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尿感方对尿道致病性大肠杆菌毒力特征的影响
1
作者 贺敏 蒋健 +3 位作者 乔昀 陈君灏 元唯安 张雯霞 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2350-2354,共5页
目的探讨尿感方对尿道致病性大肠杆菌毒力特征的影响。方法以CFT073作为实验菌株,通过细菌生长培养,观察尿感方含药尿液对CFT073生长的影响。分别采用体外持留模型、微孔板法、平板法、ELISA法和RT-PCR法检测尿感方含药尿液对CFT073持... 目的探讨尿感方对尿道致病性大肠杆菌毒力特征的影响。方法以CFT073作为实验菌株,通过细菌生长培养,观察尿感方含药尿液对CFT073生长的影响。分别采用体外持留模型、微孔板法、平板法、ELISA法和RT-PCR法检测尿感方含药尿液对CFT073持留能力、生物膜形成、泳动能力、内毒素释放水平、侵袭力和毒力相关基因(fur、chuA、iha、fyuA、gltS、gltP、fimH和LexA)的影响。结果与未经干预的CFT073比较,经空白尿液干预后的CFT073生长能力、持留能力、生物膜形成、泳动能力、侵袭力、内毒素释放水平和毒力相关基因mRNA表达均无明显差异(P>0.05);与经90%空白尿液干预后的CFT073比较,经90%尿感方含药尿液干预后的CFT073生长受到抑制(P<0.05);与经60%空白尿液干预后的CFT073比较,经60%尿感方含药尿液干预后的CFT073持留能力、生物膜形成、泳动能力、侵袭力和内毒素释放水平降低(P<0.05,P<0.01),毒力相关基因fur、chuA、iha、fyuA、gltS、gltP、fimH、LexAmRNA表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论尿感方可降低CFT073的持留能力、泳动能力和侵袭力,抑制生物膜的形成和内毒素的释放,下调毒力相关基因fur、chuA、iha、fyuA、gltS、gltP、fimH、LexAmRNA表达,影响CFT073的毒力特征。 展开更多
关键词 尿感方 尿道致病性大肠杆菌 毒力特征 毒力相关基因
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尿感方清除受感染膀胱上皮细胞胞内尿道致病性大肠杆菌的作用 被引量：3
2
作者 吴雨 蒋健 +2 位作者 贺敏 张磊阳 陈文文 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2469-2474,共6页
目的观察尿感方(马齿苋、蒲公英)清除受感染膀胱上皮细胞胞内尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escheriehia coli,UPEC)的作用,并探讨其作用机制。方法通过UPEC感染人膀胱癌细胞5637(human bladder cancer cell 5637,HTB-9)细胞模型,... 目的观察尿感方(马齿苋、蒲公英)清除受感染膀胱上皮细胞胞内尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escheriehia coli,UPEC)的作用,并探讨其作用机制。方法通过UPEC感染人膀胱癌细胞5637(human bladder cancer cell 5637,HTB-9)细胞模型,观察尿感方含药尿液清除受感染膀胱上皮细胞胞内UPEC的作用;同时采用分子生物学技术,观察其对TLR4/cAMP信号传导通路的主要环节Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、腺苷酸环化酶3(adenylate cyclase 3,AC3)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、蛋白激酶A(protien kinase A,PKA)、肌球蛋白Ⅶa和Rab蛋白相互作用蛋白(MyosinⅦA and Rab interacting protein,MyRIP)、Rab27b和小窝蛋白1(Caveolin-1)的影响。结果与大鼠空白尿液高剂量组比较,尿感方大鼠含药尿液高剂量组的细菌胞吐率增加。与大鼠空白尿液高剂量组比较,尿感方大鼠含药尿液高剂量组增加TLR4、AC3蛋白的表达及胞内cAMP的水平,促进PKA活化,增加TLR4、AC3、MyRIP、Rab27b和Caveolin-1蛋白的表达。结论尿感方具有一定的清除受感染膀胱上皮细胞胞内UPEC的作用,其作用机制与TLR4/cAMP信号传导通路的环节有关。 展开更多
关键词 尿感方 尿道致病性大肠杆菌 胞吐 人膀胱上皮细胞 TLR4/cAMP信号传导通路
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应用DNA芯片技术筛选禽致病性大肠杆菌和尿道致病性大肠杆菌的差异表达基因
3
作者 宦海霞 张科 +2 位作者 陈祥 高崧 刘秀梵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期19-22,共4页
为研究禽致病性大肠杆菌强毒株E058的毒力相关基因在鸡体内、体外表达情况以及E058和尿道致病性大肠杆菌HEC4在LB和尿液中培养的表达情况,本研究分别提取E058株在SPF鸡体内及E058株和HEC4株在LB和尿液中静置培养的总RNA,与构建的DNA芯... 为研究禽致病性大肠杆菌强毒株E058的毒力相关基因在鸡体内、体外表达情况以及E058和尿道致病性大肠杆菌HEC4在LB和尿液中培养的表达情况,本研究分别提取E058株在SPF鸡体内及E058株和HEC4株在LB和尿液中静置培养的总RNA,与构建的DNA芯片杂交,检测和分析RNA的差异表达情况。芯片的检测结果表明:E058株在鸡体内和LB中培养差异表达基因共有9个,上调基因为5个,分别为neuC、iutA、cvaC、aes-15和iucCD;下调基因为4个,分别为aes-8、gyrB、aec-30和mdh。另外,芯片检测结果也显示E058株和HEC4株在LB和尿液中静置培养,具有相似的基因表达情况。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 尿道致病性大肠杆菌 毒力基因 基因表达差异 DNA芯片
