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巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)高效异源表达脂肪酶研究进展被引量：2: 1; 作者李杨蔡海莺 +2 位作者赵敏洁李阳冯凤琴《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期377-381,共5页; 脂肪酶作为一种常见的工业用酶,广泛应用于食品、化妆品等与生活密切相关的工业领域,但较高的生产成本和使用成本,在一定程度上限制了其进一步应用。通过巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)异源表达系统重组表达脂肪酶,成为解决限制脂肪... 展开更多; 关键词巴斯德毕赤酵母(p.pastoris) 脂肪酶重组表达优化方法表面展示技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

人白介素-12(P40)亚基在巴斯德毕赤酵母中的表达: 2; 作者陈新华杨林 +2 位作者陈曲侯王珣章龙綮新《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期72-74,100,共4页; 运用PCR技术特异性地扩增了人IL 1 2p4 0亚基cDNA的编码区序列 ,得到 94 0bp的扩增片段 ,将其克隆于毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC的ClaⅠ ,XbaⅠ位点 ,构建成重组表达质粒pPICZαC p4 0 .经LiCl2 转化 ,Zeocin抗性筛选 ,... 展开更多; 关键词 IL-12 p40亚基表达白介素-12 巴斯德毕赤酵母 pCR技术免疫调节因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

微小隐孢子虫P23基因在毕赤酵母中的表达及初步应用: 3; 作者黄燕米荣升 +6 位作者周鹏曹薇杨晓娇王向佩王晓娟石凯陈兆国《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第6期56-62,共7页; 为将微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)P23基因在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)系统中进行表达,利用表达蛋白初步建立隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,设计引物从微小隐孢子虫基因组DNA中扩增P23基因序列,构建pPIC9K-P23重组质粒,... 展开更多; 关键词微小隐孢子虫 p23基因巴斯德毕赤酵母真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

β-葡聚糖酶杂合基因bglHAM的克隆及在P.pastoris中的表达被引量：2: 4; 作者苏华波韦宇拓 +2 位作者黄鲲赵颖怡黄日波《广西大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2002年第1期10-13,共4页; 采用 PCR的方法 ,以 Bacillus macerans总 DNA为模板 ,构建出β 1 ,3 1 ,4葡聚糖酶杂合基因bgl HAM,与巴斯德毕赤酵母表达载体 p PIC9K重组 ,得到重组质粒 p PIC9K HAM,电脉冲转化法转化酵母菌 GS1 1 5 ,KM71 .在 MM,MD平板上筛选表型 ,... 展开更多; 关键词 bglHAM p.pastoris β-1 3-1 4葡聚糖酶巴斯德毕赤酵母杂合基因基因克降基因表达 pCR扩增; 在线阅读下载PDF 职称材料

