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Chrm3通过MAPK/ERK途径调节LPS诱导的Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞炎症
1
作者 陈志达 付彬 +4 位作者 李思迪 刘赛 郭中坤 张悦 王可洲 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第4期69-78,共10页
目的基于LBP敲除小鼠(Lbp^(-/-)小鼠)探讨LBP缺失后Chrm3在LPS诱导的腹腔巨噬细胞炎症中的作用。方法提取WT型、Lbp^(-/-)型小鼠腹腔巨噬细胞,构建LPS诱导的腹腔巨噬细胞炎症模型。分别采取加入抑制剂4-damp、转染siRNA两种方法抑制Lbp^... 目的基于LBP敲除小鼠(Lbp^(-/-)小鼠)探讨LBP缺失后Chrm3在LPS诱导的腹腔巨噬细胞炎症中的作用。方法提取WT型、Lbp^(-/-)型小鼠腹腔巨噬细胞,构建LPS诱导的腹腔巨噬细胞炎症模型。分别采取加入抑制剂4-damp、转染siRNA两种方法抑制Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞中Chrm3的表达;通过转染慢病毒的方法使Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞中的Chrm3过表达;抑制剂法将细胞分为对照组A、LPS组A、抑制剂组,转染siRNA法将细胞分为对照组B、LPS组B、si-NC组、si-Chrm3组,过表达法将细胞分为对照组C、LPS组C、阴性对照组、过表达组。本研究以WT型、Lbp^(-/-)型小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象利用Western blot方法验证Chrm3在LPS刺激下的变化情况,采用CCK-8、RT-PCR、Western blot等实验方法探讨4-damp、si-Chrm3及过表达慢病毒对Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞的存活率及炎症的影响。结果在LPS刺激下Lbp^(-/-)小鼠的腹腔巨噬细胞Chrm3蛋白表达显著升高(P<0.001),而野生型变化并不明显;抑制剂组及si-Chrm3组的细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01)、过表达组细胞存活率显著下降(P<0.01);抑制剂组及si-Chrm3组的TNF-α、IL-1β、IL-6炎症因子表达情况显著降低(P<0.01,P<0.001),与细胞损伤及炎症相关的蛋白p-ERK的表达量也显著降低(P<0.01,P<0.001),而过表达组则与之相反,其炎症因子(P<0.001)和p-ERK蛋白的磷酸化水平显著升高(P<0.001)。结论LPS刺激Lbp^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞后Chrm3的表达上调、炎症因子表达上调,使用4-damp与si-Chrm3特异性降低Chrm3表达后使LPS导致的相关的Lbp^(-/-)小鼠细胞炎症因子明显下降,使用过表达慢病毒上调Chrm3后使相关炎症因子显著升高。由此可验证敲除LBP后Chrm3调控LPS诱导的炎症反应。 展开更多
关键词 毒蕈碱受体 Lbp^(-/-)小鼠 腹腔巨噬细胞 4-damp 干扰RNA 过表达 MAPK信号通路
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中性粒细胞和巨噬细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠各组织中的浸润情况分析
2
作者 徐龙薇 王亚丹 +1 位作者 周敏思 吴静 《首都医科大学学报》 北大核心 2025年第2期306-313,共8页
目的研究中性粒细胞和巨噬细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠各组织中的浸润情况。方法选取6~8周龄雌性C57BL/6小鼠30只,应用腹腔注射鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和灌胃给予OVA的方式诱导野生型小鼠建立嗜酸性胃肠炎模型。通过测量小鼠体质量... 目的研究中性粒细胞和巨噬细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠各组织中的浸润情况。方法选取6~8周龄雌性C57BL/6小鼠30只,应用腹腔注射鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和灌胃给予OVA的方式诱导野生型小鼠建立嗜酸性胃肠炎模型。通过测量小鼠体质量变化、应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠外周血OVA特异性免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)和免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)水平、应用流式细胞术检测小鼠肠道嗜酸性粒细胞计数等方法验证小鼠嗜酸性胃肠炎是否造模成功。通过流式细胞术检测小鼠外周血中性粒细胞、单核细胞比例,检测脾脏、肠系膜淋巴结、小肠和结肠组织中的中性粒细胞和巨噬细胞比例。结果OVA腹腔致敏和灌胃激发可成功诱导小鼠嗜酸性胃肠炎模型。嗜酸性胃肠炎小鼠外周血单核细胞及脾脏、肠系膜淋巴结和小肠、结肠组织中的巨噬细胞浸润增多,中性粒细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠的外周血及小肠、结肠组织中浸润比例增加。结论巨噬细胞在酸性胃肠炎小鼠外周血、肠道引流淋巴结及肠组织中浸润增多,中性粒细胞在嗜酸性胃肠炎小鼠外周血和肠组织中浸润也增多。 展开更多
