嵌合抗原受体自然杀伤细胞免疫治疗多发性骨髓瘤研究进展 被引量：3

1

作者 唐文娇 李燕 +2 位作者 郑宇欢 张丽 牛挺 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期290-297,共8页

尽管新药的进展使多发性骨髓瘤(MM)患者的生存得到明显改善,但复发难治MM仍缺乏有效治疗方案,且预后差。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫治疗技术虽然在复发难治MM中有不错的疗效,但仍存在局限性,如细胞因子释放综合征、神经毒性等不良反... 尽管新药的进展使多发性骨髓瘤(MM)患者的生存得到明显改善,但复发难治MM仍缺乏有效治疗方案,且预后差。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫治疗技术虽然在复发难治MM中有不错的疗效,但仍存在局限性,如细胞因子释放综合征、神经毒性等不良反应和脱靶效应等。自然杀伤(NK)细胞作为机体固有免疫的重要成分,在肿瘤免疫监视中发挥重要功能,因此基于NK细胞的嵌合抗原受体自然杀伤细胞(CAR-NK)免疫治疗技术也越来越受到关注。目前CAR-NK免疫治疗MM的研究显示,多个靶点可作为CAR-NK免疫治疗技术特异性治疗靶点,并且在MM细胞及动物实验中也证实其抗肿瘤效应。本文总结了MM肿瘤微环境中NK细胞抗肿瘤机制、生物学特点和功能缺陷情况,以及CAR-NK免疫治疗MM的基础和临床研究进展。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 嵌合抗原受体自然杀伤细胞 复发 难治 治疗

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嵌合抗原受体T细胞的肿瘤杀伤作用 被引量：1

2

作者 黄凯锋 王月丹 李海潮 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2024年第4期288-295,共8页

近年来,嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞免疫疗法在血液恶性肿瘤的治疗中取得了重要进展,但在实体瘤方面的应用并不理想。本文对CAR-T细胞的结构、杀伤功能进行了介绍,包括非经典免疫突触的形成、分泌细胞因子、... 近年来,嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞免疫疗法在血液恶性肿瘤的治疗中取得了重要进展,但在实体瘤方面的应用并不理想。本文对CAR-T细胞的结构、杀伤功能进行了介绍,包括非经典免疫突触的形成、分泌细胞因子、分泌穿孔素和颗粒酶、Fas-FasL(factor associated suicide-Fas ligand)途径以及组成CAR结构成分的改变等杀伤肿瘤的主要机制,比较三种CAR细胞的特点,结合CAR-T细胞治疗实体瘤的挑战,对CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗领域未来的研究方向进行了分析。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体T细胞 肿瘤 免疫治疗 杀伤功能 研究进展

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嵌合抗原受体T细胞免疫疗法在晚期胃癌中的应用进展 被引量：1

3

作者 王皓 黎正行 罗天航 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1336-1342,共7页

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,当前我国胃癌就诊患者仍以进展期为主,晚期患者就诊时多已失去手术治疗的机会,而传统的放疗、化疗和靶向治疗效果并不理想。嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T)免疫疗法作为一种新的治疗手段,在血液系统恶性肿... 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,当前我国胃癌就诊患者仍以进展期为主,晚期患者就诊时多已失去手术治疗的机会,而传统的放疗、化疗和靶向治疗效果并不理想。嵌合抗原受体(CAR)-T细胞(CAR-T)免疫疗法作为一种新的治疗手段,在血液系统恶性肿瘤中疗效显著,也为胃癌的免疫治疗开辟了新途径。然而,由于胃癌的异质性、肿瘤微环境免疫抑制、肿瘤靶抗原逃逸及脱靶毒性等问题,使得CAR-T免疫疗法在胃癌治疗中的应用存在挑战。本文综述了CAR的结构及CAR-T治疗原理、CAR-T治疗晚期胃癌的主要靶点及治疗现状,并探讨了CAR-T治疗胃癌面临的挑战,旨在为晚期胃癌的临床免疫治疗提供新思路。 展开更多

