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VSV-G修饰增强工程化外泌体SARS-CoV2疫苗诱导呼吸道黏膜免疫
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作者 陈泽虹 邢昊楠 +4 位作者 陆梅 王曦维 李蒙 高秀丽 郑爱萍 《中国药理学与毒理学杂志》 北大核心 2025年第8期581-590,共10页
目的探究水泡性口腔炎病毒G蛋白(VSV-G)修饰对工程化外泌体疫苗黏膜免疫效果的影响。方法体外实验:将小鼠树突状细胞系DC2.4分为细胞对照组(无外泌体DMEM培养基处理)、受体结合域(RBD)组(转染RBD质粒)和RBD+VSV-G组(共转染RBD和VSV-G质... 目的探究水泡性口腔炎病毒G蛋白(VSV-G)修饰对工程化外泌体疫苗黏膜免疫效果的影响。方法体外实验:将小鼠树突状细胞系DC2.4分为细胞对照组(无外泌体DMEM培养基处理)、受体结合域(RBD)组(转染RBD质粒)和RBD+VSV-G组(共转染RBD和VSV-G质粒),Western印迹法检测细胞中RBD和VSV-G蛋白表达水平,流式细胞术评价RBD和VSV-G细胞阳性率,免疫荧光染色观察RBD和VSV-G的膜定位情况;超速离心法提取外泌体,透射电镜和纳米粒子示踪分析仪分别测定外泌体的形态、粒径分布;Western印迹法验证外泌体中标志蛋白〔分化群抗原9(CD9)、CD101、CD63和高尔基体蛋白亚家族A成员2(GM130)〕,RBD和VSV-G蛋白表达。体内实验:①将雌性BALB/c小鼠分为Mock-Exo对照组(鼻滴源自细胞对照组的外泌体)、RBD-Exo组(鼻滴源自RBD组的外泌体)和RBD+VSV-G-Exo组(鼻滴源自RBD+VSV-G组的外泌体),鼻内接种相应外泌体疫苗后,小动物活体成像观察疫苗滞留鼻组织时间,流式细胞术评价疫苗将CD49B^(+)自然杀伤细胞、CD11c^(+)树突细胞和F4/80^(+)巨噬细胞招募至鼻组织的能力;初次免疫后每6 d对小鼠进行称重,周期为30 d。初次免疫7 d时,全自动生化仪分析小鼠血清中血尿素氮、乳酸脱氢酶、甘油三脂、谷草转氨酶、白蛋白和谷丙转氨酶含量,然后将小鼠处死,收集心、肝、脾、肺、肾和脑组织进行HE染色;②将雌性BALB/c小鼠分为Mock-Exo组、RBD+VSV-G-Exo组和RBD+VSV-G-Exo(im)组(肌肉注射RBD+VSV-G-Exo)。初次免疫7 d和21 d时,酶联免疫吸附试验测定血清中RBD特异性免疫球蛋白G(IgG)、肺泡灌洗液和鼻腔灌洗液中RBD特异性免疫球蛋白A(IgA)的滴度。结果体外实验:RBD和VSV-G阳性细胞率分别为64.4%与31.2%,且RBD和VSV-G蛋白成功表达在细胞膜;提取的外泌体形态规整,高表达阳性标记物CD9、CD101和CD63,不表达阴性标记物GM130,粒径约138 nm且成功装载RBD和VSV-G蛋白。体内实验:与Mock-Exo和RBD-Exo相比,RBD+VSV-G-Exo鼻组织滞留时间达96 h;鼻组织中CD49B^(+)自然杀伤细胞、CD11c^(+)树突细胞和F4/80^(+)巨噬细胞含量显著增加;免疫后30 d内小鼠体重呈稳定增长趋势;免疫7 d后血尿素氮、乳酸脱氢酶、甘油三脂、谷草转氨酶、白蛋白和谷丙转氨酶均正常表达,心、肝、脾、肺、肾及嗅球无明显病理改变。RBD+VSV-G-Exo引起高水平的RBD特异性免疫应答,其血清中IgG滴度达1∶5215,肺泡灌洗液中IgA滴度达1∶2560,鼻腔灌洗液IgA滴度达1∶1114;RBD+VSV-G-Exo(im)未在肺泡灌洗液和鼻灌洗液中检测到RBD特异性的IgA抗体滴度。结论VSV-G修饰可延长工程化外泌体疫苗在鼻组织的滞留时间,增强其对免疫细胞的招募能力,诱导高水平的抗原特异性呼吸道黏膜免疫应答。 展开更多
关键词 工程化外泌体 SARS-CoV-2 水泡性口腔炎病毒G蛋白 黏膜疫苗 鼻黏膜免疫 免疫应答诱导
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工程化外泌体在肿瘤靶向治疗中的应用
