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尿嘧啶DNA糖苷酶防止PCR产物污染及其对核酸杂交的影响
被引量：
1
1
作者
王省良
周东耀
+4 位作者
王丽之
万成松
曾位森
彭华国
王虹
《第一军医大学学报》
CSCD
2000年第4期319-321,共3页
目的 采用PCR微板核酸杂交ELISA技术分析尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG/UDG）防止PCR产物污染及其对PCR扩增效率的影响，探讨在不同A/T含量的微生物中含尿嘧啶的PCR产物对核酸杂交的影响。方法 以3组dUTP含量不同的PCR产物作模板，抗污染组用UN...
目的 采用PCR微板核酸杂交ELISA技术分析尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG/UDG）防止PCR产物污染及其对PCR扩增效率的影响，探讨在不同A/T含量的微生物中含尿嘧啶的PCR产物对核酸杂交的影响。方法 以3组dUTP含量不同的PCR产物作模板，抗污染组用UNG处理，直接进行再次扩增。用微板核酸杂交ELISA检测第二次PCR扩增的结果。 结果 抗污染组中以含dUTP的PCR产物作模板，结果为阴性；而以不含dUTP的PCR产物作模板，结果为阳性。非抗污染组全部为阳性。对3组PCR产物再进行核酸杂交无明显差别，且在一定温度内，3组具有同样的稳定性。 结论 UNG能有效降解含dUTP的PCR产物，使之不能作为模板再次扩增，可以有效地防止PCR产物的污染。含有尿嘧啶的PCR产物对寡核苷酸探针的杂交无影响。
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关键词
尿嘧啶dna糖苷酶
聚合酶链反应
核酸杂交
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职称材料
题名
尿嘧啶DNA糖苷酶防止PCR产物污染及其对核酸杂交的影响
被引量：
1
1
作者
王省良
周东耀
王丽之
万成松
曾位森
彭华国
王虹
机构
第一军医大学生物医学诊断研究中心
第一军医大学珠江医院检验科
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
2000年第4期319-321,共3页
文摘
目的 采用PCR微板核酸杂交ELISA技术分析尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG/UDG）防止PCR产物污染及其对PCR扩增效率的影响，探讨在不同A/T含量的微生物中含尿嘧啶的PCR产物对核酸杂交的影响。方法 以3组dUTP含量不同的PCR产物作模板，抗污染组用UNG处理，直接进行再次扩增。用微板核酸杂交ELISA检测第二次PCR扩增的结果。 结果 抗污染组中以含dUTP的PCR产物作模板，结果为阴性；而以不含dUTP的PCR产物作模板，结果为阳性。非抗污染组全部为阳性。对3组PCR产物再进行核酸杂交无明显差别，且在一定温度内，3组具有同样的稳定性。 结论 UNG能有效降解含dUTP的PCR产物，使之不能作为模板再次扩增，可以有效地防止PCR产物的污染。含有尿嘧啶的PCR产物对寡核苷酸探针的杂交无影响。
关键词
尿嘧啶dna糖苷酶
聚合酶链反应
核酸杂交
Keywords
uracil
deoxyribonucleases
glycoside hydrolases
PCR
anti-contamination
nucleic acid hybridization
分类号
R446.9 [医药卫生—诊断学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
尿嘧啶DNA糖苷酶防止PCR产物污染及其对核酸杂交的影响
王省良
周东耀
王丽之
万成松
曾位森
彭华国
王虹
《第一军医大学学报》
CSCD
2000
1
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