关键词 胃肿瘤 免疫疗法 嵌合抗原受体T细胞 密封蛋白18.2 自然杀伤细胞活化型受体 上皮细胞黏附分子

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自然杀伤细胞疗法的机遇与挑战

4

作者 丁亦扬 赵翔宇 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第5期621-627,共7页

自然杀伤细胞(NK细胞)是天然免疫系统的一部分,可以不受主要组织相容性复合体(MHC)限制识别并消除异常细胞,在机体抗肿瘤、抗病毒、免疫调节中发挥着重要作用,因此NK细胞治疗在免疫细胞治疗领域颇有前景。嵌合抗原受体NK细胞治疗(CAR-NK... 自然杀伤细胞(NK细胞)是天然免疫系统的一部分,可以不受主要组织相容性复合体(MHC)限制识别并消除异常细胞,在机体抗肿瘤、抗病毒、免疫调节中发挥着重要作用,因此NK细胞治疗在免疫细胞治疗领域颇有前景。嵌合抗原受体NK细胞治疗(CAR-NK)增加了NK细胞的靶向性和功能活性,进一步提升了NK细胞杀伤潜力,是当前及未来NK细胞治疗领域的研究热点。现阶段NK细胞治疗已在抗肿瘤、抗病毒及自身免疫性疾病中开展诸多临床试验。本文总结了当前NK细胞治疗在临床应用的研究现况,表明了NK细胞治疗是一项极具潜力的免疫细胞疗法,尽管面临着细胞持久性和肿瘤微环境抑制等挑战,但这一领域的发展前景依然广阔。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 细胞治疗 嵌合抗原受体NK细胞免疫疗法

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靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体T细胞的构建及其对肿瘤细胞的杀伤 被引量：1

5

作者 郝瑞栋 田芳 +7 位作者 杨振莉 汪敏亮 张大挺 李彦涛 凡鹏程 吴国祥 朱学军 刘根桃 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期152-158,共7页

目的:探索通过嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)以治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的方法。方法:构建基于鼠源BCMA scFv的CAR-BCMA分子,包装为慢病毒载体... 目的:探索通过嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)以治疗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的方法。方法:构建基于鼠源BCMA scFv的CAR-BCMA分子,包装为慢病毒载体并感染健康人T细胞构建CAR-BCMA-T细胞;构建BCMA阳性细胞系A549-BCMA、A549-BCMAOFP和K562-BCMA作为靶细胞。将CAR-BCMA-T细胞与构建的靶细胞和人骨髓瘤细胞U266共孵育,CCK-8法和流式细胞术检测其对BCMA阳性肿瘤细胞的杀伤能力。构建MM患者来源CAR-BCMA-T细胞并检测其杀伤靶细胞A549-BCMA的能力,并采用ELISA和流式细胞术检测CAR-BCMA-T细胞IFN-γ的释放水平。结果:健康人来源的CAR-BCMA-T经过11 d培养扩增300倍,阳性率达到43%;成功构建BCMA阳性靶细胞。在5:1效靶比下,CAR-BCMA-T对A549-BCMA、K562-BCMA和U266细胞的杀伤率分别在80%、60%和80%左右,显著高于对BCMA阴性细胞的杀伤率,且杀伤力与靶细胞的BCMA表达强度相关。在效靶比20:1时,MM患者来源CAR-BCMA-T细胞对靶细胞A549-BCMA的杀伤率达到95%以上,并且大量分泌IFN-γ。结论:本研究成功构建了健康人及MM患者来源的靶向BCMA的CAR-T细胞,其能够有效特异杀伤BCMA阳性的肿瘤细胞。 展开更多

关键词 B细胞成熟抗原 嵌合抗原受体 多发性骨髓瘤 Γ干扰素 杀伤功能

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嵌合抗原受体修饰CIK细胞抗肿瘤研究进展 被引量：2

6

作者 姚惟琦 饶巍 周宏灏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期720-726,共7页

在过去的20多年中,CIK细胞已逐步从实验室研究走向临床应用研究并展现了一定的抗瘤效果。然而,CIK细胞存在缺乏抗原特异性、靶向性不足、体内存活时间短等问题限制了其在临床上的应用。随着嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR... 在过去的20多年中,CIK细胞已逐步从实验室研究走向临床应用研究并展现了一定的抗瘤效果。然而,CIK细胞存在缺乏抗原特异性、靶向性不足、体内存活时间短等问题限制了其在临床上的应用。随着嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰的T细胞(CAR-T)技术的兴起,CIK细胞的CAR修饰潜力也倍受关注。本文就CAR-CIK细胞的构建思路、效应细胞来源和简化治疗优势、基础研究和临床转化现状以及目前CAR-CIK面临的瓶颈问题等的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体 细胞因子诱导的杀伤细胞 肿瘤 免疫治疗

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嵌合抗原受体修饰T细胞真的对卵巢癌有杀伤作用吗?

