急性脑梗死患者血浆巯基丙酮酸硫基转移酶及β-淀粉样蛋白42的水平及其临床意义 被引量：16

1

作者 柯莉 高丹 +5 位作者 陈秋霞 刘梦洁 赵丰丽 乔沛丰 张华 晏勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期743-746,共4页

目的探讨脑梗死(cerebral infarction,CI)患者急性期血浆巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,3-MST)及β-淀粉样蛋白42(β-amyloid peptide 42,Aβ42)水平及其与脑梗死体积、神经功能缺损程度的关系。方法抽取5... 目的探讨脑梗死(cerebral infarction,CI)患者急性期血浆巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,3-MST)及β-淀粉样蛋白42(β-amyloid peptide 42,Aβ42)水平及其与脑梗死体积、神经功能缺损程度的关系。方法抽取52例急性期CI患者及35例健康人血浆标本,采用ELISA检测其3-MST及Aβ42水平,分析2组人群血浆3-MST及Aβ42水平的差异及其与脑梗死的关系。结果 CI患者组血浆3-MST水平较健康对照组水平明显降低[(3.67±0.29)vs(4.98±0.30)ng/m L,P<0.05],CI患者组血浆Aβ42水平较健康对照组水平显著增高[(44.52±2.92)vs(15.77±1.71 pg/m L),P<0.01]。急性CI患者中,血浆3-MST水平随脑梗死体积增大和NIHSS评分增加而降低;血浆Aβ42水平随脑梗死体积增大及NIHSS评分增加而升高。结论脑梗死患者急性期的血浆3-MST水平明显降低、Aβ42水平显著增高,其变化与脑梗死患者神经功能缺损程度及梗死灶体积有关。 展开更多

关键词 急性脑梗死 巯基丙酮酸硫基转移酶 Β淀粉样蛋白

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生物功能化纳米SiO_2微球的构建及对谷胱甘肽S-转移酶的捕获分离 被引量：3

2

作者 邹雪艳 褚留杰 +2 位作者 董烁 赵彦保 李宾杰 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1394-1400,共7页

采用巯基丙基三甲氧基硅烷(MPS)一步水解法制备了表面带有巯基(—SH)的纳米SiO2微球(nSiO2-SH),探讨了水/醇体积比、反应温度、MPS初始浓度及反应时间对nSiO2-SH微球形貌的影响,并分析了反应机理.制备的nSiO2-SH微球进一步与还原型谷胱... 采用巯基丙基三甲氧基硅烷(MPS)一步水解法制备了表面带有巯基(—SH)的纳米SiO2微球(nSiO2-SH),探讨了水/醇体积比、反应温度、MPS初始浓度及反应时间对nSiO2-SH微球形貌的影响,并分析了反应机理.制备的nSiO2-SH微球进一步与还原型谷胱甘肽(GSH)中的—SH反应生成双硫键(—S—S—),在微球表面键合上GSH分子,得到了生物功能化的纳米nSiO2-GSH微球.通过扫描电子显微(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和热重分析仪(TG)对样品的表面形貌、尺寸和组成等进行了表征.利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)检测样品对谷胱甘肽S-转移酶(GST)的分离效果,结果表明,nSiO2-GSH微球能从混合蛋白中特异性吸附GST,达到了分离GST的目的. 展开更多

关键词 巯基纳米SiO2 生物功能化 特异性吸附 谷胱甘肽S-转移酶分离

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环磷酰胺激活小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ的机制研究 被引量：2

3

作者 郑英 邹晓华 +3 位作者 付再林 方慧 陈素红 吕圭源 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1387-1390,共4页

目的探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ(mGST-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制。方法用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定9 h内mGST-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化... 目的探讨环磷酰胺(CP)在体内对小鼠肝微粒体谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ(mGST-Ⅰ)活性的影响及其可能的机制。方法用苯巴比妥75 mg·kg-1诱导小鼠CYP2B后,ip CP,测定9 h内mGST-Ⅰ酶活性,观察二巯基丁二醇(DTT)对酶激活的逆转作用和巯基烷化剂N-乙基马来酰亚胺(NEM)对酶再激活效应,用SDS-PAGE和负染凝胶法评价CP对mGST-Ⅰ蛋白表达的影响。结果 CP引起小鼠微粒体中mGST-Ⅰ活性增加;NEM在mGST-Ⅰ半胱氨酸-49-巯基(cys-49-SH)上的活化效应减弱,而CP引起的mGST-Ⅰ激活效应不被二硫键还原剂DTT逆转。激活的mGST-Ⅰ电泳图谱未见蛋白分子量变迁及蛋白表达增加。结论大剂量CP致mGST-Ⅰ激活效应机制主要是酶分子cys-49-SH上单个巯基的修饰作用。 展开更多

