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EcoRⅡ甲基化酶基因在小鼠NIH3T3细胞中的表达
1
作者 刘金毅 孟雁 +2 位作者 赵晓娟 沈洁 蔡有余 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1998年第2期36-42,共7页
CG外甲基化在哺乳动物细胞中的生物学意义仍不清楚。建立了特定位点CCWGG（W＝A／T）甲基化的哺乳动物细胞株。来自大肠杆菌的EcoRⅡ甲基化酶（催化CCWGG→CmCWGG）基因经定点诱变后重组到真核表达载体pCI－neo上，采用脂质体介导的方... CG外甲基化在哺乳动物细胞中的生物学意义仍不清楚。建立了特定位点CCWGG（W＝A／T）甲基化的哺乳动物细胞株。来自大肠杆菌的EcoRⅡ甲基化酶（催化CCWGG→CmCWGG）基因经定点诱变后重组到真核表达载体pCI－neo上，采用脂质体介导的方法将其转染小鼠NIH3T3细胞，经G418筛选获得有效表达的细胞株，酶切证实该细胞株基因组DNA上的大部分EcoRⅡ识别位点已被甲基化，PCR鉴定EcoRⅡ甲基化酶基因已稳定整合到细胞染色体上。 展开更多
关键词 甲基化 小鼠 表达 nih 细胞株 3t3细胞 酶基因 哺乳动物细胞 定点诱变 基因组DNA
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不同发育阶段BTBR T^(+) Itpr3^(tf)孤独症小鼠T细胞亚群异常研究
2
作者 申晨 李萌 +6 位作者 聂祖庆 李志伟 文婕 杜娟娟 奎秀莹 杨菁瑞 曹霞 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第3期30-39,47,共11页
目的为了研究4周、8周和12周龄BTBR T^(+)Itpr3^(tf)孤独症小鼠脾T细胞亚群表达情况,明确用于研究免疫异常与孤独症关系的最适BTBR孤独症小鼠年龄。方法随机选取5~6只4周、8周和12周龄雄性BTBR小鼠与对应年龄的同性别C57BL/6J小鼠进行... 目的为了研究4周、8周和12周龄BTBR T^(+)Itpr3^(tf)孤独症小鼠脾T细胞亚群表达情况,明确用于研究免疫异常与孤独症关系的最适BTBR孤独症小鼠年龄。方法随机选取5~6只4周、8周和12周龄雄性BTBR小鼠与对应年龄的同性别C57BL/6J小鼠进行三箱社交实验、理毛实验和埋珠实验;取8周龄和12周龄小鼠脾制成单细胞悬液,通过流式细胞技术检测8种T细胞亚群(T_(H)1、T_(H)2、T_(H)17、T_(C)1、T_(C)2、T_(C)17、T_(FH)和T_(reg))细胞。结果4周、8周和12周龄BTBR小鼠相较于同龄C57小鼠,社交时间减少(P<0.001),理毛时间增加(P<0.01,P<0.001),8周龄和12周龄BTBR小鼠埋珠数量增多(P<0.01,P<0.001);与同龄C57小鼠相比,8周龄BTBR小鼠T_H1(P<0.001)、T_(H)2(P<0.01)、T_(C)1(P<0.05)、T_C2(P<0.001)_、T_(FH)(P<0.01)细胞表达明显增加,T_(reg)细胞(P<0.001)明显降低;12周龄BTBR小鼠T_H1(P<0.01)、T_(H)2(P<0.01)、T_(H)17(P<0.05)、T_C1(P<0.01)、T_(C)2(P<0.001)、T_(C)17(P<0.01)、T_(FH)(P<0.001)细胞表达增加,T_(reg)细胞(P<0.05)表达降低。不同年龄阶段,8周龄BTBR小鼠较12周龄小鼠,T_H1/T_(reg),T_C1/T_(reg)比例明显升高(P<0.05),而T_C(17)/T_(reg)比例降低。结论不同发育阶段BTBR小鼠均表现出不同程度的T_(eff)/T_(reg)比例异常增高;结合行为学数据,建议使用8周龄BTBR小鼠用于开展孤独症与免疫异常的研究。 展开更多
关键词 BtBR t^(+)Itpr3^(tf)小鼠 t细胞亚群 流式细胞术 孤独症
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淫羊藿苷通过调控PI3K/AKT/mTOR通路影响自然衰老小鼠Treg细胞的表达 被引量：1
3
作者 邓锋 侯利 +4 位作者 王怡 罗亚男 曾巧煌 温涛 刘翠华 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第7期506-512,共7页
目的:观察淫羊藿苷延缓自然衰老小鼠皮肤老化的作用和初步探讨其作用机制。方法:将15月龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为衰老组、淫羊藿苷低剂量组(5 mg/kg)和淫羊藿高剂量组(20 mg/kg),每组10只。另取10只1月龄的雄性C57BL/6J小鼠作为... 目的:观察淫羊藿苷延缓自然衰老小鼠皮肤老化的作用和初步探讨其作用机制。方法:将15月龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为衰老组、淫羊藿苷低剂量组(5 mg/kg)和淫羊藿高剂量组(20 mg/kg),每组10只。另取10只1月龄的雄性C57BL/6J小鼠作为青年对照组。饲养3个月后处死所有小鼠。H&E染色观察小鼠皮肤组织厚度;Masson染色观察胶原纤维的变化;免疫组化检测皮肤组织Ki67和p16表达;流式细胞术检测脾脏和淋巴结中CD4^(+)FoxP3^(+)Treg百分比以及免疫组化检测皮肤组织Foxp3表达;蛋白免疫印迹法检测皮肤组织PI3K、AKT、m-TOR、P70S6K的蛋白表达水平。结果:与青年组比较,衰老组小鼠皮肤的厚度变薄(P<0.01);胶原纤维含量减少(P<0.01);表皮Ki67的表达减少(P<0.01);皮肤组织p16的表达增加(P<0.01);脾脏和淋巴结组织内CD4^(+)Foxp3^(+)Treg百分比增加(P<0.01);皮肤组织Foxp3的表达增加(P<0.01);皮肤组织PI3K、AKT和mTOR的蛋白表达没有明显变化,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR和P70S6K的蛋白表达增加(P<0.01)。与衰老组小鼠比较,淫羊藿苷给药组小鼠皮肤变厚(P<0.01);胶原纤维含量增加(P<0.01);表皮Ki67表达增加(P<0.01);皮肤组织p16的表达减少(P<0.01);脾脏和淋巴结组织内CD4^(+)Foxp3^(+)Treg百分比减少(P<0.05,P<0.01);皮肤组织Foxp3表达减少(P<0.01)。皮肤组织PI3K、AKT和mTOR的蛋白表达没有明显变化,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR和P70S6K的蛋白表达减少(P<0.05,P<0.01)。结论:淫羊藿苷可以通过调控PI3K/AKT/m-TOR信号通路影响自然衰老小鼠Treg的表达进而延缓皮肤的衰老。 展开更多
关键词 自然衰老 淫羊藿苷 调节性t细胞 PI3K/AKt/MtOR
