干扰素调节因子7(IRF7)与系统性硬化症关系研究进展 被引量：2

1

作者 闭雄杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期2686-2688,F0003,F0004,共5页

系统性硬化症(SSc)是一种以血管病变、皮肤和内脏纤维化、免疫调节紊乱为特征的致死风险高的自身免疫性疾病,其首要死因是肺纤维化和肺动脉高压。如何破解SSc纤维化难题,是降低SSc患者死亡率的关键。目前,SSc病因尚不清楚,尚无有效的治... 系统性硬化症(SSc)是一种以血管病变、皮肤和内脏纤维化、免疫调节紊乱为特征的致死风险高的自身免疫性疾病,其首要死因是肺纤维化和肺动脉高压。如何破解SSc纤维化难题,是降低SSc患者死亡率的关键。目前,SSc病因尚不清楚,尚无有效的治疗方案。近年来研究表明,Ⅰ型干扰素(IFN)在SSc纤维化的发病中起重要作用,而IRF7作为Ⅰ型IFN的最主要调节因子参与Ⅰ型IFN诱导基因的转录调控及促进单核/巨噬细胞的表达和TGF-β信号转导,可能参与了SSc发病中纤维化的形成。 展开更多

关键词 干扰素 系统性硬化症 干扰素调节因子7

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干扰素调节因子-7(IRF-7)对肿瘤细胞凋亡的影响 被引量：1

2

作者 高锋 ZHANG Lu-rong Underhill Charles B 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期180-182,共3页

目的 :研究干扰素调节因子 7(Interferonregulatorfactor 7,IRF 7)对部分人肿瘤细胞凋亡的影响 ,探讨IRF 7抑制肿瘤生长的机制。方法 :将IRF 7的cDNA转染到人前列腺癌细胞 (TSU)和乳腺癌细胞 (MDA4 35 )中 ,采用Westernblot检测转基因... 目的 :研究干扰素调节因子 7(Interferonregulatorfactor 7,IRF 7)对部分人肿瘤细胞凋亡的影响 ,探讨IRF 7抑制肿瘤生长的机制。方法 :将IRF 7的cDNA转染到人前列腺癌细胞 (TSU)和乳腺癌细胞 (MDA4 35 )中 ,采用Westernblot检测转基因细胞的caspase 3和Bax表达的变化 ;ELISA测定细胞裂解液中Bcl 2的含量 ,与转染空载体的对照组细胞进行比较。结果 :TSU和MDA4 35细胞转染IRF 7基因后 ,caspase 3和Bax的表达均增高 ,而Bcl 2的含量下降。结论 :干扰素调节因子 7(IRF 7)可能诱导肿瘤细胞出现凋亡 ,从而抑制肿瘤生长。 展开更多

关键词 干扰素调节因子-7 肿瘤细胞 细胞凋亡

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肝细胞中固有干扰素调节因子7的表达及其抗病毒作用 被引量：4

3

作者 齐月 金清龙 +1 位作者 温晓玉 牛俊奇 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期183-186,F0002,共5页

目的:检测肝细胞中固有表达的干扰素调节因子7(IRF7)在免疫过程中的作用,揭示IRF7固有表达对肝细胞抵御病毒感染的影响。方法:以原代肝细胞、永生化肝细胞HuS-E/2以及肝肿瘤细胞株HuH-7细胞作为研究对象,利用仙台病毒(SV)感染原代肝细胞... 目的:检测肝细胞中固有表达的干扰素调节因子7(IRF7)在免疫过程中的作用,揭示IRF7固有表达对肝细胞抵御病毒感染的影响。方法:以原代肝细胞、永生化肝细胞HuS-E/2以及肝肿瘤细胞株HuH-7细胞作为研究对象,利用仙台病毒(SV)感染原代肝细胞和HuH-7细胞,以RT-PCR法检测IFNα1、IFNβ、IFNλ3及视黄酸诱导基因蛋白(RIG-I)的诱导表达,以IRF7显性负性突变体表达载体pcDNA3-7DN转染HuS-E/2细胞,RT-PCR法及实时定量PCR检测上述基因的诱导变化。IRF7表达载体pcDNA3-IRF7转染HuH-7细胞后,进行2a型HCV病毒株JFH1感染,间接免疫荧光法检测HCV感染情况。结果:SV感染12 h内,HuH-7细胞中未检测到明显的IFNα1、IFNβ、IFNλ3和RIG-I的诱导表达;而在SV感染早期(3 h),原代肝细胞中即可检测到上述基因的mRNA条带。IRF7功能受到抑制后,RT-PCR结果显示SV感染的肝细胞中上述基因表达在感染早期的mRNA条带灰度降低;实时定量PCR可见SV感染3 h内,上述基因mRNA诱导表达水平均显著降低(P<0.001)。异位表达IRF7的HuH-7细胞中JFH1感染后未检测到明显的HCV信号。结论:肝细胞中固有IRF7的表达与细胞感染后的免疫反应密切相关,对于防御病毒感染起到重要作用。 展开更多

