流体剪切力调控血管平滑肌细胞向巨噬样细胞表型转化促胸主动脉夹层形成的机制研究

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作者 高文博 赵婷 +1 位作者 余泓池 刘肖珩 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期614-614,共1页

目的胸主动脉瘤(TAA)与胸主动脉夹层(TAD)是一类严重危害人们身体健康和生命安全的重大疾病。目前,TAA和TAD的发病机制尚不清楚,更不了解TAA向TAD转化的分子机制。前期研究发现,在TAA向TAD演变的进程中,VSMCs发生巨噬样细胞表型转化,且... 目的胸主动脉瘤(TAA)与胸主动脉夹层(TAD)是一类严重危害人们身体健康和生命安全的重大疾病。目前,TAA和TAD的发病机制尚不清楚,更不了解TAA向TAD转化的分子机制。前期研究发现,在TAA向TAD演变的进程中,VSMCs发生巨噬样细胞表型转化,且受流体剪切力的调控。本研究旨在探明流体剪切力诱导VSMCs巨噬样细胞表型转化的力学生物分子机制,为解析TAA向TAD演变的机理提供新方向,为TAA和TAD的药物治疗提供新的分子靶标。方法对临床TAA和TAD样本进行单细胞测序及分析;基于医学影像数据模拟计算TAA和TAD病变部位的流体剪切力变化,并通过体外力学加载实验探究出合适的力学加载条件;在此基础上通过体内外力学加载实验流体剪力调控VSMCs表型转化的分子机制。结果数值模拟表明,VSMCs在TAA和TAD的血管组织中受到的流体剪力均值分别为1.0、40 dyn/cm^(2);流体剪切力显著下调PTCH1及上调GLI2的表达水平,该过程伴随VSMCs的巨噬样细胞表型转化;过表达PTCH1和抑制GLI2可显著阻碍流体剪力诱导的VSMCs巨噬样细胞表型转化,延缓TAA向TAD的转化进程。结论流体剪切力通过PTCH1-GLI2信号轴诱导VSMCs巨噬样细胞表型转化,从而促进TAA向TAD的演变。 展开更多

关键词 胸主动脉夹层 流体剪切力 胸主动脉瘤 血管组织 重大疾病 血管平滑肌细胞 TAA 转化进程

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大鼠胸主动脉平滑肌细胞的组织贴块法培养及鉴定 被引量：14

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作者 任立群 张秀云 +1 位作者 孙波 王金凤 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期135-137,共3页

目的 :建立大鼠胸主动脉平滑肌细胞的组织贴块培养法。方法 :取大鼠胸主动脉 ,切成1 mm× 1 mm× 1 mm的小块 ,均匀地种植于培养瓶壁上 ,约 5 0 min后加入含有 2 0 %小牛血清的PRMI- 1 640培养基进行培养。结果 :培养第 5天时 ... 目的 :建立大鼠胸主动脉平滑肌细胞的组织贴块培养法。方法 :取大鼠胸主动脉 ,切成1 mm× 1 mm× 1 mm的小块 ,均匀地种植于培养瓶壁上 ,约 5 0 min后加入含有 2 0 %小牛血清的PRMI- 1 640培养基进行培养。结果 :培养第 5天时 ,可见少量梭形或长梭形细胞自组织块周围游出 ,至培养 3周细胞融合成片 ,呈“峰、谷”状生长。肌动蛋白免疫组化染色 ,>98%的细胞染色阳性 ,透射电镜观察 ,于基膜下和胞浆内可见密斑和密体。 VG染色也证实几乎所有的细胞均为平滑肌细胞。结论 :应用细胞贴块法培养大鼠平滑肌细胞 ,操作简单 ,结果稳定 ,纯度较高 。 展开更多

关键词 平滑肌细胞 组织贴块培养法 胸主动脉 鉴定 动物实验 心血管疾病 发病机制

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SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞组织贴块法培养及鉴定 被引量：6

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作者 申红远 白静 +2 位作者 汤喆 刘秀华 王禹 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期850-852,共3页