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调理脾胃针法肠道菌群移植对糖尿病肾病大鼠Foxp3/NF-κB-p65信号通路及T淋巴细胞稳态的影响 被引量：1
4
作者 卢轩 李梦梦 +3 位作者 吉学群 杨元庆 张智龙 武红 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第6期189-194,I0004,共7页
目的基于Foxp3/NF-κB-p65信号通路和T淋巴细胞稳态探讨调理脾胃针法肠道菌群移植治疗和预防糖尿病肾病的可能分子作用机制。方法随机将30只雄性SD大鼠分为3组,分别为肠道菌群提取物组、模型组和菌群移植组,每组10只,全部大鼠采用高脂... 目的基于Foxp3/NF-κB-p65信号通路和T淋巴细胞稳态探讨调理脾胃针法肠道菌群移植治疗和预防糖尿病肾病的可能分子作用机制。方法随机将30只雄性SD大鼠分为3组,分别为肠道菌群提取物组、模型组和菌群移植组,每组10只,全部大鼠采用高脂高糖饮食联合低剂量腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法制备糖尿病肾病大鼠模型。造模成功后肠道菌群提取物组给予调理脾胃针法连续治疗4周。治疗后,取该组大鼠盲肠内容物,制成调理脾胃针法肠道菌群提取物溶液。菌群移植组给予调理脾胃针法肠道菌群提取物溶液灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。4周后模型组和菌群移植组采用高脂高糖饮食联合低剂量腹腔注射STZ的方法制备糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后,进行各组大鼠取材及指标检测。造模完成后检测各组大鼠尿蛋白(urinary protein,UP)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,CRE)水平;酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠血清和肾脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)、干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)和白细胞介素-17(interleukin 17,IL-17)水平;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测各组大鼠肾脏组织Foxp3/NF-κB-p65信号通路表达水平;苏木素-伊红染液(hematoxylin-eosin staining,HE),过碘酸-雪夫(Periodic Acid-Schiff,PAS)染色和透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)观察肾脏组织病理形态学改变;采集各组大鼠血液,肠道和肾脏标本进行T淋巴细胞的流式分选检测。结果与模型组大鼠比较,菌群移植组大鼠的UP、BUN、CRE和炎症因子水平均明显下降,肾脏病变程度有所改善,菌群移植组大鼠肾脏组织的Foxp3/NF-κB-p65信号通路表达得到改善,同时,菌群移植组大鼠血液,肠道和肾脏组织中不同种类的T淋巴细胞,包括Th1、Th2、Th17和Treg细胞的比例失调得到缓解,T淋巴细胞稳态重新得到恢复。结论调理脾胃针法肠道菌群移植通过调节Foxp3/NF-κB-p65信号通路和恢复T淋巴细胞稳态来减轻糖尿病肾病大鼠肾脏组织损伤,改善糖尿病肾病大鼠不同菌属的物种丰度,有效改善糖尿病肾病大鼠肠道菌群的菌群结构组成和丰度,进而达到治疗和预防糖尿病肾病大鼠的目的。 展开更多
关键词 Foxp3/NF-κB-p65信号通路 糖尿病肾病 肠道菌群移植 调理脾胃针法 t淋巴细胞稳态
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Id2通过PI3K/AKT通路调控Tcm细胞的代谢重编程抑制结肠癌细胞生长
5
作者 刘枋 潘春丽 +2 位作者 周智锋 陈淑萍 叶韵斌 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第6期570-578,共9页
目的:探讨分化抑制因子2(Id2)在诱导生成中央记忆性T(Tcm)细胞及增强T细胞抗肿瘤持久性中的作用。方法:磁珠分选CD8^(+)初始T细胞,与负载癌胚抗原(CEA)的树突状细胞(DC)共培养,经白介素-2(IL-2)或IL-7/15/21/23分别诱导培养效应T(Teff)... 目的:探讨分化抑制因子2(Id2)在诱导生成中央记忆性T(Tcm)细胞及增强T细胞抗肿瘤持久性中的作用。方法:磁珠分选CD8^(+)初始T细胞,与负载癌胚抗原(CEA)的树突状细胞(DC)共培养,经白介素-2(IL-2)或IL-7/15/21/23分别诱导培养效应T(Teff)或Tcm细胞;qPCR和WB法分别检测T细胞中Id2和Id3 mRNA、蛋白表达;慢病毒敲减T细胞中Id2基因,用流式细胞术检测其T细胞记忆表型;WB法检测PI3K/AKT通路相关蛋白的表达;Seahorse能量代谢仪分析细胞外酸化速率(ECAR)和耗氧速率(OCR);斑马鱼结肠癌HCT116细胞移植瘤模型分析Teff和Tcm细胞的抗肿瘤差异,进一步观察敲减Id2基因的Tcm细胞(Tcm-shId2)对第二次移植瘤的生长抑制。结果:Tcm细胞高表达Id3 mRNA(P<0.05),而Teff细胞高表达Id2 mRNA(P<0.001)。成功构建敲减Id2基因的Tcm细胞(Tcm-shId2)且其Id3表达明显上调,敲减Id2可促进Tcm细胞的形成(P<0.05)。Tcm-shId2细胞通过PI3K/AKT通路进行代谢重编程,有效抑制斑马鱼体内结肠癌移植瘤的生长,对第二次移植瘤也能产生显著抑制作用(P<0.01)。结论:Id2可能通过调控PI3K/AKT通路改变T细胞代谢模式,从而促进CD8^(+)T细胞向Tcm细胞分化,有效抑制结肠癌移植瘤的生长。 展开更多
关键词 分化抑制因子2 中央记忆性t细胞 t细胞分化 PI3K/AKt信号通路 代谢重编程
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急性淋巴细胞白血病患者Tim-3、C-myc、T淋巴细胞亚群比例与预后的相关性
6
作者 钟玉钗 胡可丁 +1 位作者 姜义荣 黄晓文 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第5期1299-1304,共6页
