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差速贴壁法分离兔骨髓源性间充质干细胞和内皮祖细胞及其生物学特性的研究被引量：10: 1; 作者辛毅刘小希 +6 位作者赵伟刘飒李娜许秀芳黄益民罗毅张宏家《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期746-753,共8页; 本研究探讨一种高效、稳定的从兔骨髓中同时分离培养间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSC)和内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells,EPC)的方法并观察其生物学特性。抽取兔骨髓,应用密度梯度分离单个核细胞,采用差速贴壁经纤连... 展开更多; 关键词差速贴壁法骨髓间充质干细胞内皮祖细胞细胞培养生物学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

差速贴壁法分离培养脂肪源间充质干细胞被引量：3: 2; 作者戴景兴杨林林 +6 位作者曲戎梅周智涛余磊邱晓忠彭晨李晋原林《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2007年第3期313-316,共4页; 目的:探讨差速贴壁法从大鼠腹股沟脂肪垫分离纯化脂肪源间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)的可行性。方法:采用差速贴壁培养法分离ADMSCs,并与普通培养法得到的ADMSCs进行表面分子CD44阳性率对比。在... 展开更多; 关键词脂肪源间充质干细胞间充质干细胞差速贴壁法; 在线阅读下载PDF 职称材料

单次差速贴壁法纯化培养大鼠嗅神经鞘细胞的实验研究被引量：3: 3; 作者李玉安徐华梓李万里《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期1562-1565,共4页; 目的:探讨单次差速贴壁法纯化培养成年大鼠嗅球嗅鞘细胞的可行性。方法:选取8～10周龄的成年SD大鼠,无菌条件下切取嗅球、剪碎,胰酶消化制成细胞悬液后接种,采用18h单次差速贴壁的方法纯化培养嗅鞘细胞,定期在倒置显微镜下观察嗅鞘细胞... 展开更多; 关键词细胞培养技术嗅鞘细胞嗅球差速贴壁法; 在线阅读下载PDF 职称材料

酶差速脱壁法联合差速贴壁法分离人颊黏膜上皮干细胞: 4; 作者张鸿黄挺《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第6期518-522,共5页; 目的培养人颊黏膜上皮细胞和分离上皮干细胞,在角膜缘干细胞微环境下诱导颊黏膜上皮干细胞转分化,为前者获取足够的种子细胞。方法应用Epilife培养基培养颊黏膜上皮细胞,使用CFSE标记,观察CFSE标记率及标记细胞与未标记细胞的生物学特... 展开更多; 关键词颊黏膜上皮干细胞 CFSE 差速脱壁法差速贴壁法; 在线阅读下载PDF 职称材料

组织块法培养大鼠颌下腺细胞的实验研究被引量：9: 5; 作者黄巍巍谭学新 +4 位作者李波王哲李欣宇马丽黄丹丹《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期194-196,共3页; 目的探讨组织块法培养大鼠颌下腺细胞(RSGC)的方法与细胞生长的特点。方法采用组织块法培养RSGC,使用酶消化法和差速贴壁法进行细胞纯化,免疫组织化学SABC方法进行细胞角蛋白-8免疫组化染色,进行细胞来源鉴定。倒置显微镜下进行形态学观... 展开更多; 关键词颌下腺细胞组织块培养方法酶消化法差速贴壁法组织工程; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠骨骼肌卫星细胞体外原代培养的试验研究被引量：1: 6; 作者赵燕管武太《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第3期312-314,共3页; 对大鼠骨骼肌卫星细胞体外原代培养方法进行研究,以得到高纯度的骨骼肌卫星细胞,为转基因等试验研究提供充足的试验材料。用0.1%Ⅱ型胶原酶消化法从18日龄SD大鼠后腿部肌肉分离出骨骼肌细胞并培养5日,再利用差速贴壁法分离得到高纯度的... 展开更多; 关键词骨骼肌卫星细胞细胞培养差速贴壁法; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名差速贴壁法分离兔骨髓源性间充质干细胞和内皮祖细胞及其生物学特性的研究被引量：10: 1; 作者辛毅刘小希赵伟刘飒李娜许秀芳黄益民罗毅张宏家; 机构首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所分子生物学研究室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期746-753,共8页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号81170283) 北京市自然科学基金项目(编号7072012) +1 种基金首都医科大学基础-临床合作基金重点课题(编号11JL09); 文摘本研究探讨一种高效、稳定的从兔骨髓中同时分离培养间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSC)和内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells,EPC)的方法并观察其生物学特性。抽取兔骨髓,应用密度梯度分离单个核细胞,采用差速贴壁经纤连蛋白包被并结合EGM-2MV培养基分别扩增MSC和EPC。