连续酸-尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳制备人和兔中性粒细胞防御素各组分 被引量：11

1

作者 王永杰 齐名 《医学研究生学报》 CAS 2001年第2期106-109,共4页

目的 :建立和应用连续酸 -尿素 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (CAU- PAGE)纯化人和兔中性粒细胞防御素组分(HNP- 1～ 3和 RNP- 1～ 5 )。　方法 :从人外周血或兔人工无菌性腹水中分离中性粒细胞 ,用 5 %冰醋酸直接提取 ,经 CAU- PA GE洗脱 ,获... 目的 :建立和应用连续酸 -尿素 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (CAU- PAGE)纯化人和兔中性粒细胞防御素组分(HNP- 1～ 3和 RNP- 1～ 5 )。　方法 :从人外周血或兔人工无菌性腹水中分离中性粒细胞 ,用 5 %冰醋酸直接提取 ,经 CAU- PA GE洗脱 ,获取纯化的 HNP- 1～ 3或 RNP- 1～ 5组分。以聚丙烯酰胺凝胶过滤作为参比方法。　结果 :1次洗脱电泳可从 5× 10 8个细胞中获得纯化的 HNP组分约 1.5 0 mg或 RNP组分 2 .5 0 mg,并保持天然的生物活性。　结论 :CAU- PAGE是一种较简便、快速。 展开更多

关键词 防御素 中性粒细胞 连续酸-尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳 制备

在线阅读 下载PDF 职称材料

脱脂松仁粕中球蛋白的提取工艺及其SDS–PAGE分析 被引量：1

2

作者 包怡红 赵楠 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期654-657,共4页

以脱脂松仁粕为原料,采用Osborne法提取松仁粕中的球蛋白,设NaCl质量分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%)、料(质量,g)液(体积,m L)比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35)、提取时间(30、60、90、120、150、180 min)和提... 以脱脂松仁粕为原料,采用Osborne法提取松仁粕中的球蛋白,设NaCl质量分数(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%)、料(质量,g)液(体积,m L)比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35)、提取时间(30、60、90、120、150、180 min)和提取温度(40、45、50、55、60、65℃)4个单因素试验,再用响应面法优化松仁粕中球蛋白的提取工艺,并对其分子量进行分析。结果表明:当NaCl质量分数为2.5%,料液比为1∶15,提取时间为150 min,提取温度为56℃时,松仁粕中球蛋白的提取率较高,为15.32%;SDS–PAGE分析结果表明,脱脂松仁粕球蛋白的分子量为41 320、27 520、21 690、16 310、15 180。 展开更多

关键词 脱脂松仁粕 球蛋白 提取工艺 十二烷基硫酸钠–聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds–PAGE)

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛羊乳酪蛋白制备及电泳分析比较 被引量：10

3

作者 宋宏新 张歌 +1 位作者 李红心 薛海燕 《中国酿造》 CAS 2012年第10期65-67,共3页

采采用新鲜和复原的牛羊乳为原料,等电点沉淀,通过洗涤、干燥等步骤分别制得牛乳和羊乳酪蛋白,用凯氏定氮法对其进行定量检测,应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析比较牛羊乳酪蛋白组分差异。结果表明:牛乳酪蛋白得率为... 采采用新鲜和复原的牛羊乳为原料,等电点沉淀,通过洗涤、干燥等步骤分别制得牛乳和羊乳酪蛋白,用凯氏定氮法对其进行定量检测,应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析比较牛羊乳酪蛋白组分差异。结果表明:牛乳酪蛋白得率为86.75%,羊乳酪蛋白得率为90.55%,高含量的酪蛋白主要集中在电泳图谱的中分子量组,可分为αs1-CN、αs2-CN、β-CN和κ-CN,牛羊乳αs2-CN分子量羊乳大于牛乳,牛乳α-CN含量比较多,羊乳β-CN含量比较多,鲜乳与复原乳全蛋白主要组分在电泳图谱中除酪蛋白差别外,上端的高分子量组清蛋白区羊乳IgG重链的分子量比牛乳小。应用蛋白质电泳分析技术可以区分羊乳和牛乳的蛋白质组分,等电点沉淀法制备酪蛋白的方法简单,易于操作。 展开更多

关键词 牛乳 羊乳 酪蛋白制备 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds PAGE)