关键词 小鼠 嗜酸性胃肠炎 嗜酸性粒细胞 中性粒细胞 巨噬细胞
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丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响
3
作者 徐广立 田超 +4 位作者 郭晶晶 郭婧 景竹青 李思梦 陈萍 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期33-37,共5页
目的:探讨丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响。方法:将12只CBA/J雌鼠随机分为2组,每组6只,丹寿汤组灌胃丹寿汤1 mL/次,2次/d,模型组则灌胃等体积蒸馏水,连续7 d。停药3 d后,将雌鼠与DBA/2雄鼠合笼交配,诱导复... 目的:探讨丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响。方法:将12只CBA/J雌鼠随机分为2组,每组6只,丹寿汤组灌胃丹寿汤1 mL/次,2次/d,模型组则灌胃等体积蒸馏水,连续7 d。停药3 d后,将雌鼠与DBA/2雄鼠合笼交配,诱导复发性流产,雌鼠继续灌胃蒸馏水或丹寿汤。于受孕第15天安乐处死孕鼠,称重胚胎并计算胚胎吸收率。收集蜕膜组织,免疫磁珠法分选蜕膜巨噬细胞,超速离心法提取外泌体,透射电镜下观察外泌体形态,Western blot法检测CD63表达。采用高通量测序技术检测外泌体miRNA表达情况,筛选差异miRNA,并与miRanda、miRWalk和miRDB数据库进行比对,筛选差异miRNA靶基因,对靶基因进行GO和KEGG富集分析。结果:丹寿汤组小鼠胚胎质量大于模型组,胚胎吸收率小于模型组(P<0.05)。共筛选出14个蜕膜巨噬细胞外泌体差异miRNA,其中5个(miR-466m-3p、miR-497a-3p、miR-7015-3p、miR-744-3p和miR-7679-5p)在丹寿汤组表达上调,9个(miR-222-5p、miR-541-5p、miR-3963、miR-669o-5p、miR-3062-5p、miR-34c-3p、miR-6976-5p、miR-3473g和miR-434-5p)表达下调。预测的靶基因有1 490个,GO和KEGG富集分析结果显示,靶基因功能主要为参与蜕膜巨噬细胞的细胞过程及组成等,主要涉及PI3K-Akt和MAPK等信号通路。结论:丹寿汤可能通过调控蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA的表达,发挥治疗复发性流产的作用。 展开更多
关键词 复发性流产 丹寿汤 蜕膜巨噬细胞 外泌体 MIRNA 小鼠
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小鼠骨髓源性巨噬细胞诱导及冻存方法的优化
4
作者 魏琼 赵梦竹 +2 位作者 程序 刘梦华 张冬梅 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期611-618,共8页
目的:探讨小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)诱导及冻存的适宜方法。方法:将小鼠成纤维细胞(L929细胞)于不同温度、接种密度、血清浓度培养条件下培养,ELISA法检测细胞上清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophag... 目的:探讨小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)诱导及冻存的适宜方法。方法:将小鼠成纤维细胞(L929细胞)于不同温度、接种密度、血清浓度培养条件下培养,ELISA法检测细胞上清中巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)浓度;提取小鼠骨髓细胞,细胞差速贴壁法将骨髓细胞预培养4 h,流式细胞术检测骨髓原驻留巨噬细胞比例;使用L929细胞上清或重组M-CSF诱导细胞7 d,倒置显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测诱导后细胞F4/80及CD11b双阳性占比;中性红法及ELISA法检测C57BL/6N和C57BL/6J两种亚型来源BMDMs吞噬能力和炎症反应水平;将提取的骨髓细胞即刻冻存后复苏再诱导,或将已成功诱导的BMDMs冻存后复苏,倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力,中性红法检测吞噬能力。结果:33℃、10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)培养7 d条件下的L929细胞上清中富集高浓度M-CSF;骨髓细胞经预培养4 h,贴壁细胞中F4/80+占比显著高于悬浮细胞(P<0.01);经L929上清或重组M-CSF诱导7 d后细胞F4/80+CD11b+占比无显著差异(P>0.05);与C57BL/6J亚型来源BMDMs相比,C57BL/6N亚型来源BMDMs具有更强的吞噬能力(P<0.01),释放较低水平TNF-α(P<0.01)和IL-6(P<0.05),以及较高水平IL-1β(P<0.05);相较于将已成功诱导的BMDMs冻存后复苏,骨髓细胞提取后即刻冻存、复苏再诱导的BMDMs具有更好的巨噬细胞形态,更高的细胞活力(P<0.01)和更强的吞噬能力(P<0.01)。结论:通过33℃、10%FBS培养7 d的L929细胞上清富含更高浓度M-CSF,可成功诱导骨髓细胞分化为小鼠骨髓源性巨噬细胞,细胞差速贴壁法预培养可去除原骨髓驻留巨噬细胞,C57BL/6N和C57BL/6J两种亚型来源BMDMs吞噬能力和炎症反应水平不同,将提取的骨髓细胞即刻冻存后复苏再诱导是较好的BMDMs冻存方法。 展开更多