目的:分析急性淋巴细胞白血病(ALL)患者Tim-3、C-myc、T淋巴细胞亚群比例与预后的相关性。方法:研究组选取2019年12月到2021年12月本院收治的60例ALL患者,对照组选取于本院进行体检的健康志愿者55例。对两组患者Tim-3、C-myc mRNA表达量... 目的:分析急性淋巴细胞白血病(ALL)患者Tim-3、C-myc、T淋巴细胞亚群比例与预后的相关性。方法:研究组选取2019年12月到2021年12月本院收治的60例ALL患者,对照组选取于本院进行体检的健康志愿者55例。对两组患者Tim-3、C-myc mRNA表达量、T淋巴细胞亚群比例进行检测。统计患者死亡率,分析Tim-3、C-myc、T淋巴细胞亚群比例与病理特征、预后的相关性。结果:与对照组相比,研究组Tim-3、C-myc、CD8^(+)水平明显升高,而CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平明显降低(均P<0.001)。Tim-3、C-myc mRNA表达量、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平与危险度分型、髓外浸润相关(均P<0.05)。Tim-3、C-myc、CD8^(+)低表达患者生存率高于高表达患者,而CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高表达患者生存率高于低表达患者(均P<0.05)。单因素分析结果显示,与存活患者相比,死亡患者有髓外浸润、高危分型占比、Tim-3、C-myc、CD8^(+)水平较高,CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平较低(均P<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,髓外浸润、危险度分型、Tim-3、C-myc、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)为影响ALL患者预后的主要因素(均P<0.05)。ROC曲线显示,与Tim-3、C-myc、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)单项诊断相比,Tim-3、C-myc、T淋巴细胞亚群联合预测ALL患者预后的敏感性、准确性较高(P<0.05)。结论:ALL患者Tim-3、C-myc mRNA表达量、CD8^(+)水平较高,CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平较低,且Tim-3、C-myc、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)表达水平与患者髓外浸润、高危分型、预后相关。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 t细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3 C-MYC t淋巴细胞亚群
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基于METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬探讨补肾强督方抑制炎症治疗强直性脊柱炎的机制研究 被引量：1
7
作者 吴琳 李松倍 +2 位作者 苏晓庆 韩天然 李泽光 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第2期94-101,共8页
目的:观察补肾强督方对T淋巴细胞METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬的影响,从而明确其抑制炎症、治疗强制性脊柱炎的分子机制。方法:使用Jurkat细胞,采用抗CD3联合抗CD28抗体诱导24 h构建细胞模型,并给予补肾强督方含药血清... 目的:观察补肾强督方对T淋巴细胞METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬的影响,从而明确其抑制炎症、治疗强制性脊柱炎的分子机制。方法:使用Jurkat细胞,采用抗CD3联合抗CD28抗体诱导24 h构建细胞模型,并给予补肾强督方含药血清和METTL14重组蛋白进行干预。采用ELISA法检测炎症因子(IL-23和IL-17A)和氧化应激指标的水平,流式细胞术检测ROS水平,Western blot法检测自噬相关蛋白、METTL14和FOXO3A的表达,RT-qPCR检测METTL14和FOXO3A的表达,斑点杂交实验检测FOXO3A的m^(6)A甲基化水平。结果:与模型组比较,补肾强督方显著降低Jurkat细胞上清中IL-23、IL-17A和MDA的含量与ROS的水平,增加SOD和GSH-Px的活性,差异均具有统计学意义(P<0.01)。此外,补肾强督方能显著上调Jurkat细胞中Beclin-1、FOXO3A和METTL14蛋白和基因的表达和增加LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值,下调p62蛋白的表达,与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。在此基础之上,与模型组比较,补肾强督方能显著上调Jurkat细胞FOXO3A的m^(6)A甲基化水平,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:补肾强督方通过METTL14介导的FOXO3A的m^(6)A甲基化修饰促进T细胞自噬,从而达到治疗强直性脊柱炎的作用。 展开更多
关键词 补肾强督方 t淋巴细胞 MEttL14 FOXO3A m^(6)A甲基化修饰
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白叶1号发酵茶复配养生茶调节3T3-L1细胞脂质代谢的作用 被引量：1
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作者 朱天乐 盛思杰 +4 位作者 徐铃琳 吴媛媛 刘仲华 王凯茜 屠幼英 《中国茶叶》 2025年第1期50-57,共8页
随着肥胖问题的日益突出,调节血脂、预防肥胖成了人们的关注焦点,通过健康饮食方法解决该问题是最简单可行的途径。试验采用白叶1号发酵茶配伍枸杞、山楂制成养生茶,就其对小鼠3T3-L1前脂肪细胞的调脂效果和作用机理进行了研究。将3T3-L... 随着肥胖问题的日益突出,调节血脂、预防肥胖成了人们的关注焦点,通过健康饮食方法解决该问题是最简单可行的途径。试验采用白叶1号发酵茶配伍枸杞、山楂制成养生茶,就其对小鼠3T3-L1前脂肪细胞的调脂效果和作用机理进行了研究。将3T3-L1细胞诱导为成熟脂肪细胞后,通过测定油红O染色面积、脂肪和甘油三酯(TG)含量来判断养生茶对脂质形成的抑制作用。结果显示,在200~500μg/mL范围内,随着养生茶质量浓度的升高,3T3-L1前脂肪细胞的油红O染色面积下降,表明养生茶具有降脂功效。当茶样质量浓度为300、400、500μg/mL时,与模型组相比,细胞脂肪含量分别降低了22.64、23.17、30.63个百分点,降脂效果优于阳性药物辛伐他丁。此外,养生茶可以显著减少细胞中的TG含量,具有剂量依赖效应。当养生茶质量浓度为500μg/mL时,细胞内TG含量最低,与模型组相比降低了89.33%。通过茶饮代谢物与3T3-L1细胞脂肪指标的相关性分析发现,该养生茶中多种成分与3T3-L1细胞的脂质代谢物呈强相关关系。本研究可为开发具有降脂功能的新式茶饮产品提供科学依据。 展开更多
