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甘蔗叶绿体DNA的提取方法及其验证分析被引量：3: 1; 作者岑华飞黄玉新 +7 位作者罗霆周珊高轶静段维兴杨翠芳周会张革民刘昔辉《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期546-550,共5页; [目的]探索适于普通实验室条件的甘蔗叶绿体DNA（cpDNA）提取方法,为甘蔗叶绿体分子生物学研究提供参考.[方法]参考水稻、小麦等作物cpDNA的DNase Ⅰ差速离心处理法,采用改良的DNase Ⅰ差速离心法提纯甘蔗cpDNA,并对其trnL基因序列进行... 展开更多; 关键词甘蔗叶绿体DNA 提取 trnL基因改良的DNase Ⅰ差速离心法; 在线阅读下载PDF 职称材料

速度区带离心分离提纯蚕豆叶绿体: 2; 作者秦德安何学民《生物学教学》 1981年第1期30-31,共2页; 一、原理速度区带离心是在离心过程中借助于密度梯度介质,使不同大小和形状的样品颗粒因沉降速度不同而从达到分离目的的一种离心技术。速度区带离心由于在离心过程中应用了密度梯度介质,故又称作密度梯度离心。1951年,Brakke首次应用... 展开更多; 关键词速度区带离心离心技术密度梯度沉降系数分离效率沉降速度样品颗粒差速离心法超速离心机过滤漏斗; 在线阅读下载PDF 职称材料

两种提取细胞外泌体方法的比较被引量：3: 3; 作者周昌娈谭磊 +1 位作者谢军丁铲《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第2期64-67,共4页; 近期研究发现外泌体在很多生理病理过程中起着重要作用,因而外泌体已成为当前的科研热点。本研究从外泌体形态、标志蛋白的表达方面比较了He La细胞外泌体的两种常用提取方法,以期获得更有效地提取Hela细胞中的外泌体方法。利用电镜观... 展开更多; 关键词外泌体 HELA细胞差速离心法 PEG沉淀法; 在线阅读下载PDF 职称材料

水牛犊牛血浆外泌体的分离与鉴定: 4; 作者庞春英梁莎莎 +5 位作者文崇利陈明棠陆呈委韦科龙潘玉红梁贤威《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第9期3200-3205,共6页; 研究旨在从水牛犊牛血浆中分离外泌体,并对分离的外泌体进行分子生物学特征分析和鉴定。采用差速离心法分离3头水牛犊牛的血浆外泌体,并在透射电子显微镜下观察其形态,使用纳米粒度及Zeta电位仪对提取的外泌体进行粒径大小分析,应用West... 展开更多; 关键词水牛血浆外泌体差速离心法外泌体特异蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

星豹蛛乙酰胆碱酯酶亚细胞分布的研究: 5; 作者葛衍珍李锐 +1 位作者马敏李生才《农业技术与装备》 2011年第6期79-80,共2页; 采用差速离心法研究了星豹蛛(PardosaastrigenaL.Koch)乙酰胆碱酯酶(AChE)亚细胞分布特点。结果表明,星豹蛛的AChE主要存在于微粒体和线粒体中,其活性之和占到总活性的63.14%,其次才是细胞核及其碎片和胞质液;使用TritonX100处理各亚层... 展开更多; 关键词星豹蛛乙酰胆碱酯酶差速离心法亚细胞分布; 在线阅读下载PDF 职称材料

紫花苜蓿线粒体和叶绿体DNA高效提取体系的建立被引量：2: 6; 作者姜少俊周海辰 +4 位作者金樑宋瑜杨阳张晓强王晓娟《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期747-754,共8页; 细胞质雄性不育系是作物杂种优势利用的有效途径,分离其不育系线粒体和叶绿体基因组是深入探究细胞质雄性不育分子机制的重要环节,本研究以紫花苜蓿细胞质雄性不育系CMS1和野生对照植株WT为研究材料,选取新鲜叶片经冷冻匀浆、差速离心... 展开更多; 关键词紫花苜蓿线粒体DNA 叶绿体DNA 差速离心法; 在线阅读下载PDF 职称材料