关键词 小鼠骨髓源性巨噬细胞 原代细胞 成纤维细胞 巨噬细胞集落刺激因子
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绞股蓝多糖提高小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能 被引量：2
5
作者 王欣雨 金鑫 +4 位作者 杜倩笙 唐非台 刘可可 董胤余 王晓丽 《湖北农业科学》 2024年第6期151-155,共5页
研究不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/mL)绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP)对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,探讨GPP对机体免疫功能的调节作用及其可能的作用机制。采用中性红法、Griess法、CCK8法、ELIS... 研究不同浓度(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0μg/mL)绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP)对小鼠腹腔巨噬细胞的影响,探讨GPP对机体免疫功能的调节作用及其可能的作用机制。采用中性红法、Griess法、CCK8法、ELISA法和荧光定量PCR法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力、增殖、细胞因子(NO、LDH、TNF-α、IL-1β)的分泌量、CaM和GSα基因的表达水平。结果表明,GPP激活小鼠腹腔巨噬细胞,随着GPP浓度的增加小鼠腹腔巨噬细胞增殖能力增强,当GPP浓度为50.0、100.0、200.0μg/mL时,吸光度与空白对照处理相比差异显著;GPP刺激小鼠腹腔巨噬细胞后,吞噬能力强于空白对照处理,GPP浓度为200.0μg/mL时,小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力最强;GPP促进小鼠腹腔巨噬细胞NO、LDH、TNF-α和IL-1β的分泌;GPP上调CaM和GSα基因的表达,GPP浓度为100.0、25.0μg/mL时CaM、GSα基因表达量分别达到最高。 展开更多
关键词 绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino]多糖(GPP) 巨噬细胞 吞噬作用 免疫功能 小鼠 腹腔
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敲低多房棘球蚴let-7-5p可抑制BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长 被引量：1
6
作者 王立群 吴易璇 +8 位作者 蒲桂婷 曹珊菱 王得先 刘婷丽 李红 AMUDA Tharheer Oluwashola 郭小腊 殷宏 骆学农 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2619-2628,共10页
旨在明确敲低多房棘球蚴emu-let-7-5p对小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长的影响。构建表达多房棘球蚴emu-let-7-5p海绵序列的重组腺相关病毒载体,并在293T细胞上验证其抑制效果和特异性。70只清洁级BALB/c小鼠分别经尾静脉注射AAV8-si-le... 旨在明确敲低多房棘球蚴emu-let-7-5p对小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长的影响。构建表达多房棘球蚴emu-let-7-5p海绵序列的重组腺相关病毒载体,并在293T细胞上验证其抑制效果和特异性。70只清洁级BALB/c小鼠分别经尾静脉注射AAV8-si-let-7-5p、AAV8-control和PBS后两周,每组随机选取2只小鼠分别用Western blot和qRT-PCR分析肝组织中GFP、let-7-5p及其靶基因C/EBP δ的表达。随后,所有小鼠每只腹腔接种1 000个原头蚴,3个月后qRT-PCR检测腹腔巨噬细胞emu-let-7-5p、C/EBP δ、M1型(IL-1β、iNOS和IL-6)和M2型(Arg-1、IL-4和IL-10)相关分子的转录水平,并统计各组小鼠多房棘球蚴的包囊重量和原头蚴数量。结果表明,注射后第15天,AAV8-si-let-7-5p成功靶向小鼠肝脏,并引起emu-let-7-5p的敲低和C/EBP δ的上调表达。感染后3个月,AAV8-si-let-7-5p组小鼠腹腔巨噬细胞emu-let-7-5p和M2型相关分子Arg-1均显著下调,而C/EBP δ和M1型相关分子IL-1β和iNOS均显著上调。此外,AAV8-si-let-7-5p组IL-4和IL-6下调表达,而IL-10上调表达,且小鼠肝脏包囊重量和原头蚴数量显著低于对照组。敲低多房棘球蚴感染小鼠体内emu-let-7-5p,可促进C/EBP δ的表达,进而抑制M2型极化和虫体生长。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 emu-let-7-5p 腹腔巨噬细胞极化 虫体生长
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LPS与ATP共同诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞焦亡模型的建立 被引量：3
7
作者 刘慧玲 吴传新 +4 位作者 龙贤梨 李丽 李飞 郭晖 孙航(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期2028-2033,共6页