关键词 发酵白化茶 枸杞 山楂 3t3-L1前脂肪细胞 调节脂肪代谢 功效成分
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环状RNA mmu_circ_0000818在地塞米松导致的MC3T3-E1细胞凋亡中的作用及机制
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作者 杨慧霞 丁宁 +5 位作者 马润秋 李桂忠 郝银菊 马胜超 姜怡邓 白志刚 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第4期478-489,共12页
目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dex... 目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dexamethasone(DEX)组;(2)采用Western blot检测各组细胞BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达,TUNEL染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;(3)提取正常和DEX处理的MC3T3-E1细胞RNA,进行RNA测序,筛选出差异表达的circRNAs,并通过GO和KEGG分析其功能;(4)筛选出差异表达的mmu_circ_0000818并进行细胞水平验证以及UCSC Genome Browser Gateway和circbase网站分析mmu_circ_0000818在染色体的位置和保守性;(5)构建mmu_circ_0000818过表达质粒及小干扰RNA(siRNA)并转染细胞,流式细胞术检测各组MC3T3-E1细胞凋亡情况。结果(1)与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞凋亡升高(P<0.01);(2)根据log2foldchange(≥2)和P值(P<0.05)筛选差异表达的circRNAs,与Control组相比,DEX组中共有234个表达差异的circRNAs,其中上调的138个,下调的96个。差异表达circRNAs的靶基因利用GO和KEGG进行富集分析,Apoptosis(凋亡)和PI3K-Akt signaling pathway(磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路)差异最显著。(3)qRT-PCR结果显示,与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞中mmu_circ_0000818表达明显升高(P<0.01),UCSC Genome Browser Gateway和circbase分析发现mmu_circ_0000818主要位于17:78712463-78715086,由Crim1基因第6~7外显子环化形成并且在不同物种间具有高的保守性。(4)流式细胞术结果提示抑制mmu_circ_0000818可改善DEX引起的MC3T3-E1细胞凋亡,过表达则促进其凋亡。结论mmu_circ_0000818在DEX处理的MC3T3-E1细胞中显著增高,降低其可抑制DEX引起的细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA mmu_circ_0000818 地塞米松 MC3t3-E1细胞 RNA测序 凋亡
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病理T3a期肾细胞癌肾部分切除与根治性肾切除的回顾性匹配研究
10
作者 周泽臻 葛力源 +7 位作者 张帆 邓绍晖 颜野 张洪宪 王国良 刘磊 黄毅 张树栋 《北京大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期704-710,共7页
目的:评估临床T1(clinical T1,cT1)期术后升级为病理T3a(pathological T3a,pT3a)期肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)患者应用肾部分切除术(partial nephrectomy,PN)的远期肿瘤学结局。方法:回顾研究北京大学第三医院2013年2月至2022... 目的:评估临床T1(clinical T1,cT1)期术后升级为病理T3a(pathological T3a,pT3a)期肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)患者应用肾部分切除术(partial nephrectomy,PN)的远期肿瘤学结局。方法:回顾研究北京大学第三医院2013年2月至2022年12月427例术后评估为pT3aN0M0期的RCC患者,其中33例cT1术后升级为pT3a的RCC患者均接受了PN(PN组),而394例术后未升级的pT3a RCC患者均接受了根治性肾切除术(radical nephrectomy,RN,RN组),根据基线特征以1∶1的比例进行倾向性评分匹配,使用Kalan-Meier曲线评估总生存期(overall survival,OS)、癌症特异性生存期(cancer-specific survival,CSS)和无病生存期(disease-free survival,DFS),并使用对数秩检验和Cox回归模型进行多因素分析。结果:匹配前,PN组(n=33)与RN组(n=394)相比,肾周脂肪浸润(perirenal fat invasion,PFI;45.5%vs.15.2%)和肾段静脉受累(42.4%vs.20.8%)的比例更高,而肾盂肾窦侵犯(renal sinus invasion,RSI;21.2%vs.73.6%)及合并肾静脉癌栓(0%vs.15.2%)的比例较低,差异有统计学意义(P<0.05)。匹配后,PN组(n=33)和RN组(n=33)的基线特征具有可比性。PN和RN组在手术时间、出血量、平均住院日、并发症发生率、阳性切缘率、中转开放手术的比例方面差异无统计学意义(P>0.05),但PN组术后估算的肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)更高[76.9(55.4,87.3)mL/(min·1.73 m^(2))vs.61.7(56.8,73.5)mL/(min·1.73 m^(2)),P<0.05],表明其对肾功能的保留效果更好。两组在OS、CSS和DFS方面差异无统计学意义(P>0.05)。多因素分析显示,肾静脉侵犯(renal vein invasion,RVI)、较高的肿瘤Fuhrman分级(Ⅲ~Ⅳ)以及伴有肉瘤样分化特征是pT3a RCC患者的DFS和CSS的独立危险因素(P<0.05)。结论:对于cT1升级为pT3a的RCC患者,PN在更大程度上保留了肾功能,并且肿瘤学结局可能与RN的效果相当。RVI、较高的肿瘤Fuhrmann分级以及伴有肉瘤样分化特征是pT3N0M0期RCC患者的独立危险因素。 展开更多