关键词 干扰素调节因子7 肝细胞 病毒感染 免疫反应

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鸡干扰素调节因子7的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量：3

4

作者 崔鹏飞 邓国华 +2 位作者 韦良孟 焦培荣 廖明 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第4期1-4,共4页

为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT-PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a-chIRF7。将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil)BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60ku。... 为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT-PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a-chIRF7。将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil)BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60ku。将纯化的重组蛋白免疫接种小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA测定血清抗体滴度在1∶51 200以上,IFA检测结果显示制备的鼠抗chIRF7蛋白多抗能够与AIV刺激的CEF细胞内的chIRF7蛋白发生特异性反应,表明通过原核表达系统表达的重组蛋白rchIRF7具有很好的免疫原性,以其制备的鼠抗chIRF7蛋白多克隆抗体滴度高、特异性好。 展开更多

关键词 鸡干扰素调节因子7 原核表达 多克隆抗体

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HBV对健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞Toll样受体9、干扰素调节因子7、干扰素α表达的影响 被引量：3

5

作者 彭建平 孙克伟 +1 位作者 银思涵 伍玉南 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第5期894-898,共5页

目的观察HBV对体外培养的健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)Toll样受体(TLR)9、干扰素调节因子(IRF)7、干扰素(IFN)α表达的影响。方法体外培养Hep G 2.2.15细胞,收集各孔Hep G 2.2.15培养上清,超离心HBV病毒颗粒,PCR荧光探针法检... 目的观察HBV对体外培养的健康产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)Toll样受体(TLR)9、干扰素调节因子(IRF)7、干扰素(IFN)α表达的影响。方法体外培养Hep G 2.2.15细胞,收集各孔Hep G 2.2.15培养上清,超离心HBV病毒颗粒,PCR荧光探针法检测HBV DNA浓度。将培养第7天的pDC与不同载量的HBV(1×105拷贝/ml、1×106拷贝/ml、1×107拷贝/ml和空白对照)共培养24 h。随后每组均加入终浓度为2μg/ml的Cp G ODN 2216继续培养24 h。Real Time-PCR检测pDC中TLR9、IRF7mRNA的表达,Western Blot检测TLR9、IRF7蛋白表达,ELISA法测IFNα水平。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验;对HBV DNA拷贝数取常用对数,相关指标与HBV DNA的常用对数值用Pearson直线相关分析法。结果HBV 1×106拷贝/ml组和1×107拷贝/ml组TLR9 mRNA、IRF7 mRNA、pDC TLR9和IRF7蛋白、IFNα的表达水平明显低于空白对照组及HBV 1×105拷贝/ml组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。HBV对pDC TLR9 mRNA、IRF7 mRNA的表达和对pDC TLR9、IRF7蛋白的表达以及对pDC培养上清液IFNα的表达均呈浓度依赖性,HBV DNA载量越高,对TLR9 mRNA、IRF7 mRNA、TLR9和IRF7蛋白、IFNα表达的抑制效果越强(r值分别为-0.729、-0.761、-0.657、-0.703、-0.803,P值均<0.05)。结论 HBV体外干预后,正常pDC TLR9、IRF7 mRNA及蛋白表达下降,从而导致其下游IFNα的分泌减少。HBV能抑制正常pDC功能,导致HBV持续感染。 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 树突细胞 TOLL样受体9 干扰素调节因子7 干扰素Α

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鸡传染性支气管炎病毒MM41株感染对干扰素调节因子7的影响 被引量：2

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作者 何怡宁 戴锦龙 +4 位作者 谢智文 曹艳杰 韦平 韦天超 磨美兰 《中国家禽》 北大核心 2016年第15期15-20,共6页