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基于毒力因子FimH探讨尿感方抗尿道致病性大肠杆菌的作用机制 被引量：1
4
作者 朱盼盼 蒋健 +4 位作者 陈君灏 乔昀 元唯安 梁群梅 贺敏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期217-222,共6页
目的观察尿感方对尿道致病性大肠杆菌(UPEC)毒力因子FimH的作用和UPEC侵袭力的影响,并探讨其作用机制。方法UPEC分别经含空白尿液、尿感方含药尿液的培养基和空白培养基预处理后,观察UPEC毒力因子FimH表达的情况,并通过UPEC感染细胞模型... 目的观察尿感方对尿道致病性大肠杆菌(UPEC)毒力因子FimH的作用和UPEC侵袭力的影响,并探讨其作用机制。方法UPEC分别经含空白尿液、尿感方含药尿液的培养基和空白培养基预处理后,观察UPEC毒力因子FimH表达的情况,并通过UPEC感染细胞模型,评价其侵袭力,同时采用Western blot、ELISA、RT-qPCR法检测整合素α3(integrinα3)、integrinβ1、p-FAK、p-Src、p-PI3K、p-αPAK蛋白表达,Rc1、Cdc42活性和三磷酸肌醇(IP3)水平,integrinα3、integrinβ1和细胞骨架蛋白[纽蛋白(vinculin)、踝蛋白(talin)、桩蛋白(paxillin)、F-肌动蛋白(F-actin)、α-辅助肌动蛋白(α-actinin)]mRNA表达。结果大鼠空白尿液和健康人空白尿液对UPEC FimH mRNA表达和UPEC入侵率无明显影响(P>0.05),对integrinα3、integrinβ1 mRNA和蛋白表达,p-FAK、p-Src、p-PI3K、p-αPAK蛋白表达,Rc1、Cdc42活性,IP3水平,细胞骨架蛋白mRNA表达均无明显影响(P>0.05)。大鼠含药尿液和健康人含药尿液降低了FimH mRNA表达,UPEC入侵率,integrinα3、integrinβ1 mRNA和蛋白表达,p-FAK、p-Src、p-PI3K、p-αPAK蛋白表达,Rc1、Cdc42活性,IP3水平,细胞骨架蛋白mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论尿感方能影响UPEC FimH表达,减弱UPEC侵袭力,其作用机制与FimH/integrinα3、β1/FAK信号传导通路有关。 展开更多
关键词 尿感方 尿道致病性大肠杆菌 FimH 整合素α3(integrinα3) 整合素β1(integrinβ1) 粘附斑激酶(FAK) 细胞骨架蛋白
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大肠杆菌致病因子研究进展 被引量：7
5
作者 宦海霞 张科 《中国家禽》 北大核心 2010年第23期45-48,共4页
禽致病性大肠杆菌和尿道致病性大肠杆菌是引起禽类和人肠道外感染的主要病原菌,这两种病原菌的毒力因子,致病机理及其相关性的研究现已成为热点。本文对近年来这些方面的研究进展进行概述。
关键词 禽致病性大肠杆菌 尿道致病性大肠杆菌 相关性 毒力因子
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氨基酸代谢变化引起的c-di-GMP稳态波动对大肠杆菌致病过程中菌毛合成的影响
6
作者 孙敏 高兴 +4 位作者 任方勋 白乾坤 泮欣铭 马家乐 姚火春 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期113-123,共11页
[目的]细菌能够合成多种信号分子,调控自身在各种营养状态或应激条件下的生长代谢及毒力发挥。第二信使环二鸟苷酸(c-di-GMP)在致病菌感应氨基酸饥饿(AAS)的过程中发挥重要作用,调控多种生理活动并显著影响其毒力发挥。本文旨在研究c-di... [目的]细菌能够合成多种信号分子,调控自身在各种营养状态或应激条件下的生长代谢及毒力发挥。第二信使环二鸟苷酸(c-di-GMP)在致病菌感应氨基酸饥饿(AAS)的过程中发挥重要作用,调控多种生理活动并显著影响其毒力发挥。本文旨在研究c-di-GMP在尿道致病性大肠杆菌(UPEC)尿道定殖及毒力发挥过程中的作用。[方法]采用尿液培养UPEC,结合转座子突变技术筛选氨基酸代谢相关生长缺陷基因,采用基因敲除技术、特定氨基酸回补及小鼠尿道感染模型验证尿液生长及尿道定殖缺陷表型;借助表达谱数据、RT-qPCR及β-半乳糖苷酶活性测定法筛选并鉴定受氨基酸饥饿影响的毒力基因及c-di-GMP相关基因;通过多基因敲除及回补技术、凝胶阻滞试验(EMSA)鉴定c-di-GMP对毒力基因的调控机制。[结果]精氨酸、异亮氨酸及蛋氨酸代谢失衡引起UPEC在尿液中生长缺陷,尿道定殖能力显著下降及局部c-di-GMP稳态破坏;YciR及YcgF相关c-di-GMP体系失衡显著下调菌毛基因簇表达;YciR通过调节子MlrA直接调控P菌毛基因簇表达;YcgF通过下游配对调节子YcgE直接调控P菌毛基因簇表达。[结论]c-di-GMP感应尿道定殖过程中的特定氨基酸饥饿,调控菌毛等黏附因子合成,促进UPEC完整毒力发挥。 展开更多
关键词 第二信使环二鸟苷酸 尿道致病性大肠杆菌 P菌毛 I型菌毛 氨基酸代谢
