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黏病毒抗性蛋白A(MxA)通过增强干扰素刺激应答元件(ISRE)活性诱导HepG2细胞干扰素刺激基因表达
被引量：
1
1
作者
杨凯
潘颖
+4 位作者
刘萍
宇芙蓉
魏晓康
张发苏
王琴
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第8期704-709,共6页
目的研究黏病毒抗性蛋白A(MxA)对HepG2细胞Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)途径的影响。方法采用pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2细胞,免疫荧光细胞化学染色检测MxA蛋白在HepG2细胞的表达和定位,Western blot法检测MxA蛋白表达...
目的研究黏病毒抗性蛋白A(MxA)对HepG2细胞Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)途径的影响。方法采用pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2细胞,免疫荧光细胞化学染色检测MxA蛋白在HepG2细胞的表达和定位,Western blot法检测MxA蛋白表达;采用MxA小干涉RNA(si-MxA)转染HepG2细胞并以α干扰素(IFN-α)处理细胞,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞黏液病毒抗性蛋白A(MxA)、蛋白激酶R(PKR)和寡聚腺苷酸合成酶(OAS)的mRNA表达,Western blot法检测MxA、PKR、OAS、细胞信号转导子与转录激活子1(STAT1)、磷酸化的STAT1(p-STAT1)、STAT2、p-STAT2和干扰素调节因子9(IRF9)的蛋白表达。此外,pcDNA3.1-Flag-MxA与pISRE-TA-luc分别共转染至HepG2和HepG2.2.15细胞,荧光素酶活性检测干扰素刺激应答元件(ISRE)活性。结果MxA蛋白在HepG2细胞质和细胞核均有表达且细胞质表达量高于胞核。敲低HepG2细胞中MxA表达虽不影响IFN-α诱导的STAT1、p-STAT1、STAT2、p-STAT2和IRF9蛋白的表达,但显著降低抗病毒蛋白PKR和OAS的表达。过表达MxA的HepG2细胞ISRE活性增强且PKR和OAS蛋白表达增高,但这种效应却在HepG2.2.15细胞中被抑制。结论MxA通过增强JAK/STAT信号通路ISRE活性诱导抗病毒蛋白表达。
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关键词
黏病毒抗性蛋白A(MxA)
Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)
干扰素
刺激
应答
元件
(
isre
)
干扰素
刺激
基因(ISG)
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职称材料
猪圆环病毒2型基因组中干扰素刺激应答元件对体外干扰素介导的猪圆环病毒2型复制增强效应的影响
2
作者
Ramamoorthy S
邱文英
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第11期56-56,共1页
猪圆环病毒2型是猪的一种重要病原。有证据显示,使用γ-干扰素或α-干扰素对PCV-2感染细胞进行处理,可以增强体外PCV-2的复制,经鉴定干扰素刺激应答元件(ISRE)样序列存在PCV-2的基因组中。为了确定ISRE是否与病毒对IFNs的响应有关,构造...
猪圆环病毒2型是猪的一种重要病原。有证据显示,使用γ-干扰素或α-干扰素对PCV-2感染细胞进行处理,可以增强体外PCV-2的复制,经鉴定干扰素刺激应答元件(ISRE)样序列存在PCV-2的基因组中。为了确定ISRE是否与病毒对IFNs的响应有关,构造一些经ISRE序列系列突变而来的ISRE突变体。用γ-干扰素或α-干扰素对ISRE突变体感染细胞进行处理,结果显示由ISRE序列引起的相关病毒复制增强现象逐渐消失。为了确定ISRE是否是IFN介导的PCV-2复制增强的充足和必要条件,在荧光报告基因检测系统中对包含有ISRE基因启动区重复基因的野生型PCV-2及ISRE突变的PCV-2的DNA片段进行检测,分别用γ-干扰素或α-干扰素处理被报告基因结构转染的3D4/31细胞。结果显示,与经IFN处理后的ISRE突变PCV-2和野生型PCV-2样品相比,没有处理的ISRE突变PCV-2和野生型PCV-2对照有更高水平的荧光活性,表明从整个病毒基因组中移除ISRE样序列后,其活性消失。另外,无论是何种突变,用IFNs处理后启动子活性逐渐消失,这表明在调节ISRE介导的基因转录过程中还需要病毒基因组中的其它顺式元件。结论:当PCV-2 ISRE样序列存在于完整病毒中而不是分离毒株中时,其能在体外影响干扰素介导的PCV-2复制增强。
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关键词
猪圆环病毒2型
干扰素
干扰素
刺激
应答
元件
(
isre
)
复制增强
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职称材料
题名
黏病毒抗性蛋白A(MxA)通过增强干扰素刺激应答元件(ISRE)活性诱导HepG2细胞干扰素刺激基因表达
被引量：
1
1
作者
杨凯
潘颖
刘萍
宇芙蓉
魏晓康
张发苏
王琴
机构
安徽医学高等专科学校