目的建立SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC）组织贴块培养法并进行鉴定。方法无菌条件下取大鼠胸主动脉,4-6h后加入含20%胎牛血清的DMEM培养液,原代培养2周并用免疫荧光染色对培养的VSMC进行鉴定。结... 目的建立SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC）组织贴块培养法并进行鉴定。方法无菌条件下取大鼠胸主动脉,4-6h后加入含20%胎牛血清的DMEM培养液,原代培养2周并用免疫荧光染色对培养的VSMC进行鉴定。结果组织贴块法成功培养了大鼠胸主动脉VSMC,5-7d细胞迁出,10-14d细胞融合至80%进行传代。体外培养的VSMC可传至20代,培养的细胞呈典型的＂峰谷＂样生长,免疫荧光染色鉴定细胞纯度达95%。结论组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC培养体系稳定,操作简单、方便,纯度较高,免疫荧光是鉴定VSMC的较佳方法。 展开更多

关键词 主动脉 胸 肌 平滑 血管 肌细胞 平滑肌 细胞融合 组织培养技术 荧光免疫测定

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尾加压素Ⅱ对自发性高血压大鼠胸主动脉的收缩效应及其对血管平滑肌细胞内ERK_(1/2)磷酸化的影响 被引量：4

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作者 石莹 王艳霞 +1 位作者 姚泰 朱依纯 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期48-52,共5页

目的观察尾加压素Ⅱ(U-Ⅱ)对不同血压水平的自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉的收缩效应和U-Ⅱ对血管平滑肌细胞(VSMC)内ERK1/2和p38MAPK磷酸化的影响,以进一步明确U-Ⅱ对SHR的血管效应及其可能机制。方法离体血管灌流实验测定U-Ⅱ对胸主... 目的观察尾加压素Ⅱ(U-Ⅱ)对不同血压水平的自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉的收缩效应和U-Ⅱ对血管平滑肌细胞(VSMC)内ERK1/2和p38MAPK磷酸化的影响,以进一步明确U-Ⅱ对SHR的血管效应及其可能机制。方法离体血管灌流实验测定U-Ⅱ对胸主动脉张力的影响,采用免疫荧光标记UT受体在VSMC的表达,并通过蛋白质印迹的方法观察U-Ⅱ对VSMC内ERK1/2和p38MAPK磷酸化的作用。结果U-Ⅱ受体分布在VSMC上,累积浓度的U-Ⅱ对成年SHR去除内皮的胸主动脉环收缩效应明显强于WKY大鼠;在VSMC细胞内,U-Ⅱ可以浓度依赖性地激活VSMC内ERK1/2磷酸化,但对p38MAPK没有作用;ERK1/2阻断剂的应用不能阻断(肌凝蛋白轻链)MLC的磷酸化。结论U-Ⅱ对SHR离体血管表现出较强的收缩作用,可能通过ERK1/2及p38MAPK以外的其他通路参与了MLC的磷酸化以及VSMC的收缩效应。 展开更多

关键词 尾加压素Ⅱ 自发性高血压大鼠 胸主动脉 血管平滑肌细胞 ERK1/2 磷酸化

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钙激活氯通道蛋白ANO1在小鼠主动脉平滑肌细胞的表达及其功能鉴定 被引量：3

5

作者 张雲乔 王胜 +6 位作者 刘艳杰 崔爽 曲适 王鑫鑫 龙啸 方芳 郝峰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期87-88,92,I0007,共4页

探讨钙激活氯通道蛋白ANO1在C57BL/6小鼠主动脉平滑肌细胞中的表达及其功能特性。运用胶原酶消化法获得原代培养的小鼠主动脉平滑肌细胞,流式细胞术检测平滑肌细胞纯度;应用RT-PCR检测主动脉平滑肌细胞ANO1 mRNA的表达;免疫印迹检测ANO... 探讨钙激活氯通道蛋白ANO1在C57BL/6小鼠主动脉平滑肌细胞中的表达及其功能特性。运用胶原酶消化法获得原代培养的小鼠主动脉平滑肌细胞,流式细胞术检测平滑肌细胞纯度;应用RT-PCR检测主动脉平滑肌细胞ANO1 mRNA的表达;免疫印迹检测ANO1蛋白在主动脉平滑肌细胞的表达情况;应用荧光淬灭动力学实验检测ANO1钙激活氯通道的功能特性。原代培养成功获得主动脉平滑肌细胞;RT-PCR结果分析表明,主动脉平滑肌细胞在mRNA水平有ANO1表达;免疫印迹显示主动脉平滑肌细胞蛋白水平有ANO1表达;荧光淬灭动力学实验证实表达在主动脉平滑肌细胞的ANO1具有阴离子转运功能,即钙激活氯通道典型特性。小鼠主动脉平滑肌细胞表达的ANO1是钙激活氯通道的分子基础。 展开更多