目的:探索脂多糖(LPS)和三磷酸腺苷(ATP)共同诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞焦亡模型的最佳条件。方法:采用流式细胞仪F4/80和CD-11b染色检测巨噬细胞纯度,Annexin V-PE/7-AAD双染色法筛选出LPS和ATP共同诱导细胞焦亡的最适浓度及时间。巨噬... 目的:探索脂多糖(LPS)和三磷酸腺苷(ATP)共同诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞焦亡模型的最佳条件。方法:采用流式细胞仪F4/80和CD-11b染色检测巨噬细胞纯度,Annexin V-PE/7-AAD双染色法筛选出LPS和ATP共同诱导细胞焦亡的最适浓度及时间。巨噬细胞随机分为control组、LPS组、ATP组和LPS+ATP组;Western blot检测GSDMD、caspase-1、caspase-11、NLRP3、ASC、pro-IL-1β、pro-IL-18和HMGB1蛋白表达水平;ELISA检测培养上清中IL-1β和TNF-α表达水平;透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)观察巨噬细胞焦亡形态。结果:巨噬细胞的纯度达到90%;500 ng/ml LPS 24 h+5 mmol/L ATP 4 h为诱导巨噬细胞焦亡的最佳组合方式;LPS+ATP组的GSDMD、caspase-1、caspase-11、NLRP3、ASC、pro-IL-1β、pro-IL-18和HMGB1的蛋白表达量明显高于对照组(P<0.05);培养上清中IL-1β和TNF-α表达量显著高于对照组(P<0.05);电镜下可观察到明显的焦亡特征。结论:成功建立了LPS和ATP共同诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞的焦亡模型,为深入探讨免疫细胞焦亡的分子机制提供了稳定的细胞模型。 展开更多
关键词 LPS ATP 细胞焦亡 原代腹腔巨噬细胞 脓毒症
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电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞阴离子通道活动的影响及康复新对其的作用 被引量：19
8
作者 舒崇湘 叶本兰 +1 位作者 程天民 萧家思 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期290-292,共3页
目的　探讨电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞阴离子通道活动的影响及康复新对其的作用。方法　采用电生理膜片钳离子单通道记录方法。结果　用调理的zymosan刺激腹腔巨噬细胞后 ,阴离子通道开放的阳性率在受照射组显著减少 ,且受刺激至通道... 目的　探讨电离辐射对小鼠腹腔巨噬细胞阴离子通道活动的影响及康复新对其的作用。方法　采用电生理膜片钳离子单通道记录方法。结果　用调理的zymosan刺激腹腔巨噬细胞后 ,阴离子通道开放的阳性率在受照射组显著减少 ,且受刺激至通道开放的时间间隔显著延长。受照射组较正常对照组通道开放概率显著降低、开放时间常数缩短而关闭时间常数延长 ,康复新对正常对照组离子通道活动的影响不显著 ,但可使照射组的通道开放有一定程度的加强。结论　电离辐射抑制巨噬细胞膜上阴离子通道的开放可能是其抑制巨噬细胞功能的一个重要途径。 展开更多
关键词 电离辐射 巨噬细胞 阴离子通道 康复新 腹腔创伤 小鼠
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槐定碱对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响 被引量：8
9
作者 周娅 王宁萍 +4 位作者 赵建宁 张艳丽 王大军 佟书娟 黎雪如 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2000年第2期84-86,共3页
观察槐定碱对巨噬细胞功能的影响。以 YC花环试验、活化 MΦ的 NO诱生量及胞内溶菌酶与超氧化物岐化酶的活性、小鼠脾脏和胸腺的组织学形态变化为观察指标。结果 ,灌胃槐定碱小鼠的腹腔 MΦC3 b受体数量较对照组显著升高 ;与对照组比较 ... 观察槐定碱对巨噬细胞功能的影响。以 YC花环试验、活化 MΦ的 NO诱生量及胞内溶菌酶与超氧化物岐化酶的活性、小鼠脾脏和胸腺的组织学形态变化为观察指标。结果 ,灌胃槐定碱小鼠的腹腔 MΦC3 b受体数量较对照组显著升高 ;与对照组比较 ,脾组织中脾小体融合增大 ,MΦ增多。槐定碱不影响腹腔活化 MΦ内 SOD活性 ,但对腹腔活化 MΦ的 NO诱生量及胞内 L SZ活性有抑制趋势。结论 ,槐定碱可增强正常小鼠 MΦ功能 ,并促进脾脏免疫细胞增殖 ,而对活化 MΦ的功能则表现抑制倾向。 展开更多
关键词 槐定碱 巨噬细胞 腹腔 小鼠 中药
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红景天苷对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、ROS和NO产生的影响 被引量：51
10
作者 叶莎莎 曾耀英 尹乐乐 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期237-241,共5页