安徽医科大学第二附属医院检验科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第8期704-709,共6页
基金
安徽省高校省级自然科学研究重大项目(KJ2020ZD68)
安徽教育厅省级教学质量工程(2020jyxm0950)。
文摘
目的研究黏病毒抗性蛋白A(MxA)对HepG2细胞Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)途径的影响。方法采用pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2细胞,免疫荧光细胞化学染色检测MxA蛋白在HepG2细胞的表达和定位,Western blot法检测MxA蛋白表达;采用MxA小干涉RNA(si-MxA)转染HepG2细胞并以α干扰素(IFN-α)处理细胞,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞黏液病毒抗性蛋白A(MxA)、蛋白激酶R(PKR)和寡聚腺苷酸合成酶(OAS)的mRNA表达,Western blot法检测MxA、PKR、OAS、细胞信号转导子与转录激活子1(STAT1)、磷酸化的STAT1(p-STAT1)、STAT2、p-STAT2和干扰素调节因子9(IRF9)的蛋白表达。此外,pcDNA3.1-Flag-MxA与pISRE-TA-luc分别共转染至HepG2和HepG2.2.15细胞,荧光素酶活性检测干扰素刺激应答元件(ISRE)活性。结果MxA蛋白在HepG2细胞质和细胞核均有表达且细胞质表达量高于胞核。敲低HepG2细胞中MxA表达虽不影响IFN-α诱导的STAT1、p-STAT1、STAT2、p-STAT2和IRF9蛋白的表达,但显著降低抗病毒蛋白PKR和OAS的表达。过表达MxA的HepG2细胞ISRE活性增强且PKR和OAS蛋白表达增高,但这种效应却在HepG2.2.15细胞中被抑制。结论MxA通过增强JAK/STAT信号通路ISRE活性诱导抗病毒蛋白表达。
关键词
黏病毒抗性蛋白A(MxA)
Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)
干扰素
刺激
应答
元件
(
isre
)
干扰素
刺激
基因(ISG)
Keywords
myxovirus resistance protein A
JAK/STAT
interferon-stimulated response element
interferon-stimulated gene(ISG)
分类号
Q279 [生物学—细胞生物学]
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R392 [医药卫生—免疫学]
Q753 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
猪圆环病毒2型基因组中干扰素刺激应答元件对体外干扰素介导的猪圆环病毒2型复制增强效应的影响
2
作者
Ramamoorthy S
邱文英
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009年第11期56-56,共1页
文摘
猪圆环病毒2型是猪的一种重要病原。有证据显示,使用γ-干扰素或α-干扰素对PCV-2感染细胞进行处理,可以增强体外PCV-2的复制,经鉴定干扰素刺激应答元件(ISRE)样序列存在PCV-2的基因组中。为了确定ISRE是否与病毒对IFNs的响应有关,构造一些经ISRE序列系列突变而来的ISRE突变体。用γ-干扰素或α-干扰素对ISRE突变体感染细胞进行处理,结果显示由ISRE序列引起的相关病毒复制增强现象逐渐消失。为了确定ISRE是否是IFN介导的PCV-2复制增强的充足和必要条件,在荧光报告基因检测系统中对包含有ISRE基因启动区重复基因的野生型PCV-2及ISRE突变的PCV-2的DNA片段进行检测,分别用γ-干扰素或α-干扰素处理被报告基因结构转染的3D4/31细胞。结果显示,与经IFN处理后的ISRE突变PCV-2和野生型PCV-2样品相比,没有处理的ISRE突变PCV-2和野生型PCV-2对照有更高水平的荧光活性,表明从整个病毒基因组中移除ISRE样序列后,其活性消失。另外,无论是何种突变,用IFNs处理后启动子活性逐渐消失,这表明在调节ISRE介导的基因转录过程中还需要病毒基因组中的其它顺式元件。结论:当PCV-2 ISRE样序列存在于完整病毒中而不是分离毒株中时,其能在体外影响干扰素介导的PCV-2复制增强。
关键词
猪圆环病毒2型
干扰素
干扰素
刺激
应答
元件
(
isre
)
复制增强
分类号
S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]
Q511.03 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
黏病毒抗性蛋白A(MxA)通过增强干扰素刺激应答元件(ISRE)活性诱导HepG2细胞干扰素刺激基因表达
杨凯
潘颖
刘萍
宇芙蓉
魏晓康
张发苏
王琴
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
1
在线阅读
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职称材料
2
猪圆环病毒2型基因组中干扰素刺激应答元件对体外干扰素介导的猪圆环病毒2型复制增强效应的影响
Ramamoorthy S
邱文英
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2009
0
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