Neuritin毕赤酵母分泌表达系统的构建被引量：1: 5; 作者朱井玲汪海燕 +1 位作者王旭晖黄瑾《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第6期710-714,共5页; 为构建Neuritin毕赤酵母分泌表达系统,进一步得到高纯度的具有天然活性的Neuritin蛋白提供实验基础。采用人工合成去除信号肽的neuritin基因并在N端引入His标签序列,两端引入Eco RⅠ和NotⅠ酶切位点,克隆至p PIC9K分泌型表达载体。重组... 展开更多; 关键词 NEURITIN 巴斯德毕赤酵母 p pIC9K; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)高效异源表达脂肪酶研究进展被引量：2: 1; 作者李杨蔡海莺赵敏洁李阳冯凤琴; 机构浙江大学生物系统工程与食品科学学院、馥莉食品研究院; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期377-381,共5页; 基金浙江省重大科技专项(2012C12005-2) 浙江省植物食品加工技术科技创新团队项目(2010R50032); 文摘脂肪酶作为一种常见的工业用酶,广泛应用于食品、化妆品等与生活密切相关的工业领域,但较高的生产成本和使用成本,在一定程度上限制了其进一步应用。通过巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)异源表达系统重组表达脂肪酶,成为解决限制脂肪酶发展的方法之一。本文介绍了脂肪酶在P.pastoris表达系统中的异源表达及其优化策略,并对毕赤酵母表面展示异源脂肪酶的技术及应用进行了归纳。; 关键词巴斯德毕赤酵母(p.pastoris) 脂肪酶重组表达优化方法表面展示技术; Keywords pichia pastoris lipase optimization strategies of recombinant expression surface display technology; 分类号 TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人白介素-12(P40)亚基在巴斯德毕赤酵母中的表达: 2; 作者陈新华杨林陈曲侯王珣章龙綮新; 机构中山大学生物防治国家重点实验室/生物医药中心华中师范大学昆虫研究所; 出处《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期72-74,100,共4页; 基金广东省自然科学基金资助项目!( 960 0 59); 文摘运用PCR技术特异性地扩增了人IL 1 2p4 0亚基cDNA的编码区序列 ,得到 94 0bp的扩增片段 ,将其克隆于毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC的ClaⅠ ,XbaⅠ位点 ,构建成重组表达质粒pPICZαC p4 0 .经LiCl2 转化 ,Zeocin抗性筛选 ,得到含多拷贝p4 0基因的酵母工程菌PichiapastorisX 3 3 /p4 0 ,在 φ =0 5%甲醇诱导下 ,p4 0基因得到了分泌型表达 ,培养上清的SDS PAGE及Western blot均显示表达产物相对分子质量约 4 40 0 0 ,与预计大小相符 ,薄层凝胶扫描结果表明 ,分泌型表达蛋白占培养上清总蛋白量质量的 4 7% .; 关键词 IL-12 p40亚基表达白介素-12 巴斯德毕赤酵母 pCR技术免疫调节因子; Keywords hIL-12 p40 subunit pichia pastoris expression; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名微小隐孢子虫P23基因在毕赤酵母中的表达及初步应用: 3; 作者黄燕米荣升周鹏曹薇杨晓娇王向佩王晓娟石凯陈兆国; 机构中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心; 出处《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第6期56-62,共7页; 基金国家科技重大专项项目(2012ZX10004220-008) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2012JB16) 上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字[2005]第3-4号); 文摘为将微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)P23基因在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)系统中进行表达,利用表达蛋白初步建立隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,设计引物从微小隐孢子虫基因组DNA中扩增P23基因序列,构建pPIC9K-P23重组质粒,在毕赤酵母中进行表达,用阴离子交换层析柱进行纯化。以重组P23纯化蛋白为抗原建立间接ELISA检测方法,对现场采集的猪血清样品进行检测。SDS-PAGE显示所表达的蛋白大小约为23 kDa。Western blot检测表明该蛋白能与兔抗P23蛋白血清特异性结合。用建立的间接ELISA技术对186份猪血清样品进行检测,阳性率为83.3%。本研究获得了真核表达的P23重组蛋白,初步建立了微小隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,为隐孢子虫病的诊断和流行病学调查打下了基础。; 关键词微小隐孢子虫 p23基因巴斯德毕赤酵母真核表达; Keywords Cryptosporidium parvum p23 gene pichia pastoris eukaryotic expression; 分类号 S852.723 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名β-葡聚糖酶杂合基因bglHAM的克隆及在P.pastoris中的表达被引量：2: 4; 作者苏华波韦宇拓黄鲲赵颖怡黄日波; 机构广西大学生物技术实验中心; 出处《广西大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2002年第1期10-13,共4页; 基金国家"八六三计划"(国科生字 [1 997]1 92号 ); 文摘采用 PCR的方法 ,以 Bacillus macerans总 DNA为模板 ,构建出β 1 ,3 1 ,4葡聚糖酶杂合基因bgl HAM,与巴斯德毕赤酵母表达载体 p PIC9K重组 ,得到重组质粒 p PIC9K HAM,电脉冲转化法转化酵母菌 GS1 1 5 ,KM71 .在 MM,MD平板上筛选表型 ,YPD G41 8平板上筛选多拷贝重组子 .重组菌株经甲醇诱导后 ,刚果红平板染色法检测到β葡聚糖酶活性 ,SDS PAGE证明表达产物的分子量约为 2 4k D,摇瓶诱导培养筛选到的重组菌株 ,胞外每 m L发酵液最高酶活达 2 40 U.; 关键词 bglHAM p.pastoris β-1 3-1 4葡聚糖酶巴斯德毕赤酵母杂合基因基因克降基因表达 pCR扩增; Keywords beta1,31,4 glucanase pichia pastoris hybrid gene cloning induced expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Neuritin毕赤酵母分泌表达系统的构建被引量：1: 5; 作者朱井玲汪海燕王旭晖黄瑾; 机构石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室; 出处《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第6期710-714,共5页; 基金科技支疆计划项目(2014AB048); 文摘为构建Neuritin毕赤酵母分泌表达系统,进一步得到高纯度的具有天然活性的Neuritin蛋白提供实验基础。采用人工合成去除信号肽的neuritin基因并在N端引入His标签序列,两端引入Eco RⅠ和NotⅠ酶切位点,克隆至p PIC9K分泌型表达载体。重组质粒经PCR与测序鉴定正确后电击转化至毕赤酵母GS115感受态细胞中,经MD平板与G418平板筛选阳性重组子,抽提毕赤酵母基因组PCR鉴定重组质粒的插入。结果显示,p PIC9K-neuritin重组质粒经测序鉴定完全正确,电转后成功插入毕赤酵母基因组中。由此可知,成功构建Neuritin的毕赤酵母分泌表达系统。; 关键词 NEURITIN 巴斯德毕赤酵母 p pIC9K; Keywords neuritin pichia pastoris ppIC9K; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)高效异源表达脂肪酶研究进展	李杨蔡海莺赵敏洁李阳冯凤琴	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人白介素-12(P40)亚基在巴斯德毕赤酵母中的表达	陈新华杨林陈曲侯王珣章龙綮新	《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	微小隐孢子虫P23基因在毕赤酵母中的表达及初步应用	黄燕米荣升周鹏曹薇杨晓娇王向佩王晓娟石凯陈兆国	《中国动物传染病学报》 CAS	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	β-葡聚糖酶杂合基因bglHAM的克隆及在P.pastoris中的表达	苏华波韦宇拓黄鲲赵颖怡黄日波	《广西大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD	2002	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	Neuritin毕赤酵母分泌表达系统的构建	朱井玲汪海燕王旭晖黄瑾	《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料