为探讨鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染对天然免疫关键分子干扰素调节因子7（IRF7）的影响，为IBV致病及免疫机制研究提供理论依据，应用实时荧光定量PCR和West-ernblot技术检测了IBV感染鸡气管和肾脏中鹏F7mRNA和蛋白表达水平，并用... 为探讨鸡传染性支气管炎病毒（IBV）感染对天然免疫关键分子干扰素调节因子7（IRF7）的影响，为IBV致病及免疫机制研究提供理论依据，应用实时荧光定量PCR和West-ernblot技术检测了IBV感染鸡气管和肾脏中鹏F7mRNA和蛋白表达水平，并用免疫组化方法观察了IRF7在气管和肾脏中的定位，同时检测IBV载量及蛋白的表达。结果表明，IBV感染后气管中馏F7mRNA明显上调并在接种后3～5d（3-5dpi）显著上调（P〈0．05），分别上调13．42和6．16倍，蛋白水平在5和11dpi明显高于对照组，5～8dpi核转位明显，肾脏中侬F7mRNA仅在8dpi显著上调2．15倍（P〈0．05），蛋白水平在5和8dpi明显高于对照组，8dpi核转位明显。气管中IBV载量在1～11dpi迅速上升，5dpi达到峰值，肾脏中8dpi达到峰值。IRF7的表达和活化与IBV含量呈一致性。研究表明，IBVM41株感染后上调并激活了气管和肾脏中的IRF7，使其发生核转位，IRF7在抗IBV天然免疫反应中具有重要作用，气管和肾脏中的IRF7免疫应答存在一定差异性。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 干扰素调节因子7 天然免疫

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稳定表达猪干扰素调节因子7的ST细胞株的建立

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作者 陈恒 徐磊 +6 位作者 宁蓬勃 郭抗抗 何雷 林鸷 吕亚辉 林青 张彦明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期760-763,共4页

干扰素调节因子(IRF)在抗病毒感染中具有重要作用,为构建稳定表达猪IRF7(pIRF7)的猪睾丸细胞系(ST),本研究从猪淋巴细胞中扩增获得pIRF7基因,将其插入pEGFP-C3载体中构建重组表达质粒pEGFP-pIRF7。并转染于ST细胞中,通过G418加压筛选及... 干扰素调节因子(IRF)在抗病毒感染中具有重要作用,为构建稳定表达猪IRF7(pIRF7)的猪睾丸细胞系(ST),本研究从猪淋巴细胞中扩增获得pIRF7基因,将其插入pEGFP-C3载体中构建重组表达质粒pEGFP-pIRF7。并转染于ST细胞中,通过G418加压筛选及细胞纯化获得G418抗性ST细胞株(STA1)。RT-PCR和western blot检测结果表明,STA1细胞株能够稳定表达重组pIRF7;而且以聚肌胞刺激STA1细胞可以观察到表达的pIRF7在细胞内具有核转位能力,该项研究为进一步研究猪瘟病毒对pIRF7的作用奠定基础。 展开更多

关键词 猪干扰素调节因子7 稳定细胞系 核转位

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红嘴鸥IRF7基因克隆与生物信息学分析

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作者 王一涵 张宏莉 +4 位作者 张慧 马俊蕊 项勋 段纲 常华 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期513-521,共9页

【目的】探究红嘴鸥(Larus ridibundus)干扰素调节因子7(interferon regulatory factor 7,IRF7)基因的相关信息,为研究IRF7蛋白在抗病毒反应中的功能提供依据。【方法】克隆IRF7基因,运用MegAlign工具和MEGA 11.0软件分析其序列,运用Rar... 【目的】探究红嘴鸥(Larus ridibundus)干扰素调节因子7(interferon regulatory factor 7,IRF7)基因的相关信息,为研究IRF7蛋白在抗病毒反应中的功能提供依据。【方法】克隆IRF7基因,运用MegAlign工具和MEGA 11.0软件分析其序列,运用Rare Codon Caltor工具、ProtParam工具、NetNGlyc 1.0工具、NetPhos 3.1工具、TMHMM 2.0工具、SignalP 4.1工具、ProtScale工具、PSORT Prediction软件、SOPMA和SWISS-MODEL软件分析其编码蛋白的稀有密码子特征、理化性质、N-糖基化位点、磷酸化位点、跨膜区域、信号肽、亲水性、疏水性、亚细胞定位、二级结构和三级结构。【结果】红嘴鸥与三趾鸥(Rissa tridactyla)亲缘关系最近,IRF7基因长度为1242 bp,IRF7是亲水性蛋白,不属于跨膜蛋白或分泌蛋白,其分子质量约为46 ku,主要存在于细胞核,无信号肽和跨膜结构域。IRF7二级结构主要由无规则卷曲构成,其三级结构与翻石鹬(Arenaria interpres)IRF7蛋白(模型蛋白)的相似性为78.73%。【结论】IRF7基因的保守性较差。 展开更多

关键词 红嘴鸥 干扰素调节因子7 克隆 生物信息学分析 病毒防御

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干扰素调节因子5(IRF5)调控小鼠骨髓源性巨噬细胞的极化 被引量：7