关键词 环磷酰胺 微粒体 谷胱甘肽S-转移酶Ⅰ 二巯基丁二醇 N-乙基马来酰亚胺 半胱氨酸-49-巯基 机制

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镉胁迫对高低积累型水稻幼苗非蛋白巯基含量的影响 被引量：7

4

作者 李冬琴 王丽丽 +2 位作者 李智鸣 黎华寿 陈桂葵 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2697-2704,共8页

为研究镉胁迫对高低积累型水稻幼苗非蛋白巯基(Non-protein thiols, NPT)物质含量的动态变化影响规律,利用营养液沙培盆栽实验,设置镉浓度为50μmol·L^-1,分别监测处理前(0 d)和处理后第1、3、5、7 d水稻的过氧化程度和非蛋白巯基... 为研究镉胁迫对高低积累型水稻幼苗非蛋白巯基(Non-protein thiols, NPT)物质含量的动态变化影响规律,利用营养液沙培盆栽实验,设置镉浓度为50μmol·L^-1,分别监测处理前(0 d)和处理后第1、3、5、7 d水稻的过氧化程度和非蛋白巯基物质含量。结果表明:随镉胁迫时间的延长,两品种水稻的过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)和硫代巴比妥酸反应产物(Thiobarbituric acid reactive substances,TBARS)含量逐渐上升,且镉低积累型品种优I2009的H2O2和TBARS含量上升的幅度大于镉高积累型品种欣荣优2045,其中欣荣优2045地上部H2O2和TBARS含量上升的幅度分别为45%和74%,其根系上升的幅度分别为1.14倍和61%,而优I2009地上部H2O2和TBARS含量上升的幅度分别为78%和1.20倍,其根系上升的幅度分别为1.32倍和64%,说明镉低积累型品种优I2009遭受的氧化胁迫水平和膜脂过氧化程度大于镉高积累型品种欣荣优2045。欣荣优2045的还原型谷胱甘肽(Reduced glutathione,GSH)随镉胁迫时间的延长逐渐增加,而优I2009的GSH呈先升后降的趋势;两品种水稻的NPT、植物螯合肽(Phytochelatins,PCs)含量和谷胱甘肽硫转移酶(Glutathione S-transferase,GST)活性随镉胁迫时间的延长呈先升后降的趋势,且欣荣优2045合成的NPT含量和生成的GST活性更高。研究表明,镉高积累型水稻品种可以通过合成更多的含巯基的非蛋白化合物与镉络合来清除活性氧,进而增加对镉的耐性。 展开更多

关键词 镉胁迫 水稻 非蛋白巯基化合物 还原型谷胱甘肽 植物螯合肽 谷胱甘肽硫转移酶

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大鼠视神经挫伤致视网膜硫化氢合成酶表达变化 被引量：1

5

作者 曾铭伟 王涛 +3 位作者 费成平 邹彩霞 刘夷嫦 谷振勇 《法医学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期635-639,共5页

目的探讨大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)、胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfur-transferase,3-MST)的表达变化。方... 目的探讨大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)、胱硫醚β-合成酶(cystathionine β-synthase,CBS)和3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3-mercaptopyruvate sulfur-transferase,3-MST)的表达变化。方法建立大鼠视神经挫伤模型。将大鼠分为正常对照组、视神经挫伤组和假手术组。观察大鼠视网膜的组织病理学变化,检测视网膜神经节细胞数量和视网膜内侧部分厚度。用实时荧光定量PCR技术检测CBS、CSE和3-MST的mRNA表达变化。结果正常对照组大鼠视网膜组织结构正常,假手术组仅有轻微变化。与假手术组比较,视神经挫伤后各组大鼠视网膜出现明显损伤,视网膜神经节细胞数量呈时间依赖性减少且视网膜内侧部分厚度呈进行性变薄。正常对照组大鼠视网膜存在CSE、CBS和3-MST mRNA的基础表达。与正常对照组比较,假手术组CSE、CBS和3-MST的mRNA表达无明显变化。与假手术组比较,CBS mRNA表达在视神经挫伤后3 d、7 d和14 d呈时间依赖性上调;CSEmRNA表达在伤后7 d达到峰值,14 d时有所下降;3-MST mRNA表达在视神经挫伤后3 d和7 d有上调的趋势,14 d时有明显上调。结论大鼠视神经挫伤后视网膜硫化氢合成酶CBS、CSE和3-MST表达上调,这可能引起视网膜局部内源性硫化氢生成增多并产生代偿性保护效应。 展开更多