关键词 肾细胞癌 肾部分切除术 根治性肾切除术 病理t3a期
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涎腺腺样囊性癌组织色素框同源蛋白2、T细胞免疫球蛋白黏液素3表达水平及与患者临床病理特征、预后的关系
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作者 张璇 刘振丽 +3 位作者 杨永超 马赛 刘博 吕红娟 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第12期1873-1878,共6页
目的探究涎腺腺样囊性癌(SACC)组织色素框同源蛋白2(CBX2)、T细胞免疫球蛋白黏液素3(TIM3)表达水平及与患者临床病理特征、预后的关系。方法选取2016年1月至2020年1月期间在河北北方学院附属第一医院接受手术治疗的SACC患者80例。采用... 目的探究涎腺腺样囊性癌(SACC)组织色素框同源蛋白2(CBX2)、T细胞免疫球蛋白黏液素3(TIM3)表达水平及与患者临床病理特征、预后的关系。方法选取2016年1月至2020年1月期间在河北北方学院附属第一医院接受手术治疗的SACC患者80例。采用免疫组化测定组织CBX2、TIM3表达水平;SACC组织中CBX2、TIM3的表达与预后的关系分析采用Kaplan-Meier法;SACC患者预后的影响因素采用多因素Cox回归分析。结果SACC组织CBX2、TIM3阳性表达率显著高于癌旁正常腺体组织(χ^(2)=11.237、8.229,P<0.05)。CBX2、TIM3表达与神经侵犯、远处转移有关(P<0.05)。随访5年,死亡26例,存活54例,5年总体生存率为67.50%(54/80)。死亡组SACC组织CBX2、TIM3阳性表达率高于存活组(P<0.05)。SACC组织CBX2、TIM3阳性表达患者5年生存率显著低于CBX2、TIM3阴性表达(Log Rankχ^(2)=6.564、5.197,P<0.05)。CBX2、TIM3阳性、神经侵犯、远处转移是影响SACC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论CBX2、TIM3在SACC组织中阳性表达与患者临床病理特征及预后密切相关。 展开更多
关键词 涎腺腺样囊性癌 色素框同源蛋白2 t细胞免疫球蛋白黏液素3 临床病理特征 预后
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支链氨基酸通过Stat3通路双向调控3T3-L1前脂肪细胞分化
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作者 蔡兴华 高洁 +5 位作者 徐媛颖 张会会 买热艳木·肉孜 沙雯君 鲁郡 雷涛 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第3期494-501,共8页
目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组;CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响;油... 目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组;CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响;油红O染色观察各组脂肪细胞脂滴形成情况;酶法检测细胞内三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量;RT-qPCR和Western blot检测Stat3和脂肪细胞分化相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果 CCK-8结果显示,当BCAA浓度≤10 mmol/L时,3T3-L1细胞的存活率不受BCAA的影响。与DM组相比,低浓度BCAA组(0.5、1.0 mmol/L)细胞内脂滴明显增大、脂滴数目明显增加,且细胞内TC(0.88 vs 0.68 mmol/g;0.83 vs 0.68 mmol/g,P<0.01)和TG水平(0.77 vs 0.40 mmol/g;0.62 vs 0.40 mmol/g,P<0.01)明显上升;而高浓度BCAA组(5.0、10.0 mmol/l)细胞分化较DM组明显下降。RT-qPCR和Western blot检测显示低浓度BCAA组PPARγ、C/EBPα、Adiponectin、FABP4的mRNA和蛋白表达均明显上升,而高浓度BCAA组上述基因表达均明显下降(P<0.01)。此外,低浓度BCAA促进Stat3磷酸化水平,而高浓度BCAA抑制其磷酸化水平(P<0.01)。结论 BCAA通过Stat3双向调控前脂肪细胞脂肪分化,即低浓度BCAA可通过促进Stat3磷酸化水平诱导其向成熟脂肪细胞分化;而高浓度BCAA则抑制Stat3磷酸化及细胞分化。 展开更多
关键词 BCAA 3t3-L1 脂肪细胞分化 StAt3 脂肪生成 肥胖
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下丘脑室旁核STAT3信号通路参与小鼠体重调节
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作者 贺炀 刘昊东 +2 位作者 李鹏辉 王星 杜晨光 《神经解剖学杂志》 北大核心 2025年第3期327-334,共8页
目的:探讨下丘脑室旁核(PVN)中信号转导与转录激活因子3(STAT3)在小鼠体重调节及能量代谢中的作用和分子机制。方法:使用脑立体定位注射方法将AAV2/9-hSyn-Cre-EGFP病毒注射至STAT3 Flox/Flox小鼠PVN,条件性敲除(CKO)小鼠PVN中的STAT3基... 目的:探讨下丘脑室旁核(PVN)中信号转导与转录激活因子3(STAT3)在小鼠体重调节及能量代谢中的作用和分子机制。方法:使用脑立体定位注射方法将AAV2/9-hSyn-Cre-EGFP病毒注射至STAT3 Flox/Flox小鼠PVN,条件性敲除(CKO)小鼠PVN中的STAT3基因,使用免疫荧光染色和Western blot方法检测PVN中STAT3表达。监测小鼠体重和温度变化,并通过葡萄糖耐量测试间接评估小鼠葡萄糖耐受性;利用苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠肝脏、背肩胛棕色脂肪组织(IBAT)、腹股沟白色脂肪组织(IWAT)和股四头肌的形态学变化,使用RT-qPCR方法检测上述组织中血小板衍生生长因子受体α(PDGFRα)、过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPARγ)、激素敏感性脂肪酶(HSL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)mRNA的表达水平。结果:CKO小鼠PVN中STAT3蛋白表达量明显降低,STAT3阳性神经元数量亦显著减少。相较于WT小鼠,CKO小鼠体重显著增加,以及IBAT产热能力下降,葡萄糖耐受性显著降低。HE染色发现CKO小鼠肝脏细胞质中有大量脂滴积聚,脂肪组织中脂滴增大并伴有白细胞浸润,且股四头肌可见肌间脂肪沉积。此外,RT-qPCR分析显示,在CKO小鼠肝脏中PDGFRα、HSL和ATGL mRNA表达下降;IBAT和IWAT组织中PPARγmRNA表达上调而HSL和ATGL mRNA表达下调;股四头肌中PPARγ和HSL mRNA水平表达均下调。结论:小鼠PVN内的STAT3信号通路对维持机体能量平衡至关重要,是调控代谢的重要节点。 展开更多