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作者 孙康 瞿建国 +6 位作者 陈吉祥 党胜春 何宋兵 张进 谢嵘 王韵 张建新 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期168-173,共6页

目的诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞极化为M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞,检测干扰素调节因子5(IRF5)在M1型和M2型巨噬细胞中的表达差异,并用IRF5小干扰RNA(IRF5 siRNA)沉默巨噬细胞中IRF5基因表达,观察其极化状态的改变。方法用γ干扰素(IFN... 目的诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞极化为M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞,检测干扰素调节因子5(IRF5)在M1型和M2型巨噬细胞中的表达差异,并用IRF5小干扰RNA(IRF5 siRNA)沉默巨噬细胞中IRF5基因表达,观察其极化状态的改变。方法用γ干扰素(IFN-γ)和脂多糖(LPS)诱导小鼠骨髓来源的巨噬细胞向M1型巨噬细胞分化,白细胞介素4(IL-4)诱导其向M2型巨噬细胞分化,实时定量PCR检测IRF5、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、精氨酸酶1(Arg1)和巨噬细胞甘露糖受体(MMR)mRNA在M1型和M2型巨噬细胞中的表达。用IRF5 siRNA转染巨噬细胞,实时定量PCR检测M1型巨噬细胞标志物IRF5、IL-12、TNF-α、i NOS和M2型巨噬细胞标志物Arg1、MMR mRNA的表达,评估其极化状态的改变。结果流式细胞术检测巨噬细胞分化率达81.7%,实时定量PCR检测显示M1型巨噬细胞中IRF5、IL-12、i NOS mRNA的表达量明显高于M2型巨噬细胞,TNF-α亦高于M2型巨噬细胞;M2型巨噬细胞中Arg1、MMR mRNA表达量同M1型巨噬细胞比较显著增高。IRF5 siRNA转染巨噬细胞后,IRF5、IL-12、TNF-α、i NOS mRNA的表达量显著降低,Arg1、MMR mRNA的表达量明显增加。Western blot法检测结果显示IRF5、IL-12、TNF-α、i NOS蛋白的表达量显著降低,Arg1、MMR蛋白的表达量明显增加,极化状态向M2型巨噬细胞偏移。结论 IRF5对巨噬细胞的极化调控有重要作用,可作为鉴别M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞的重要标志物。 展开更多

关键词 干扰素调节因子5(irf5) 小干扰RNA M1型巨噬细胞 M2型巨噬细胞 极化

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干扰素调节因子8(IRF8)在髓系细胞形成和相关疾病中的作用 被引量：1

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作者 何苗 乔静巧 +2 位作者 韩燕霞 欧剑锋 白海 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期138-142,共5页

干扰素调节因子8(IRF8)是造血细胞中表达的转录因子,调控一系列转录因子的功能和表观遗传改变。在单核吞噬细胞祖细胞中,IRF8与富含嘌呤盒1(PU.1)联合促进末端增强子的形成,诱导单核细胞相关基因包括关键的下游Krüppel样因子4(KLF4... 干扰素调节因子8(IRF8)是造血细胞中表达的转录因子,调控一系列转录因子的功能和表观遗传改变。在单核吞噬细胞祖细胞中,IRF8与富含嘌呤盒1(PU.1)联合促进末端增强子的形成,诱导单核细胞相关基因包括关键的下游Krüppel样因子4(KLF4)的表达,调节单核细胞的形成;IRF8还可以促进树突状细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞的形成;IRF8通过抑制CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的活性来抑制中性粒细胞的分化程序从而抑制中性粒细胞的产生。IRF8-/-单核吞噬细胞祖细胞不能分化成单核细胞、吞噬细胞,反而异常引起中性粒细胞产生。IRF8-/-小鼠及IRF8表达缺失或突变的人都会表现出免疫缺陷和类慢性粒细胞性疾病。本文主要概括IRF8在髓系细胞形成及在相关疾病中重要作用。 展开更多

关键词 髓系细胞发育过程 转录因子 干扰素调节因子8(irf8) 白血病 综述

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鸭干扰素因子7基因克隆及组织表达特异性分析 被引量：2

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作者 邓志超 章程 +4 位作者 罗沛 詹晓芝 江丹莉 阳佑天 刘文俊 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2606-2616,共11页