在线阅读 下载PDF 职称材料

酸菜发酵液中小分子肽的鉴定方法

4

作者 陈兵 黄琰 《黑龙江生态工程职业学院学报》 2008年第6期38-39,共2页

从酸菜水中提取与乳链菌肽相类似的抑菌物质——小分子肽。利用紫外分光光度法确定样品层析液中存在蛋白质,通过抑菌实验确定样品层析液中的蛋白质是小分子肽,最后通过尿素—SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳确定提取物的分子量。

关键词 紫外分光光度法 抑菌实验 尿素—sds—聚丙烯酰胺凝胶电泳 小分子肽

在线阅读 下载PDF 职称材料

燕麦麸蛋白的组成及功能性质研究 被引量：44

5

作者 管骁 姚惠源 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第7期72-76,共5页

以燕麦麸为原料制备了燕麦麸浓缩蛋白(OBPC)。同时,也按照Osborne蛋白分级提取方法对燕麦麸蛋白进行了精细的分类,分别得到了燕麦麸清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。球蛋白和谷蛋白是燕麦麸蛋白的主要组分。清蛋白提取液中含有高含... 以燕麦麸为原料制备了燕麦麸浓缩蛋白(OBPC)。同时,也按照Osborne蛋白分级提取方法对燕麦麸蛋白进行了精细的分类,分别得到了燕麦麸清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。球蛋白和谷蛋白是燕麦麸蛋白的主要组分。清蛋白提取液中含有高含量的可溶性碳水化合物,可以通过(NH4)2SO4分级沉淀的方法将其纯度由6.5%提高到67.2%。SDS-PAGE的结果表明OBPC及各蛋白组分有不同的分子组成。OBPC及各蛋白组分的功能性质,包括溶解性、持水持油性、乳化活性、泡沫性质也分别进行了测定,以评价燕麦蛋白作为一种潜在的配料在食品中的应用价值。 展开更多

关键词 燕麦麸 燕麦麸浓缩蛋白 Osborne分级 sds聚丙烯酰胺凝胶电泳 功能性质

在线阅读 下载PDF 职称材料

酸菜发酵液中抑菌物质的提取与鉴定 被引量：6

6

作者 陈兵 田波 +1 位作者 原韬 赵晓龙 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2011年第5期123-125,136,共4页

通过低温浓缩法、浓度梯度盐析沉淀法、透析层析法从酸菜水中提纯一种肽类物质,经过抑菌试验检测发现其抑菌效果优于Nisin,利用UV-5800紫外分光光度计测定其吸光值,得到A280=0.195和A280=0.316两个峰值,通过尿素-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电... 通过低温浓缩法、浓度梯度盐析沉淀法、透析层析法从酸菜水中提纯一种肽类物质,经过抑菌试验检测发现其抑菌效果优于Nisin,利用UV-5800紫外分光光度计测定其吸光值,得到A280=0.195和A280=0.316两个峰值,通过尿素-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳确定该物质的分子量主要包含3 510Da和22 000Da两部分,证实该物质虽属于小肽类抑菌物质但与Nisin不同。 展开更多

关键词 酸菜水 提取纯化 尿素-sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳 确定分子量 抑菌活性 小肽

在线阅读 下载PDF 职称材料

菊芋可溶性蛋白的提取及其分子质量的测定 被引量：3

7

作者 李雪雁 张维 +1 位作者 张秀兰 李志忠 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期184-186,共3页

利用磷酸缓冲液提取菊芋可溶性蛋白,采用单因素实验和正交实验研究提取工艺条件,确定的提取条件为:料液比(w/v)1∶40、处理时间4h、处理温度40℃、pH值8.0。在此条件下,蛋白质平均提取率为14.7mg/g。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶... 利用磷酸缓冲液提取菊芋可溶性蛋白,采用单因素实验和正交实验研究提取工艺条件,确定的提取条件为:料液比(w/v)1∶40、处理时间4h、处理温度40℃、pH值8.0。在此条件下,蛋白质平均提取率为14.7mg/g。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定所提菊芋蛋白质的分子质量,结果显示其分子质量介于20.9-69.2ku之间。 展开更多

关键词 菊芋 蛋白 提取 sds·聚丙烯酰胺凝胶电泳 分子质量

在线阅读 下载PDF 职称材料

均匀试验设计优化酶法提取燕麦全粉蛋白质研究 被引量：3

8

作者 刘建垒 李英杰 郝利平 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期78-82,86,共6页

