CpG-寡核苷酸对巨噬泡沫细胞形成相关基因表达的调控作用

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作者 万斌 胡振林 +1 位作者 周凤娟 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期458-459,共2页

关键词 CpG-寡核苷酸 巨噬泡沫细胞形成相关基因 表达 调控作用 RT—PCR技术

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稽留流产患者蜕膜组织高表达核心蛋白聚糖并抑制PBMC来源的巨噬细胞M1极化及机制研究

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作者 刘丽平 徐慧 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第8期724-734,共11页

目的探究稽留流产(MA)患者蜕膜组织的巨噬细胞极化变化、核心蛋白聚糖(DCN)蛋白表达及DCN在巨噬细胞极化中的调节作用。方法流式细胞术检测MA、复发性流产(RSA)和正常妊娠人群蜕膜巨噬细胞极化比例,免疫组织化学染色检测DCN、缺氧诱导因... 目的探究稽留流产(MA)患者蜕膜组织的巨噬细胞极化变化、核心蛋白聚糖(DCN)蛋白表达及DCN在巨噬细胞极化中的调节作用。方法流式细胞术检测MA、复发性流产(RSA)和正常妊娠人群蜕膜巨噬细胞极化比例,免疫组织化学染色检测DCN、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在蜕膜和绒毛组织的表达和定位,Western blot法检测蜕膜和绒毛中DCN、HIF-1α的蛋白表达。分离获取原代滋养细胞(Trops)和外周血单个核细胞(PBMC)来源的巨噬细胞,ELISA检测原代滋养细胞和PBMC来源的巨噬细胞培养上清中DCN含量,流式细胞术检测PBMC来源的巨噬细胞极化比例,免疫荧光细胞化学染色检测巨噬细胞中HIF-1α的表达,Western blot法检测巨噬细胞中干扰素/维甲酸联合诱导细胞死亡相关基因19(GRIM-19)/信号转导子和转录激活因子3(STAT3)/HIF-1α信号相关蛋白表达。结果流产患者蜕膜M1型巨噬细胞极化比例明显高于正常妊娠,而M2型极化比例明显降低;且绒毛和蜕膜中DCN和HIF-1α表达明显高于正常妊娠。在10 mL/L O_(2)条件下培养24 h的原代滋养细胞和PBMC来源的巨噬细胞上清液中DCN、HIF-1α蛋白含量明显高于210 mL/L O_(2)处理的细胞;与PBS组相比,在10 mL/L和210 mL/LO_(2)条件下DCN组的M1型巨噬细胞比例明显降低;GRIM-19蛋白表达明显降低,磷酸化的STAT3(p-STAT3)和HIF-1α蛋白明显升高。结论与正常早期妊娠相比,MA患者的蜕膜和绒毛中高表达DCN,DCN抑制PBMC来源的巨噬细胞M1极化,并与GRIM-19/STAT3/HIF-1α信号有关。 展开更多

关键词 巨噬细胞极化 核心蛋白聚糖(DCN) 稽留流产(MA) 滋养细胞 干扰素维甲酸联合诱导细胞死亡相关基因19(GRIM-19) 信号转导子和转录激活因子3(STAT3) 缺氧诱导因子1α(HIF-1α)

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过表达或抑制肿瘤相关巨噬细胞B7-H1基因对卵巢癌增殖侵袭的机制研究 被引量：6

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作者 瞿秋红 韦立蓓 尹伶 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1195-1200,共6页

目的:探讨过表达或抑制肿瘤相关巨噬细胞(TAM)B7-H1基因对卵巢癌增殖侵袭的影响及机制。方法:在体外刺激人单核THP-1细胞成为巨噬细胞,并诱导为TAM,通过腺病毒载体系统过表达(Ad-B7-H1)或抑制(Ad-si B7-H1)TAM中的B7-H1基因,通过Western... 目的:探讨过表达或抑制肿瘤相关巨噬细胞(TAM)B7-H1基因对卵巢癌增殖侵袭的影响及机制。方法:在体外刺激人单核THP-1细胞成为巨噬细胞,并诱导为TAM,通过腺病毒载体系统过表达(Ad-B7-H1)或抑制(Ad-si B7-H1)TAM中的B7-H1基因,通过Western blot检测转染后的TAM中的B7-H1表达;单独培养(Alone组)与过表达(si B7-H1-TAM组)或抑制(B7-H1-TAM组)B7-H1基因的TAM共培养后,CCK8法检测CAOV3细胞的活力。Transwell小室检测细胞的迁移能力;Western blot检测Ki67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、磷酸化的蛋白酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化的信号转导与转录因子3(p-STAT3)。结果:Ad-si B7-H1组B7-H1的表达显著低于对照组,Ad-B7-H1组B7-H1的表达显著高于对照组(P<0.05);与单独培养组比较,TAM组细胞活力、细胞侵袭能力及Ki67、MMP-2、MMP-9、p-JAK2和p-STAT3的蛋白表达均显著升高(P<0.05),与RFP-TAM组比较,si B7-H1-TAM组的细胞活力、细胞侵袭能力及Ki67、MMP-2、MMP-9、pJAK2和p-STAT3的蛋白表达均显著降低,B7-H1-TAM组的细胞活力、细胞侵袭能力及Ki67、MMP-2、MMP-9、p-JAK2和pSTAT3的蛋白表达均显著升高(P<0.05)。结论:抑制肿瘤相关巨噬细胞B7-H1基因可抑制卵巢癌细胞活力及侵袭能力,下调JAK2/STAT3信号通路,过表达B7-H1基因反之。 展开更多