关键词 法医病理学 视神经损伤 视网膜 硫化氢合成酶 胱硫醚γ-裂解酶 胱硫醚Β-合成酶 3-巯基丙酮酸硫基转移酶 大鼠

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单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白B胞浆区编码基因的原核表达、纯化及抗体制备

6

作者 李英辉 刘军 +5 位作者 薛采芳 甄荣芬 李旬 王宪锋 刘忠湘 万磊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期549-551,共3页

目的获得高纯度的重组单纯疱疹病毒Ⅰ型HSV-1糖蛋白BgB胞浆区蛋白并制备其特异性抗体。方法从感染HSV-1的BHK细胞中提取总RNA用RT-PCR特异性扩增HSV-1gB胞浆区编码基因,经双酶切后,克隆入表达载体pGEX4T-1中,进行融合表达... 目的获得高纯度的重组单纯疱疹病毒Ⅰ型HSV-1糖蛋白BgB胞浆区蛋白并制备其特异性抗体。方法从感染HSV-1的BHK细胞中提取总RNA用RT-PCR特异性扩增HSV-1gB胞浆区编码基因,经双酶切后,克隆入表达载体pGEX4T-1中,进行融合表达。以纯化的重组蛋白免疫小鼠制备抗体,进行Westernblot鉴定。结果用IPTG诱导后,表达出相对分子质量Mr约42000的融合蛋白。用纯化的融合蛋白免疫小鼠制备的抗体滴度为1400。结论获得重组HSV-1gB胞浆区蛋白及其特异性抗体,为后续功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 单纯疱疹病毒I型 糖蛋白B 原核表达 谷胱甘肽巯基-转移酶 纯化 抗体

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亚砷酸钠对SH-SY5Y细胞生长和3MST表达的影响 被引量：4

7

作者 聂杨 王念 +1 位作者 徐国强 潘际刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1182-1183,共2页

神经母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一。因其恶性程度高，手术加化疗的方案对于侵润性的神经母细胞瘤效果不佳。砷，俗名砒霜，很早被用来治疗急性粒性白血病。现在发现砷对神经母细胞瘤、胶质瘤，以及来源于肝脏、前列腺、肾脏、子... 神经母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一。因其恶性程度高，手术加化疗的方案对于侵润性的神经母细胞瘤效果不佳。砷，俗名砒霜，很早被用来治疗急性粒性白血病。现在发现砷对神经母细胞瘤、胶质瘤，以及来源于肝脏、前列腺、肾脏、子宫颈和胆囊等固体肿瘤也有效［1］。然而，其作用机制尚未完全明了。有报道，肿瘤细胞H2 S合成酶表达上调［2］。那么，砷是否可通过下调H2 S合成酶的表达发挥抗癌作用？本实验采用SH－SY5Y细胞和亚砷酸钠（ NaAsO2）对此问题进行了探讨。 展开更多

关键词 亚砷酸钠 砷 神经母细胞瘤 SH-SY5Y细胞 3-巯基丙酮酸硫基转移酶 下调

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硫化氢--新的心脏保护因子 被引量：8

8

作者 廖锋 郑扬 耿彬 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期111-114,共4页

硫化氢(H2S)是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后,被发现的第三种内源性气体信号分子。哺乳动物心血管组织表达胱硫醚γ裂解酶和3巯基丙酮酸转硫酶,内源性生成H2S。内源性或适当浓度的外源性H2S可开放ATP敏感性K+通道(KATP),阻断L型Ca2... 硫化氢(H2S)是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后,被发现的第三种内源性气体信号分子。哺乳动物心血管组织表达胱硫醚γ裂解酶和3巯基丙酮酸转硫酶,内源性生成H2S。内源性或适当浓度的外源性H2S可开放ATP敏感性K+通道(KATP),阻断L型Ca2+通道,调控蛋白激酶C(PKC)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)等信号转导分子,进而在心脏受缺血缺氧等刺激时,通过抗炎症、抗凋亡、抗氧化应激、促进血管生成等病生理机制,发挥重要的保护作用。H2S是一种新的拮抗心脏损伤的保护物质。 展开更多

关键词 硫化氢 心血管 胱硫醚γ裂解酶 3巯基丙酮酸转硫酶

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加味通络方对气虚血瘀兼阴虚型急性脑梗死疗效及3-MST、AngⅡ、VEGF指标的影响 被引量：12

9

作者 栗昭生 那丽莎 +2 位作者 杨贺然 张忠敏 李超 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第7期89-91,共3页

