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N端9个谷氨酸或7个天冬氨酸显著增强普鲁兰酶在大肠杆菌中表达分泌
1
作者
栗亚美
安展飞
+2 位作者
陈阿娜
杨艳坤
白仲虎
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2017年第3期11-17,共7页
各种标签被广泛应用于大肠杆菌分泌表达异源蛋白,其中最简单有效地便是氨基酸标签,尤其是带电荷氨基酸标签。为了研究N端添加不同种类和数目的带电荷氨基酸标签对普鲁兰酶(pullulanase,Ba Pul13A)在大肠杆菌中表达分泌水平的影响,构建...
各种标签被广泛应用于大肠杆菌分泌表达异源蛋白,其中最简单有效地便是氨基酸标签,尤其是带电荷氨基酸标签。为了研究N端添加不同种类和数目的带电荷氨基酸标签对普鲁兰酶(pullulanase,Ba Pul13A)在大肠杆菌中表达分泌水平的影响,构建了25株Ba Pul13A变体。实验结果表明:N端添加9个连续的谷氨酸标签,降低了mRNA的转录水平,增加了N端mRNA的稳定性,使得普鲁兰酶总酶活达到179.60 U/m L,比不添加氨基酸标签的对照菌高278.28%。N端添加7个连续的天冬氨酸标签,增强了大肠杆菌细胞内膜通透性,大量的普鲁兰酶,48.18U/m L,分泌到培养基中。通过蛋白质结构预测软件I-TASSER分析得知,N端添加不同带电荷氨基酸标签引起CBM41结构域发生变化,猜测该变化是导致Ba Pul13A变体表达分泌水平差异的主要原因。
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关键词
带电荷氨基酸标签
表达分泌
mRNA
膜通透性
蛋白结构预测
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职称材料
题名
N端9个谷氨酸或7个天冬氨酸显著增强普鲁兰酶在大肠杆菌中表达分泌
1
作者
栗亚美
安展飞
陈阿娜
杨艳坤
白仲虎
机构
江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2017年第3期11-17,共7页
基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助(JUSRP51401A)
863项目(2015AA020802)
+1 种基金
973项目(2013CB733602)
国家自然科学基金项目(31570034)
文摘
各种标签被广泛应用于大肠杆菌分泌表达异源蛋白,其中最简单有效地便是氨基酸标签,尤其是带电荷氨基酸标签。为了研究N端添加不同种类和数目的带电荷氨基酸标签对普鲁兰酶(pullulanase,Ba Pul13A)在大肠杆菌中表达分泌水平的影响,构建了25株Ba Pul13A变体。实验结果表明:N端添加9个连续的谷氨酸标签,降低了mRNA的转录水平,增加了N端mRNA的稳定性,使得普鲁兰酶总酶活达到179.60 U/m L,比不添加氨基酸标签的对照菌高278.28%。N端添加7个连续的天冬氨酸标签,增强了大肠杆菌细胞内膜通透性,大量的普鲁兰酶,48.18U/m L,分泌到培养基中。通过蛋白质结构预测软件I-TASSER分析得知,N端添加不同带电荷氨基酸标签引起CBM41结构域发生变化,猜测该变化是导致Ba Pul13A变体表达分泌水平差异的主要原因。
关键词
带电荷氨基酸标签
表达分泌
mRNA
膜通透性
蛋白结构预测
Keywords
charged-amino-acid tags
expression and secretory
mRNA
membrane permeability
protein structure prediction
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
N端9个谷氨酸或7个天冬氨酸显著增强普鲁兰酶在大肠杆菌中表达分泌
栗亚美
安展飞
陈阿娜
杨艳坤
白仲虎
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2017
0
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