关键词 ANO1蛋白 钙激活氯离子通道 小鼠 主动脉平滑肌细胞

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血管平滑肌细胞自噬对小鼠主动脉夹层形成的影响 被引量：6

6

作者 陈琳 程玲霞 +3 位作者 杨帆 刘英 胡迎春 钟武 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期226-234,共9页

【目的】研究血管平滑肌自噬对小鼠主动脉夹层形成的影响。【方法】①构建小鼠主动脉夹层模型:60只C57BL/6小鼠被随机分为三组:阴性对照组、实验(AD)组、氯喹(CQ)干预组,实验组与CQ组使用β-氨基丙腈(BAPN)喂养联合人血管紧张素-Ⅱ(Ang-... 【目的】研究血管平滑肌自噬对小鼠主动脉夹层形成的影响。【方法】①构建小鼠主动脉夹层模型:60只C57BL/6小鼠被随机分为三组:阴性对照组、实验(AD)组、氯喹(CQ)干预组,实验组与CQ组使用β-氨基丙腈(BAPN)喂养联合人血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)皮下注射16 d构建小鼠主动脉夹层的模型,同时干预组每天腹腔注射CQ,对照组给予生理盐水。②Yes相关蛋白(YAP)、自噬相关蛋白及血管平滑肌细胞相关标志蛋白的检测:采用蛋白质免疫印迹法、免疫组织化学染色法对小鼠主动脉样本中YAP、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62及血管平滑肌细胞不同表型相关标志蛋白进行检测。【结果】①实验组主动脉夹层的发生率为60%,干预组小鼠未见明显主动脉夹层形成征象。②与对照组相比,实验组与干预组小鼠主动脉中合成型血管平滑肌细胞(VSMC)标志蛋白骨桥蛋白(OPN)、LC3含量明显增高,同时,收缩型VSMC标志蛋白α-SMA及YAP蛋白的表达下降(P<0.05)。【结论】在BAPN联合Ang-Ⅱ构建的小鼠主动脉夹层模型中,YAP蛋白调控VSMC表型转化,且该过程受到自噬的调节,自噬可能作为YAP蛋白调控VSMC表型转化致小鼠主动脉夹层形成的关键。 展开更多

关键词 小鼠 主动脉夹层 自噬 血管平滑肌细胞 Yes相关蛋白

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多沙唑嗪光学异构体对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的选择性抑制作用 被引量：6

7

作者 王荣英 任雷鸣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期81-84,共4页

目的观察多沙唑嗪（racemic—doxazosin，rac—DOX）及其对映体（S—DOX、R—DOX）对大鼠血管平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecells，VSMCs）增殖的影响。方法采用培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞，应用MTT比色法，测定VSMCs的增殖活... 目的观察多沙唑嗪（racemic—doxazosin，rac—DOX）及其对映体（S—DOX、R—DOX）对大鼠血管平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecells，VSMCs）增殖的影响。方法采用培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞，应用MTT比色法，测定VSMCs的增殖活力，Giemsa，S染色观察VSMCs的形态学改变。结果在3～30μmol·L-1浓度范围，S-DOX、R—DOX和rac—DOX作用于VSMCs96h，均抑制大鼠胸主动脉VSMCs增殖活动；但是，S—DOX的抑制作用强于同浓度R—DOX（P〈0．05），与同浓度Fac—DOX的抑制作用无差别。以30μmol·L-1浓度的药物处理VSMCs48h、72h和96h；S—DOX对主动脉VSMCs增殖的抑制率依次为28．67％、34．51％和56．89％，R—DOX为22．59％、26．66％和45．79％，rac—DOX为21．88％、32．84％和52．04％。以不同浓度的药物处理大鼠胸主动脉VSMCs96h，rac—DOX、S-DOX和R—DOX抑制VSMCs增殖达40％的浓度（IC40）分别为（12．1±2．6）、（10．2±1．3）和（20．9±2．2）μmol·L-1；R-DOX的Ic40值大于rac—DOX和S—DOX（P〈0．01）。S—DOX处理后，VSMCs出现细胞体积变小，核固缩，核边集等形态学改变。结论S—DOX和R—DOX对大鼠胸主动脉VSMCs的抗增殖作用具有化学结构的立体选择性，S—DOX的抗VSMCs增殖作用明显强于R—DOX。 展开更多

