表达鉴定成骨细胞 ,比较P3和P10代MSC成骨分化的能力。结果 :MSC在体外扩增原代可获得 (5 - 6 )× 10 5个细胞 ,10代可获得 2× 10 10个细胞。流式细胞仪检测结果显示CD2 9、CD4 4、CD5 9、CD10 5、CD16 6表达阳性 ,CD11a、CD14、CD33、CD34、CD4 5、CD38、CD80、CD86、CD117表达为阴性。加入成骨诱导剂 ,细胞形态发生变化 ,AP活性增强 ,骨桥蛋白表达阳性 ,钙沉积逐渐出现。P3和P10代的MSC均有良好的分化为成骨细胞的能力。结论 :成人骨髓间质干细胞在体外可分化为成骨细胞。 展开更多
关键词 定向诱导 骨髓间干细胞 成骨细胞 骨组织工程
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