关键词 肿瘤相关巨噬细胞 卵巢癌 B7-H1基因 增殖 侵袭 JAK2/STAT3信号通路

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脂肪分化相关蛋白在巨噬细胞和泡沫细胞中的表达 被引量：3

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作者 宋越 李航 +2 位作者 张丽英 叶菁 李青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期309-311,共3页

目的:观察脂肪分化相关蛋白(ADRP)在单核细胞向巨噬细胞和泡沫细胞分化过程中的表达变化。方法:体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞和泡沫细胞,应用RealtimeRT-PCR和Western blot测定ADRP在基因水平和蛋白水平的表达。结果:单核细胞... 目的:观察脂肪分化相关蛋白(ADRP)在单核细胞向巨噬细胞和泡沫细胞分化过程中的表达变化。方法:体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞和泡沫细胞,应用RealtimeRT-PCR和Western blot测定ADRP在基因水平和蛋白水平的表达。结果:单核细胞分化为巨噬细胞时ADRP的表达水平无明显变化,当进一步分化为泡沫细胞时,ADRP的mR-NA和蛋白表达水平均显著增加。结论:单核细胞向巨噬细胞分化时对ADRP的表达无影响,而由巨噬细胞进一步向泡沫细胞分化时ADRP的表达升高。 展开更多

关键词 脂肪分化相关蛋白 脂滴 巨噬细胞 泡沫细胞 动脉粥样硬化

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降钙素基因相关肽对脂多糖诱导的巨噬细胞表达髓样细胞触发受体-1的影响(英文) 被引量：2

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作者 李云超 管茶香 +4 位作者 周漾 孙国瑛 施萌 邬晶 李文杰 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期100-106,共7页

目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞表达髓样细胞触发受体-1(TREM-1)的影响及其信号转导途径。方法:采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)观察巨噬细胞TREM-1mRNA表达量的变化,应用流式细胞术检测巨噬细胞... 目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞表达髓样细胞触发受体-1(TREM-1)的影响及其信号转导途径。方法:采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)观察巨噬细胞TREM-1mRNA表达量的变化,应用流式细胞术检测巨噬细胞膜表面TREM-1蛋白的表达。结果:CGRP对未受刺激的巨噬细胞表达TREM-1无明显影响,LPS可诱导巨噬细胞表达TREM-1;CGRP预处理呈剂量和时间依赖性上调LPS所致的巨噬细胞TREM-1mRNA的表达;同时,CGRP上调LPS所致的巨噬细胞膜表面TREM-1蛋白的表达;上述作用均可被PKC阻断剂H-7和PKA阻断剂H-89部分逆转(P<0.05)。结论:CGRP上调LPS诱导的巨噬细胞表达TREM-1,其胞内信号转导途径与PKA和PKC有关。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽 髓样细胞触发受体-1 脂多糖 巨噬细胞

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大豆异黄酮对褐牙鲆头肾巨噬细胞免疫相关基因表达的体外研究 被引量：3

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作者 姜秦 杨宁 +2 位作者 袁瑞 陈京华 王正丽 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期787-792,共6页

