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布鲁氏菌野毒株A544与疫苗株104M的差异蛋白筛选
被引量：
1
1
作者
王海艳
赵治国
+7 位作者
赵林立
刘佳
任彩霞
敖威华
马彩霞
李刚
郭文秀
陈宇飞
《中国动物检疫》
CAS
2017年第5期101-105,共5页
为给布鲁氏菌病自然感染与疫苗免疫鉴别方法的建立提供参考,采用比较蛋白质组学研究技术,以野毒株A544和疫苗株104M的菌体蛋白为研究对象,以双向电泳技术为分离手段,以基质辅助激光解吸飞行时间质谱为检测手段,利用生物学信息解析所得...
为给布鲁氏菌病自然感染与疫苗免疫鉴别方法的建立提供参考,采用比较蛋白质组学研究技术,以野毒株A544和疫苗株104M的菌体蛋白为研究对象,以双向电泳技术为分离手段,以基质辅助激光解吸飞行时间质谱为检测手段,利用生物学信息解析所得实验结果。双向电泳结果分析显示,野毒株A544和疫苗株104M之间约有20个差异蛋白点,经质谱成功鉴定了9种蛋白。通过蛋白数据库检索发现,这些蛋白主要参与了一些代谢调节等生物过程,其中有6个蛋白点在野毒株A544上高表达,3个蛋白点在疫苗株104M上高表达。
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关键词
布鲁氏菌野毒株a544
布鲁氏菌
疫苗
株
104M
差异蛋白筛选
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职称材料
布鲁氏菌野毒株A544和疫苗株104M差异蛋白的表达及抗体制备
2
作者
王海艳
赵林立
+6 位作者
赵治国
郭文秀
陈宇飞
刘佳
任彩霞
敖威华
马彩霞
《中国动物检疫》
CAS
2017年第10期60-64,共5页
选取布鲁氏菌差异蛋白部分基因序列,将其克隆到表达载体p GEX-6p-1中;经PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定,得到重组质粒p GEX-6p-1-bru;将重组质粒转化到Rosetta(DE3)感受态细胞中,用1 mmol/L异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)对转化菌进行诱...
选取布鲁氏菌差异蛋白部分基因序列,将其克隆到表达载体p GEX-6p-1中;经PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定,得到重组质粒p GEX-6p-1-bru;将重组质粒转化到Rosetta(DE3)感受态细胞中,用1 mmol/L异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)对转化菌进行诱导表达,并用表达蛋白制备多克隆抗体。结果:差异蛋白在体外获得了高效表达,表达融合蛋白分子量约为35 k D;诱导5 h后表达量最高,占菌体总蛋白的30%左右;表达蛋白能与多克隆抗体发生免疫印迹反应,证明所表达的蛋白具有良好的免疫原性。该研究结果为免疫学检测方法的建立奠定了基础。
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关键词
差异蛋白
布鲁氏菌野毒株a544
布鲁氏菌
疫苗
株
104M
表达
抗体制备
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职称材料
羊种布鲁氏菌野毒株和疫苗株的HOOF-Prints技术鉴别
3
作者
唐莉娟
刘丹
卜三平
《畜禽业》
2020年第9期18-19,共2页
目的区别羊种布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染。方法本实验根据软件DNAMAN对羊种布鲁氏菌的8个位点侧翼序列分析后,自行设计8对引物,用可变8聚核苷酸DNA指纹技术(HOOF-Prints)进行鉴别诊断。结果疫苗株M5与野毒株M43之间存在着显著的差异,...
