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HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体构建及其基因工程菌种稳定性的鉴定 被引量:2
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作者 席文锦 彭红艳 +7 位作者 白文栋 郑国旭 史圣甲 皇甫罗锴 王曦 贾林涛 张英起 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期93-95,共3页
目的构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的原核表达载体并鉴定其基因工程菌种稳定性。方法应用PCR技术以pCMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pET-22b原核表达载体;将该表达载体转化BL21大肠杆菌并... 目的构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的原核表达载体并鉴定其基因工程菌种稳定性。方法应用PCR技术以pCMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pET-22b原核表达载体;将该表达载体转化BL21大肠杆菌并挑取表达蛋白较高的克隆菌,划线接种传代50次;通过革兰氏染色方法、扫描电镜形态观察、菌种质粒酶切鉴定及蛋白诱导表达的Western blot分析鉴定e23sFv-Fdt-tBid免疫促凋亡蛋白表达工程菌的稳定性。结果成功构建pET-22b-e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体,并在BL21大肠杆菌中诱导表达;革兰氏染色方法、扫描电镜形态观察、菌种质粒酶切鉴定及Western blot法鉴定结果表明基因工程菌种稳定性良好,可以稳定表达免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid。结论成功构建了HER2靶向免疫促凋亡蛋白原核表达载体,鉴定了表达该免疫促凋亡蛋白的基因工程菌种稳定性,为HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的应用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 HER2 原核表达 基因工程菌种 稳定性
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高通量筛选技术在菌种进化中的研究进展 被引量:3
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作者 杨祖明 王颖 +1 位作者 姚明东 肖文海 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第5期2402-2412,共11页
菌种进化工程是绿色生物制造的重要策略,利用高效的高通量筛选方法和技术可以快速地获得理想的实用菌株。针对菌种进化工程中的高通量筛选方法,本文重点综述了基于颜色或荧光、基于细胞生长、基于生物传感器以及基于液滴微流体平台等4... 菌种进化工程是绿色生物制造的重要策略,利用高效的高通量筛选方法和技术可以快速地获得理想的实用菌株。针对菌种进化工程中的高通量筛选方法,本文重点综述了基于颜色或荧光、基于细胞生长、基于生物传感器以及基于液滴微流体平台等4个方面的高通量筛选技术的重要进展,同时也介绍了各种高通量筛选技术的应用范围和特点,为研究人员从不同进化文库中获得生理特性或者代谢能力显著提高的目标菌株提供了理论指导,极大地提高进化文库的筛选效率,降低了菌株筛选的时间和成本。最后展望了人工智能、合成生物学以及生物信息学的发展对高通量筛选技术的重要影响,以期提高高通量筛选技术的精度、效率和应用范围,进而加速菌种进化过程和工业化进程。 展开更多
关键词 菌种进化工程 绿色生物制造 高通量筛选 进化文库
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荧光蛋白及其在微生物过程工程中的应用 被引量:3
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作者 毛洪丽 刘雨 张建国 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期252-257,共6页
荧光蛋白是一系列在紫外光激发下产生荧光的发光蛋白,以其荧光稳定性好、灵敏度高、无毒害等优点广泛应用于诸多领域。目前成功开发的荧光蛋白有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)、蓝色荧光蛋白(blue fluorescent protein,B... 荧光蛋白是一系列在紫外光激发下产生荧光的发光蛋白,以其荧光稳定性好、灵敏度高、无毒害等优点广泛应用于诸多领域。目前成功开发的荧光蛋白有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)、蓝色荧光蛋白(blue fluorescent protein,BFP)、青色荧光蛋白(cyan fluoroscent protein,CFP)、黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,YFP)、红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)。荧光蛋白在微生物工程中菌株筛选方面的应用逐渐成熟,菌株筛选是菌种工程中较为耗时、费力的步骤,荧光蛋白为菌株筛选提供了新突破口。本文从荧光蛋白的基础研究出发,综述了近年来荧光蛋白在微生物工程中菌株筛选方面的进展和基于荧光蛋白的新型微生物筛选技术,为荧光蛋白等其他发光蛋白在微生物菌种工程的应用提供参考。 展开更多
关键词 荧光蛋白 菌种工程 筛选策略 微流体技术
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微生物固定化技术处理含油废水的研究 被引量:12
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作者 朱文芳 李伟光 《工业水处理》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期44-47,共4页
在实验室小试的基础上,利用固定化微生物技术现场处理了大庆炼化公司含油废水,分别考察了不同pH及油浓度条件下,反应器对油的去除率的变化。结果表明,与相同条件下的游离细胞方法相比较,采用固定化技术后,不同pH对应的油去除率都有较大... 在实验室小试的基础上,利用固定化微生物技术现场处理了大庆炼化公司含油废水,分别考察了不同pH及油浓度条件下,反应器对油的去除率的变化。结果表明,与相同条件下的游离细胞方法相比较,采用固定化技术后,不同pH对应的油去除率都有较大增加且基本保持稳定,表明微生物对pH及其变化的耐受力显著提高;不同油浓度条件下,与并行的颗粒活性炭(GAC)反应器相比,对油、挥发酚去除率的提高达到20%,抗冲击负荷能力有较大提高。连续运行两个月后,分析表明固定化反应器中高效工程菌发生种群变化,优势菌由开始时的假单胞菌和芽孢杆菌演变为芽孢杆菌,即最终的优势菌为芽孢杆菌。 展开更多
关键词 含油废水 固定化微生物技术 工程菌种
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