采用酶法从燕麦全粉中提取燕麦蛋白。先对提取所用的酶进行筛选,选定提取率最高的碱性蛋白酶为提取酶类,在单因素试验基础上用五因素十水平均匀试验设计对酶法提取燕麦蛋白的工艺进行优化。结果表明:碱性蛋白酶提取燕麦蛋白的最佳工艺为... 采用酶法从燕麦全粉中提取燕麦蛋白。先对提取所用的酶进行筛选,选定提取率最高的碱性蛋白酶为提取酶类,在单因素试验基础上用五因素十水平均匀试验设计对酶法提取燕麦蛋白的工艺进行优化。结果表明:碱性蛋白酶提取燕麦蛋白的最佳工艺为:加酶量(E/S)100.358 U/g,pH 10.5,温度53.49℃,液料比18∶1,时间60 min,在此条件下,提取率为84.09%,纯度达89.16%,得到的燕麦蛋白的等电点为4.4,分离率达93.33%。SDS-PAGE电泳分析显示,酶法制备的燕麦蛋白在65.2～12.5 ku上都有条带分布,其中74.3%的条带集中在31.3～40.0 ku和21.0～21.9 ku两个区间,与碱法相比,有条带缺失。 展开更多

关键词 燕麦全粉 燕麦蛋白 酶法提取 均匀设计 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds—PAGE)

在线阅读 下载PDF 职称材料

L-乳酸菌酸菜发酵液中小肽类天然防腐剂的研究 被引量：6

9

作者 雷虹 李秀凉 +3 位作者 平文祥 周东坡 贾树彪 庄海霁 《中国林副特产》 2005年第2期44-45,共2页

对具有较长货架期的L-乳酸菌酸菜的发酵液进行浓缩和抑菌试验,验证L-乳酸菌酸菜发酵液中确实存在具有抑菌活性的非酸类物质;经酶解试验验证其具有蛋白质性质;经进一步分离提纯,获得抑菌物质的纯品;经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量,... 对具有较长货架期的L-乳酸菌酸菜的发酵液进行浓缩和抑菌试验,验证L-乳酸菌酸菜发酵液中确实存在具有抑菌活性的非酸类物质;经酶解试验验证其具有蛋白质性质;经进一步分离提纯,获得抑菌物质的纯品;经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量,证明为肽类物质。 展开更多

关键词 发酵液 天然防腐剂 酸菜 sds聚丙烯酰胺凝胶电泳 肽类 乳酸菌 L-乳酸 长货架期 酸类物质 试验验证 分离提纯 蛋白质 分子量 酶解

在线阅读 下载PDF 职称材料

低转移性和高转移性的FBJ骨肉瘤细胞在脂筏上的区别

10

作者 胡丹 山形贞子 山形达也 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期167-171,共5页

目的通过寻找低转移性和高转移性的FBJ骨肉瘤细胞在脂筏上的区别来研究神经节苷脂(GD1a)调控肿瘤转移能力的机制。方法提取细胞的脂筏成分,用聚丙烯酰胺凝胶电泳和二维电泳来检测转移性不同的细胞在脂筏上的蛋白组成区别,并用免疫印迹法... 目的通过寻找低转移性和高转移性的FBJ骨肉瘤细胞在脂筏上的区别来研究神经节苷脂(GD1a)调控肿瘤转移能力的机制。方法提取细胞的脂筏成分,用聚丙烯酰胺凝胶电泳和二维电泳来检测转移性不同的细胞在脂筏上的蛋白组成区别,并用免疫印迹法(Western blot)来分析转移性不同的细胞在脂筏上的磷酸化区别。结果通过以上方法,发现了转移性不同的细胞在脂筏上的蛋白组成上有所不同,且磷酸化呈现明显区别,这些变化可能与调控肿瘤细胞的转移有关。 展开更多

关键词 神经节苷脂(GD1a) FBJ骨肉瘤细胞 脂筏 二维电泳 sds聚丙烯酰胺凝胶电泳

在线阅读 下载PDF 职称材料

结核分支杆菌H_(37)Rv株抗原成份分析

11

作者 杜育峰 赵迪 +1 位作者 陆学东 蒙世杰 《延安大学学报（自然科学版）》 2006年第1期52-55,共4页

通过免疫印迹技术(W estern b lotting),用结核杆菌的单克隆抗体及兔抗结核菌多克隆抗体对结核分支杆菌H37R v的菌体蛋白和培养液蛋白成份进行了初步分析,发现固体培养菌与液体培养菌的菌体具有基本一致的多肽抗原成份,而培养液中的抗... 通过免疫印迹技术(W estern b lotting),用结核杆菌的单克隆抗体及兔抗结核菌多克隆抗体对结核分支杆菌H37R v的菌体蛋白和培养液蛋白成份进行了初步分析,发现固体培养菌与液体培养菌的菌体具有基本一致的多肽抗原成份,而培养液中的抗原成份与前两者差异稍大。通过筛选和鉴定结核分枝杆菌的特异性和保护性抗原,研究结核杆菌的免疫反应特点,为探索结核病的诊断和治疗的新途径奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 结核分支杆菌 特异性抗原 sds聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪血清中抗猪丹毒丝菌特异性IgG的纯化 被引量：6