目的:研究红景天苷(Sal)对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、胞内活性氧簇(ROS)及分泌一氧化氮(NO)的影响,初步探讨其对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。方法:无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,并制备单细胞悬液,以不同终浓度(80μmol/L... 目的:研究红景天苷(Sal)对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、凋亡、吞噬、胞内活性氧簇(ROS)及分泌一氧化氮(NO)的影响,初步探讨其对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。方法:无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,并制备单细胞悬液,以不同终浓度(80μmol/L、160μmol/L及320μmol/L)的Sal和巨噬细胞共培养4 h,再以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(IFN-γ)进行共刺激。利用MTT比色法检测Sal对巨噬细胞体外增殖的影响。用放线菌酮(CHX)诱导巨噬细胞凋亡,用Sytox G reen染色结合荧光酶标仪检测Sal对CHX诱导巨噬细胞凋亡的影响。用流式细胞术(FCM)检测Sal对巨噬细胞吞噬功能的影响。用2-7-二氯氢化荧光素乙二脂(H2DCFDA)染色法结合荧光酶标仪检测Sal对胞内ROS产生的影响;用G riess反应检测Sal对巨噬细胞分泌NO的影响。结果:MTT比色法检测显示,终浓度为80、160、320μmol/L的Sal均可显著促进LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞增殖(P<0.05)。荧光酶标仪检测Syto xG reen染色法的结果显示,160μmol/L的Sal可抑制CHX诱导的巨噬细胞凋亡(P<0.01)。FCM结果显示,各浓度的Sal均能促进单纯药物组和实验药物组LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞的吞噬功能(P<0.05)。用荧光酶标仪检测DH2DCFDA染色结果表明,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激的巨噬细胞胞内ROS的产生均具有显著的抑制作用(P<0.01)。Griess反应检测NO含量的结果显示,各浓度的Sal对LPS+IFN-γ刺激巨噬细胞产生NO均具有促进作用(P<0.05)。结论:Sal对LPS和IFN-γ刺激的巨噬细胞增殖具有显著的促进作用,对CHX诱导的巨噬细胞凋亡具有显著的抑制作用,对静息态和活化态的巨噬细胞的吞噬功能均有增强作用,并能减少LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞胞内ROS的产生;但能促进LPS和IFN-γ活化的巨噬细胞NO的分泌。 展开更多
关键词 红景天苷 腹腔巨噬细胞 增殖 凋亡 吞噬 活性氧 一氧化氮
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不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用 被引量：7
11
作者 王翠芳 王特日格乐 +4 位作者 丹妮 杜红喜 张秀媛 萨茹丽 敖长金 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期342-350,共9页
本试验旨在研究通过超声波法提取的35%和75%乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用。采用细胞计数试剂盒检测不同添加浓度(25、50、100、200、400μg/mL)的35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞活性的... 本试验旨在研究通过超声波法提取的35%和75%乙醇洗脱沙葱黄酮对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的抗炎作用。采用细胞计数试剂盒检测不同添加浓度(25、50、100、200、400μg/mL)的35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响;设空白对照组、LPS应激模型组、不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮组(分别加入25、50、100μg/mL 35%或75%乙醇洗脱沙葱黄酮溶液),采用Griess、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附测定法检测不同浓度乙醇洗脱沙葱黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子及炎性因子的影响。结果表明:与空白对照组相比,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮在25～100μg/mL添加浓度内可极显著提高小鼠腹腔巨噬细胞活性(P<0.01)。与LPS应激模型组相比,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮均可极显著极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮含量及诱导型一氧化氮合酶mRNA相对表达量(P<0.01),并均呈剂量依赖效应,且75%乙醇洗脱沙葱黄酮作用效果优于35%乙醇洗脱沙葱黄酮; 35%乙醇洗脱沙葱黄酮可极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量(P<0.01),极显著降低TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量(P<0.01); 75%乙醇洗脱沙葱黄酮可显著或极显著降低小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α含量(P<0.05或P<0.01),极显著降低TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量(P<0.01)。由此可见,35%、75%乙醇洗脱沙葱黄酮可通过提高小鼠腹腔巨噬细胞活性、调控细胞因子及炎性因子的分泌而发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 沙葱 黄酮 脂多糖 小鼠 腹腔巨噬细胞 炎症
