目的探究METTL3(methyltransferase like 3,METTL3)介导的m6A(N6甲基腺苷)修饰对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)焦亡的影响。方法ox-LDL(50μg/mL)诱导RAW264....目的探究METTL3(methyltransferase like 3,METTL3)介导的m6A(N6甲基腺苷)修饰对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)焦亡的影响。方法ox-LDL(50μg/mL)诱导RAW264.7细胞24 h后,对METTL3进行敲低或过表达,检测培养细胞RNA m6A甲基化水平,荧光定量PCR和Western blot法检测METTL3和细胞焦亡相关基因NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平,乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测细胞死亡率,酶联免疫吸附法检测炎症细胞因子IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α和IL-10的含量。结果ox-LDL能够促进RAW264.7巨噬细胞METTL3的表达和RNA m6A甲基化水平,同时也能促进炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α的分泌(P<0.05),降低IL-10(P<0.05)的表达。在ox-LDL诱导基础上,METTL3过表达后,RNA m6A甲基化水平升高,NLRP3、NF-κB p65、GSDMD-N、Caspase-1表达显著增加,促炎细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18水平升高,抗炎细胞因子IL-10水平降低,LDH释放增加,METTL3敲低后结果相反。结论METTL3介导的m6A修饰能够显著促进ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡和炎症反应。展开更多
