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细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞抑制性差减杂交文库构建及巨噬细胞表达蛋白cDNA的克隆与差异表达
被引量:
4
1
作者
任洪林
徐丹丹
+4 位作者
乔琨
蔡灵
黄伟滨
张鼐
王克坚
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期1043-1050,共8页
以雌性杂色鲍为对象,以大肠杆菌、副溶血弧菌、溶壁微球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的混悬液做为攻毒菌,利用抑制性差减杂交(SSH)技术构建细菌攻毒的杂色鲍血淋巴细胞SSHcDNA文库。随机挑取生长菌落110个克隆子,进行菌液PCR鉴定,...
以雌性杂色鲍为对象,以大肠杆菌、副溶血弧菌、溶壁微球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的混悬液做为攻毒菌,利用抑制性差减杂交(SSH)技术构建细菌攻毒的杂色鲍血淋巴细胞SSHcDNA文库。随机挑取生长菌落110个克隆子,进行菌液PCR鉴定,计算文库重组率为98.18%,文库容量为1.37×106pfu。将重组子测序,经BLAST一致性搜索比对分析,有一重组片段含有穿孔素(Perforin)保守结构域,为巨噬细胞表达蛋白(MEP)类穿孔素部分cDNA序列,片段大小为1551bp,连续编码517个氨基酸残基,申请GenBank登录号为EU272049。经半定量PCR和荧光定量PCR差异显示分析,发现在细菌感染状态下MEP基因在血淋巴细胞中存在明显的上调表达现象。
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关键词
杂色鲍
血淋巴
细胞
细菌
抑制性差减杂交
巨噬细胞表达蛋白
类穿孔素
差异
表达
分析
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职称材料
题名
细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞抑制性差减杂交文库构建及巨噬细胞表达蛋白cDNA的克隆与差异表达
被引量:
4
1
作者
任洪林
徐丹丹
乔琨
蔡灵
黄伟滨
张鼐
王克坚
机构
近海海洋环境科学国家重点实验室厦门大学海洋与环境学院
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第8期1043-1050,共8页
基金
国家高技术研究发展计划项目(863计划)(编号:2007AA091406)资助~~
文摘
以雌性杂色鲍为对象,以大肠杆菌、副溶血弧菌、溶壁微球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的混悬液做为攻毒菌,利用抑制性差减杂交(SSH)技术构建细菌攻毒的杂色鲍血淋巴细胞SSHcDNA文库。随机挑取生长菌落110个克隆子,进行菌液PCR鉴定,计算文库重组率为98.18%,文库容量为1.37×106pfu。将重组子测序,经BLAST一致性搜索比对分析,有一重组片段含有穿孔素(Perforin)保守结构域,为巨噬细胞表达蛋白(MEP)类穿孔素部分cDNA序列,片段大小为1551bp,连续编码517个氨基酸残基,申请GenBank登录号为EU272049。经半定量PCR和荧光定量PCR差异显示分析,发现在细菌感染状态下MEP基因在血淋巴细胞中存在明显的上调表达现象。
关键词
杂色鲍
血淋巴
细胞
细菌
抑制性差减杂交
巨噬细胞表达蛋白
类穿孔素
差异
表达
分析
Keywords
variously colored abalone(Haliotis diversicolor)
haemocyte
bacteria
SSH
macrophage expressed protein
perforin-like
differential expression analysis
分类号
S917.4 [农业科学—水产科学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞抑制性差减杂交文库构建及巨噬细胞表达蛋白cDNA的克隆与差异表达
任洪林
徐丹丹
乔琨
蔡灵
黄伟滨
张鼐
王克坚
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008
4
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