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CHO工程细胞株低血清培养的初探被引量：2: 1; 作者马爱瑛周栋李敏《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期154-157,共4页; 以DMEM∶F12(1∶1)为基础培养基,对CHO细胞的低血清培养进行了初步探索,降低培养基中血清含量,观察了细胞在10%、5%和1%等不同浓度低血清培养条件下生长状态和外源蛋白表达活性的变化。试验结果表明:在含1%血清的F12∶DMEM(1∶1)培养基... 展开更多; 关键词 CHO-pCSA工程细胞株 T-PA RPA(K) 低血清培养基础培养基; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源受体hGPCRc工程细胞株的建立及其应用被引量：1: 2; 作者袁广胜刘永学《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期818-822,共5页; 目的建立孤儿G蛋白偶联受体(OrphanGproteincoupledreceptors,oGPCRs)配基筛选体系并应用于化合物的筛选。方法利用RTPCR从人结肠组织获得oGPCR成员hGPCRc的氨基酸编码序列,在利用相关软件对hGPCRc的结构特点进行分析的基础上,构建hGPCR... 展开更多; 关键词孤儿G蛋白偶联受体 hGPCRc 钙 CHO—K1细胞系工程细胞株; 在线阅读下载PDF 职称材料

野生型组织型纤溶酶原激活剂工程细胞株生物学特性分析: 3; 作者徐秀英陈琳 +4 位作者欧阳应斌刘士辉朱恒奇黄培堂黄翠芬《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期293-295,共3页; 组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）是体内丝氨酸类蛋白酶。它能激活纤维蛋白溶酶原生成纤溶酶，后者将不溶性的纤维蛋白降解为可溶性肽段，使血栓溶解，血管再通。而且由于它与纤维蛋白有高亲和力，只激活血栓表面纤溶酶原，溶解局部血... 展开更多; 关键词野生型 T-PA 工程细胞株纤溶酶原激活剂; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄糖和丁酸钠对CHO-rHSA工程细胞株中rHSA产量的影响被引量：2: 4; 作者牛宇辉李向茸 +5 位作者吴贝李洪珊李殿玉陈磊魏锁成冯若飞《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期278-286,共9页; 目前,悬浮CHO细胞作为外源蛋白的最有潜力的工程细胞株被广泛应用,探索其高密度生长和高表达外源蛋白的培养条件也成为研究的热点。葡萄糖和丁酸钠在促进CHO细胞生长和外源蛋白表达方面具有重要作用,所以研究葡萄糖和丁酸钠对CHO-rHSA... 展开更多; 关键词重组人血清白蛋白丁酸钠葡萄糖 CHO-rHSA工程细胞株; 在线阅读下载PDF 职称材料

HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体的构建及其稳定表达细胞株的建立被引量：4: 5; 作者白文栋席文锦 +5 位作者王芳王丽娟杨韬彭红艳孟艳玲杨安钢《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期94-96,共3页; 目的:构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体,并运用Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达该细胞的CHO工程细胞株。方法:应用PCR技术以pcMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pcDNA5/FRT载... 展开更多; 关键词免疫促凋亡蛋白 HER2 真核表达定点整合 CHO工程细胞株; 在线阅读下载PDF 职称材料

《重庆工学院学报》“生物工程”栏目简介: 6; 《重庆工学院学报（自然科学版）》 2009年第3期F0002-F0002,共1页; 关键词生物工程重庆工学院现代工程技术栏目学报生物学理论分子生物学工程细胞株; 在线阅读下载PDF 职称材料

高通量筛选JAK-STAT6信号传导通路抑制剂方法的初步建立被引量：5: 7; 作者笪宇蓉姚智 +5 位作者李静雅邵洁沈强东莉洁李佳杨洁《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期943-947,共5页; 目的构建可用于高通量筛选JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的工程细胞株,建立稳定可靠的筛选方法。方法利用基因重组和转染技术,将STAT6特异性识别启动子IgE基因序列和虫荧光素酶报告基因联合插入pCMV质粒,脂质体法转染至HeLa细胞,经潮红霉... 展开更多; 关键词 JAK/STAT6 高通量筛选工程细胞株抑制剂; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CHO工程细胞株低血清培养的初探被引量：2: 1; 作者马爱瑛周栋李敏; 机构北方民族大学生物科学与工程学院宁夏大学生命科学学院教育部重点实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期154-157,共4页; 基金北方民族大学科研项目(2008Y025) 宁夏自然科学基金项目(NZ0842); 文摘以DMEM∶F12(1∶1)为基础培养基,对CHO细胞的低血清培养进行了初步探索,降低培养基中血清含量,观察了细胞在10%、5%和1%等不同浓度低血清培养条件下生长状态和外源蛋白表达活性的变化。试验结果表明:在含1%血清的F12∶DMEM(1∶1)培养基中,细胞仍能保持良好的生长状态,且培养上清中的目的蛋白活性与常规血清浓度10%DMEM培养条件下的活性接近。从而达到了既可以降低生产成本,又可以降低纯化难度的目的。