大豆异黄酮作为免疫增强剂对机体具有免疫调节作用。在离体条件下以不同质量浓度大豆异黄酮细胞培养液(0、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0mg/mL)培养褐牙鲆头肾巨噬细胞,分别在培养至6、12、24h收集细胞并进行细胞RNA提取,通过荧光定量PCR测... 大豆异黄酮作为免疫增强剂对机体具有免疫调节作用。在离体条件下以不同质量浓度大豆异黄酮细胞培养液(0、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0mg/mL)培养褐牙鲆头肾巨噬细胞,分别在培养至6、12、24h收集细胞并进行细胞RNA提取,通过荧光定量PCR测定巨噬细胞中免疫相关基因IL-1"、IFN-#、IgM及HSP70的相对表达量。试验结果表明,在体外培养下,大豆异黄酮显著影响褐牙鲆头肾巨噬细胞中4种免疫相关基因的相对表达,且大豆异黄酮质量浓度为0.5~1.5mg/mL时,显著上调IL-1"、IFN-#和HSP70基因的相对表达(P<0.05),0.5~1.0mg/mL的大豆异黄酮显著上调IgM基因的相对表达(P<0.05)。选取大豆异黄酮质量浓度为1.0mg/mL时,研究脂多糖刺激下大豆异黄酮对4种基因相对表达量的影响,试验结果显示,在脂多糖刺激下,褐牙鲆头肾巨噬细胞4种免疫相关基因随刺激时间的变化趋势与未添加大豆异黄酮组基本一致,但是在特定取样时间点,其相对表达量显著增加。IL-1"在脂多糖刺激后6h和24h表达量极显著高于对照组(P<0.01);IFN-#在脂多糖刺激后24h表达量显著高于对照组(P<0.05);IgM则在刺激后6h极显著高于对照组(P<0.01);而HSP70自脂多糖刺激后3h开始,其相对表达量均极显著高于对照组(P<0.01)。综上所述,在本试验条件下,培养液中大豆异黄酮质量浓度为0.5~1.5mg/mL时,能够显著上调体外培养条件下褐牙鲆头肾巨噬细胞IL-1"、IFN-#、IgM和HSP70基因的相对表达,从而增强褐牙鲆头肾巨噬细胞的免疫力。 展开更多

关键词 大豆异黄酮 褐牙鲆 头肾巨噬细胞 免疫相关基因

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降钙素基因相关肽对大鼠骨髓单核巨噬细胞破骨分化作用的实验研究 被引量：1

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作者 张文强 段春光 +5 位作者 孟国林 王春梅 唐鹏 王铮 曾艳平 刘建 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期403-408,共6页

目的通过体外实验研究外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对大鼠骨髓单核巨噬细胞(BMMs)破骨分化能力的影响,为CGRP在抗骨质疏松治疗方面的应用提供理论依据。方法采用差速贴壁的方法分离出SD大鼠髓腔内单... 目的通过体外实验研究外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对大鼠骨髓单核巨噬细胞(BMMs)破骨分化能力的影响,为CGRP在抗骨质疏松治疗方面的应用提供理论依据。方法采用差速贴壁的方法分离出SD大鼠髓腔内单核巨噬细胞,原代培养并传代,在培养体系中添加含不同浓度CGRP(实验组:10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L;对照组:无CGRP)的破骨诱导液,对前体细胞进行破骨诱导7天后进行相关实验检测,分别采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP染色)观察破骨细胞的生成能力;用RT-PCR方法检测破骨细胞系特征性基因(RANK、TRAP、NFATc1);Western-blot检测破骨特征性TRAP和RANK蛋白的表达;骨磨片甲苯胺蓝染色检测诱导的破骨细胞的骨吸收功能。结果 TRAP染色显示CGRP各浓度组镜下成熟破骨细胞的个数显著低于对照组,有统计学差异(P<0.05)并随CGRP浓度的增高成熟破骨细胞数减少,CGRP组间亦差异明显(P<0.05);RT-PCR检测破骨特征性RANK、TRAP、NFATc1 mRNA和Western-blot测破骨特征性TRAP、RANK蛋白的表达各CGRP组均低于对照组(P<0.05);骨磨片破骨细胞甲苯胺蓝染色后单倍视野下CGRP组破骨陷窝数量也明显少于对照组(P<0.05),且与药物组浓度与陷窝数量呈负相关性。结论 CGRP能够抑制BMMs向破骨方向的分化,为CGRP抗骨质疏松的治疗提供理论支持。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽 单核巨噬细胞 破骨分化

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巨噬细胞相关基因与非小细胞肺癌预后和肿瘤微环境的分析 被引量：1

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作者 孙清玙 周阳 +4 位作者 杜丽娟 张梦珂 王家乐 任媛媛 刘芳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期684-699,共16页

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是一种高发病率和高死亡率的疾病,其预后和药物治疗效果存在个体化差异。因此,了解肺癌发生和发展的分子机制可以有效提高早期诊断和治疗,改善患者预后。巨噬细胞具有高度可塑性和异质性... 非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是一种高发病率和高死亡率的疾病,其预后和药物治疗效果存在个体化差异。因此,了解肺癌发生和发展的分子机制可以有效提高早期诊断和治疗,改善患者预后。巨噬细胞具有高度可塑性和异质性,是肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中发挥抗肿瘤作用的关键细胞之一,在肿瘤发生发展过程中起着复杂的作用。为了阐明NSCLC中肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)相关基因在肺癌中的发生机制,本研究采用转录组测序、单因素COX回归、LASSO回归、多因素COX回归分析方法,筛选出与预后最相关的11个基因(FCRLA、LDHA、LMOD3、MAP3K8、NT5E、PDGFB、S100P、SFXN1、TDRD1、TFAP2A、TUBB6)。计算风险评分(risk score,RS),根据RS中位数将所有样本分为高风险组和低风险组,并采用CIBERSORT反卷积算法验证RS及11个基因与巨噬细胞的相关性。上述结果表明,本研究所建立的风险评分可用于非小细胞肺癌患者预后预测,还可评估患者的免疫浸润状态,为后续肿瘤免疫治疗及基因靶向治疗提供参考。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 肿瘤微环境 肿瘤相关巨噬细胞 关键基因