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雷公藤多甙抑制小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮 被引量：15
12
作者 张永健 谢彦华 +3 位作者 苏素文 武占军 王永利 吕占军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期75-76,共2页
雷公藤多甙（ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｓｉｄｅｏｆＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｗｉｌｆｏｒｄｉＨｏｏｋ．ｆ．，ＴＷＰ）临床广泛用于治疗类风湿性关节炎等多种自身免疫性疾病，既可抑制细胞免疫又可抑制体液免疫［１］．但其在免疫抑制过程... 雷公藤多甙（ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｓｉｄｅｏｆＴｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍｗｉｌｆｏｒｄｉＨｏｏｋ．ｆ．，ＴＷＰ）临床广泛用于治疗类风湿性关节炎等多种自身免疫性疾病，既可抑制细胞免疫又可抑制体液免疫［１］．但其在免疫抑制过程中对一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的影响却... 展开更多
关键词 雷公藤多甙 腹腔巨噬细胞 一氧化氮
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红毛五加多糖不同组分对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的研究 被引量：12
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作者 郝慧慧 陈永 +1 位作者 林志娟 张义军 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期612-616,共5页
本文研究红毛五加多糖不同组分(AHP-I、AHP-II、AHP-III)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫调节功能的影响,为进一步阐明红毛五加多糖对小鼠免疫调节作用机制奠定基础。采用不同浓度的3种多糖组分作用于小鼠腹腔巨噬细胞,测定其对巨噬细胞吞噬中... 本文研究红毛五加多糖不同组分(AHP-I、AHP-II、AHP-III)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫调节功能的影响,为进一步阐明红毛五加多糖对小鼠免疫调节作用机制奠定基础。采用不同浓度的3种多糖组分作用于小鼠腹腔巨噬细胞,测定其对巨噬细胞吞噬中性红、释放NO能力、分泌IL-6、TNF-α、IL-1β水平的影响。最后结果是红毛五加多糖的3种不同组分对小鼠免疫细胞有不同的刺激能力。其中,AHP-II可极其显著地增强吞噬细胞的吞噬功能,促进其合成NO,促进巨噬细胞细胞因子的分泌。因此红毛五加多糖能激活小鼠腹腔巨噬细胞,其中,AHP-II是最重要的作用组分。 展开更多
关键词 红毛五加多糖 腹腔巨噬细胞 免疫调节 NO 细胞因子
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大枣中性多糖对小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子及其mRNA表达的影响 被引量：22
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作者 张庆 雷林生 +1 位作者 杨淑琴 孙莉莎 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第8期592-594,共3页
目的 研究大枣中性多糖（JDP-N）对小鼠腹腔巨噬细胞（Mφ）分泌肿瘤坏死因子（TNF）及其mRNA表达水平的影响。方法 MTT法测定细胞增殖，半定量RT-PCR测定TNF-α mRNA的表达。结果 JDP-N能诱导Mφ分泌TNF，诱生TNF达峰时间约为6 h，与... 目的 研究大枣中性多糖（JDP-N）对小鼠腹腔巨噬细胞（Mφ）分泌肿瘤坏死因子（TNF）及其mRNA表达水平的影响。方法 MTT法测定细胞增殖，半定量RT-PCR测定TNF-α mRNA的表达。结果 JDP-N能诱导Mφ分泌TNF，诱生TNF达峰时间约为6 h，与脂多糖相比，时效关系相仿；蛋白激酶C激活在JDP-N诱导Mφ分泌TNF过程中具有关键性作用；JDP-N能促进MφTNF-α mRNA的表达。结论 JDP-N增强小鼠免疫功能的机制之一是促进Mφ分泌TNF。 展开更多
关键词 大枣中性多糖 肿瘤坏死因子 蛋白激酶C 巨噬细胞 信使RNA JDP-N 小鼠 mRNA
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连翘提取物对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬和NO释放的影响 被引量：12
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作者 尹乐乐 曾耀英 侯会娜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期557-559,563,共4页