目的分析加味通络方对气虚血瘀兼阴虚型急性脑梗死患者疗效及巯基丙酮酸硫基转移酶(3-MST)、血管生成素-Ⅱ(AngⅡ)、血管内皮生长因子(VEGF)指标的影响。方法选取医院2017年10月—2019年3月收治的急性脑梗死患者98例,按照入院顺序分为... 目的分析加味通络方对气虚血瘀兼阴虚型急性脑梗死患者疗效及巯基丙酮酸硫基转移酶(3-MST)、血管生成素-Ⅱ(AngⅡ)、血管内皮生长因子(VEGF)指标的影响。方法选取医院2017年10月—2019年3月收治的急性脑梗死患者98例,按照入院顺序分为两组。对照组给予常规西医治疗,研究组加用加味通络方治疗,分析两组患者治疗后的临床疗效。结果两组治疗前在美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分上组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组治疗7、14 d后NIHSS评分(11.02±3.57)分、(7.48±3.23)分低于对照组(P<0.05)。研究组治疗7 d时侧支循环代偿改善率(26.53%,13/49)和治疗14 d时侧支循环代偿改善率(42.86%,21/49)均高于对照组(P<0.05)。两组治疗前3-MST、AngⅡ、VEGF水平组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组治疗14 d后3-MST、AngⅡ、VEGF水平高于对照组(P<0.05)。两组治疗前中医证候积分组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组治疗7、14 d后中医证候积分(9.21±2.28)分、(6.65±0.84)分低于对照组(P<0.05)。结论加味通络方治疗气虚血瘀兼阴虚型急性脑梗死可促进患者脑侧支代偿血管的建立,调节3-MST、AngⅡ、VEGF的表达,改善神经功能。 展开更多

关键词 加味通络方 气虚血瘀兼阴虚型 急性脑梗死 巯基丙酮酸硫基转移酶 血管生成素-Ⅱ

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HGPRT缺陷型T淋巴瘤细胞系的建立与鉴定 被引量：3

10

作者 翁秀芳 吴雄文 +6 位作者 梁智辉 陆盛军 卢小玲 张彩娥 钟茂华 陈雪玲 龚非力 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期701-704,共4页

目的通过突变诱导次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷型的T淋巴瘤细胞系,为制备T细胞杂交瘤提供利于筛选的亲代细胞。方法通过乙基甲磺酸对Jurkat细胞进行突变,逐步提高培养液中6-巯基鸟嘌呤(6-TG)的浓度,筛选出对6-TG具有稳定抗... 目的通过突变诱导次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷型的T淋巴瘤细胞系,为制备T细胞杂交瘤提供利于筛选的亲代细胞。方法通过乙基甲磺酸对Jurkat细胞进行突变,逐步提高培养液中6-巯基鸟嘌呤(6-TG)的浓度,筛选出对6-TG具有稳定抗性的单克隆细胞株Jur16-TG细胞。比较Jurkat细胞与Jur16-TG细胞在含6-TG培养液和HAT培养液中的生长情况。结果在含20μg/ml 6-TG的培养液中,Jur16-TG细胞能够稳定生长,而Jurkat细胞在培养1周后基本死亡。在HAT培养液中氨基喋呤的浓度为4×10-8mol/L或8×10-8mol/L时,Jur16-TG细胞4 d内基本死亡,而Jurkat细胞至少能存活7~10 d。Jur16-TG细胞与正常外周血淋巴细胞(PBL)的融合实验显示,35%的Jur16-TG细胞与PBL融合。结论突变筛选出的单克隆细胞株Jur16-TG具有6-TG抗性和在HAT培养液中不能生长的特性,证实该细胞为HGPRT缺陷型细胞株,并且该细胞株可有效地与原代淋巴细胞融合,从而为T细胞杂交瘤的制备提供了利于筛选的亲代永生化的T细胞。 展开更多

关键词 次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷 6-巯基鸟嘌呤抗性 次黄嘌呤/氨基喋呤/胸腺嘧啶(HAT)培养液 T细胞杂交瘤

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C4ST-1在大肠杆菌中的可溶性表达 被引量：2

11

作者 李青 周正雄 +2 位作者 堵国成 李江华 康振 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期68-75,共8页