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烟草自然抗性相关巨噬细胞蛋白基因家族的鉴定与分析 被引量：1

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作者 陈邦兰 翟梦倩 +6 位作者 龙涛 赵顺程 刘娟 尹茂灵 万心言 王治杰 刘继恺 《安徽农业科学》 CAS 2021年第3期100-104,109,共6页

自然抗性相关巨噬细胞蛋白(natural resistance associated macrophage proteins,NRAMPs)是一类高度保守的二价金属跨膜转运蛋白,在调控生物体内重金属稳态中发挥着重要作用。为了探究烟草NRAMP基因的多样性,该研究根据烟草基因组数据信... 自然抗性相关巨噬细胞蛋白(natural resistance associated macrophage proteins,NRAMPs)是一类高度保守的二价金属跨膜转运蛋白,在调控生物体内重金属稳态中发挥着重要作用。为了探究烟草NRAMP基因的多样性,该研究根据烟草基因组数据信息,利用生物信息学方法对烟草NRAMP基因家族成员进行了鉴定,对其基本信息、结构特点、蛋白理化性质及保守序列、启动子元件和组织表达模式等进行了分析。结果表明:烟草基因组含有9个NtNRAMP基因,分别命名为NtNRAMP1.1~6.2,其编码氨基酸长度为500~542 aa,蛋白分子量为54.31~59.11 kD,等电点为5.09~8.73,总平均亲水性为0.475~0.604;除了NRAMP6.1和6.2不含有motif4外,其余NRAMP蛋白都含有motif1~motif10。顺式作用元件分析表明所有NtNRAMP基因启动子中均含有参与基因转录、非生物胁迫、植物激素响应和光应答途径的元件,部分基因含有生物胁迫、次生代谢、组织表达和结合位点的元件。染色体定位发现,6个NtNRAMP基因分别分布在5条烟草染色体上。表达分析表明:NtNRAMP基因组织表达模式差异较大,其中NtNRAMP6.1和NtNRAMP6.2基因表达具有组织特异性。该研究结果为进一步研究烟草NtNRAMP基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 自然抗性相关巨噬细胞蛋白 烟草 基因家族 表达分析

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小鼠腹腔巨噬细胞内胆固醇酯再形成的选择性抑制剂——FO-6979-P9 被引量：2

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作者 司书毅 生田目 +2 位作者 供田洋 吴剑波 大村智 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期1-3,共3页

ＦＯ－６９７９－Ｐ９是在从真菌培养液筛选巨噬细胞泡沫化抑制剂过程中获得的，其对小鼠腹腔巨噬细胞中胆固醇酯再形成的抑制ＩＣ５０为０．３８ｍｇ／Ｌ（０．７８μｍｏｌ／Ｌ），而对甘油三酯和磷脂的再形成无显著抑制作用。真菌Ｂ... ＦＯ－６９７９－Ｐ９是在从真菌培养液筛选巨噬细胞泡沫化抑制剂过程中获得的，其对小鼠腹腔巨噬细胞中胆固醇酯再形成的抑制ＩＣ５０为０．３８ｍｇ／Ｌ（０．７８μｍｏｌ／Ｌ），而对甘油三酯和磷脂的再形成无显著抑制作用。真菌Ｂｅａｕｖｅｒｉａｓｐ．ＦＯ－６９７９静置培养１４ｄ后，经有机溶媒提取，常压ＯＤＳ柱层析和制备ＨＰＬＣ柱层析分离得到ＦＯ－６９７９－Ｐ９纯品。又经过测定其ＦＡＢＭＳ、ＵＶ、１Ｈ－ＮＭＲ、１３Ｃ－ＮＭＲ、１Ｈ－１ＨＣＯＳＹ、ＤＥＰＴ、ＨＭＱＣ和ＨＭＢＣ等光谱数据。 展开更多

关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 泡沫细胞 胆固醇酯再形成抑制剂 FO-6979-P9

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GLI1介导的巨噬细胞极化调控缺氧性肺动脉高压的作用及机制 被引量：1

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作者 朱祥瑞 梅健 +8 位作者 王朝思 欧琅琳 张立新 王晓颖 和思燏 白君娥 管晓宇 袁昊 马翠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1016-1022,共7页