【目的】构建樱桃谷鸭干扰素调节因子7(interferon regulatory factor 7,IRF7)基因CDS区序列的真核表达载体,分析IRF7蛋白结构和生物特性,检测不同组织内IRF 7基因的表达水平,为进一步对鸭天然免疫系统开展研究奠定基础。【方法】利用RT... 【目的】构建樱桃谷鸭干扰素调节因子7(interferon regulatory factor 7,IRF7)基因CDS区序列的真核表达载体,分析IRF7蛋白结构和生物特性,检测不同组织内IRF 7基因的表达水平,为进一步对鸭天然免疫系统开展研究奠定基础。【方法】利用RT-PCR扩增樱桃谷鸭IRF 7基因的CDS区,构建真核表达质粒,利用Western blotting检测蛋白表达。使用荧光显微镜观察Poly(I∶C)对IRF7蛋白核移位的影响。对IRF 7基因序列进行核苷酸相似性比对,构建系统进化树,并通过生物信息学方法在线分析预测IRF7蛋白的分子和结构特征。实时荧光定量PCR检测不同组织中IRF 7基因的表达特异性。【结果】成功克隆樱桃谷鸭IRF 7基因CDS区,长1536 bp,共编码512个氨基酸,通过对重组质粒的真核表达,提取细胞总蛋白,Western blotting检测蛋白表达,结果显示重组蛋白大小约为110 ku。Poly(I∶C)处理鸭胚成纤维细胞促使pCMV-C-EGFP-IRF7的核内定位增加。核苷酸相似性结果显示,樱桃谷鸭与绿头鸭和鸡的IRF 7基因核苷酸序列相似性分别为99.1%和80.8%,与非洲爪蛙的相似性仅为41.8%。系统进化树结果显示,樱桃谷鸭与绿头鸭和鸡亲缘关系最近,与非洲爪蛙亲缘关系最远。IRF7蛋白表现为结构不稳定的疏水性蛋白,主要由α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲构成。IRF 7基因在各个组织内均有表达,在胆囊中表达量最高,在肺脏中表达量最低。【结论】樱桃谷鸭IRF 7基因的CDS区序列大小为1536 bp,编码512个氨基酸,IRF7蛋白为结构不稳定的疏水性蛋白,Poly(I∶C)刺激可引起IRF7发生核移位,该基因在不同组织表达差异较大。 展开更多

关键词 干扰素调节因子7(irf7) 蛋白结构 亚细胞定位

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干扰素调节因子3基因敲除对伪狂犬病病毒增殖的影响 被引量：4

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作者 张爽 樊爽爽 +7 位作者 常雯茹 丁光绪 郭瑞珍 段利芳 杜永坤 褚贝贝 杨国宇 王江 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期1253-1262,共10页

试验旨在研究敲除干扰素调节因子3 (interferon regulatory factor 3,IRF3)对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)复制的影响。使用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术建立了IRF3基因敲除PK15细胞系。通过构建重组质粒pIRF3-sgRNA,... 试验旨在研究敲除干扰素调节因子3 (interferon regulatory factor 3,IRF3)对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)复制的影响。使用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术建立了IRF3基因敲除PK15细胞系。通过构建重组质粒pIRF3-sgRNA,转染至HEK293T/17细胞,收获慢病毒并感染PK15细胞,经嘌呤霉素筛选获得多克隆细胞系,T7酶切鉴定后通过有限稀释法获得PK15-IRF3^(-/-)单克隆稳定细胞系。为验证敲除IRF3基因稳定细胞系是否构建成功,采用实时荧光定量PCR、Western blotting方法检测PRV相关基因及蛋白的表达,应用荧光显微镜和流式细胞术观察病毒复制情况并进行病毒滴度检测。结果显示,PK15-IRF3^(-/-)细胞系感染PRV-GFP后PK15-IRF3^(-/-)细胞荧光强度明显强于PK15细胞。感染PRV野毒(PRV-QXX)后PK15-IRF3^(-/-)病毒滴度明显强于PK15细胞,PRV的gE蛋白水平明显高于PK15细胞。在mRNA水平检测两种细胞中PRV TK基因的变化也得到相同的结果。进一步研究表明,在感染PRV-QXX后,PK15细胞中IFN-βmRNA会随着时间增加显著增高(P<0.05),但PK15-IRF3^(-/-)细胞中IFN-βmRNA则无明显变化。上述结果表明,敲除IRF3基因后显著促进PRV的增殖,IRF3在病毒的复制中发挥着重要作用,为伪狂犬病的防控提供了新的方法和策略。 展开更多

关键词 干扰素调节因子3 (irf3) 伪狂犬病病毒(PRV) CRISPR/Cas9

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牛病毒性腹泻病毒Npro蛋白与宿主IRF7相互作用机制的研究

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作者 曹唱唱 项安琪 +7 位作者 陈珊 王雨欣 王静 王爽 陈斐 宋厚辉 姜胜 宋泉江 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2024年第12期1222-1229,1283,共9页