目的区别羊种布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染。方法本实验根据软件DNAMAN对羊种布鲁氏菌的8个位点侧翼序列分析后,自行设计8对引物,用可变8聚核苷酸DNA指纹技术(HOOF-Prints)进行鉴别诊断。结果疫苗株M5与野毒株M43之间存在着显著的差异,可以从PCR产物的片段大小来进行区分。实验为以后鉴别布鲁氏菌的野毒株和疫苗株提供理论依据。
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关键词
疫苗
株
野
毒
株
布鲁氏菌
Hoof-print
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职称材料
题名
布鲁氏菌野毒株A544与疫苗株104M的差异蛋白筛选
被引量：
1
1
作者
王海艳
赵治国
赵林立
刘佳
任彩霞
敖威华
马彩霞
李刚
郭文秀
陈宇飞
机构
内蒙古出入境检验检疫局
出处
《中国动物检疫》
CAS
2017年第5期101-105,共5页
基金
国家质检总局科技计划项目"鉴别布鲁菌病自然感染动物与疫苗免疫动物检测方法的研究"(2012IK014)
文摘
为给布鲁氏菌病自然感染与疫苗免疫鉴别方法的建立提供参考,采用比较蛋白质组学研究技术,以野毒株A544和疫苗株104M的菌体蛋白为研究对象,以双向电泳技术为分离手段,以基质辅助激光解吸飞行时间质谱为检测手段,利用生物学信息解析所得实验结果。双向电泳结果分析显示,野毒株A544和疫苗株104M之间约有20个差异蛋白点,经质谱成功鉴定了9种蛋白。通过蛋白数据库检索发现,这些蛋白主要参与了一些代谢调节等生物过程,其中有6个蛋白点在野毒株A544上高表达,3个蛋白点在疫苗株104M上高表达。
关键词
布鲁氏菌野毒株a544
布鲁氏菌
疫苗
株
104M
差异蛋白筛选
Keywords
Brucella wild strain
a544
Brucella vaccine strain 104M
screening of differential proteins
分类号
S852.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
布鲁氏菌野毒株A544和疫苗株104M差异蛋白的表达及抗体制备
2
作者
王海艳
赵林立
赵治国
郭文秀
陈宇飞
刘佳
任彩霞
敖威华
马彩霞
机构
内蒙古出入境检验检疫局
出处
《中国动物检疫》
CAS
2017年第10期60-64,共5页
基金
国家质检总局科技计划(2012IK014
2016IK165)
文摘
选取布鲁氏菌差异蛋白部分基因序列,将其克隆到表达载体p GEX-6p-1中;经PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定,得到重组质粒p GEX-6p-1-bru;将重组质粒转化到Rosetta(DE3)感受态细胞中,用1 mmol/L异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)对转化菌进行诱导表达,并用表达蛋白制备多克隆抗体。结果:差异蛋白在体外获得了高效表达,表达融合蛋白分子量约为35 k D;诱导5 h后表达量最高,占菌体总蛋白的30%左右;表达蛋白能与多克隆抗体发生免疫印迹反应,证明所表达的蛋白具有良好的免疫原性。该研究结果为免疫学检测方法的建立奠定了基础。
关键词
差异蛋白
布鲁氏菌野毒株a544
布鲁氏菌
疫苗
株
104M
表达
抗体制备
Keywords
variant protein
Brucella bovis virulent strain
a544
Brucella abortus vaccine strain 104M
expression
antibody preparation
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
羊种布鲁氏菌野毒株和疫苗株的HOOF-Prints技术鉴别
3
作者
唐莉娟
刘丹
卜三平
机构
巴音郭楞职业技术学院
出处
《畜禽业》
2020年第9期18-19,共2页
基金
新疆维吾尔自治区自然科学基金青年基金资助项目(2018D01B08)。
文摘
目的区别羊种布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染。方法本实验根据软件DNAMAN对羊种布鲁氏菌的8个位点侧翼序列分析后,自行设计8对引物,用可变8聚核苷酸DNA指纹技术(HOOF-Prints)进行鉴别诊断。结果疫苗株M5与野毒株M43之间存在着显著的差异,可以从PCR产物的片段大小来进行区分。实验为以后鉴别布鲁氏菌的野毒株和疫苗株提供理论依据。
关键词
疫苗
株
野
毒
株
布鲁氏菌
Hoof-print
分类号
S85 [农业科学—兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
布鲁氏菌野毒株A544与疫苗株104M的差异蛋白筛选
王海艳
赵治国
赵林立
刘佳
任彩霞
敖威华
马彩霞
李刚
郭文秀
陈宇飞
《中国动物检疫》
CAS
2017
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
布鲁氏菌野毒株A544和疫苗株104M差异蛋白的表达及抗体制备
王海艳
赵林立
赵治国
郭文秀
陈宇飞
刘佳
任彩霞
敖威华
马彩霞
《中国动物检疫》
CAS
2017
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
羊种布鲁氏菌野毒株和疫苗株的HOOF-Prints技术鉴别
唐莉娟
刘丹
卜三平
《畜禽业》
2020
0
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职称材料
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