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UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究 被引量：1
7
作者 李国强 朱丽萍 +2 位作者 朱丽臻 陈蕾蕾 颜世敢 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1113-1117,共5页
[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037... [目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037基因同源臂的氯霉素抗性基因取代c5032—c5037基因,在温度敏感型质粒p CP20作用下消除氯霉素抗性基因,构建基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,用PCR和基因测序验证基因敲除是否成功,测定有氧和厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中培养不同时间的菌液D600值。[结果]构建了CFT073Δc5032—c5037,PCR验证及基因测序结果均表明已成功敲除c5032—c5037基因;厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中生长比野生型菌株CFT073缓慢,且差异极显著(P<0.01),但在有氧条件下二者的生长无显著差异。[结论]成功构建了基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,并试验证实Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因在厌氧条件下参与α-酮戊二酸的利用,为进一步研究Kgu S/KguR在UPEC中的代谢适应机制奠定了基础。 展开更多
关键词 尿道致病性大肠杆菌 KguS/KguR c5032-c5037基因 RED重组系统
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NhaA通过维持细菌包膜的完整性和逃避补体攻击增强ExPEC的毒力
8
《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1205-1205,共1页
肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)是一种在肠外组织中定植的细菌,主要包括禽致病性大肠杆菌(APEC)、致新生儿脑膜炎大肠杆菌(NMEC)和尿道致病性大肠杆菌(UPEC)。由于其高致病性、高致死率和潜在的人兽共患性,ExPEC导致人类和动物多种宿主严重... 肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)是一种在肠外组织中定植的细菌,主要包括禽致病性大肠杆菌(APEC)、致新生儿脑膜炎大肠杆菌(NMEC)和尿道致病性大肠杆菌(UPEC)。由于其高致病性、高致死率和潜在的人兽共患性,ExPEC导致人类和动物多种宿主严重感染,每年给养殖业造成巨大的经济损失,同时对人类健康造成严重威胁。然而,目前尚无能够全面防控ExPEC感染的有效疫苗。因此,深入研究ExPEC影响其毒力的关键因子和相关机制,将为未来开发有效疫苗提供重要的科学参考。 展开更多
关键词 有效疫苗 禽致病性大肠杆菌 肠外致病性大肠杆菌 毒力 高致病性 尿道致病性大肠杆菌 关键因子 PEC
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尿感方对膀胱上皮屏障及关键连接蛋白表达的影响 被引量：1
9
作者 朱盼盼 蒋健 +4 位作者 陈君灏 乔昀 元唯安 梁群梅 贺敏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3307-3310,共4页
目的 观察尿感方对膀胱上皮屏障完整性和通透性的影响,并探讨其作用机理。方法 采用Transwell小室建立单层膀胱上皮细胞尿道致病性大肠杆菌感染模型,通过菌落检出数量化穿过单层细胞的细菌数和酚红透过率的方法,观察尿感方含药尿液对细... 目的 观察尿感方对膀胱上皮屏障完整性和通透性的影响,并探讨其作用机理。方法 采用Transwell小室建立单层膀胱上皮细胞尿道致病性大肠杆菌感染模型,通过菌落检出数量化穿过单层细胞的细菌数和酚红透过率的方法,观察尿感方含药尿液对细胞屏障完整性和通透性的影响,并运用Western blot法检测关键连接蛋白(ZO-1、Occludin、E-cadherin)的表达。结果 与正常组比较,模型组菌落检出数和酚红透过率增加(P<0.01),ZO-1、Occludin、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,大鼠空白尿液组菌落检出数、酚红透过率和ZO-1、Occludin、E-cadherin蛋白表达均无明显变化(P>0.05);与10%大鼠空白尿液组比较,10%尿感方大鼠含药尿液组菌落检出数和酚红透过率降低(P<0.05),ZO-1、Occludin、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与5%大鼠空白尿液组比较,5%尿感方大鼠含药尿液组酚红透过率降低(P<0.05),ZO-1、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。结论 尿感方对尿道致病性大肠杆菌所导致的膀胱上皮屏障损伤有一定修复作用,其作用机制与关键连接蛋白表达有关。 展开更多
关键词 尿感方 尿道致病性大肠杆菌 膀胱上皮屏障 ZO-1 OCCLUDIN E-CADHERIN
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