海苔和茶叶中铝的亚细胞分布及风险评估被引量：2: 7; 作者宋政马丽霞 +2 位作者彭青枝黄徽程银琪《食品与机械》北大核心 2021年第3期46-50,63,共6页; 以海苔和茶叶为研究对象,采用差速离心法结合微波消解—电感耦合等离子体质谱法分析茶叶和海苔中铝的亚细胞分布,结果表明,茶叶中铝在细胞壁、细胞器、细胞质中占比分别为78.4%,11.2%,9.5%,海苔中铝在细胞壁、细胞器、细胞质中占比分别... 展开更多; 关键词铝茶叶海苔差速离心法透射电子显微镜—能谱法; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甘蔗叶绿体DNA的提取方法及其验证分析被引量：3: 1; 作者岑华飞黄玉新罗霆周珊高轶静段维兴杨翠芳周会张革民刘昔辉; 机构广西大学农学院广西甘蔗遗传改良重点实验室广西农业科学院甘蔗研究所/农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室; 出处《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期546-550,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31360357) 广西自然科学基金项目(2013GXNSFBA019063 +2 种基金 2013GXNSFAA019051) 桂农科2012YZ10); 文摘 [目的]探索适于普通实验室条件的甘蔗叶绿体DNA（cpDNA）提取方法,为甘蔗叶绿体分子生物学研究提供参考.[方法]参考水稻、小麦等作物cpDNA的DNase Ⅰ差速离心处理法,采用改良的DNase Ⅰ差速离心法提纯甘蔗cpDNA,并对其trnL基因序列进行比对分析,证实所提取cpDNA的可行性.[结果]采用改良的DNase Ⅰ差速离心处理法提取能得到量多、杂质少的cpDNA,用Eppendorf蛋白核酸测定仪检测,平均每克甘蔗样可提取2.71 μg cpDNA,OD260/OD280为1.79～1.90.对提取的cpDNA的trnL基因序列进行比对分析,证实参试的甘蔗栽培种、斑割复合体后代及其回交材料的叶绿体trnL基因与已报道的甘蔗栽培种NCo 310、SP-80-3280和割手密HN0046的trnL基因相似度均在99.0％以上,并在381、386、389、392、393、400、488、490 bp等8个位点上检测出碱基突变、插入和缺失现象.[结论]采用改良的DNase Ⅰ差速离心处理法提取甘蔗叶绿体DNA具有可行性,提取的甘蔗cpDNA完全可以用于后续的分子水平研究.; 关键词甘蔗叶绿体DNA 提取 trnL基因改良的DNase Ⅰ差速离心法; Keywords sugarcane cpDNA extraction tmL gene modified DNase I differential centrifugation method; 分类号 S566.1 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名速度区带离心分离提纯蚕豆叶绿体: 2; 作者秦德安何学民; 机构华东师大生物系; 出处《生物学教学》 1981年第1期30-31,共2页; 文摘一、原理速度区带离心是在离心过程中借助于密度梯度介质,使不同大小和形状的样品颗粒因沉降速度不同而从达到分离目的的一种离心技术。速度区带离心由于在离心过程中应用了密度梯度介质,故又称作密度梯度离心。1951年,Brakke首次应用了速度区带离心技术。六十年代以来,速度区带离心得到较大的发展,目前已成为一种广泛应用的离心技术。速度区带离心有以下特点:①由于在离心过程中引进了密度梯度介质,增加了整个离心体系的稳定性,有助于克服对流影响。②分离效率高。通常应用的差速离心法虽操作简便,但对沉降系数(S)接近的样品颗粒不易分离。; 关键词速度区带离心离心技术密度梯度沉降系数分离效率沉降速度样品颗粒差速离心法超速离心机过滤漏斗; 分类号 G6 [文化科学—教育学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名两种提取细胞外泌体方法的比较被引量：3: 3; 作者周昌娈谭磊谢军丁铲; 机构中国农业科学院上海兽医研究所西北民族大学; 出处《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第2期64-67,共4页; 基金国家自然科学基金(31772725 31402182) 十三五重点研发项目(2017YFD0500700); 文摘近期研究发现外泌体在很多生理病理过程中起着重要作用,因而外泌体已成为当前的科研热点。本研究从外泌体形态、标志蛋白的表达方面比较了He La细胞外泌体的两种常用提取方法,以期获得更有效地提取Hela细胞中的外泌体方法。利用电镜观察两种方法提取的外泌体形态;动态光散射(dynamic light scattering,DLS)测定外泌体颗粒大小及分布,蛋白印迹法(Western Blot,WB)检测外泌体标志蛋白CD63、CD81的表达。