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作者 宋佳璐 金意欣 +2 位作者 牟星宇 蒋宇寰 王婧 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第5期1140-1151,共12页
肿瘤是全球第二位死亡因素,其发病机制的复杂性对人类健康构成了严重威胁。外泌体通过运送蛋白质、核酸等物质参与细胞通讯,调节肿瘤微环境,影响肿瘤的增殖和进展。凭借天然的生物相容性和独特的生理特性,外泌体可作为药物载体装载多种... 肿瘤是全球第二位死亡因素,其发病机制的复杂性对人类健康构成了严重威胁。外泌体通过运送蛋白质、核酸等物质参与细胞通讯,调节肿瘤微环境,影响肿瘤的增殖和进展。凭借天然的生物相容性和独特的生理特性,外泌体可作为药物载体装载多种抗肿瘤药物,跨越生物屏障,逃避免疫清除,靶向运输药物至肿瘤组织处,为肿瘤治疗提供新的策略。本文系统地总结了外泌体的分离和载药技术,探讨了改善外泌体载药系统靶向性、留存率和渗透率的方法,并阐述了外泌体作为载药体系装载不同抗肿瘤药物的应用现状。具体来说,外泌体能够装载抗癌药物来降低药物的不良反应并提高到达肿瘤组织的药物浓度,装载蛋白质改善药物利用度,装载siRNA、miRNA以调节基因表达、抑制肿瘤的增殖和侵袭。此外,外泌体还可以作为肿瘤标志物用于疾病的早期诊断。尽管外泌体作为载药体系展现出强大的应用潜力,但在标准化和规模化生产方面仍面临诸多挑战。本文对工程化外泌体在肿瘤靶向治疗中的未来发展方向进行展望,提出植物来源外泌体的应用潜能和外泌体与人工智能相结合的发展方向。 展开更多
关键词 工程化外泌体 肿瘤 靶向治疗
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工程化外泌体在肺癌治疗中的研究进展
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作者 杨婉玲 顾岩 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期535-540,共6页
非小细胞肺癌最佳的治疗方式为早期手术治疗,而大部分肺癌发现时已为晚期。治疗方式以药物及放射治疗为主。但上述治疗方式出现耐药或疗效不显著是不可避免的,因此,针对肺癌的治疗迫切需要更多的手段。研究证实,工程化外泌体在心血管系... 非小细胞肺癌最佳的治疗方式为早期手术治疗,而大部分肺癌发现时已为晚期。治疗方式以药物及放射治疗为主。但上述治疗方式出现耐药或疗效不显著是不可避免的,因此,针对肺癌的治疗迫切需要更多的手段。研究证实,工程化外泌体在心血管系统疾病、肿瘤、组织再生与修复等领域具有良好的临床应用潜能。本文总结了国内外工程化外泌体在肺癌治疗中的应用。 展开更多
关键词 工程化外泌体 靶向递送 肺肿瘤 基因治疗 肿瘤微环境
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外泌体调控树突状细胞免疫功能的研究进展 被引量:2
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作者 李琳琳 朱珊(指导) 陈京涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期404-409,共6页
树突状细胞(DC)是机体内抗原提呈能力最强的一类抗原提呈细胞(APC),是联系固有免疫和适应性免疫的纽带。外泌体为体内活细胞分泌的双层囊泡小体,携带多种生物活性物质,参与细胞间信息传递和物质交换。内容物含量、大小、细胞来源等特征... 树突状细胞(DC)是机体内抗原提呈能力最强的一类抗原提呈细胞(APC),是联系固有免疫和适应性免疫的纽带。外泌体为体内活细胞分泌的双层囊泡小体,携带多种生物活性物质,参与细胞间信息传递和物质交换。内容物含量、大小、细胞来源等特征的不同组合导致了外泌体的高度异质性,因此,外泌体对DC功能调节的方式及机制具有复杂性和不确定性。本文系统回顾近年外泌体参与DC功能调控的研究进展,并对工程化外泌体的开发策略与应用现状进行总结,以期为后续研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 树突状细胞 免疫调节 工程化外泌体
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