本团队前期研究发现干扰素调节因子7(IRF7)参与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)在宿主细胞中的复制。为进一步研究BVDV与IRF7之间的相互作用机制,本实验经PCR扩增BVDV N^(pro)和IRF7基因后,分别构建真核表达质粒pCMV-Flag-IRF7和pCMV-HA-BVDV^(N... 本团队前期研究发现干扰素调节因子7(IRF7)参与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)在宿主细胞中的复制。为进一步研究BVDV与IRF7之间的相互作用机制,本实验经PCR扩增BVDV N^(pro)和IRF7基因后,分别构建真核表达质粒pCMV-Flag-IRF7和pCMV-HA-BVDV^(Npro),并分别经PCR和测序鉴定均正确。将pCMV-Flag-IRF7转染牛睾丸(BT)细胞后感染BVDV,24 h后分别采用western blot和RT-qPCR检测BVDV E2、IRF7蛋白的表达和BVDV 5'UTR、IRF7mRNA转录水平。结果显示,与BT细胞相比,过表达IRF7的BT细胞在感染后BVDV E2蛋白的表达水平极显著下调(P<0.001),且BVDV 5'UTR基因的转录水平极显著降低(P<0.001);与未感染BVDV的过表达IRF7组相比,感染BVDV后IRF7蛋白表达水平极显著下调(P<0.001),但IRF7 mRNA的转录水平无明显差异。进一步以MOI 0.1的BVDV感染IRF7过表达的BT细胞24 h后,采用RT-qPCR检测IRF7、IFN-α和IFN-βmRNA的转录水平。结果显示,与感染BVDV的BT细胞组相比,BVDV感染过表达IRF7的BT细胞组IRF7 mRNA的转录水平极显著上调(P<0.001)、IFN-α和IFN-βm RNA的转录水平显著上调(P<0.05),表明IRF7可通过增强下游IFN-I的表达水平抑制BVDV的复制。将pCMV-Flag-IRF7和pCMV-HA-BVDV N^(pro)质粒共转染HEK 293T细胞后,经激光共聚焦试验进一步分析BVDV N^(pro)蛋白与IRF7的相互作用关系,结果显示BVDV N^(pro)蛋白和IRF7蛋白在细胞浆中存在明显的共定位,提示二者可能在细胞浆中存在特异性相互作用。将不同剂量重组质粒pCMV-HA-BVDV N^(pro)分别转染HEK 293T后采用western blot检测,结果显示Npro蛋白可以下调IRF7蛋白的表达,且转染2μg重组质粒组中IRF7蛋白极显著下调(P<0.001)。上述结果首次证实宿主细胞可通过上调IRF7和IFN-I的表达抑制BVDV复制,BVDV的Npro蛋白与IRF7可发生特异性相互作用,并下调IRF7表达水平以拮抗宿主细胞对BVDV的抑制作用。本实验为进一步研究BVDV N^(pro)蛋白的功能奠定基础,也为BVD的防控研究提供参考依据。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 干扰素 干扰素调节因子7 相互作用 复制

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IRF7表达与系统性红斑狼疮的相关性 被引量：2

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作者 缪倩 唐元家 +3 位作者 黄新芳 钱晓霞 黄秀琴 沈南 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期111-117,共7页

探讨了干扰素调节因子7(IRF7)的表达与中国汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)的相关性.运用实时荧光定量聚合酶链式反应的方法分别测定疾病患者与正常对照组外周血IRF7mRNA的表达水平,并与血清中干扰素水平、干扰素积分以及SLEDAI积分作相关... 探讨了干扰素调节因子7(IRF7)的表达与中国汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)的相关性.运用实时荧光定量聚合酶链式反应的方法分别测定疾病患者与正常对照组外周血IRF7mRNA的表达水平,并与血清中干扰素水平、干扰素积分以及SLEDAI积分作相关性分析.结果发现,患者外周血IRF7mRNA的表达水平较正常对照组的明显增高,且其与血清中干扰素水平、干扰素积分以及SLEDAI积分均呈正相关.由此可知,IRF7表达的增高可能促使干扰素通路异常激活,从而导致系统性红斑狼疮的发生. 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 干扰素调节因子7 表达

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Smad7对TGF-β/SMAD的调节及其在肝纤维化中的作用 被引量：7

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作者 杨小艳 郑勇 《临床肝胆病杂志》 CAS 2007年第6期467-469,共3页

关键词 肝纤维化形成 SMAD蛋白 负性调节因子 SMAD7 TGF-Β 转化生长因子Β 信号传导 中间环节

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影响新梨7号组培快繁因子研究 被引量：12

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作者 高疆生 张卫芳 +1 位作者 欧勇慧 杨鹏卫 《北方果树》 2003年第3期4-6,共3页