; 关键词 CHO-pCSA工程细胞株 T-PA RPA(K) 低血清培养基础培养基; Keywords Engineering cells of CHO-pCSA t-PA rPA（K） Serum-low medium Base medium; 分类号 Q813.1 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源受体hGPCRc工程细胞株的建立及其应用被引量：1: 2; 作者袁广胜刘永学; 机构四川农业大学玉米研究所北京放射医学研究所药理室; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期818-822,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No30171096) 全军"十五医药卫生资助项目(No01MB056); 文摘目的建立孤儿G蛋白偶联受体(OrphanGproteincoupledreceptors,oGPCRs)配基筛选体系并应用于化合物的筛选。方法利用RTPCR从人结肠组织获得oGPCR成员hGPCRc的氨基酸编码序列,在利用相关软件对hGPCRc的结构特点进行分析的基础上,构建hGPCRc之表达载体pcDNA3.1(+)hGPCRc,转染CHOK1细胞获得CHOhGPCR工程细胞株,将不同化合物作用于细胞株,用Fluo3为分子探针检测细胞内钙离子浓度变化,以分析化合物中是否为该受体的特异性配基。结果生物信息学分析得到:hGPCR定位于人染色体13q32.2,对应的氨基酸序列组成了7个跨膜区段的结构域,在进化树上与人源P2Y1受体最亲近,应属于人类GPCR成员;成功得到CHOhGPCRc工程细胞株;所检测化合物作用于细胞株并没有引起胞内钙离子的波动,很可能没有活化hGPCRc。结论hGPCRc是一个与已知人P2Y1最近的成员,但基于CHOhGPCRc工程细胞株的第二信使筛选结果表明,hGPCRc并不被P2Y1的已知配基活化因此很可能属于不同于P2Y1的嘌呤类受体新亚型。; 关键词孤儿G蛋白偶联受体 hGPCRc 钙 CHO—K1细胞系工程细胞株; Keywords orphan G protein-coupled receptors hGPCRc calcium CHO-K_1 cell line engineered cells; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] R394.2 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名野生型组织型纤溶酶原激活剂工程细胞株生物学特性分析: 3; 作者徐秀英陈琳欧阳应斌刘士辉朱恒奇黄培堂黄翠芬; 机构军事医学科学院生物工程研究所; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期293-295,共3页; 文摘组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）是体内丝氨酸类蛋白酶。它能激活纤维蛋白溶酶原生成纤溶酶，后者将不溶性的纤维蛋白降解为可溶性肽段，使血栓溶解，血管再通。而且由于它与纤维蛋白有高亲和力，只激活血栓表面纤溶酶原，溶解局部血栓，因而引起全身出血倾向小。目前，...; 关键词野生型 T-PA 工程细胞株纤溶酶原激活剂; 分类号 Q556.9 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄糖和丁酸钠对CHO-rHSA工程细胞株中rHSA产量的影响被引量：2: 4; 作者牛宇辉李向茸吴贝李洪珊李殿玉陈磊魏锁成冯若飞; 机构西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室西北民族大学生命科学与工程学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期278-286,共9页; 基金兰州市人才创新创业项目(2019-RC-20) 国家民委中青年英才计划[批准号(2018)98]。; 文摘目前,悬浮CHO细胞作为外源蛋白的最有潜力的工程细胞株被广泛应用,探索其高密度生长和高表达外源蛋白的培养条件也成为研究的热点。葡萄糖和丁酸钠在促进CHO细胞生长和外源蛋白表达方面具有重要作用,所以研究葡萄糖和丁酸钠对CHO-rHSA工程细胞表达重组人血清白蛋白的影响有重要的应用价值。首先利用单因素试验确定了葡萄糖和丁酸钠对CHO-rHSA工程细胞表达重组人血清白蛋白的作用,并筛选出最优添加条件;然后利用双因素组合作用试验优选出可有效提高rHSA表达量的葡萄糖及丁酸钠的组合培养条件。细胞培养第3天开始,每48 h添加终浓度为7 g/L的葡萄糖,可使rHSA产量平均提高121.93%;细胞培养第2天添加终浓度为1.0 mmoL/L的丁酸钠,可使rHSA产量平均提高110.01%;丁酸钠和葡萄糖组合使用可使CHO-rHSA工程细胞株培养时间从7 d左右延长到14 d左右,使rHSA表达量达平均达到了85.642 mg/L,rHSA表达量与未处理组相比平均提高了212.49%,比单独使用葡萄糖平均提高了134.85%,比单独使用丁酸钠平均提高了88.35%。确定待细胞培养48 h 时添加1.0 mmol/L 丁酸钠和3.0→7.0 g/L葡萄糖为CHO工程细胞株高效表达的培养条件。丁酸钠和葡萄糖组合使用可更高效的表达外源蛋白,葡萄糖可以减弱丁酸钠对CHO细胞生长的抑制作用,为提高CHO工程细胞株外源蛋白表达提供新的理论依据。