7

《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期F0002-F0002,共1页

卵巢癌的标准治疗方案以外科手术治疗为主，辅以顺铂和紫杉烷联合化疗，中位生存期仅为18个月。因此，亟需寻找更有效的卵巢癌治疗手段。陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院全军临床病理学研究所余时沧教授研究团队以间皮素作为... 卵巢癌的标准治疗方案以外科手术治疗为主，辅以顺铂和紫杉烷联合化疗，中位生存期仅为18个月。因此，亟需寻找更有效的卵巢癌治疗手段。陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院全军临床病理学研究所余时沧教授研究团队以间皮素作为T细胞表面稳定表达可特异性识别肿瘤相关抗原，采用人源化抗人间皮素单链可变区片段，与T细胞活化分子CD3ξ；链及共刺激分子CD28构建嵌合抗原受体融合基因，在保证嵌合抗原受体修饰T细胞特异性识别肿瘤抗原、增强T细胞活化和续存能力、避免脱靶效应的同时，减少了宿主抗异基因体液免疫应答。 展开更多

关键词 T细胞活化 抗原受体 卵巢癌 杀伤作用 嵌合 修饰 第三军医大学 单链可变区片段

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嵌合抗原受体NK细胞(CAR-NK)的研究进展 被引量：2

8

作者 郭张燕 李秧 +1 位作者 温伟红 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期474-478,共5页

自然杀伤(NK)细胞是一类重要的固有免疫细胞,也是人体抵御病原体入侵和细胞恶变第一道防线的重要组成部分。嵌合抗原受体(CAR)基因修饰细胞是近年来免疫治疗领域的研究热点,关于CAR-T免疫治疗的临床试验已取得了很好的疗效,但也存在一... 自然杀伤(NK)细胞是一类重要的固有免疫细胞,也是人体抵御病原体入侵和细胞恶变第一道防线的重要组成部分。嵌合抗原受体(CAR)基因修饰细胞是近年来免疫治疗领域的研究热点,关于CAR-T免疫治疗的临床试验已取得了很好的疗效,但也存在一些弊端。CAR介导的NK细胞抗肿瘤活性已有很多报道,包括NK细胞系,从外周血中分离出的NK细胞,以及从人多能干细胞中衍生出的NK细胞。目前也已有CAR-NK临床研究获得批准。我们总结了CAR-NK的相关研究进展。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体(CAR) 自然杀伤(NK)细胞 免疫治疗 肿瘤 综述

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特异性人工抗原提呈细胞体外激活CD19嵌合抗原受体T细胞的构建

9

作者 彭耀军 吴其艳 +2 位作者 刘鸿宇 赵健 危华锋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期581-587,共7页

目的构建CD19特异性人工抗原提呈细胞(aAPC)用于体外激活扩增CD19嵌合抗原受体(CAR)修饰T细胞(CD19-CAR-T),并考察其杀伤效应。方法通过慢病毒介导的方法制备以NIH3T3为细胞骨架、表达共刺激分子CD86和/或CD137L的CD19特异性a APC(NIH3T... 目的构建CD19特异性人工抗原提呈细胞(aAPC)用于体外激活扩增CD19嵌合抗原受体(CAR)修饰T细胞(CD19-CAR-T),并考察其杀伤效应。方法通过慢病毒介导的方法制备以NIH3T3为细胞骨架、表达共刺激分子CD86和/或CD137L的CD19特异性a APC(NIH3T3-CD19/86、NIH3T3-CD19/86/137L)。采用照射的CD19特异性a APC与CD19-CAR-T细胞按一定比例混合培养激活扩增CD19-CAR-T细胞,台盼蓝染色法检测并绘制CD19-CAR-T细胞生长曲线;流式细胞术检测CD19-CAR-T细胞CAR表达变化及分化表型;生物发光细胞毒性法检测扩增的CD19-CAR-T细胞体外靶特异杀伤效应。结果流式检测结果显示NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞表面分别高表达CD19、CD86和/或CD137L分子;NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞都能够高效扩增CD19-CAR-T细胞,NIH3T3-CD19/86/137L细胞具有更好的扩增效应,其与CD19-CAR-T细胞混合培养14 d后,扩增的T细胞数量明显高于NIH3T3-CD19/86细胞组(P<0.05);同时,与刺激前相比NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞刺激扩增的T细胞中CD19-CAR-T细胞比例显著增加(P<0.05);扩增的CD19-CAR-T细胞具有靶特异杀伤效应,能够特异性杀伤CD19阳性靶细胞;流式检测显示NIH3T3-CD19/86/137L扩增的CD19-CAR-T细胞含有约20%作用中心记忆性T细胞。结论成功制备CD19特异性a APC,其可在体外特异性扩增功能性CD19-CAR-T细胞,为初步建立制备高质量临床级CD19-CART细胞的方法提供了技术支撑。 展开更多