目的:分析连翘(FS)对小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和体外NO释放的影响。方法:无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞和羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记大肠杆菌DH5α,短期培养3h后流式细胞术(FCM)分析FS对腹腔巨噬细胞体外吞噬的影响。... 目的:分析连翘(FS)对小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和体外NO释放的影响。方法:无菌收集小鼠腹腔巨噬细胞和羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记大肠杆菌DH5α,短期培养3h后流式细胞术(FCM)分析FS对腹腔巨噬细胞体外吞噬的影响。用LPS体外刺激活化腹腔巨噬细胞,Griess Reagent试剂盒检测并分析FS对巨噬细胞体外释放NO的影响。结果:FCM分析显示,终浓度为40、80、160mg/L的FS对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬具有明显的促进作用(P<0.05)。不同终质量浓度的FS对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞体外NO的释放均有抑制作用(P<0.05)。结论:FS可以促进小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬和抑制NO体外的释放。 展开更多
关键词 连翘提取物 腹腔巨噬细胞 吞噬 NO释放
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白细胞介素18重组腺病毒对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响 被引量：6
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作者 姚航平 张立煌 +1 位作者 冷建杭 曹雪涛 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2001年第6期248-251,共4页
目的 :研究白细胞介素 1 8重组腺病毒 ( Adms IL -1 8)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响 ,并对其机理作一探讨。方法 :重组腺病毒腹腔注射 BAL B/ C小鼠 ,每周注射 1次 ,共 2次。 2周后制备腹腔巨噬细胞 ,经 L PS刺激 ,采用 EL ISA法... 目的 :研究白细胞介素 1 8重组腺病毒 ( Adms IL -1 8)对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响 ,并对其机理作一探讨。方法 :重组腺病毒腹腔注射 BAL B/ C小鼠 ,每周注射 1次 ,共 2次。 2周后制备腹腔巨噬细胞 ,经 L PS刺激 ,采用 EL ISA法检测培养上清 m IL-1 8、m IL-1 β、m TNFα的水平 ;酶还原法检测 NO的含量 ;L DH释放法检测巨噬细胞的杀伤活性。结果 :Adms IL -1 8注射后 ,小鼠腹腔巨噬细胞高效表达 m IL-1 8,同时巨噬细胞分泌 m IL-1 β、m TNFα、NO水平明显增加 ,并增强巨噬细胞的杀伤活性 ,与其它对照组比较均 P<0 .0 1。结论 :小鼠腹腔注射 Adms IL-1 8,能显著增加巨噬细胞表达 m IL -1 8、m IL -1β、m TNFα、NO,增强巨噬细胞的杀伤活性。 展开更多
关键词 白细胞介素18 巨噬细胞 重组腺病毒科 细胞毒作用 细胞因子 小鼠
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类胡萝卜素对小鼠腹腔巨噬细胞释放一氧化氮的影响 被引量：13
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作者 吴江 林晓霞 刘子贻 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2001年第5期211-214,共4页
目的 :观察类胡萝卜素对巨噬细胞释放一氧化氮 (NO)的影响 ,探讨类胡萝卜素免疫调节作用的机制。方法 :选用小鼠腹腔巨噬细胞为对象 ,观察不同浓度的虾青素和β-胡萝卜素对细胞产生 NO的影响。结果 :用 1 mg/L的内毒素脂多糖刺激巨噬细... 目的 :观察类胡萝卜素对巨噬细胞释放一氧化氮 (NO)的影响 ,探讨类胡萝卜素免疫调节作用的机制。方法 :选用小鼠腹腔巨噬细胞为对象 ,观察不同浓度的虾青素和β-胡萝卜素对细胞产生 NO的影响。结果 :用 1 mg/L的内毒素脂多糖刺激巨噬细胞时 ,2× 1 0 - 7mol/L和 2× 1 0 - 8mol/L的虾青素使巨噬细胞释放 NO分别下降 77%和 43% ;而浓度相同 β-胡萝卜素仅使巨噬细胞释放NO分别下降 2 8%和 8%。两者对正常状态的巨噬细胞没有明显影响。结论 :类胡萝卜素能抑制受L PS刺激的巨噬细胞释放 NO,其免疫调节功能可能与影响 展开更多
关键词 类胡萝卜素 β-胡萝卜素 脂多糖类 腹腔巨噬细胞 一氧化氮 小鼠 免疫调节
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灵芝干膏和灵芝孢子粉对小鼠腹腔巨噬细胞酸性磷酸酶活性的影响 被引量：6
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作者 李铁民 朱继红 +3 位作者 刘冲 赛吉热呼 新春 李昱 《食用菌学报》 2004年第3期30-33,共4页