目的:探讨神经胶质瘤相关癌基因家族锌指1(GLI1)对缺氧诱导大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)发生M1表型转化的作用机制及对肺动脉高压(PH)进展的影响。方法:将15只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、缺氧PH模型组和缺氧PH加GANT61给药处理组,... 目的:探讨神经胶质瘤相关癌基因家族锌指1(GLI1)对缺氧诱导大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)发生M1表型转化的作用机制及对肺动脉高压(PH)进展的影响。方法:将15只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、缺氧PH模型组和缺氧PH加GANT61给药处理组,每组5只。小动物超声、右心导管实验检测大鼠PH相关指标,确定GLI1特异性抑制剂GANT61对PH进程的影响。HE染色检测肺动脉壁厚度。免疫组化检测α-SMA及M1型极化标志物TNF-α和IL-1β蛋白表达。免疫荧光检测M1型极化标志物CD86及TNF-α表达。Western blot检测GLI1及NF-κB蛋白表达。qRT-PCR检测M1型极化标志物iNOS、CD86、TNF-α、IL-1β及IL-12 mRNA表达。CHIP-PCR验证GLI1调控NF-κB启动子活性。ELISA检测IL-12含量。CCK-8检测大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。结果:GLI1抑制剂GANT61可缓解缺氧大鼠PH(P<0.05)。与缺氧组相比,抑制GLI1可降低大鼠肺组织TNF-α和IL-1β表达(P<0.05)。细胞实验中,缺氧通过上调GLI1激活NF-κB通路诱导NR8383 M1型极化,GLI1过表达促进M1型巨噬细胞相关标志物iNOS、CD86、TNF-α、IL-1β及IL-12表达(P<0.05)。NR8383培养上清可刺激肺动脉平滑肌细胞增殖(P<0.05),参与PH。结论:缺氧通过上调GLI1激活NF-κB通路诱导巨噬细胞发生M1型极化参与PH发生。 展开更多

关键词 神经胶质瘤相关癌基因家族锌指1 缺氧 巨噬细胞 M1型极化 肺动脉高压

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基于温里药抑制肺癌的药物筛选及对肿瘤相关巨噬细胞的影响 被引量：6

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作者 李洪霖 吴建春 +1 位作者 崔亚静 李雁 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第6期1359-1362,I0019-I0022,共8页

目的：根据《中药学》第7版，将温里药附子、肉桂、干姜、高良姜、丁香、小茴香、花椒、吴茱萸、胡椒、荜茇、荜澄茄进行筛选，选出温里药中对Lewis小鼠具有抑瘤作用的温里药，并通过数据库筛选出肿瘤的有效成分，为下一步温里药组方奠... 目的：根据《中药学》第7版，将温里药附子、肉桂、干姜、高良姜、丁香、小茴香、花椒、吴茱萸、胡椒、荜茇、荜澄茄进行筛选，选出温里药中对Lewis小鼠具有抑瘤作用的温里药，并通过数据库筛选出肿瘤的有效成分，为下一步温里药组方奠定基础。方法：构建Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤模型，将附子、干姜、高良姜、丁香、小茴香、花椒、吴莱萸、胡椒、荜茇、荜澄茄灌胃21d后，观察其抑瘤效果。结果：附子、吴茱萸、荜茇对肿瘤具有抑制作用，与对照组相比，附子、吴莱萸、荜茇对肿瘤具有抑制效果，可以抑制Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤的生长，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：温里药中的附子、吴茱萸、荜茇对Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤有抑制作用，荜茇可抑制肿瘤组织中CD206的表达。 展开更多

关键词 温里药 肺癌 LEWIS肺癌小鼠 肿瘤相关巨噬细胞 基因/蛋白网络分析

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基因工程改造巨噬细胞及其应用 被引量：1

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作者 鲍佳明 赵晨旭 +1 位作者 孙凌云 赵勇(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期2062-2070,共9页

巨噬细胞具有高度异质性,与肿瘤、自身免疫病等多种疾病相关。因此,巨噬细胞作为这些疾病治疗的潜在靶点受到越来越多的关注。基因工程作为改造细胞的一种手段,应用十分广泛。由于巨噬细胞自身特点和限制性,导致常规基因编辑手段对巨噬... 巨噬细胞具有高度异质性,与肿瘤、自身免疫病等多种疾病相关。因此,巨噬细胞作为这些疾病治疗的潜在靶点受到越来越多的关注。基因工程作为改造细胞的一种手段,应用十分广泛。由于巨噬细胞自身特点和限制性,导致常规基因编辑手段对巨噬细胞的高效改造仍有难度。近来经过不断尝试和改进,基因工程改造巨噬细胞的效率明显提高。本文主要介绍目前常用的几种巨噬细胞改造方法,并分析其优缺点,简要讨论目前基因工程改造巨噬细胞在疾病如肿瘤、自身免疫病诊治及抗移植物排斥等方面的应用前景。 展开更多