关键词 人工抗原提呈细胞 CD19 嵌合抗原受体修饰T细胞 增殖 杀伤

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抗间皮素嵌合抗原受体修饰T细胞治疗卵巢癌的实验研究 被引量：4

10

作者 杨永君 李瑶 +3 位作者 尹立 刘新东 卞修武 余时沧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期945-953,共9页

目的观察抗间皮素(mesothelin,MSLN)嵌合抗原受体修饰的T细胞对卵巢癌细胞的杀伤作用,探索新的卵巢癌治疗手段与策略。方法设计人源化抗人间皮素的嵌合抗原受体融合基因;构建慢病毒表达载体;感染人外周血单核细胞,制备稳定表达抗MSLN嵌... 目的观察抗间皮素(mesothelin,MSLN)嵌合抗原受体修饰的T细胞对卵巢癌细胞的杀伤作用,探索新的卵巢癌治疗手段与策略。方法设计人源化抗人间皮素的嵌合抗原受体融合基因;构建慢病毒表达载体;感染人外周血单核细胞,制备稳定表达抗MSLN嵌合抗原受体的T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CART);Western blot、qRT-PCR、流式细胞术检测CAR的表达;免疫组织化学法和Western blot检测卵巢癌样本及细胞系中MSLN表达;体内和体外实验验证CART细胞对卵巢癌细胞的杀伤能力。结果与正常组织相比,卵巢癌组织MSLN表达显著升高(P<0.01);成功制备了抗MSLN-CART细胞;体外实验证明,抗MSLN-CART细胞能够特异性识别和杀伤MSLN阳性的卵巢癌细胞,效靶比为2^(-4)∶1时,MSLN-CART杀伤率仍达到80%;NOD/SCID小鼠卵巢癌原位移植瘤模型证明,经尾静脉回输抗MSLN-CART细胞(1×10~7/只,共2次),原位移植瘤消失。结论抗MSLN-CART细胞能有效、特异且安全地杀伤卵巢癌细胞,抑制肿瘤的生长。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 间皮素 嵌合抗原受体修饰T细胞 杀伤作用

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嵌合抗原受体NK细胞治疗肝细胞癌的研究进展 被引量：2

11

作者 刘思远 陈琳 +3 位作者 夏安亮 朱明明 孙美玲 孙倍成 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第5期595-603,647,共10页

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌。在过去十年中,HCC治疗领域最令人瞩目的当属新型免疫疗法的蓬勃发展。自然杀伤(natural killer,NK)细胞是免疫系统的一员,在抗肿瘤免疫中发挥着至关重要的作用。嵌合抗原... 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的原发性肝癌。在过去十年中,HCC治疗领域最令人瞩目的当属新型免疫疗法的蓬勃发展。自然杀伤(natural killer,NK)细胞是免疫系统的一员,在抗肿瘤免疫中发挥着至关重要的作用。嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-NK细胞疗法是一种新型的肿瘤免疫疗法,通过基因工程技术使NK细胞能够特异性识别肿瘤相关抗原,从而更精准高效地发挥抗肿瘤作用。本篇综述通过关注CAR-NK的靶点和相关免疫检查点,总结了CAR-NK在HCC治疗中面临的挑战及一些可能的解决方案,并讨论了提高CAR-NK疗效的潜在策略。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体 自然杀伤细胞 肝细胞癌 免疫疗法 免疫检查点

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嵌合抗原受体修饰的CD19-CAR-T的体外构建、扩增及初步功能鉴定

12

作者 李剑 田芳 +8 位作者 姜鹏君 孔祥图 吴坚 殷婷婷 邢芸 金亮 郝瑞栋 刘根桃 朱学军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期389-393,共5页