作者研究了取材时期、材料处理、培养基及生长调节剂、光照等因子对新梨7号芽诱导、分化和生根的影响。结果表明,外植体接种最佳时间为5月份,经8-HQS处理的外植体,接种于AS+6-BA2.0mg/mL+IBA0.05mg/mL+GA30.2mg/mL+抗坏血酸0.3mg/mL的... 作者研究了取材时期、材料处理、培养基及生长调节剂、光照等因子对新梨7号芽诱导、分化和生根的影响。结果表明,外植体接种最佳时间为5月份,经8-HQS处理的外植体,接种于AS+6-BA2.0mg/mL+IBA0.05mg/mL+GA30.2mg/mL+抗坏血酸0.3mg/mL的培养基中,前期暗光,后期每天10h光照培养,有利于芽的生长增殖及减轻褐变。生根培养以1/2MS+IBA2.0mg/mL,每天14h光照培养有较高的生根率。 展开更多

关键词 新梨7号品种 香梨 早酥梨 杂交选育 组织培养 繁殖因子 培养基 生长调节剂

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半滑舌鳎IRF-7基因的全长cDNA克隆及表达分析

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作者 刘万建 史成银 +3 位作者 宋展 耿伟光 李赟 黄倢 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2012年第5期39-47,共9页

本研究克隆了半滑舌鳎干扰素调节因子7(CsIRF-7)cDNA的全长序列,并对该基因进行了结构特征分析,同时还完成了该基因在半滑舌鳎各组织中表达水平的定量分析。结果表明,CsIRF-7基因cDNA全长为1957bp,其中包含48bp的5′-UTR、1302bp的ORF和... 本研究克隆了半滑舌鳎干扰素调节因子7(CsIRF-7)cDNA的全长序列,并对该基因进行了结构特征分析,同时还完成了该基因在半滑舌鳎各组织中表达水平的定量分析。结果表明,CsIRF-7基因cDNA全长为1957bp,其中包含48bp的5′-UTR、1302bp的ORF和607bp的3′-UTR。CsIRF-7 cDNA编码一个由433个氨基酸残基组成的多肽。氨基酸序列比对结果表明,CsIRF-7多肽与脊椎动物IRF-7相似,存在高度保守的3个结构域:DNA结合域(DNA binding domain,DBD)、干扰素相关区(IRF associated domain,IAD)和丝氨酸富含区(Serine-rich domain,SRD)。全长氨基酸序列同源性分析发现,CsIRF-7与硬骨鱼类的IRF-7同源性较高,与4种硬骨鱼类的同一性和相似性分别介于48.5%～73.6%和65.4%～83.8%之间;其中与牙鲆的同一性和相似性最高,分别为73.6%和83.8%;而与哺乳类和鸟类IRF-7的同源性较低,其同一性和相似性分别仅为30.3%～32.2%和46.5%～52.5%。系统进化分析表明,CsIRF-7与硬骨鱼类的IRF-7聚为一类,并与其他脊椎动物的IRF-7和IRF-3共同组成了脊椎动物IRF-3亚家族。实时荧光定量PCR检测结果显示,CsIRF-7基因在半滑舌鳎的肝、肾、脾、血细胞、鳃、肠和心脏等7种检测的组织中均有表达,在肠中表达量最高,而在肝、鳃和血细胞中表达量相对较少。 展开更多

关键词 半滑舌鳎 干扰素调节因子7 POLY I:C 基因克隆 表达分析

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鸡IRF7原核表达及多克隆抗体制备 被引量：2

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作者 朱敏 王琳 +4 位作者 许默儒 钱琨 邵红霞 叶建强 秦爱建 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第4期76-81,共6页

为了制备鸡干扰素调节因子7(interferon regulatory fator 7,IRF7)抗体,本研究通过分离鸡的外周血淋巴细胞,抽提RNA并反转录获得鸡淋巴细胞c DNA,利用聚合酶链式反应扩增获得鸡IRF7基因(ch IRF7),将该基因克隆入原核表达载体p COLD-TF中... 为了制备鸡干扰素调节因子7(interferon regulatory fator 7,IRF7)抗体,本研究通过分离鸡的外周血淋巴细胞,抽提RNA并反转录获得鸡淋巴细胞c DNA,利用聚合酶链式反应扩增获得鸡IRF7基因(ch IRF7),将该基因克隆入原核表达载体p COLD-TF中,构建成p COLD-TF-ch IRF7原核表达质粒。将测序正确的表达质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,经0.25 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)低温诱导20 h。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白获得高效表达,大小为107 k Da。切胶免疫BALB/c小鼠,制备鼠抗鸡IRF7多克隆抗体。激光共聚焦、Western blot实验结果显示,该抗鸡IRF7多克隆抗体能与真核质粒表达的ch IRF7蛋白发生特异性反应。该抗体的成功制备为进一步研究鸡IRF7的表达调控机制奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡 干扰素调节因子7 多抗制备

