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大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建
1
作者
张文刚
叶江
+1 位作者
吴海珍
张惠展
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期519-522,共4页
报道了体外构建caiA基因缺失的带有卡那霉素抗性基因的5.2kb线状DNA分子,以此转化大肠杆菌JM83和BL21(DE3)株,借助于体内DNA同源重组,定向敲除了大肠杆菌中的巴豆甜菜碱还原酶编码基因caiA。经遗传稳定性实验、聚合酶链反应(PCR)以及Sou...
报道了体外构建caiA基因缺失的带有卡那霉素抗性基因的5.2kb线状DNA分子,以此转化大肠杆菌JM83和BL21(DE3)株,借助于体内DNA同源重组,定向敲除了大肠杆菌中的巴豆甜菜碱还原酶编码基因caiA。经遗传稳定性实验、聚合酶链反应(PCR)以及Southern鉴定,表明所获得的JM83转化子22号和BL21(DE3)转化子4号确为caiA基因缺失突变株;酶活分析结果表明,22号和4号转化子均丧失了巴豆甜菜碱还原酶活性。
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关键词
同源重组
巴豆甜菜碱还原酶
基因缺失
抗性基因
突变株
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题名
大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建
1
作者
张文刚
叶江
吴海珍
张惠展
机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
出处
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期519-522,共4页
文摘
报道了体外构建caiA基因缺失的带有卡那霉素抗性基因的5.2kb线状DNA分子,以此转化大肠杆菌JM83和BL21(DE3)株,借助于体内DNA同源重组,定向敲除了大肠杆菌中的巴豆甜菜碱还原酶编码基因caiA。经遗传稳定性实验、聚合酶链反应(PCR)以及Southern鉴定,表明所获得的JM83转化子22号和BL21(DE3)转化子4号确为caiA基因缺失突变株;酶活分析结果表明,22号和4号转化子均丧失了巴豆甜菜碱还原酶活性。
关键词
同源重组
巴豆甜菜碱还原酶
基因缺失
抗性基因
突变株
Keywords
homologous recombination
crotonobetaine reductase
gene deletion
resistant gene
mutantstrain
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建
张文刚
叶江
吴海珍
张惠展
《华东理工大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
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