结果显示,差速离心法与PEG沉淀法所提外泌体都呈茶托样双层膜结构,直径约30~150 nm,无明显形态差异,外泌体标志蛋白正常表达,但PEG沉淀法要引入PEG,有可能影响外泌体生物活性,可见,差速离心法是一种更可靠的有效提取外泌体的方法。; 关键词外泌体 HELA细胞差速离心法 PEG沉淀法; Keywords Exosomes HeLa cells differential centrifugation PEG precipitation method; 分类号 Q813 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水牛犊牛血浆外泌体的分离与鉴定: 4; 作者庞春英梁莎莎文崇利陈明棠陆呈委韦科龙潘玉红梁贤威; 机构中国农业科学院广西水牛研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第9期3200-3205,共6页; 基金广西自然科学基金(2017GXNSFAA198108) 广西科技重大专项(桂科AA16450002) 国家自然科学基金项目(31660649)。; 文摘研究旨在从水牛犊牛血浆中分离外泌体,并对分离的外泌体进行分子生物学特征分析和鉴定。采用差速离心法分离3头水牛犊牛的血浆外泌体,并在透射电子显微镜下观察其形态,使用纳米粒度及Zeta电位仪对提取的外泌体进行粒径大小分析,应用Western blotting方法检测外泌体标记蛋白钙联蛋白(Calnexin)、肿瘤易感基因101(TSG101)、CD9、CD81在3头水牛犊牛血浆外泌体中的表达情况。结果显示,从水牛犊牛血浆中分离的外泌体形态多为圆形和椭圆形,直径在30~150 nm;Western blotting检测结果表明,在水牛血浆外泌体表面,特异性蛋白Calnexin、TSG101和CD81阳性表达,CD9不表达。本研究从形态学和分子生物学特征等方面证实研究获得的提取物为外泌体,由此说明,差速离心法可以成功分离提取水牛犊牛血浆中的外泌体,为水牛外泌体的后续研究提供了重要技术基础和参考。; 关键词水牛血浆外泌体差速离心法外泌体特异蛋白; Keywords buffalos plasma exosome differential centrifugation exosome specific protein; 分类号 Q251 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名星豹蛛乙酰胆碱酯酶亚细胞分布的研究: 5; 作者葛衍珍李锐马敏李生才; 机构山西农业大学农学院; 出处《农业技术与装备》 2011年第6期79-80,共2页; 文摘采用差速离心法研究了星豹蛛(PardosaastrigenaL.Koch)乙酰胆碱酯酶(AChE)亚细胞分布特点。结果表明,星豹蛛的AChE主要存在于微粒体和线粒体中,其活性之和占到总活性的63.14%,其次才是细胞核及其碎片和胞质液;使用TritonX100处理各亚层后,AChE的活性均得到提高,且分布趋于一致;星豹蛛AchE在细胞内具有膜结合态和可溶性态两种存在形式。; 关键词星豹蛛乙酰胆碱酯酶差速离心法亚细胞分布; 分类号 Q55 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名紫花苜蓿线粒体和叶绿体DNA高效提取体系的建立被引量：2: 6; 作者姜少俊周海辰金樑宋瑜杨阳张晓强王晓娟; 机构兰州大学草地农业生态系统国家重点实验室草地农业科技学院上海科技馆上海自然博物馆自然史研究中心中国环境管理干部学院; 出处《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期747-754,共8页; 基金国家自然科学基金项目(31270558); 文摘细胞质雄性不育系是作物杂种优势利用的有效途径,分离其不育系线粒体和叶绿体基因组是深入探究细胞质雄性不育分子机制的重要环节,本研究以紫花苜蓿细胞质雄性不育系CMS1和野生对照植株WT为研究材料,选取新鲜叶片经冷冻匀浆、差速离心分离叶绿体和线粒体、DNase I降解核DNA、蛋白酶K裂解线粒体和叶绿体、酚—氯仿—异戊醇去除蛋白质和用乙醇沉淀叶绿体DNA(cpDNA)和线粒体DNA(mtDNA),结果如下:(1)叶绿体提取液中叶绿体数量的平均值为1 500个/m L,而詹纳斯绿B染色观察发现提取液中线粒体结构完整、含量较多;(2)叶片取材量为4 