关键词 基因工程 巨噬细胞 转染 转导 疾病 慢病毒 腺相关病毒 脂质体 生物材料 电转染

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免疫反应基因1/衣康酸在调控巨噬细胞炎症中的研究进展 被引量：2

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作者 朱宇琪 于英华 潘伟(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期2592-2596,2601,共6页

免疫反应基因1(IRG1)是三羧酸循环的一种代谢酶,其催化顺乌头酸脱羧产生衣康酸。IRG1/衣康酸是巨噬细胞免疫与代谢的重要连接点,其作用及机制研究在近年取得了重大进展。研究证实,衣康酸是负向调控巨噬细胞炎症反应的关键代谢物,其可通... 免疫反应基因1(IRG1)是三羧酸循环的一种代谢酶,其催化顺乌头酸脱羧产生衣康酸。IRG1/衣康酸是巨噬细胞免疫与代谢的重要连接点,其作用及机制研究在近年取得了重大进展。研究证实,衣康酸是负向调控巨噬细胞炎症反应的关键代谢物,其可通过抑制琥珀酸脱氢酶(SDH)活性及诱导核因子E2相关因子2(Nrf2)介导抗氧化等机制下调LPS诱导的巨噬细胞炎症反应。此外,基于衣康酸设计的衍生物显示出对炎症疾病的治疗潜力。本文就IRG1/衣康酸调控巨噬细胞炎症反应的分子机制研究进行综述。 展开更多

关键词 巨噬细胞炎症 免疫反应基因1 衣康酸 琥珀酸脱氢酶 核因子E2相关因子2

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PTH作用于老年大鼠骨髓细胞骨代谢相关基因表达的实验方法 被引量：6

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作者 丰盛梅 高建军 金慰芳 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期219-221,242,共4页

目的　从骨髓微环境角度研究甲状旁腺激素 (parathyroidhormone,PTH)对老年大鼠骨形成刺激作用的分子机制。方法　 8只 2 0月龄雄性大鼠随机平均分两组 ,每组 4只 ,分别给予人重组甲状旁腺激素和生理盐水 ,1次 /天 ,5次 /周 ,8周后处死 ... 目的　从骨髓微环境角度研究甲状旁腺激素 (parathyroidhormone,PTH)对老年大鼠骨形成刺激作用的分子机制。方法　 8只 2 0月龄雄性大鼠随机平均分两组 ,每组 4只 ,分别给予人重组甲状旁腺激素和生理盐水 ,1次 /天 ,5次 /周 ,8周后处死 ,无菌获取股骨和腰椎骨髓细胞 ,用RT PCR法检测成骨功能相关基因核结合因子α1(Cbfα1)、碱性磷酸酶 (ALP)和骨钙素 (BGP)及破骨细胞分化成熟调节基因NF κB受体激活因子配体(RANKL)、骨保护素 (OPG)、巨噬细胞克隆刺激因子 (M CSF)、肿瘤坏死因子受体相关因子 6 (TRAF6 )和白介素 - 6 (IL 6 )mRNA表达水平。结果　PTH显著增加骨髓细胞中成骨功能相关基因Cbfα1、ALP和BGPmRNA表达 (P <0 .0 5～ 0 .0 0 1) ;调整破骨细胞分化成熟调节基因mRNA表达 :下调RANKL、M CSF和TRAF6mRNA表达 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,上调OPGmRNA表达 (P <0 .0 1)和IL 6mRNA表达 (P <0 .0 5 )。股骨与腰椎呈类似变化。结论　PTH增加老年大鼠骨量可能与其强烈刺激骨髓微环境中成骨活性基因表达 ,同时调整破骨细胞分化和功能成熟状态有关。 展开更多

关键词 骨髓细胞 老年大鼠 相关基因表达 PTH 实验方法 肿瘤坏死因子受体相关因子 巨噬细胞克隆刺激因子 骨代谢 破骨细胞分化 基因mRNA表达 甲状旁腺激素 骨髓微环境 PCR法检测 成骨功能 0.05 碱性磷酸酶 RANKL 分子机制 刺激作用 雄性大鼠 生理盐水 激活因子 调节基

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PPARα、γ配体对单核细胞来源的巨噬细胞的作用观察 被引量：1

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作者 舒茂琴 何作云 +2 位作者 王国超 方玉强 李晓霞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期924-927,共4页