软骨素-4-O-硫酸转移酶-1(Chondroitin-4-O-sulfotransferase-1,C4ST-1,EC 2.8.2.5)催化软骨素N-乙酰半乳糖胺(N-Acetylgalactosamine,GalNAc)4号位羟基硫酸化生成硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)。C4ST-1含3对二硫键,在Escheri... 软骨素-4-O-硫酸转移酶-1(Chondroitin-4-O-sulfotransferase-1,C4ST-1,EC 2.8.2.5)催化软骨素N-乙酰半乳糖胺(N-Acetylgalactosamine,GalNAc)4号位羟基硫酸化生成硫酸软骨素A(chondroitin sulfate A,CSA)。C4ST-1含3对二硫键,在Escherichia coli细胞质内二硫键难以正确形成,故在E.coli中表达时主要以包涵体形式存在。为提高胞内可溶性蛋白质的表达水平,共表达了催化二硫键从头形成的巯基氧化酶(Erv1p)或/和促进二硫键正确折叠的二硫键异构酶(DsbC)。结果表明共表达DsbC可使C4ST-1融合蛋白的胞内可溶性表达水平显著提高,但C4ST-1和Erv1p共表达对胞内可溶性蛋白质的表达影响相对较小。C4ST-1和Erv1p或C4ST-1和DsbC共表达菌株的酶活分别为原始菌株的1.30和2.33倍,活力达到(12.32±0.76)U/L和(21.99±0.42)U/L。挑取同时共表达C4ST-1、Erv1p和DsbC的菌株进行摇瓶水平和3 L发酵罐放大培养,酶活分别达到(29.12±0.66)U/L和49.97 U/L。本研究为C4ST-1的大规模应用奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 软骨素-4-O-硫酸转移酶-1 硫氧还蛋白还原酶 巯基氧化酶 二硫键异构酶 可溶性表达

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亚砷酸钠对SH-SY5Y细胞周期的影响及MPST过表达的干预 被引量：10

12

作者 柳香香 孙达权 +3 位作者 许键炜 范海琼 徐国强 潘际刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期634-639,共6页

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_2)对神经细胞周期的影响及MPST过表达在其中的作用。方法以空白组(正常SH-SY5Y细胞,BC)、空载对照组(NC)、过表达组(过表达MPST,OP)细胞分别经NaAsO_2处理后,采用CCK-8法、结晶紫染色法、流式细胞术和Western b... 目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_2)对神经细胞周期的影响及MPST过表达在其中的作用。方法以空白组(正常SH-SY5Y细胞,BC)、空载对照组(NC)、过表达组(过表达MPST,OP)细胞分别经NaAsO_2处理后,采用CCK-8法、结晶紫染色法、流式细胞术和Western blot法,分别检测细胞活力、细胞贴壁力、细胞周期及p53、CDC25A、CyclinA、CDK2等蛋白表达水平。结果经NaAsO_2处理48 h后,NC组细胞存活率、细胞贴壁率明显降低,而过表达MPST细胞上述变化明显得到改善(P<0.01)。同时,NaAsO_2明显上调BC、NC组细胞S期比例和p53蛋白表达,而下调CDC25A、CyclinA及CDK2蛋白(P<0.01);然而,过表达MPST则明显拮抗上述效应(P<0.05,P<0.01)。结论 NaAsO_2通过诱导SH-SY5Y细胞S期阻滞,抑制细胞生长,而过表达MPST可拮抗NaAsO_2诱导的毒性效应。 展开更多

关键词 亚砷酸钠 3-巯基丙酮酸硫转移酶 SH-SY5Y细胞 细胞周期 S期阻滞 硫化氢

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砷及MPST过表达对SH-SY5Y细胞GRP78/CHOP通路的影响 被引量：2

13

作者 李成 楼迪栋 +3 位作者 齐晓岚 范海琼 朱卫 潘际刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期131-135,共5页

目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因... 目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株作为SH-MPST过表达组,另设空载体转染细胞为SH-PEB组,染砷组(NaAsO2组),内质网应激阻断剂TUDCA组,TUDCA预处理染砷组。Western blot法分别检测过表达MPST、染砷及TUDCA预处理后细胞内GRP78和CHOP蛋白表达的变化。结果单纯MPST过表达不影响SH-SY5Y细胞内GRP78、CHOP蛋白的表达水平;经NaAsO2处理后,SH-PEB细胞内GRP78、CHOP蛋白明显上调(P<0.01),而被内质网应激阻断剂TUDCA所拮抗;MPST过表达则抑制砷对GRP78、CHOP蛋白的上调(P<0.01);然而,TUDCA预处理则明显逆转MPST过表达对GRP78、CHOP蛋白的影响(P<0.01)。结论GRP78/CHOP内质网应激通路参与了砷诱导的神经毒性损伤;MPST过表达可降低砷诱导的内质网应激水平。 展开更多

关键词 亚砷酸钠 内质网应激 3-巯基丙酮酸硫转移酶 硫化氢 葡萄糖调节蛋白78 环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白 SH-SY5Y细胞

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