采用4 氨基安替比林法检测小鼠腹腔巨噬细胞酸性磷酸酶(ACP)活性。结果表明,灵芝干膏与灵芝孢子粉均可显著提高小鼠腹腔巨噬细胞ACP酶活性;一定剂量范围内,灵芝干膏与灵芝孢子粉对小鼠腹腔巨噬细胞ACP酶活性的影响无明显差异;灵芝孢子... 采用4 氨基安替比林法检测小鼠腹腔巨噬细胞酸性磷酸酶(ACP)活性。结果表明,灵芝干膏与灵芝孢子粉均可显著提高小鼠腹腔巨噬细胞ACP酶活性;一定剂量范围内,灵芝干膏与灵芝孢子粉对小鼠腹腔巨噬细胞ACP酶活性的影响无明显差异;灵芝孢子粉破壁率越高,达到最高酶活性所需时间越短,剂量越小;连续服用灵芝干膏可使ACP酶活性始终保持较高水平,而灵芝孢子粉仅在一定时间范围内使ACP酶活性保持一定水平。 展开更多
关键词 灵芝 干膏 孢子粉 小鼠 腹腔 巨噬细胞 酸性磷酸酶
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乌头碱对小鼠腹腔巨噬细胞Ia抗原表达影响的研究 被引量：35
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作者 马健 陆平成 +1 位作者 牧野充弘 木村正康 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期341-344,共4页
目的：观察乌头碱（ＡＴＮ）对正常小鼠和皮质酮所致阳虚模型小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）在干扰素（ＩＮＦ－γ）诱导下，其表面Ｉａ抗原表达的改变。方法：采用流式细胞技术测定。结果：正常小鼠腹腔注射ＡＴＮ（１．５、３．０和６．０... 目的：观察乌头碱（ＡＴＮ）对正常小鼠和皮质酮所致阳虚模型小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）在干扰素（ＩＮＦ－γ）诱导下，其表面Ｉａ抗原表达的改变。方法：采用流式细胞技术测定。结果：正常小鼠腹腔注射ＡＴＮ（１．５、３．０和６．０μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）７ｄ后，其ＭΦ在３００Ｕ·Ｌ－１浓度ＩＮＦ－的诱导下Ｉａ抗原表达明显增强，反映Ｉａ抗原表达的荧光强度从对照组的９３．０１±１３．３０增加到１０８．９０±８．６３、１１３．０１±１２．８０和１１３．５７±１０．１３（Ｐ＜０．０５）。阳虚模型小鼠腹腔ＭΦ在ＩＦＮ－诱导下的Ｉａ抗原表达明显低于正常小鼠（９０．８０±７．３６和１０９．９６±１０．３７，Ｐ＜０．０５），但ＡＴＮ治疗可使阳虚模型小鼠ＭΦ的Ｉａ抗原表达增强到１１１．１１±１４．４８、１１７．８９±１４．６４和１１５．６１±１３．７４，与模型组相比差异显著（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）。结论：说明ＡＴＮ能够提高正常小鼠和皮质酮免疫抑制阳虚模型小鼠ＭΦＩａ抗原的表达，从而增强ＭΦ递呈抗原能力，促进免疫应答反应。 展开更多
关键词 乌头碱 腹腔巨噬细胞 IA抗原表达
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黑灵芝多糖对S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞cAMP/PKA、IP_3/Ca^(2+)及DAG/PKC信号通路的影响 被引量：5
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作者 黄建琴 聂少平 +3 位作者 张莘莘 黄丹菲 朱科学 谢明勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期204-208,共5页
目的:探讨黑灵芝多糖(polysaccharide from Ganoderma atrum,PSG-1)对S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、三磷酸肌醇(inositol triphosphate,IP3)/Ca2+... 目的:探讨黑灵芝多糖(polysaccharide from Ganoderma atrum,PSG-1)对S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)、三磷酸肌醇(inositol triphosphate,IP3)/Ca2+及甘油二酯(diacylglycerol,DAG)/蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信号通路的影响。方法:将S-180细胞接种于BALB/c小鼠体内建立荷瘤小鼠模型,成模后收集腹腔巨噬细胞进行体外培养,用不同浓度的PSG-1干预;ELISA法分别检测巨噬细胞培养上清液中的IP3、DAG和AMP含量;流式细胞仪测定细胞内Ca2+含量;Western blotting测定细胞PKA及PKC蛋白表达。结果:PSG-1在20~160μg/mL质量浓度范围能促进S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞产生cAMP、IP3和DAG,同时能增加细胞内Ca2+含量,并显著增强PKA及PKC蛋白表达量。结论:PSG-1能有效激活S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞cAMP/PKA、IP3/Ca2+及DAG/PKC信号通路。由此推测,PSG-1可能通过cAMP/PKA、IP3/Ca2+及DAG/PKC信号通路促进S-180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 黑灵芝多糖 腹腔巨噬细胞 抗肿瘤 信号通路
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