目的:探索一种特异性靶向CD19分子的嵌合抗原受体修饰的CD19-CAR-T的构建方法 ,并明确其体外杀伤靶细胞的效果。方法:运用分子克隆技术,将PCR获得的CD19-CAR片段构建到p CDH-GFP慢病毒载体上,利用包装的慢病毒颗粒转染供者CD3^+T细胞,... 目的:探索一种特异性靶向CD19分子的嵌合抗原受体修饰的CD19-CAR-T的构建方法 ,并明确其体外杀伤靶细胞的效果。方法:运用分子克隆技术,将PCR获得的CD19-CAR片段构建到p CDH-GFP慢病毒载体上,利用包装的慢病毒颗粒转染供者CD3^+T细胞,通过流式细胞术及PCR鉴定转染效率,并通过7-AAD染色鉴定扩增得到的CD19-CAR-T细胞体外杀伤CD19^+Ramos靶细胞的效果。结果:经慢病毒转染T细胞在体外培养10 d后,CD3^+T扩增达(78.8±23.2)倍,(58.3±5.4)%的CD3^+T细胞表达GFP,CD19-CAR-T体外杀伤CD19^+Ramos靶细胞在效靶比5∶1时效率为(57.4±9.3)%。结论:本实验成功建立了一种有效的体外构建及扩增CD19-CAR-T的方法,且具有明显靶向性,为CD19^+B细胞肿瘤临床治疗提供实验依据。 展开更多

关键词 CD19嵌合抗原受体 白血病 淋巴瘤 细胞杀伤

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基于CAR的细胞免疫治疗在自身免疫性疾病中的应用

13

作者 戴尔放 付妤 《华中科技大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2024年第6期839-844,共6页

自身免疫性疾病是一类由免疫系统错误地攻击正常健康组织和细胞导致的疾病,其主要发病基础是产生自身抗体的自身反应性B细胞,而基于嵌合抗原受体(CAR)的细胞免疫治疗可以耗竭B细胞或抑制自身反应性T细胞。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)通过... 自身免疫性疾病是一类由免疫系统错误地攻击正常健康组织和细胞导致的疾病,其主要发病基础是产生自身抗体的自身反应性B细胞,而基于嵌合抗原受体(CAR)的细胞免疫治疗可以耗竭B细胞或抑制自身反应性T细胞。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)通过靶向CD19/BCMA可以实现非特异性B细胞耗竭。嵌合自身抗体受体T细胞(CAAR-T)选择性杀伤携带特定自身抗体的免疫细胞,不损害正常B细胞。嵌合抗原受体调节T细胞(CAR-Treg)利用Treg细胞具有的调节自身耐受性和抑制免疫反应的作用抑制自身反应性T细胞。嵌合抗原受体自然杀伤细胞(CAR-NK)和嵌合自身抗体受体自然杀伤细胞(CAAR-NK)则进一步提高了安全性与可及性,在避免引起免疫排斥反应的同时扩宽了免疫细胞的来源。该文将探讨CAR的细胞免疫疗法在治疗自身免疫性疾病方面的应用研究进展。 展开更多

关键词 自身免疫性疾病 嵌合抗原受体T细胞 嵌合自身抗体受体T细胞 嵌合抗原受体调节T细胞 嵌合抗原受体自然杀伤细胞

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NKG2D CAR-NK92细胞构建及其对多发性骨髓瘤细胞的杀伤作用 被引量：1

14

作者 龙婧 郑榕 +4 位作者 叶思诗 柯善文 段德明 魏成 高基民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期577-585,共9页

