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玉米陈化关键酶基因Zmlox-2的RNA干扰载体的构建%
被引量：
3
1
作者
韩颖
赵寿经
+2 位作者
杨瑜
孙尧
王乐
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期136-141,共6页
脂肪酸氧化酶(LOX)催化不饱和脂肪酸过氧化反应,导致玉米(Zea mays L.)种子储藏品质的下降.为抑制玉米陈化关键酶基因Zmlox-2的表达,依据RNA干扰原理,针对玉米Zmlox-2基因进行克隆,采用重组PCR及酶切连接技术成功构建了Zmlox-2基因的RN...
脂肪酸氧化酶(LOX)催化不饱和脂肪酸过氧化反应,导致玉米(Zea mays L.)种子储藏品质的下降.为抑制玉米陈化关键酶基因Zmlox-2的表达,依据RNA干扰原理,针对玉米Zmlox-2基因进行克隆,采用重组PCR及酶切连接技术成功构建了Zmlox-2基因的RNA干扰植物表达载体,并将重组载体pRI101-on-Zmlox-2-RNAi通过热激转化法转化到根癌农杆菌中.实验结果表明Zmlox-2基因的RNA干扰表达载体构建正确,这为下一步诱导遗传转化、探索陈化酶基因的干扰表达效果奠定了理论和实验基础.
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关键词
生物工程
陈化
RNA
干扰表达载体
重组PCR
脂肪酸氧化酶
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职称材料
萝卜过氧化物酶RNA干扰载体的构建及鉴定
被引量：
5
2
作者
杨少华
王丽
+1 位作者
王一帆
王林嵩
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期147-150,共4页
萝卜过氧化物酶在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要作用。利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究酶功能已日渐成熟。本文根据植物hpRNA(hairpin RNA)的原理,以萝卜过氧化物酶基因rsprx1序列为靶目标,选择r...
萝卜过氧化物酶在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要作用。利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究酶功能已日渐成熟。本文根据植物hpRNA(hairpin RNA)的原理,以萝卜过氧化物酶基因rsprx1序列为靶目标,选择rsprx1的保守区作为构建RNAi序列,借助中间克隆载体,经过3次亚克隆,最后形成含rsprx1-RNAi表达盒的双元表达载体pART27-Y2,并转入农杆菌EHA105。
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关键词
萝卜
过氧化物酶
RNA
干扰
双元
表达
载体
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职称材料
油菜BnSGS3基因克隆及转基因拟南芥病毒抗性
3
作者
陈泉
王杰
+2 位作者
侯明生
刘胜毅
蔡丽
《中国油料作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期512-519,共8页
为阐明甘蓝型油菜BnSGS3抗病毒功能,用5′-RACE和巢氏PCR方法从油菜中克隆了BnSGS3。该基因全长2638bp,包含4个内含子和1个1824bp的完整开放阅读框。序列对比发现,BnSGS3与其他SGS3基因同源性在58.9%～97.5%之间。构建BnSGS3过表达载体...
为阐明甘蓝型油菜BnSGS3抗病毒功能,用5′-RACE和巢氏PCR方法从油菜中克隆了BnSGS3。该基因全长2638bp,包含4个内含子和1个1824bp的完整开放阅读框。序列对比发现,BnSGS3与其他SGS3基因同源性在58.9%～97.5%之间。构建BnSGS3过表达载体（BnSGS3-Ov）和干扰表达载体（BnSGS3-Si）,通过浸花（Floral-dip）法转化拟南芥,经除草剂筛选及PCR检测,获得2种转基因拟南芥各30株。拟南芥接种黄瓜花叶病毒（CMV）的抗性鉴定显示,转BnSGS3-Ov植株发病轻,株型基本正常,后期能正常开花结籽,对CMV表现中抗;而转BnSGS3-Si植株发病重,不能正常开花结籽。接种油菜花叶病毒（YoMV）后,2种转基因和非转基因拟南芥均对YoMV表现感病,说明BnSGS3对CMV有一定抗性,但对YoMV无明显抗性。
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关键词
BnSGS3
序列分析
过
表达
载体
干扰表达载体
黄瓜花叶病毒
油菜花叶病毒
抗性鉴定
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职称材料
题名
玉米陈化关键酶基因Zmlox-2的RNA干扰载体的构建%
被引量：
3
1
作者
韩颖
赵寿经
杨瑜
孙尧
王乐
机构
吉林大学生物与农业工程学院
长春工业大学化学与生命科学学院
出处
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期136-141,共6页
基金
吉林省科技发展计划项目(20130102041JC)
吉林省教育厅科学技术研究基金资助项目(吉教科合字[2012]376)~~
文摘
脂肪酸氧化酶(LOX)催化不饱和脂肪酸过氧化反应,导致玉米(Zea mays L.)种子储藏品质的下降.为抑制玉米陈化关键酶基因Zmlox-2的表达,依据RNA干扰原理,针对玉米Zmlox-2基因进行克隆,采用重组PCR及酶切连接技术成功构建了Zmlox-2基因的RNA干扰植物表达载体,并将重组载体pRI101-on-Zmlox-2-RNAi通过热激转化法转化到根癌农杆菌中.实验结果表明Zmlox-2基因的RNA干扰表达载体构建正确,这为下一步诱导遗传转化、探索陈化酶基因的干扰表达效果奠定了理论和实验基础.