目的　探讨PPARα和γ配体在动脉粥样硬化病变局部的作用。方法　观察PPARα和γ配体对氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)介导的巨噬细胞清道夫受体A(SRA)基因表达、肿瘤坏死因子 (TNF α)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)释放、细胞增殖与凋亡的影... 目的　探讨PPARα和γ配体在动脉粥样硬化病变局部的作用。方法　观察PPARα和γ配体对氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)介导的巨噬细胞清道夫受体A(SRA)基因表达、肿瘤坏死因子 (TNF α)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)释放、细胞增殖与凋亡的影响。结果　中低浓度的PPARα和γ配体不但增强ox LDL介导的巨噬细胞TNF α、MMP 9表达 ,而且有促细胞凋亡和抗细胞增殖的作用 ;PPARγ配体不但能显著增加巨噬细胞PPARγmRNA表达 ,而且还能抑制ox LDL介导的巨噬细胞SRA。结论　PPARα和γ基因激活可能有抗炎和抗细胞增生的作用 ,后者可能还有助于减少粥样斑块脂质内容。 展开更多

关键词 核受体 泡沫细胞 细胞凋亡 单核巨噬细胞 过氧化酶体增殖激活受体 Γ基因 动脉粥样硬化

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皮下注射巨噬细胞集落刺激因子诱导机械痛超敏的性别二态性 被引量：2

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作者 彭湘格 林震嘉 +5 位作者 张辉 冷世泽 唐源 郑钰凡 谈智 周利君 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期395-402,共8页

【目的】通过正常小鼠皮下注射巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)来研究其对疼痛行为的影响是否存在性别差异,并初步探讨其机制。【方法】将30只10周龄C57 BL/6J小鼠随机分为三组(每组10只,雌雄各半):牛血清白蛋白对照组(BSA,0.3μg)、低剂量... 【目的】通过正常小鼠皮下注射巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)来研究其对疼痛行为的影响是否存在性别差异,并初步探讨其机制。【方法】将30只10周龄C57 BL/6J小鼠随机分为三组(每组10只,雌雄各半):牛血清白蛋白对照组(BSA,0.3μg)、低剂量M-CSF组(L M-CSF,0.075μg)、高剂量M-CSF组(H M-CSF,0.3μg)。分别于左大腿内侧皮下注射50μL BSA或M-CSF,每日1次,连续3 d。给药前后采用von-Frey机械敏感性测试检测各组小鼠的机械撤足阈值(PWT)。再用免疫荧光染色法观察皮肤离子钙结合衔接蛋白1(Iba1),L5-L6 DRG及腰段脊髓背角中降钙素基因相关肽(CGRP)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的表达变化。【结果】在雌性小鼠中,只有高剂量M-CSF引起显著的机械痛超敏,而在雄性小鼠中两个剂量都引起明显痛觉异常。机制上,高剂量M-CSF诱导雌性小鼠皮下巨噬细胞大量聚集(Iba1标识);雄性小鼠巨噬细胞呈浓度依赖性增多,但没有雌性小鼠明显。在DRGs中,p-ERK与CGRP表达增多也存在类似的性别差异。值得注意的是,CGRP在雄性小鼠DRG的神经纤维中显著升高。相应地,脊髓背角浅层的p-ERK与CGRP+末梢在M-CSF处理后显著增多,且雄性小鼠多于雌性小鼠。【结论】皮下注射M-CSF诱发的机械性痛觉超敏存在性别二态性,并与外周巨噬细胞扩增和伤害性通路敏化的差异性变化有关。 展开更多

关键词 痛觉超敏 性别二态性 巨噬细胞 巨噬细胞集落刺激因子 降钙素基因相关肽

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MIF促进新生微血管生成及其相关基因表达的研究 被引量：12

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作者 蔡施霞 余细勇 +1 位作者 林秋雄 单志新 《中国心血管杂志》 2007年第3期169-171,共3页

目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)对新生微血管生成及血管内皮生长因子(VEGF)、Smadl 基因表达的影响。方法以体外培养的人血管内皮细胞株 EA.hy926为研究对象,分别用体外血管生成分析试剂盒... 目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)对新生微血管生成及血管内皮生长因子(VEGF)、Smadl 基因表达的影响。方法以体外培养的人血管内皮细胞株 EA.hy926为研究对象,分别用体外血管生成分析试剂盒及免疫组织化学染色法观察 MIF 在体内外对新生微血管生成的作用。通过基因芯片实验检测 MIF 对内皮细胞血管生成相关基因表达的影响,并通过 RT-PCR 检测 MIF 对 VEGF_(165)、Smadl 基因表达的影响。结果 MIF 可以促进人血管内皮细胞在体外形成血管腔,在小鼠体内也能促进新生微血管生成。MIF 可以显著上调血管内皮细胞血管生成基因21个,其中上调 VEGF_(165)、Smadl 基因表达呈剂量依赖性。结论MIF 有促进新生微血管生成的作用,并能促进人血管内皮细胞中 VEGF_(165)、Smadl 基因表达。 展开更多