目的 构建并鉴定靶向自然杀伤细胞2组成员D配体(NKG2DL)的嵌合抗原受体NK92(CAR-NK92)细胞[分泌白细胞介素15受体a与白细胞介素15的复合物(IL-15Ra-IL-15)],并验证NKG2D CAR-NK92细胞对多发性骨髓瘤细胞的杀伤活性。方法 通过筛选NKG2D... 目的 构建并鉴定靶向自然杀伤细胞2组成员D配体(NKG2DL)的嵌合抗原受体NK92(CAR-NK92)细胞[分泌白细胞介素15受体a与白细胞介素15的复合物(IL-15Ra-IL-15)],并验证NKG2D CAR-NK92细胞对多发性骨髓瘤细胞的杀伤活性。方法 通过筛选NKG2D的胞外段连接4-1BB、 CD3ζ、 IL-15Ra-IL-15序列构建CAR载体,包装慢病毒并转导NK92细胞,获得NKG2D CAR-NK92细胞;CCK-8法检测NKG2D CAR-NK92细胞的增殖能力,ELISA检测其IL-15Ra的分泌,乳酸脱氢酶(LDH)法检测其杀伤效率;流式细胞术检测细胞活化性受体NK细胞受体p30(NKp30)、 NKp44、 NKp46的表达,凋亡细胞群的比例以及CD107α表达、胞内颗粒酶B(granzyme B)和穿孔素(perforin)的释放,以进一步验证NKG2D CAR-NK92细胞对肿瘤的细胞毒性作用机制;通过NKG2D抗体抑制效应细胞、组胺抑制肿瘤细胞后,LDH法检测对细胞杀伤效率的影响;构建NCG(NOD-Prkdcem26Cd52Il2rgem26Cd22/Nju)小鼠多发性骨髓瘤异体移植模型,验证其体内抗肿瘤活性。结果 慢病毒转导后,NK92细胞的NKG2D表达显著增加;与NK92细胞相比,NKG2D CAR-NK92细胞的增殖能力稍弱,早期凋亡细胞群少于其亲本NK92细胞;NKG2D CAR-NK92对多发性骨髓瘤细胞的细胞毒性更强,在其培养上清液中可检测到IL-15Ra的分泌;NKp44蛋白在NKG2D CAR-NK92细胞上的表达量显著增加,活化效应增强;抑制试验显示,CAR-NK92细胞对MHC-Ⅰ类链相关蛋白A(MICA)和MICB阳性的肿瘤细胞的细胞毒性作用更依赖于NKG2D CAR和NKG2DL的相互作用;NKG2D CAR-NK92细胞经肿瘤细胞刺激后,granzyme B和perforin表达增加,且NK细胞显著上调CD107α的表达;在高度免疫缺陷NCG小鼠多发性骨髓瘤异体移植模型中,经NKG2D CAR-NK92细胞治疗的小鼠肿瘤明显缩小,且体质量无明显下降。结论 成功构建一种靶向NKG2DL的CAR-NK92细胞(分泌IL-15Ra-IL-15),其对多发性骨髓细胞的杀伤作用明显。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体(CAR) NK92细胞 自然杀伤细胞2组成员D配体(NKG2DL) 多发性骨髓瘤

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通用型CAR-NK细胞治疗系统性红斑狼疮的应用与展望 被引量：3

15

作者 于奕奕 胡佳琪 +2 位作者 靳正逸 孔瑞娜 高洁 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1199-1204,共6页

系统性红斑狼疮(SLE)的特点是B细胞异常活化产生大量自身抗体,这些自身抗体与自身抗原形成免疫复合物诱发系统性炎症,导致全身多系统多器官受累。现有靶向B细胞治疗策略(如贝利尤单抗、泰它西普及利妥昔单抗等)的临床疗效仍然有限,近年... 系统性红斑狼疮(SLE)的特点是B细胞异常活化产生大量自身抗体,这些自身抗体与自身抗原形成免疫复合物诱发系统性炎症,导致全身多系统多器官受累。现有靶向B细胞治疗策略(如贝利尤单抗、泰它西普及利妥昔单抗等)的临床疗效仍然有限,近年来靶向CD19的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞治疗SLE展现出卓越的疗效。但自体CAR-T细胞治疗存在细胞因子释放综合征、T细胞肿瘤、感染等潜在风险,且价格昂贵。CAR-自然杀伤(NK)细胞治疗是现货型细胞疗法,其安全性高,无神经毒性及肿瘤化风险,且治疗费用低。目前,CAR-NK细胞在治疗血液系统肿瘤中取得了显著的研究成果,且CAR-NK细胞治疗SLE的初步临床研究展现出良好的治疗效果、优异的安全性及可预期的持久性。本文将重点阐述新一代通用型CAR-NK细胞的特点及其用于治疗复发难治性SLE的最新临床研究结果,展望其治疗SLE及B细胞相关自身免疫病的广阔前景。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 嵌合抗原受体 自然杀伤细胞 通用型