关键词 StAt3信号通路 室旁核 体重调节 代谢 脂肪细胞 小鼠
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加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢及PI3K/Akt/FOXO1信号通路的影响
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作者 张凯茵 姚凤云 +6 位作者 韩瑶瑶 姜劼琳 王琳 李雯 杨红芳 张桓源 崔言坤 《中成药》 北大核心 2025年第10期3242-3248,共7页
目的探讨不同剂量加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞分化及PI3K/Akt/FOXO1糖脂代谢通路的影响。方法CCK-8法筛选加味温胆汤含药血清浓度。将从3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成的3T3-L1脂肪细胞分为空白组、模型组、罗格列酮组(10 mg/L)和加味温胆... 目的探讨不同剂量加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞分化及PI3K/Akt/FOXO1糖脂代谢通路的影响。方法CCK-8法筛选加味温胆汤含药血清浓度。将从3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成的3T3-L1脂肪细胞分为空白组、模型组、罗格列酮组(10 mg/L)和加味温胆汤低、中、高剂量组(5%、10%、20%),给予不同浓度血清干预48 h后收集样本。油红O染色检测脂质积累,葡萄糖氧化酶(GOD)法检测细胞葡萄糖消耗量,RT-qPCR法检测细胞IRS-1、PI3K、Akt、GLUT4、IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA表达,Western blot法检测细胞INSR、IRS-1、PI3K-p85、Akt、FOXO1、GLUT4蛋白表达。结果不同浓度加味温胆汤含药血清干预3T3-L1前脂肪细胞24、48、72 h后,对细胞活性无显著影响(P>0.05)。3T3-L1前脂肪细胞可在14 d内诱导为成熟脂肪细胞。与模型组比较,加味温胆汤各剂量组脂肪细胞脂质积累减少,IRS-1、IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA表达降低(P<0.01);加味温胆汤低剂量组PI3K、GLUT4 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),INSR、IRS-1、PI3K-p85、Akt、GLUT4蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);加味温胆汤中剂量组GLUT4 mRNA表达升高(P<0.01),INSR、FOXO1蛋白表达升高(P<0.05);加味温胆汤高剂量组干预24 h后,脂肪细胞葡萄糖消耗量增加(P<0.01),INSR、Akt、FOXO1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论加味温胆汤可减少脂肪细胞脂质积累,激活PI3K/Akt/FOXO1信号通路,调节糖脂代谢,促进脂肪细胞代谢稳态。 展开更多
关键词 加味温胆汤 3t3-L1脂肪细胞 肥胖 糖脂代谢 PI3K/Akt/FOXO1信号通路
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转录激活因子3对小鼠精母细胞炎性因子和趋化因子表达的影响
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作者 贺海洋 王晓梅 +1 位作者 徐书建 彭莎 《动物医学进展》 北大核心 2025年第9期59-67,共9页
旨在探究转录激活因子3(activating transcription factor3,ATF3)表达变化是否与小鼠精母细胞(GC-2spd,GC2)炎性反应相关联,为雄性生殖损伤类疾病发生机制提供见解。将ATF3干扰载体及过表达载体分别转染入GC2,用CCK-8试剂盒检测GC2活力... 旨在探究转录激活因子3(activating transcription factor3,ATF3)表达变化是否与小鼠精母细胞(GC-2spd,GC2)炎性反应相关联,为雄性生殖损伤类疾病发生机制提供见解。将ATF3干扰载体及过表达载体分别转染入GC2,用CCK-8试剂盒检测GC2活力,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GC2的ATF3、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、C-C基序趋化因子配体2(C-C motif chemokine ligand 2,CCL2)、C-C基序趋化因子受体2(C-C motif chemokine receptor 2,CCR2)的mRNA表达量;用Western blot检测GC2细胞的ATF3、NF-κB、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子受体2(tumor necrosis factor receptor 2,TNF-R2)的蛋白表达量。结果发现,过表达ATF3的GC2细胞活力降低,CCL2、CCR2的mRNA表达量显著升高,NF-κB的mRNA和蛋白表达量升高,TNF-R2的蛋白表达量升高。由于ATF3在GC2细胞含量很低,所以GC2细胞敲除ATF3后CCL2、CCR2的mRNA表达量,TNF-α、NF-κB的mRNA和蛋白表达量及TNF-R2的蛋白表达量无显著改变。ATF3通过调控CCL2/CCR2/NF-κB信号通路促进炎性因子表达从而损伤GC2细胞。 展开更多
关键词 转录激活因子3 敲除 过表达 小鼠精母细胞 炎性因子
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枸杞多糖对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的影响
