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白藜芦醇通过PROX1/SIRT1信号通路调控山羊肌纤维类型转化的机制研究
1
作者
吴少强
刘雨帆
+2 位作者
韦义荣
黄艳娜
蒋钦杨
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第1期201-212,共12页
旨在解析白藜芦醇(resveratrol, RES)介导PROX1基因调控山羊骨骼肌肌纤维类型转化的分子机制。体内试验部分,试验选取12只180日龄去势努比亚山羊((28.25±0.26)kg)随机分为2组,每组6个重复。以补饲0、150 mg·kg^(-1) RES组山...
旨在解析白藜芦醇(resveratrol, RES)介导PROX1基因调控山羊骨骼肌肌纤维类型转化的分子机制。体内试验部分,试验选取12只180日龄去势努比亚山羊((28.25±0.26)kg)随机分为2组,每组6个重复。以补饲0、150 mg·kg^(-1) RES组山羊背最长肌组织为试验样品,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及Western blot技术检测PROX1基因的表达量;体外试验,基于课题组前期试验所筛选出的20μmol·L^(-1) RES是细胞培养最佳浓度,通过转染PROX1干扰片段及干扰片段与20μmol·L^(-1) RES共处理山羊骨骼肌成肌细胞,检测CaN/NFAT通路关键基因与肌纤维四型标志基因在mRNA水平及蛋白水平的表达情况;同时,利用蛋白-蛋白对接技术检测SIRT1与PROX1蛋白是否互作,并通过SIRT1抑制剂EX-527和RES共处理山羊成肌细胞,验证SIRT1与CaN/NFAT通路的调控关系。结果表明,与对照组相比,补饲150 mg·kg^(-1) RES处理山羊成肌细胞可使SIRT1基因及CaN/NFAT通路关键基因的mRNA表达量极显著上调(P<0.001),使MYH7蛋白的表达水平显著上调(P<0.01),MYH4蛋白的表达水平显著下降(P<0.01)。而干扰PROX1基因后,CaN/NFAT通路关键基因mRNA表达水平及MYH7、MYH4基因mRNA表达水平与蛋白表达水平的表达情况都与上述相反,该情况则在干扰片段与RES共处理成肌细胞后发生改变。蛋白-蛋白对接结果表明,SIRT1蛋白与PROX1蛋白可以互作。SIRT1抑制剂处理成肌细胞后,CaN/NFAT通路关键基因(NFATc1、TNNC1、TNNI1、MYOZ2、SLN)的mRNA表达量较CON组显著下调(P<0.01),再经过RES干预后,TNNC1、TNNI1的mRNA表达量极显著上调(P<0.01)。本研究初步揭示了RES通过SIRT1/PROX1/CaN/NFAT途径调控肌纤维类型转化的机制,为后续畜禽肉品质的改良提供理论依据。
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关键词
白藜芦醇(RES)
CaN/NFAT信号通路
山羊成肌细胞
肌纤维转化
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题名
白藜芦醇通过PROX1/SIRT1信号通路调控山羊肌纤维类型转化的机制研究
1
作者
吴少强
刘雨帆
韦义荣
黄艳娜
蒋钦杨
机构
广西大学动物科学技术学院
出处
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第1期201-212,共12页
基金
国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设项目(nycytxgxcxtd-2021-09)。
文摘
旨在解析白藜芦醇(resveratrol, RES)介导PROX1基因调控山羊骨骼肌肌纤维类型转化的分子机制。体内试验部分,试验选取12只180日龄去势努比亚山羊((28.25±0.26)kg)随机分为2组,每组6个重复。以补饲0、150 mg·kg^(-1) RES组山羊背最长肌组织为试验样品,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及Western blot技术检测PROX1基因的表达量;体外试验,基于课题组前期试验所筛选出的20μmol·L^(-1) RES是细胞培养最佳浓度,通过转染PROX1干扰片段及干扰片段与20μmol·L^(-1) RES共处理山羊骨骼肌成肌细胞,检测CaN/NFAT通路关键基因与肌纤维四型标志基因在mRNA水平及蛋白水平的表达情况;同时,利用蛋白-蛋白对接技术检测SIRT1与PROX1蛋白是否互作,并通过SIRT1抑制剂EX-527和RES共处理山羊成肌细胞,验证SIRT1与CaN/NFAT通路的调控关系。结果表明,与对照组相比,补饲150 mg·kg^(-1) RES处理山羊成肌细胞可使SIRT1基因及CaN/NFAT通路关键基因的mRNA表达量极显著上调(P<0.001),使MYH7蛋白的表达水平显著上调(P<0.01),MYH4蛋白的表达水平显著下降(P<0.01)。而干扰PROX1基因后,CaN/NFAT通路关键基因mRNA表达水平及MYH7、MYH4基因mRNA表达水平与蛋白表达水平的表达情况都与上述相反,该情况则在干扰片段与RES共处理成肌细胞后发生改变。蛋白-蛋白对接结果表明,SIRT1蛋白与PROX1蛋白可以互作。SIRT1抑制剂处理成肌细胞后,CaN/NFAT通路关键基因(NFATc1、TNNC1、TNNI1、MYOZ2、SLN)的mRNA表达量较CON组显著下调(P<0.01),再经过RES干预后,TNNC1、TNNI1的mRNA表达量极显著上调(P<0.01)。本研究初步揭示了RES通过SIRT1/PROX1/CaN/NFAT途径调控肌纤维类型转化的机制,为后续畜禽肉品质的改良提供理论依据。
关键词
白藜芦醇(RES)
CaN/NFAT信号通路
山羊成肌细胞
肌纤维转化
Keywords
resveratrol(RES)
CaN/NFAT signaling pathway
goat myoblasts
myofiber transformation
分类号
S827.1 [农业科学—畜牧学]
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作者
出处
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1
白藜芦醇通过PROX1/SIRT1信号通路调控山羊肌纤维类型转化的机制研究
吴少强
刘雨帆
韦义荣
黄艳娜
蒋钦杨
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025
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