12

作者 胡云霏 钱幸 +3 位作者 王淑琴 余兴龙 刘晓波 罗璋 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期183-187,共5页

为了获得纯度高、特异性好的抗猪丹毒丝菌特异性IgG,采用抗原反向吸附结合重组葡萄球菌蛋白A(SPA)亲和层析法对猪丹毒丝菌阳性血清进行纯化。结果表明,血清用量对IgG的纯化结果影响不大,而细菌的用量则与IgG的获得量成正比;用猪丹毒丝... 为了获得纯度高、特异性好的抗猪丹毒丝菌特异性IgG,采用抗原反向吸附结合重组葡萄球菌蛋白A(SPA)亲和层析法对猪丹毒丝菌阳性血清进行纯化。结果表明,血清用量对IgG的纯化结果影响不大,而细菌的用量则与IgG的获得量成正比;用猪丹毒丝菌与阳性血清吸附,初步纯化出的猪丹毒丝菌特异性IgG,再用SPA亲和层析法特异性的浓缩和纯化IgG,获得的抗体含量为240μg/mL,即从8 mL阳性血清中获得360μg猪丹毒丝菌特异性IgG,其纯度接近100%,可用于噬菌体展示的靶分子。 展开更多

关键词 猪丹毒丝毒 特异性免疫球蛋白G(IgG) 猪血清 IgG纯化 纯度 重组葡萄球菌蛋白A凝胶(SPA) sds–聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds PAGE)

在线阅读 下载PDF 职称材料

酪蛋白降解对牦牛乳硬质干酪苦味的影响 被引量：2

13

作者 王玲 梁琪 +1 位作者 宋雪梅 张炎 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第19期1-6,共6页

针对牦牛乳硬质干酪的苦味缺陷,分别以小牛皱胃酶、微生物凝乳酶和木瓜蛋白酶制作的牦牛乳硬质干酪为研究对象,利用尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳,研究牦牛乳硬质干酪pH 4.6水不溶性酪蛋白的降解程度,且对成熟过程中的牦牛乳硬质干酪苦味进行... 针对牦牛乳硬质干酪的苦味缺陷,分别以小牛皱胃酶、微生物凝乳酶和木瓜蛋白酶制作的牦牛乳硬质干酪为研究对象,利用尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳,研究牦牛乳硬质干酪pH 4.6水不溶性酪蛋白的降解程度,且对成熟过程中的牦牛乳硬质干酪苦味进行感官评价,探究牦牛乳硬质干酪pH 4.6水不溶性酪蛋白降解对其苦味的影响。结果表明:牦牛乳硬质干酪在成熟期间酪蛋白发生了明显的降解,且α-酪蛋白均比β-酪蛋白降解速率快。经尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,发现木瓜蛋白酶制作的牦牛乳硬质干酪pH 4.6水不溶性酪蛋白在Pre-α_s-酪蛋白区域有较强的蛋白带。木瓜蛋白酶制作的牦牛乳硬质干酪pH 4.6水不溶性酪蛋白中α_s-酪蛋白和β-酪蛋白降解程度均显著或极显著高于微生物凝乳酶和小牛皱胃酶制作的牦牛乳硬质干酪(P<0.05或P<0.01),木瓜蛋白酶制作的牦牛乳硬质干酪的苦味值极显著高于微生物凝乳酶和小牛皱胃酶制作的牦牛乳硬质干酪的苦味值(P<0.01),通过主成分分析得出3种凝乳酶制作牦牛乳硬质干酪的苦味值和未降解β-酪蛋白和α_s-酪蛋白含量成极显著负相关。这为控制牦牛乳硬质干酪品质提供了理论参考。 展开更多

关键词 牦牛乳硬质干酪 酪蛋白降解 尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳 苦味 主成分分析

在线阅读 下载PDF 职称材料