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作者 王晓娟 杨晨晨 +3 位作者 齐玮瑜 姜宇宸 李相辰 张莉 《中兽医医药杂志》 2025年第1期26-31,共6页
枸杞多糖(L.barbarum polysaccharides,LBP)具有抗氧化、降血糖、降血脂、免疫调节等多种功效,然而枸杞多糖在细胞水平上对脂肪细胞分化过程的影响及具体的作用机制,目前尚无深入研究。本研究旨在初步探讨枸杞多糖在3T3-L1前脂肪细胞分... 枸杞多糖(L.barbarum polysaccharides,LBP)具有抗氧化、降血糖、降血脂、免疫调节等多种功效,然而枸杞多糖在细胞水平上对脂肪细胞分化过程的影响及具体的作用机制,目前尚无深入研究。本研究旨在初步探讨枸杞多糖在3T3-L1前脂肪细胞分化中的作用及其机制。试验采用“经典鸡尾酒法”诱导3T3-L1前脂肪细胞,在细胞接触抑制后2 d(分化第0天),加入诱导剂及不同浓度的枸杞多糖(100µg/mL、200µg/mL、400µg/mL)处理细胞,对照组则不加入药物,分化至第12天时,通过油红O染色分析3T3-L1细胞脂肪积累情况,并采用生化法检测3T3-L1细胞中甘油三酯(TG)的含量;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂肪酸合成酶(FAS)及激素敏感性脂肪酶(HSL)蛋白的表达水平。结果表明,不同浓度的枸杞多糖均能够显著降低3T3-L1细胞中脂滴与甘油三酯的含量(P<0.05),极显著下调PPARγ和FAS蛋白的表达水平(P<0.01),极显著上调HSL蛋白的表达水平(P<0.01)。结果提示,枸杞多糖能够有效抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,减少脂肪细胞的生成和脂质积累,其潜在机制可能与抑制PPARγ相关通路的蛋白表达密切相关。 展开更多
关键词 枸杞多糖 3t3-L1前脂肪细胞 分化 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 脂肪酸合成酶 激素敏感性脂肪酶
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蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒的制备、结构表征及其对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响
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作者 陈旭洁 梁慧嘉 +5 位作者 焦春伟 何春艳 陈少丹 陈秋颜 谢意珍 高雄 《食品工业科技》 北大核心 2025年第7期123-132,共10页
本研究制备了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒(selenium nanoparticles,SeNPs),并探索其在促进骨形成方面的潜力。通过透析、醇沉、除蛋白以及阴离子交换柱层析,从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体水提取物中分离纯化得到多糖组分PHPW,采用苯酚硫酸法... 本研究制备了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒(selenium nanoparticles,SeNPs),并探索其在促进骨形成方面的潜力。通过透析、醇沉、除蛋白以及阴离子交换柱层析,从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体水提取物中分离纯化得到多糖组分PHPW,采用苯酚硫酸法、高效凝胶渗透色谱法和高效阴离子交换色谱法分析PHPW的基本理化特性;以PHPW为模板,通过氧化还原法制备PHPW-SeNPs,采用纳米粒度仪、透射电子显微镜、X射线衍射仪、X射线光电子能谱仪、傅里叶变换红外光谱仪表征PHPW-SeNPs结构,并评价其稳定性;采用CCK-8法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测试剂盒及实时定量PCR技术评价PHPW-SeNPs对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响。结果表明,PHPW是一种以葡萄糖为主的中性多糖,其多糖含量和重均分子量分别为99.1%和29.4 kDa。利用200μg/mL PHPW制备获得的PHPW-SeNPs粒径最小且分散性好,呈现零价态、无定形、球状的结构,分析测定的元素中含有碳(63.1%)、氧(3.5%)和硒(33.4%),PHPW中的羟基可通过类似氢键作用稳定SeNPs。PHPW-SeNPs溶液在pH6~8、4℃避光条件下具有较好的稳定性。PHPW-SeNPs在1.25~20μmol/L浓度范围内,MC3T3-E1细胞增殖率呈剂量、时间依赖性提高,当浓度为20μmol/L时,MC3T3-E1细胞ALP活力增强至对照组的1.8倍,骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、RUNT相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、osteorix(OSX)及ALP mRNA表达量分别上调至对照组的2.9、4.7、3.2和3.8倍。综上所述,以多糖组分PHPW为模板可成功制备稳定性较好的PHPW-SeNPs,其能够显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化,在预防骨质疏松方面具有良好的应用潜力,有望开发成促进骨健康的保健品。 展开更多
关键词 蝙蝠蛾拟青霉 菌丝体多糖 纳米硒 结构特性 MC3t3-E1细胞 成骨分化
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miR-126a-3p靶向Bcl-6介导凋亡途径调控脓毒症Th1/Th2细胞平衡
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作者 李苗苗 王洁 +3 位作者 齐雅囡 王婷 王德伟 刘成 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第11期840-848,共9页