用台盼蓝法测定细胞传代成活率,通过绘制生长曲线法、MTT法、DNA周期检测MSC和EPC的增殖能力及诱导分化成骨细胞、成脂肪细胞能力,并结合流式细胞术(FCM)检测MSC免疫原型以鉴定MSC;细胞吞噬功能特异性地摄取Dil-ac-LDL及FITC-UEA-1,并结合CD133、VEGFR2/KDR、CD34免疫荧光鉴定EPC,并计算其纯度。结果表明,经密度梯度分离单个核细胞,在早期贴壁细胞24 h换液时即可见明显集落形成,8 d后达80%融合,细胞呈均匀一致的长梭形排列;2次贴壁细胞经EGM-2MV培养基培养,第3天开始伸展,约8 d可融合近80%,细胞呈多角形,出现条索状结构;2种细胞台盼蓝法测定细胞传代成活率均在90%以上,传至第2代后,生长曲线均近似"S"形;MTT法检测显示,细胞生长d 3至d 5时光密度值变化较明显;MSC G0-G1期为(93.32±1.65)%、EPC G0-G1为(93.05±1.95)%,2种细胞DNA周期无明显差异;早期贴壁细胞FCM检测CD90、CD44阳性率为(99.7±1.12)%、(99.1±2.33)%;CD14、CD45、CD79a阳性率分别为(4.8±0.38)%、(6.8±0.49)%及(0.4±0.08)%,经体外诱导能够向成骨细胞及脂肪细胞分化,鉴定为MSC;2次贴壁细胞传至第2代经Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色阳性率(82.1±3.4)%,CD133、VEGFR2/KDR、CD34免疫荧光染色阳性率分别为(74.2±3.2)%、(64.7±4.3)%及(43.5±1.5)%,鉴定为EPC。结论:应用密度梯度分离法结合差速贴壁筛选法可培养出高纯度的MSC,2次贴壁细胞经纤连蛋白预包被并结合EGM-2MV培养基体外诱导可培养出增殖能力较强的EPC,为组织工程学研究提供种子细胞。; 关键词差速贴壁法骨髓间充质干细胞内皮祖细胞细胞培养生物学特性; Keywords differential adhesion method bone marrow mesenchymal stem cell endothelial progenitor cell cell culture biological characteristics; 分类号 R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名差速贴壁法分离培养脂肪源间充质干细胞被引量：3: 2; 作者戴景兴杨林林曲戎梅周智涛余磊邱晓忠彭晨李晋原林; 机构南方医科大学人体解剖教研室南方医科大学生物技术学院南方医科大学中心实验室; 出处《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2007年第3期313-316,共4页; 基金广东省科技攻关项目(2004B34001006); 文摘目的:探讨差速贴壁法从大鼠腹股沟脂肪垫分离纯化脂肪源间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)的可行性。方法:采用差速贴壁培养法分离ADMSCs,并与普通培养法得到的ADMSCs进行表面分子CD44阳性率对比。在第2代ADMSCs中加入条件培养基进行诱导,根据条件培养基的不同分成3组:①成骨诱导组:加入成骨培养基;②成脂诱导组:加入成脂培养基;③对照组:仅加入基础培养基。成骨诱导组和对照组进行碱性磷酸酶(ALP)检测,成脂诱导组和对照组进行油红O染色检测。结果:差速贴壁培养法获得CD44阳性率更高的ADMSCs。成骨诱导组的ALP大大高于对照组,成脂诱导组油红O染色阳性,对照组油红O染色均为阴性。结论:差速贴壁培养法从大鼠腹股沟脂肪垫中分离得到高纯度ADMSCs。; 关键词脂肪源间充质干细胞间充质干细胞差速贴壁法; Keywords adipose tissue-derived mesenchymal stem cells mesenchymal stem cells differential adhesion; 分类号 Q813.1 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名单次差速贴壁法纯化培养大鼠嗅神经鞘细胞的实验研究被引量：3: 3; 作者李玉安徐华梓李万里; 机构温州医学院附属第二医院骨科浙江大学医学院附属第二医院骨科; 出处《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期1562-1565,共4页; 基金浙江省卫生厅医药卫生研究基金资助项目(编号:2007A140) 浙江省教育厅资助项目(编号:20070904); 文摘目的:探讨单次差速贴壁法纯化培养成年大鼠嗅球嗅鞘细胞的可行性。方法:选取8～10周龄的成年SD大鼠,无菌条件下切取嗅球、剪碎,胰酶消化制成细胞悬液后接种,采用18h单次差速贴壁的方法纯化培养嗅鞘细胞,定期在倒置显微镜下观察嗅鞘细胞的形态学变化及生长情况,并对其行神经生长因子受体p75抗体(NGFRp75)及碘化丙啶的免疫荧光鉴定,同时计算嗅鞘细胞的纯度。结果:通过18h单次差速贴壁法纯化培养的嗅鞘细胞经NGFRp75免疫荧光鉴定后,纯度可达70%～80%,形态上以双极和三极细胞为主,伴有少许单极及多极细胞。结论:应用18h单次差速贴壁法纯化培养嗅鞘细胞是一种简便、稳定、经济、快捷的方法。; 关键词细胞培养技术嗅鞘细胞嗅球差速贴壁法; Keywords Cell culture techniques Olfactory ensheathing cells Olfactory bulbs Nash＇s differential attachment; 分类号 R-332 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名酶差速脱壁法联合差速贴壁法分离人颊黏膜上皮干细胞: 4; 作者张鸿黄挺; 机构南华大学附属第一医院眼科中山大学中山眼科中心; 出处《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第6期518-522,共5页; 基金广东省眼科学国家重点实验室基金(编号:2012B031-800112)~~; 文摘目的培养人颊黏膜上皮细胞和分离上皮干细胞,在角膜缘干细胞微环境下诱导颊黏膜上皮干细胞转分化,为前者获取足够的种子细胞。