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屋尘螨提取物激活气道上皮细胞EphA2-STAT3/p38 MAPK信号通路介导气道炎症 被引量:4
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作者 黄国平 袁青 +4 位作者 叶迎春 于红 谢翔 徐文峰 年四季 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期31-38,共8页
目的探讨受体酪氨酸激酶肝配蛋白A型受体2(EphA2)对屋尘螨提取物(HDM)诱导气道上皮细胞表达炎症细胞因子的作用及其机制。方法用EphA2小干扰RNA(siRNA)转染气道上皮细胞株16HBE细胞建立EphA2敲减的细胞模型,HDM刺激16HBE细胞后,采用实... 目的探讨受体酪氨酸激酶肝配蛋白A型受体2(EphA2)对屋尘螨提取物(HDM)诱导气道上皮细胞表达炎症细胞因子的作用及其机制。方法用EphA2小干扰RNA(siRNA)转染气道上皮细胞株16HBE细胞建立EphA2敲减的细胞模型,HDM刺激16HBE细胞后,采用实时定量PCR检测EphA2、白细胞介素6(IL-6)和IL-8 mRNA水平,细胞因子微球检测技术(CBA)检测IL-6、 IL-8、 IL-17A、 IL-17F和肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白水平;Western blot法检测EphA2、磷酸化的EphA2(p-EphA2)、信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、 p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK)、核因子κB p65(NF-κB p65)及磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白水平。STAT3抑制剂Stattic联合HDM或p38 MAPK抑制剂SB203580联合HDM刺激16HBE细胞,实时定量PCR检测IL-6和IL-8 mRNA水平、 CBA检测IL-6和IL-8蛋白水平。结果敲低EphA2显著抑制HDM诱导16HBE细胞表达IL-6和IL-8,降低STAT3及p38 MAPK的总蛋白及磷酸化水平,但对NF-κB p65总蛋白及磷酸化水平均无明显影响。Stattic抑制STAT3表达及活化后,显著抑制HDM诱导16HBE细胞中IL-6和IL-8 mRNA和蛋白表达;而SB203580抑制p38 MAPK信号通路后,抑制HDM诱导16HBE细胞中IL-6和IL-8 mRNA表达水平,而对其蛋白水平无影响。结论 HDM通过激活EphA2-STAT3/p38 MAPK通路诱导16HBE细胞表达IL-6和IL-8参与气道炎症。 展开更多
关键词 哮喘 提取(hdm) 肝配蛋白A型受体2(EphA2) 信号通路
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鸢尾素通过NF-κB和JNK信号通路减轻屋尘螨诱导的气道上皮细胞炎症及凋亡的实验研究 被引量:4
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作者 李莹 姚伟 +4 位作者 王萌 余志宏 龚园其 蓝海兵 齐协飞 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2022年第10期1106-1112,共7页
目的:探索鸢尾素(irisin)对屋尘螨(HDM)诱导的人支气管上皮细胞(16HBE)的炎症和细胞凋亡的影响。方法:用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基培养人支气管上皮细胞(16HBE),待细胞长至85%时血清饥饿处理12 h,随后用不同浓度的HDM(0、400、800... 目的:探索鸢尾素(irisin)对屋尘螨(HDM)诱导的人支气管上皮细胞(16HBE)的炎症和细胞凋亡的影响。方法:用含10%胎牛血清的RPMI1640培养基培养人支气管上皮细胞(16HBE),待细胞长至85%时血清饥饿处理12 h,随后用不同浓度的HDM(0、400、800、1200 U/mL)刺激细胞24 h。用活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测各组细胞ROS水平,qPCR法检测各组细胞白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。用20 nmol/L irisin预处理16HBE细胞2 h后接着用800 U/mL HDM处理24 h。活性氧试剂盒检测irisin对HDM诱导的细胞ROS产生的影响;qPCR法检测irisin对HDM诱导的炎症因子TNF-α及IL-6表达的影响;Western blot检测细胞内P65 NF-κB及JNK MAPK蛋白磷酸化水平,同时检测细胞内促凋亡蛋白cleaved-caspase3、BAX及抗凋亡蛋白BCL-XL的水平。