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肿瘤免疫细胞治疗的现状及展望 被引量：57

16

作者 郭振红 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期149-160,共12页

肿瘤免疫细胞治疗近年来因其疗效显著而备受瞩目。免疫细胞,包括T细胞、NK细胞和DC在抗肿瘤免疫应答以及肿瘤免疫治疗中发挥了重要作用。其中,嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰T细胞(CAR-T)技术和逆转肿瘤免疫抑制功能... 肿瘤免疫细胞治疗近年来因其疗效显著而备受瞩目。免疫细胞,包括T细胞、NK细胞和DC在抗肿瘤免疫应答以及肿瘤免疫治疗中发挥了重要作用。其中,嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰T细胞(CAR-T)技术和逆转肿瘤免疫抑制功能的CTLA-4和PD-1/PD-L1等免疫检查点抑制剂疗法分别在血液肿瘤及黑素瘤等实体肿瘤治疗中取得了令人振奋的效果,如何进一步提高疗效、增加适应性肿瘤病种并控制其免疫相关的不良反应成为日后研究重点;NK细胞也将利用CAR技术和免疫检查点抑制剂进一步增强其在肿瘤治疗中的作用;DC作为第一个被FDA批准的治疗性肿瘤疫苗,在证明其安全无毒副作用的基础上,如何提高疗效成为关注热点。本文结合近年来肿瘤免疫细胞治疗的进展及该领域中亟需解决的问题作一分析与展望。 展开更多

关键词 肿瘤 免疫治疗 T细胞治疗 嵌合抗原受体修饰的T细胞 树突状细胞 自然杀伤细胞

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抗间皮素CAR-T细胞治疗胰腺癌的体外研究 被引量：2

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作者 田静 白天凯 +1 位作者 张之勇 闫滨 《陕西科技大学学报》 北大核心 2022年第4期67-73,共7页

本研究旨在观察抗间皮素(mesothelin,MSLN)嵌合抗原受体修饰的T细胞(Chimeric antigen receptor-modified T cells,CAR-T)在体外对两种胰腺癌细胞的杀伤作用,以及猪苓多糖(PPS)、人参多糖(GPS)、黄芪多糖(APS)、香菇多糖(LNT)和灵芝多糖... 本研究旨在观察抗间皮素(mesothelin,MSLN)嵌合抗原受体修饰的T细胞(Chimeric antigen receptor-modified T cells,CAR-T)在体外对两种胰腺癌细胞的杀伤作用,以及猪苓多糖(PPS)、人参多糖(GPS)、黄芪多糖(APS)、香菇多糖(LNT)和灵芝多糖(GLP)等调节免疫药物对CAR-T细胞增殖及杀伤肿瘤效应的影响.首先通过构建慢病毒表达载体转染制备稳定表达抗MSLN CAR-T细胞,然后采用实时无标记细胞分析仪(RTCA)和乳酸脱氢酶(LDH)等两种检测方法体外实验验证CAR-T细胞对PANC-1、ASPC-1两种胰腺癌细胞的杀伤能力.最后采用RTCA、CCK8法检测PPS、GPS、APS、LNT和GLP多糖对CAR-T细胞增殖及杀伤肿瘤效应的影响.结果表明,体外构建的MSLN CAR-T细胞对PANC-1、ASPC-1这两种胰腺癌细胞都有较好的杀伤效应,并且对MSLN蛋白高表达的ASPC-1细胞杀伤率显著高于MSLN蛋白低表达的PANC-1细胞(p<0.01);PPS、GPS、APS、LNT以及GLP等调节免疫药物对CAR-T细胞杀伤肿瘤的影响较小,但是与对照组相比,0.156 mg/mL的灵芝多糖和0.625 mg/mL的香菇多糖对CAR-T细胞增殖有一定的促进作用. 展开更多

关键词 嵌合抗原受体T细胞(CAR-T) 胰腺癌 间皮素 体外杀伤 多糖

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NK细胞:肿瘤免疫治疗的新兴主力军 被引量：3

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作者 王立韬 白丽(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1059-1064,共6页