目的:探讨miR-126a-3p与B细胞淋巴瘤6(Bcl-6)的关系以及其对脓毒症小鼠T淋巴细胞凋亡及T细胞分化的影响和机制。方法:利用miRWalk数据库预测miR-126a-3p的靶基因,进一步利用Cytoscape软件筛选出核心靶基因。然后通过腹腔注射0.9%氯化钠... 目的:探讨miR-126a-3p与B细胞淋巴瘤6(Bcl-6)的关系以及其对脓毒症小鼠T淋巴细胞凋亡及T细胞分化的影响和机制。方法:利用miRWalk数据库预测miR-126a-3p的靶基因,进一步利用Cytoscape软件筛选出核心靶基因。然后通过腹腔注射0.9%氯化钠溶液(NS)和脂多糖(LPS;20 mg/kg)将小鼠随机分为正常对照组(sham组)、脓毒症组(LPS组)、LPS+miR-126a-3p mimic组(miR-126 mimic组)、LPS+miR-126a-3p inhibitor组(miR-126 inhibitor组)。48 h后从小鼠尾静脉采集外周血,通过密度梯度离心法提取T淋巴细胞,然后将miR-126a-3p模拟物(mimic)和抑制剂(inhibitor)转染至miR-126 mimic组和miR-126 inhibitor组脓毒症T淋巴细胞中。采用聚合酶链反应及蛋白质印记实验检测T细胞内Bcl-6 mRNA和蛋白水平,Annexin V-FITC/PI双染法检测T淋巴细胞凋亡,流式细胞术检测辅助性T细胞(Th)1、Th2比例,最后通过GraphPad Prism 9.0软件对数据进行统计分析。结果:miRWalk数据库检索获得5930个miR-126a-3p的预测靶点,其中Bcl-6是miR-126a-3p的核心靶点之一。Bcl-6的表达水平与miR-126a-3p的表达水平呈正相关,两者具有靶向调控关系。且与sham组相比,LPS组Bcl-6 mRNA及蛋白表达减少,T淋巴细胞凋亡增多,T细胞向Th1分化增多,向Th2分化减少,Th1/Th2比值增加,差异均具有统计学意义(P<0.001);与LPS组相比,增强(miR-126 mimic组)或抑制(miR-126 inhibitor组)miR-126a-3p表达后,Bcl-6 mRNA和蛋白表达、T细胞凋亡及Th1和Th2细胞比例均表现出相应的增加或减少,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:脓毒症小鼠T淋巴细胞内抗凋亡蛋白Bcl-6表达异常,其表达水平受miR-126a-3p的靶向调控,从而影响T淋巴细胞的凋亡及Th1/Th2细胞分化,进而调节脓毒症免疫状态,该研究可以为脓毒症患者的治疗提供新的治疗靶点和理论依据。 展开更多
关键词 脓毒症 miR-126a-3p B细胞淋巴瘤6 细胞凋亡 t淋巴细胞
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外周血TIM-3与骨髓增生异常综合征红细胞输注患者铁过载的关系研究
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作者 干定云 吴军 +2 位作者 周曼 陈婉 姜雯 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第3期841-847,共7页
目的:探讨外周血T细胞免疫球蛋白黏液素-3(TIM-3)与骨髓增生异常综合征(MDS)红细胞输注患者铁过载的关系。方法:纳入2020年6月-2022年5月在武汉市第三医院接受诊治的120例MDS患者作为研究对象。患者均符合红细胞输注指征,输血前检测血... 目的:探讨外周血T细胞免疫球蛋白黏液素-3(TIM-3)与骨髓增生异常综合征(MDS)红细胞输注患者铁过载的关系。方法:纳入2020年6月-2022年5月在武汉市第三医院接受诊治的120例MDS患者作为研究对象。患者均符合红细胞输注指征,输血前检测血常规、生化指标,并统计分析患者一般临床资料。评估患者的铁代谢情况;分析铁过载患者的临床特征和铁过载的影响因素;并对TIM-3与其他影响铁过载的因素进行相关性分析。结果:在纳入研究的120例患者中,82例(68.33%)在红细胞输注后检测出铁过载,从第1次输注红细胞时开始计算,铁过载发生时间为20-42周,平均时间32.35±5.26周。铁过载患者中,修订的国际预后积分系统(IPSS-R)/WHO分型预后积分系统(WPSS)评估为高危/极高危患者比例、输血量、输血依赖患者比例、血清铁调素(Hepc)、促红细胞生成素(EPO)、TIM-3表达水平均高于铁代谢正常患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,WPSS高危、极高危,输血量、输血依赖,血清Hepc、EPO、TIM-3表达上调是MDS红细胞输注患者铁过载的影响因素(P<0.05);Pearson相关性分析显示,MDS患者血清TIM-3与铁过载的其他影响因素呈正相关(P<0.05)。结论:血清TIM-3与MDS红细胞输注患者铁过载有关,血清TIM-3表达上调增加红细胞输注后铁过载发生风险。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 t细胞免疫球蛋白黏液素-3 红细胞输注 铁过载
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小鼠24p3基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达
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作者 安江宏 周建新 陈彬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期1725-1728,共4页
目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能。方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA。用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核... 目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能。方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA。用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体并行酶切和测序鉴定。脂质体DOTAP方法转染NIH3T3细胞,48 h后用G418筛选阳性克隆并培养扩增至21 d。对阳性克隆的培养基上清中24p3/SIP24蛋白的表达用ELISA和W esternb lot分析,进一步用原子吸收分光光谱观察其介导铁向NIH3T3细胞内转运的生物学功能。结果成功克隆24p3 cDNA并构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体,筛选出稳定表达24p3/SIP24蛋白的NIH3T3细胞株,24p3/SIP24蛋白在NIH3T3细胞上清中获得表达,并能介导铁向NIH3T3细胞内转运。结论24p3基因在NIH3T3细胞中获得表达,有良好的生物学活性,为进一步研究24p3/SIP24蛋白介导铁转运的生物学功能及作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 24p3/SIP24 稳定转染 小鼠nih3t3细胞
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