; 关键词重组人血清白蛋白丁酸钠葡萄糖 CHO-rHSA工程细胞株; Keywords recombinant human serum albumin rHSA NaBu glucose CHO-rHSA engineering cell line; 分类号 Q813.11 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体的构建及其稳定表达细胞株的建立被引量：4: 5; 作者白文栋席文锦王芳王丽娟杨韬彭红艳孟艳玲杨安钢; 机构第四军医大学国家肿瘤生物学重点实验室第四军医大学免疫学教研室第四军医大学微生物学教研室西安交通大学医学院第一附属医院第四军医大学西京医院内分泌科; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期94-96,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(81001015/H1611); 文摘目的:构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体,并运用Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达该细胞的CHO工程细胞株。方法:应用PCR技术以pcMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pcDNA5/FRT载体中;通过Flp-InTM定点整合表达系统将e23sFv-Fdt-tBid整合入Flp-lnTM CHO细胞的基因组中一个单拷贝位点上,以适当的潮霉素B筛选定点整合e23sFv-Fdt-tBid cDNA的细胞克隆;通过基因组PCR技术和Westernblot技术检测e23sFv-Fdt-tBid基因的整合及该蛋白表达。结果:成功构建了pcDNA5/FRT-e23sFv-Fdt-tBid表达载体;成功通过Flp-InTM定点整合表达系统建立稳定表达e23sFv-Fdt-tBid蛋白的CHO工程细胞株;成功通过基因组PCR技术及基因组PCR技术和Western blot技术检测了e23sFv-Fdt-tBid基因的整合及该蛋白表达。结论:成功地构建了HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体并建立了稳定表达该蛋白的CHO工程细胞株,为该蛋白的应用研究奠定了重要基础。; 关键词免疫促凋亡蛋白 HER2 真核表达定点整合 CHO工程细胞株; 分类号 R392.9 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名《重庆工学院学报》“生物工程”栏目简介: 6; 出处《重庆工学院学报（自然科学版）》 2009年第3期F0002-F0002,共1页; 关键词生物工程重庆工学院现代工程技术栏目学报生物学理论分子生物学工程细胞株; 分类号 Q81 [生物学—生物工程] G648 [文化科学—高等教育学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高通量筛选JAK-STAT6信号传导通路抑制剂方法的初步建立被引量：5: 7; 作者笪宇蓉姚智李静雅邵洁沈强东莉洁李佳杨洁; 机构天津医科大学免疫教研室中科院上海药物所国家新药筛选中心; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期943-947,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No30300070) 国家教育部新世纪人才支持计划(NCET-04-0245) +2 种基金天津医科大学自然科学基金资助项目(No2005KY01); 文摘目的构建可用于高通量筛选JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的工程细胞株,建立稳定可靠的筛选方法。方法利用基因重组和转染技术,将STAT6特异性识别启动子IgE基因序列和虫荧光素酶报告基因联合插入pCMV质粒,脂质体法转染至HeLa细胞,经潮红霉素B抗性筛选及报告基因检测,得到稳定表达虫荧光素酶的工程细胞株。通过优化溶剂DMSO浓度,IL4作用浓度及孵育时间等筛选条件,建立了可靠的筛选方法,并在此基础上对1600种化合物进行了筛选。结果建立的筛选方法稳定可靠,系统Z′因子达到0.64。通过对1600种化合物的筛选,得到3个抑制效果较理想的化合物并测得其IC50值。结论所建立的高通量筛选方法可用于JAK/STAT6信号传导通路抑制剂的筛选。; 关键词 JAK/STAT6 高通量筛选工程细胞株抑制剂; Keywords JAK/STAT6 high throughput screen cell model inhibitor; 分类号 R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	CHO工程细胞株低血清培养的初探	马爱瑛周栋李敏	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人源受体hGPCRc工程细胞株的建立及其应用	袁广胜刘永学	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2005	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	野生型组织型纤溶酶原激活剂工程细胞株生物学特性分析	徐秀英陈琳欧阳应斌刘士辉朱恒奇黄培堂黄翠芬	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	葡萄糖和丁酸钠对CHO-rHSA工程细胞株中rHSA产量的影响	牛宇辉李向茸吴贝李洪珊李殿玉陈磊魏锁成冯若飞	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2022	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid真核表达载体的构建及其稳定表达细胞株的建立	白文栋席文锦王芳王丽娟杨韬彭红艳孟艳玲杨安钢	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	《重庆工学院学报》“生物工程”栏目简介		《重庆工学院学报（自然科学版）》	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	高通量筛选JAK-STAT6信号传导通路抑制剂方法的初步建立	笪宇蓉姚智李静雅邵洁沈强东莉洁李佳杨洁	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2006	5	在线阅读下载PDF 职称材料