方法应用Epilife培养基培养颊黏膜上皮细胞,使用CFSE标记,观察CFSE标记率及标记细胞与未标记细胞的生物学特性。采用免疫荧光检测第2代细胞P63、CK12、CK13的表达。应用酶差速脱壁法联合差速贴壁法分离培养颊黏膜上皮干细胞,观察体外培养生物学特性。采用免疫荧光检测第2氉代纯化细胞P63、CK12、CK13的表达。结果颊黏膜上皮细胞在Epilife培养基中生长良好。CFSE标记率可达100%,标记细胞与未标记细胞生物学特性相似。经联合分离法获得的第2代细胞免疫荧光P63、K13阳性,K12阴性,而未经联合分离法获得的第2代细胞免疫荧光CK13阳性,P63、CK12阴性。结论人颊黏膜上皮细胞在Epilife培养基中生长良好。CFSE是理想的颊黏膜上皮细胞荧光标记物。酶差速脱壁法联合差速贴壁法纯化了颊黏膜上皮干细胞,为转分化为角膜上皮干细胞获取了足够的种子细胞。; 关键词颊黏膜上皮干细胞 CFSE 差速脱壁法差速贴壁法; Keywords buccal mucosal epithelial stem cell CFSE differential detachment method rapid adhering method; 分类号 R772.2 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名组织块法培养大鼠颌下腺细胞的实验研究被引量：9: 5; 作者黄巍巍谭学新李波王哲李欣宇马丽黄丹丹; 机构中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理学教研室内蒙古医学院第三附属医院妇产科; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期194-196,共3页; 基金辽宁省教育厅高等学校科研项目(2008843); 文摘目的探讨组织块法培养大鼠颌下腺细胞(RSGC)的方法与细胞生长的特点。方法采用组织块法培养RSGC,使用酶消化法和差速贴壁法进行细胞纯化,免疫组织化学SABC方法进行细胞角蛋白-8免疫组化染色,进行细胞来源鉴定。倒置显微镜下进行形态学观察,取第2代RSGC,FDA-PI双色荧光法检测细胞活力,MTT法绘制生长曲线。结果细胞角蛋白-8染色阳性。倒置显微镜下,细胞主要呈3种形态,为圆形亮细胞、多角形暗细胞、梭形暗细胞。细胞活力>95%,生长曲线表示细胞5d开始进入对数生长期。结论此方法简便,易操作,获得了大量的RSGC,为颌下腺细胞作为种子细胞的颌下腺组织工程研究提供了实验基础和理论依据。; 关键词颌下腺细胞组织块培养方法酶消化法差速贴壁法组织工程; Keywords submandibular gland cell tissue-explant technique enzymatic digestion differential adhesion tissue engineering; 分类号 Q813.1 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠骨骼肌卫星细胞体外原代培养的试验研究被引量：1: 6; 作者赵燕管武太; 机构山西农业大学生命科学学院华南农业大学动物科学学院; 出处《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第3期312-314,共3页; 基金国家973项目(2004CB117500-1); 文摘对大鼠骨骼肌卫星细胞体外原代培养方法进行研究,以得到高纯度的骨骼肌卫星细胞,为转基因等试验研究提供充足的试验材料。用0.1%Ⅱ型胶原酶消化法从18日龄SD大鼠后腿部肌肉分离出骨骼肌细胞并培养5日,再利用差速贴壁法分离得到高纯度的骨骼肌卫星细胞。研究结果表明,采用此方法分离得到纯度较高的骨骼肌卫星细胞,细胞增殖快,生长良好。; 关键词骨骼肌卫星细胞细胞培养差速贴壁法; Keywords Muscle satellite cell Cell culture Different attaching time; 分类号 S831.1 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	差速贴壁法分离兔骨髓源性间充质干细胞和内皮祖细胞及其生物学特性的研究	辛毅刘小希赵伟刘飒李娜许秀芳黄益民罗毅张宏家	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	10	在线阅读下载PDF 职称材料
2	差速贴壁法分离培养脂肪源间充质干细胞	戴景兴杨林林曲戎梅周智涛余磊邱晓忠彭晨李晋原林	《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	单次差速贴壁法纯化培养大鼠嗅神经鞘细胞的实验研究	李玉安徐华梓李万里	《实用医学杂志》 CAS 北大核心	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	酶差速脱壁法联合差速贴壁法分离人颊黏膜上皮干细胞	张鸿黄挺	《眼科新进展》 CAS 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	组织块法培养大鼠颌下腺细胞的实验研究	黄巍巍谭学新李波王哲李欣宇马丽黄丹丹	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	9	在线阅读下载PDF 职称材料
6	大鼠骨骼肌卫星细胞体外原代培养的试验研究	赵燕管武太	《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料