结果:与对照组相比,不同浓度HDM(400、800、1200 U/mL)刺激16HBE细胞24 h后,细胞内ROS水平升高(P<0.05),TNF-α及IL-6表达水平也升高(P<0.05)。与单用HDM处理组相比,irisin预处理的16HBE细胞内ROS水平下降(P<0.05),同时细胞内炎症因子TNF-α及IL-6表达减少(P<0.05);irisin预处理组抗凋亡蛋白BCL-XL表达增加(P<0.05),同时促凋亡蛋白cleaved-caspase3、BAX的表达减少(P<0.05);与对照组相比,HDM干预后细胞P65 NF-κB及JNK蛋白磷酸化水平增加(P<0.05),而irisin下调了P65 NF-κB及JNK蛋白磷酸化水平(P<0.05)。结论:鸢尾素可有效改善HDM诱导的16HBE细胞的炎症和细胞凋亡,该保护作用可能与其抑制NF-κB和JNK MAPK信号通路有关,鸢尾素可能是治疗肺部炎症的潜在药物。 展开更多
关键词 鸢尾素 (hdm) 活性氧(ROS) 氧化应激 细胞凋亡 炎症
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中性粒细胞为主型尘螨过敏哮喘小鼠模型的建立
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作者 李毅 袁青 +4 位作者 黄国平 叶迎春 于红 谢翔 年四季 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期687-692,共6页
目的使用屋尘螨提取物(HDM)建立中性粒细胞为主型小鼠哮喘模型。方法按照随机数字表法,将16只无特定病原体(SPF)级BALB/c小鼠分为对照组和模型组。模型组给予HDM滴鼻致敏及激发,对照组小鼠给予等量生理盐水。末次激发后24 h,采用BUXCO... 目的使用屋尘螨提取物(HDM)建立中性粒细胞为主型小鼠哮喘模型。方法按照随机数字表法,将16只无特定病原体(SPF)级BALB/c小鼠分为对照组和模型组。模型组给予HDM滴鼻致敏及激发,对照组小鼠给予等量生理盐水。末次激发后24 h,采用BUXCO小鼠无创肺功能仪测量气道呼气间歇(Penh)值确定气道阻力,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计数细胞数并进行炎细胞分类,HE染色观察肺组织炎细胞浸润程度。实时定量PCR检测白细胞介素6(IL-6)、IL-17F、IL-1βmRNA表达,微量样本多指标流式蛋白定量技术(CBA)检测BALF中IL-4、IL-6、IL-17F、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果与对照组相比,模型组Penh值明显升高,气管及血管旁炎症比对照组明显加重;模型组小鼠IL-6、IL-17F、IL-1βmRNA水平增加,BALF细胞数及中性粒细胞数明显增加,BALF中促中性粒细胞型细胞因子IL-6、IL-17F、TNF-α水平明显升高。结论成功建立了中性粒细胞为主型尘螨过敏小鼠哮喘模型。 展开更多
关键词 提取(hdm) 中性粒细胞 哮喘 气道炎症
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哮喘小鼠气道重塑中α平滑肌肌动蛋白的表达 被引量:9
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作者 朱艳芬 宋泽庆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期934-937,941,共5页
目的:用屋尘螨提取液(House DustMite Extract,HDM)构建哮喘小鼠气道重塑模型,检测肺组织中α平滑肌肌动蛋白(Smooth Muscle Actin-α,α-SMA)的表达。方法:BALB/c小鼠随机分为空白组、HDM低、高剂量三组,每组再分为3、6、9周3个亚组。... 目的:用屋尘螨提取液(House DustMite Extract,HDM)构建哮喘小鼠气道重塑模型,检测肺组织中α平滑肌肌动蛋白(Smooth Muscle Actin-α,α-SMA)的表达。方法:BALB/c小鼠随机分为空白组、HDM低、高剂量三组,每组再分为3、6、9周3个亚组。用不同浓度的HDM皮下/腹腔致敏,滴鼻激发。用医学图像软件分析气道重塑的病理改变,分别用qRT-PCR和IH检测肺组织中α-SMAmRNA和蛋白的表达。结果:与空白组对比,HDM高、低剂量组肺组织病理炎症计分增加,气道内外径比值降低,α-SMA蛋白及其mRNA表达增加,随激发时间延长改变越来越显著;高剂量组较低剂量组更显著。结论:HDM诱导BALB/c小鼠支气管哮喘气道重塑中,α-SMA随气道重塑的加剧而表达增加。 展开更多
关键词 哮喘 气道重塑 模型 提取 Α平滑肌肌动蛋白
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