关键词
生物工程
陈化
RNA
干扰表达载体
重组PCR
脂肪酸氧化酶
Keywords
bioengineering
aging
RNA interference expression vector
recombinant PCR
lipoxygenase
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
萝卜过氧化物酶RNA干扰载体的构建及鉴定
被引量：
5
2
作者
杨少华
王丽
王一帆
王林嵩
机构
河南师范大学生命科学学院
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期147-150,共4页
基金
国家自然科学基金(30570135)
国家大学生创新性实验计划(081047609)
河南省生物化学与分子生物学重点学科
文摘
萝卜过氧化物酶在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要作用。利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究酶功能已日渐成熟。本文根据植物hpRNA(hairpin RNA)的原理,以萝卜过氧化物酶基因rsprx1序列为靶目标,选择rsprx1的保守区作为构建RNAi序列,借助中间克隆载体,经过3次亚克隆,最后形成含rsprx1-RNAi表达盒的双元表达载体pART27-Y2,并转入农杆菌EHA105。
关键词
萝卜
过氧化物酶
RNA
干扰
双元
表达
载体
Keywords
Radish
Peroxidase
RNAi dual expression vector
分类号
S631.1 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
油菜BnSGS3基因克隆及转基因拟南芥病毒抗性
3
作者
陈泉
王杰
侯明生
刘胜毅
蔡丽
机构
华中农业大学植物科学技术学院
重庆市万州区小周镇农业服务中心
中国农业科学院油料作物研究所
出处
《中国油料作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期512-519,共8页
基金
国家自然科学基金(31201500)
国家公益性行业(农业)科研专项(201303028)
文摘
为阐明甘蓝型油菜BnSGS3抗病毒功能,用5′-RACE和巢氏PCR方法从油菜中克隆了BnSGS3。该基因全长2638bp,包含4个内含子和1个1824bp的完整开放阅读框。序列对比发现,BnSGS3与其他SGS3基因同源性在58.9%～97.5%之间。构建BnSGS3过表达载体（BnSGS3-Ov）和干扰表达载体（BnSGS3-Si）,通过浸花（Floral-dip）法转化拟南芥,经除草剂筛选及PCR检测,获得2种转基因拟南芥各30株。拟南芥接种黄瓜花叶病毒（CMV）的抗性鉴定显示,转BnSGS3-Ov植株发病轻,株型基本正常,后期能正常开花结籽,对CMV表现中抗;而转BnSGS3-Si植株发病重,不能正常开花结籽。接种油菜花叶病毒（YoMV）后,2种转基因和非转基因拟南芥均对YoMV表现感病,说明BnSGS3对CMV有一定抗性,但对YoMV无明显抗性。
关键词
BnSGS3
序列分析
过
表达
载体
干扰表达载体
黄瓜花叶病毒
油菜花叶病毒
抗性鉴定
Keywords
Bn SGS3
Sequence analyses
Over-expressing vector
Interfering vector
Cucumber mosaic virus（CMV）
Youcai mosaic virus（Yo MV）
Resistance identification
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
玉米陈化关键酶基因Zmlox-2的RNA干扰载体的构建%
韩颖
赵寿经
杨瑜
孙尧
王乐
《华南理工大学学报（自然科学版）》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
萝卜过氧化物酶RNA干扰载体的构建及鉴定
杨少华
王丽
王一帆
王林嵩
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
油菜BnSGS3基因克隆及转基因拟南芥病毒抗性
陈泉
王杰
侯明生
刘胜毅
蔡丽
《中国油料作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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职称材料
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