g时,CMS1(WT)的cpDNA平均产率为0.41(0.47)μg/g,而mtDNA的平均产率为1.15(0.83)μg/g;改进叶片取材量为10 g时,两种苜蓿材料的cpDNA和mtDNA的平均产率升高至2.17μg/g和2.22μg/g,并且纯度好(cpDNA和mtDNA的OD260/OD280均保持在2.0左右);延长蛋白酶K消化处理时间(2 h,4 h和6 h)可以提高紫花苜蓿cpDNA和mtDNA的产率,其中消化4 h的mtDNA质量浓度最高(59.9 ng/μL),而cpDNA浓度则在孵育6 h后达到最高值24.3 ng/μL;(3)紫花苜蓿CMS1和WT的mtDNA和cpDNA琼脂糖凝胶电泳检测发现,细胞质基因组条带清晰,无拖尾现象,进一步表明采用以上方法提取的紫花苜蓿mtDNA和cpDNA符合分子遗传学研究的标准和要求。; 关键词紫花苜蓿线粒体DNA 叶绿体DNA 差速离心法; Keywords Medicago sativa L. mitochondrion DNA chloroplast DNA differential centrifugation method; 分类号 S541.103.2 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名海苔和茶叶中铝的亚细胞分布及风险评估被引量：2: 7; 作者宋政马丽霞彭青枝黄徽程银琪; 机构湖北省食品质量安全监督检验研究院国家知识产权局专利局专利审查协作湖北中心; 出处《食品与机械》北大核心 2021年第3期46-50,63,共6页; 基金湖北省食品药品监督管理局科研项目(编号:201802003)。; 文摘以海苔和茶叶为研究对象,采用差速离心法结合微波消解—电感耦合等离子体质谱法分析茶叶和海苔中铝的亚细胞分布,结果表明,茶叶中铝在细胞壁、细胞器、细胞质中占比分别为78.4%,11.2%,9.5%,海苔中铝在细胞壁、细胞器、细胞质中占比分别为91.60%,6.95%,1.33%。结合透射电子显微镜—能谱法对茶叶和海苔中铝的分布在单细胞范围内进行面扫分析,直观地揭示了茶叶和海苔中铝主要分布在细胞壁中。人工模拟胃液提取茶叶和海苔及其亚细胞组分中的铝,直接提取茶叶中铝的提取率为9.0%左右,其亚细胞组分提取率均不足3.0%;海苔及其亚细胞组分中铝的提取率均低于1.5%,提示茶叶和海苔中铝摄入的食品安全风险较低。; 关键词铝茶叶海苔差速离心法透射电子显微镜—能谱法; Keywords aluminium tea seaweed differential centrifugation transmission electron microscope-energy dispersive spectrometer; 分类号 TS272 [农业科学—茶叶生产加工] TS254.58 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	甘蔗叶绿体DNA的提取方法及其验证分析	岑华飞黄玉新罗霆周珊高轶静段维兴杨翠芳周会张革民刘昔辉	《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	速度区带离心分离提纯蚕豆叶绿体	秦德安何学民	《生物学教学》	1981	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	两种提取细胞外泌体方法的比较	周昌娈谭磊谢军丁铲	《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心	2018	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	水牛犊牛血浆外泌体的分离与鉴定	庞春英梁莎莎文崇利陈明棠陆呈委韦科龙潘玉红梁贤威	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	星豹蛛乙酰胆碱酯酶亚细胞分布的研究	葛衍珍李锐马敏李生才	《农业技术与装备》	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	紫花苜蓿线粒体和叶绿体DNA高效提取体系的建立	姜少俊周海辰金樑宋瑜杨阳张晓强王晓娟	《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	海苔和茶叶中铝的亚细胞分布及风险评估	宋政马丽霞彭青枝黄徽程银琪	《食品与机械》北大核心	2021	2	在线阅读下载PDF 职称材料