自然杀伤(NK)细胞作为人体免疫系统抵御外来病原体入侵的第一道防线,在宿主抵抗病毒感染和肿瘤的先天免疫和获得性免疫防御中发挥重要作用。近年来NK细胞以其独特优势逐渐成为肿瘤免疫治疗的新兴主力军,并在多种血液系统恶性肿瘤治疗中... 自然杀伤(NK)细胞作为人体免疫系统抵御外来病原体入侵的第一道防线,在宿主抵抗病毒感染和肿瘤的先天免疫和获得性免疫防御中发挥重要作用。近年来NK细胞以其独特优势逐渐成为肿瘤免疫治疗的新兴主力军,并在多种血液系统恶性肿瘤治疗中展现出不俗的实力。目前,针对NK细胞相关的免疫治疗手段主要包括免疫检查点抑制剂治疗、嵌合抗原受体NK治疗及双/三特异性杀伤细胞结合因子治疗等。本综述将对当前NK细胞主要的治疗手段及其在肿瘤治疗中所产生的临床效果展开叙述,以期为肿瘤患者的临床治疗提供可靠的理论依据。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 免疫检查点 嵌合抗原受体 双/三特异性杀伤细胞结合因子

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CAR-NK:肿瘤免疫细胞治疗新策略 被引量：2

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作者 史瑞芳(综述) 姚露 贾绍昌(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期440-444,共5页

自然杀伤细胞(natural killer cell,NK cell)是先天免疫系统的重要组成部分,在肿瘤免疫中起着至关重要的作用。近年来对NK细胞免疫生物学的不断了解,为基于NK细胞的治疗策略奠定了基础。临床前研究结果显示,嵌合抗原受体-NK(chimeric an... 自然杀伤细胞(natural killer cell,NK cell)是先天免疫系统的重要组成部分,在肿瘤免疫中起着至关重要的作用。近年来对NK细胞免疫生物学的不断了解,为基于NK细胞的治疗策略奠定了基础。临床前研究结果显示,嵌合抗原受体-NK(chimeric antigen receptor-NK,CAR-NK)细胞在抗肿瘤特异性中表现出巨大的前景。NK细胞是人体固有免疫的一类重要细胞,不同于T细胞的非特异性识靶和杀伤机制,CAR-NK细胞在体外细胞模型和体内动物模型中均显示出良好的肿瘤杀伤作用。人原代NK细胞和NK-92细胞系均可进行CAR修饰用于过继免疫治疗,其展现出细胞毒性强、经济、容易规模化制备等特点。本文总结了近年来CAR修饰的人原代NK细胞及NK-92细胞系在临床前研究结果,并分别对第一批CAR-NK细胞治疗血液学恶性肿瘤和实体瘤的临床试验结果进行阐述。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体 自然杀伤细胞 血液学恶性肿瘤 实体瘤

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scFv亲和力对CAR-T细胞抗肿瘤能力的影响 被引量：2

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作者 张代群 李峰 +3 位作者 王淑敏 张凯 石晓娟 张毅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1044-1048,1057,共6页

目的:比较抗原亲和力不同的scFv片段对CAR-T细胞增殖、分化和抗肿瘤能力的影响。方法:分别构建靶向ErbB2的FRP5(K_D=30 nmol/L)和chA21(K_D=11 nmol/L)CAR慢病毒表达载体,包装病毒后制备CD8^+CAR-T细胞;在CAR-T细胞扩增过程中,通过计数... 目的:比较抗原亲和力不同的scFv片段对CAR-T细胞增殖、分化和抗肿瘤能力的影响。方法:分别构建靶向ErbB2的FRP5(K_D=30 nmol/L)和chA21(K_D=11 nmol/L)CAR慢病毒表达载体,包装病毒后制备CD8^+CAR-T细胞;在CAR-T细胞扩增过程中,通过计数细胞来检测细胞增殖;利用流式细胞术检测CAR-T细胞分化情况;利用荧光素酶活性法检测杀伤活性;用ELISA检测CAR-T细胞在肿瘤识别过程中IL-2和IFN-γ的分泌情况;利用成像流式细胞仪检测scFv亲和力对CAR-T细胞形成免疫突触能力的影响。结果:成功构建了CD8^+ CAR-T细胞,FRP5和chA21 CAR阳性率均达50%左右;CAR-T细胞的增殖和分化状态没有差异;荧光素酶活性法显示chA21-CAR-T细胞裂解肿瘤细胞的能力较强;ELISA检测结果显示chA21-CAR-T细胞分泌细胞因子能力更强;chA21-CAR-T细胞形成免疫突触的能力更强。结论:包含高亲和力scFv的chA21-CAR-T细胞具有较强的抗原依赖性杀伤活性。 展开更多

关键词 单链可变区(scFv) ERBB2 亲和力 嵌合抗原受体T细胞 细胞杀伤

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