关键词 巨噬细胞移动抑制因子 新生微血管生成 血管生成相关基因

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基于生物信息学和机器学习鉴别胞葬相关基因治疗缺血性脑卒中及中药的预测 被引量：4

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作者 杨凯 王翔宇 +1 位作者 张钊奇 刘伟 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第S01期66-67,共2页

目的基于生物信息学和机器学习方法探究分析胞葬在缺血性脑卒中(IS)中的核心基因与免疫细胞的关系并分析预测相关作用中药。方法从GEO数据库获取GSE16561基因芯片,利用R软件筛选差异表达基因,并在Genecards数据库检索获得胞葬相关基因(M... 目的基于生物信息学和机器学习方法探究分析胞葬在缺血性脑卒中(IS)中的核心基因与免疫细胞的关系并分析预测相关作用中药。方法从GEO数据库获取GSE16561基因芯片,利用R软件筛选差异表达基因,并在Genecards数据库检索获得胞葬相关基因(MRG),并对获得基因进行通路分析。同时基于STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作网络。利用LASSO回归、随机森林和支持向量机三种机器学习方法,进一步识别核心基因。通过ssGSEA算法分析IS免疫浸润情况,进一步分析关键基因和免疫细胞的相关性。最后基于Coremine Medical和TCMSP网站构建“药物-活性成分-作用靶点”网络,筛选作用与IS的相关中药靶点。结果筛选出555个差异表达基因,包括427个上调基因和128个下调基因,共获得14个胞葬相关缺血性卒中疾病基因。GO和KEGG富集的通路主要涉及吞噬作用、内吞作用调节巨噬细胞趋化作用和巨噬细胞迁移等胞葬相关通路。通过LASSO回归、随机森林和支持向量机三种机器学习算法筛选出5个Hub基因,分别是ABCA1、FGL2、GPR18、MFGE8、PROS1。5个Hub基因与M2巨噬细胞、M0巨噬细胞、CD8+T细胞呈显著负相关,与CD4+T细胞和肥大细胞呈显著正相关。潜在治疗中药有:大黄、姜黄、郁金、三七、丹参、吴茱萸等。潜在化合物:甲基丙烯酸、1-(3-环戊基丙酸)、1,2-二氢姜黄素等。结论综上,吞噬作用、内吞作用调节、巨噬细胞趋化作用和巨噬细胞迁移等胞葬相关通路与IS的发病机制密切相关,大黄、姜黄、郁金、三七、丹参和吴茱萸可能是IS治疗的潜在分子药物来源。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中 胞葬相关基因 生物信息学 机器学习 巨噬细胞

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RANKL诱导小鼠单核细胞RAW264．7分化成成熟破骨细胞 被引量：10

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作者 肖新华 周后德 +9 位作者 王运林 张红 袁凌青 胡平安 杨雅 何玉玲 隋国良 翟木绪 王敏 廖二元 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期151-155,共5页

目的观察小鼠的单核／巨噬细胞RAW264．7的一般生物学特征及在RANKL诱导下形成成熟破骨细胞的特征。方法 RANKL诱导RAW264．7细胞6d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) 染色法观察TRAP阳性多核细胞,吖啶橙染色激光共聚焦显微镜(LCSM)观察多... 目的观察小鼠的单核／巨噬细胞RAW264．7的一般生物学特征及在RANKL诱导下形成成熟破骨细胞的特征。方法 RANKL诱导RAW264．7细胞6d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) 染色法观察TRAP阳性多核细胞,吖啶橙染色激光共聚焦显微镜(LCSM)观察多核细胞形态;诱导RAW264．7细胞9d后,RT-PCR检测RAW264．7细胞的破骨细胞表型和功能基因表达及其 RANKL诱导后变化;诱导RAW264．7细胞12d后,钙磷覆盖的破骨细胞活性分析板观察破骨细胞的骨吸收功能。结果 RAW264．7细胞TRAP染色阴性,单核或2个核,能表达破骨细胞表型和功能基因,无骨吸收功能。RANKL可诱导RAW264．7细胞形成TRAP阳性成熟的多核破骨细胞, 上调CathepsinK、CAⅡ、integrinβ3等基因。mRNA的表达。结论 RAW264．7具有破骨细胞特征性基因表达谱,是一种较好的破骨前体细胞模型。RANKL可诱导RAW264．7细胞形成成熟破骨细胞。 展开更多

关键词 成熟破骨细胞 RANKL RAW264.7细胞 单核细胞 小鼠 抗酒石酸酸性磷酸酶 激光共聚焦显微镜 integrin 单核/巨噬细胞 骨吸收功能 分化 TRAP 多核破骨细胞 基因mRNA 细胞表型 细胞形成 生物学特征 吖啶橙染色 基因表达及

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