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斑石鲷irf7基因克隆及其在病毒感染下的表达 被引量：1

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作者 宋煜 李开敏 +2 位作者 徐文腾 陈松林 王磊 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第2期50-57,共8页

为探究斑石鲷(Oplegnathuspunctatus)干扰素调节因子irf7在虹彩病毒(Iridovirus)感染过程中的作用机制,本研究通过PCR扩增获得了斑石鲷irf7基因CDS区序列,对其序列特征进行分析,并在组织水平和细胞水平研究该基因在病毒感染中的表达模... 为探究斑石鲷(Oplegnathuspunctatus)干扰素调节因子irf7在虹彩病毒(Iridovirus)感染过程中的作用机制,本研究通过PCR扩增获得了斑石鲷irf7基因CDS区序列,对其序列特征进行分析,并在组织水平和细胞水平研究该基因在病毒感染中的表达模式。结果显示,Opirf7基因CDS区全长为1332 bp,编码443个氨基酸的多肽,具有干扰素调节因子家族的保守结构域。荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,Opirf7基因在健康个体的不同组织中均有表达,在肝脏中表达量最高,在皮肤和肠等免疫组织中的表达量也较高。对斑石鲷腹腔注射虹彩病毒诱导抗病毒免疫反应,在组织水平检测Opirf7对病毒感染的响应模式。与对照组(0 h)相比,Opirf7在免疫组织中的表达水平有不同程度的升高。在细胞水平,建立polyI:C感染的斑石鲷脑细胞系模型,利用qRT-PCR检测Opirf7的表达变化。结果显示,poly I:C刺激后,脑细胞系Opirf7的表达量显著升高。结果表明,Opirf7在斑石鲷抗病毒病的免疫应答过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 斑石鲷 干扰素调节因子7 抗病基因 免疫反应

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骨形成蛋白7减轻葡聚糖硫酸钠诱导的大鼠结肠炎症及其机制

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作者 刘维新 周凤 +3 位作者 张绅 任益 王莹 王婷 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1084-1087,共4页

目的探讨骨形成蛋白7(BMP7)治疗葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的大鼠结肠炎症的疗效及其机制。方法健康雄性大鼠60只,随机平均分为正常对照组、DSS组(DSS诱导结肠炎症组)及DSS+BMP7组(BMP7治疗DSS诱导的结肠炎症组),每组20只。正常对照组大鼠... 目的探讨骨形成蛋白7(BMP7)治疗葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的大鼠结肠炎症的疗效及其机制。方法健康雄性大鼠60只,随机平均分为正常对照组、DSS组(DSS诱导结肠炎症组)及DSS+BMP7组(BMP7治疗DSS诱导的结肠炎症组),每组20只。正常对照组大鼠饮用灭菌水,DSS组及DSS+BMP7组大鼠每天饮用3.5%的DSS以建立肠炎模型,DSS+BMP7组隔日1次腹腔注射1 m L BMP7(0.1μg/m L)。于第0、7、14及28天各组分别处死5只大鼠,采用组织学评分方法判断炎症程度,并于第28天采用流式细胞术检测外周血中调节性T细胞(Treg)比例变化,切取结肠组织分别利用实时PCR及Western blot检测Foxp3m RNA及蛋白的表达,采用ELISA法检测血清中转化生长因子β1(TGF-β1)水平。结果第7天时炎症程度DSS+BMP7组和DSS组低于正常对照组(P<0.05),但DSS+BMP7组与DSS组相比无统计学差异(P>0.05);第14和28天时DSS+BMP7组炎症程度低于DSS组(P<0.05),第28天时DSS+BMP7组与正常对照组相比无统计学差异(P>0.05)。第28天时Treg细胞比例DSS组及DSS+BMP7组低于正常对照组,且DSS+BMP7组显著高于DSS组(P>0.05);与正常对照组相比,DSS组和DSS+BMP7组中Foxp3的表达降低,且DSS+BMP7组高于DSS组(P<0.05)。DSS组和DSS+BMP7组细胞因子TGF-β1水平低于正常对照组,且DSS+BMP7组高于DSS组(P<0.05)。结论 BMP7可能作用于Treg细胞,减轻DSS诱导的结肠炎性疾病。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白7 调节性T细胞 结肠炎 转化生长因子Β1

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