关键词 多沙唑嗪 光学异构体 胸主动脉 血管平滑肌细胞 细胞增殖 大鼠

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大鼠胸主动脉平滑肌细胞的原代培养及分离鉴定 被引量：1

8

作者 娄石磊 苗永迪 +3 位作者 岂蕊 郭子硕 邱悦 孙聪 《吉林畜牧兽医》 2018年第1期13-16,共4页

本实验通过建立简单高效的大鼠主动脉平滑肌细胞体外原代培养和鉴定方法,为下一步培养其他动物主动脉平滑肌细胞奠定基础。取成年SD雄性大鼠胸主动脉组织,显微镜下分离出主动脉中膜层,采用组织块联合酶消化法进行大鼠胸主动脉平滑肌细... 本实验通过建立简单高效的大鼠主动脉平滑肌细胞体外原代培养和鉴定方法,为下一步培养其他动物主动脉平滑肌细胞奠定基础。取成年SD雄性大鼠胸主动脉组织,显微镜下分离出主动脉中膜层,采用组织块联合酶消化法进行大鼠胸主动脉平滑肌细胞体外原代培养。再通过观察细胞形态学特征,免疫组织化学染色观察细胞中α-SMA和CD105两种蛋白表达情况对细胞进行鉴定。实验结果表明,组织块联合酶消化培养5 d细胞开始增殖,10~12 d细胞长满。显微镜下观察细胞呈纺锤形、三角形或椭圆形;免疫组化结果显示平滑肌细胞中α-SMA表达为阳性,CD105表达为阴性,表明分离出大鼠胸主动脉平滑肌细胞中不含有内皮细胞和成纤维细胞。 展开更多

关键词 大鼠胸主动脉 平滑肌细胞 原代培养 免疫组织化学

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藏红花醛对体外高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖、迁移和表型转变的抑制作用

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作者 高逸璇 汪鹏 +8 位作者 张思龙 高瑞娟 马莹芳 张可可 冯丹 黄宗奇 马克涛 李丽 司军强 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期948-957,共10页

目的:探讨高糖诱导的藏红花醛对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移和表型转化的影响,阐明藏红花醛在糖尿病(DM)血管病变防治中的作用。方法:选择SD大鼠作为实验对象,取大鼠胸主动脉原代培养VSMCs,分为对照组、25 mmol·L^(-1)高... 目的:探讨高糖诱导的藏红花醛对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、迁移和表型转化的影响,阐明藏红花醛在糖尿病(DM)血管病变防治中的作用。方法:选择SD大鼠作为实验对象,取大鼠胸主动脉原代培养VSMCs,分为对照组、25 mmol·L^(-1)高糖(HG)组和HG+20、40和80μmol·L^(-1)藏红花醛组。对照组VSMCs不进行处理,25 mmol·L^(-1)HG组VSMCs给予25 mmol·L^(-1)HG预处理,HG+20、40和80μmol·L^(-1)藏红花醛组VSMCs在25 mmol·L^(-1)HG组处理的基础上再分别用20、40和80μmol·L^(-1)藏红花醛进行48 h干预。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法确定藏红花醛合适浓度并检测各组VSMCs存活率,细胞划痕愈合实验检测各组VSMCs划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组VSMCs迁移细胞数,免疫荧光法检测各组VSMCs中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和兔抗骨桥蛋白(OPN)荧光强度,Western blotting法检测各组VSMCs中OPN、α-SMA和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平。结果:显微镜下可见,体外培养4 d时,胸主动脉组织块边缘有梭形或三角形细胞爬出,其中长梭形为最常见的形态;第14天时细胞逐渐铺满皿底,当细胞密度达到80%~90%时,出现标志性的“谷峰状”生长状态。取第3代细胞进行免疫荧光法鉴定,采用VSMCs特异性标记物α-SMA蛋白进行细胞免疫荧光染色,原代培养VSMCs中α-SMA蛋白均表达为阳性。CCK-8实验,与对照组比较,160μmol·L^(-1)藏红花醛组VSMCs活性明显降低(P<0.01),即对VSMCs产生了毒性损伤。20、40和80μmol·L^(-1)藏红花醛干预48 h后,VSMCs活性无明显变化,综合考虑藏红花醛的作用效果和毒性后,采用上述3个浓度藏红花醛用于后续的细胞实验。经过48 h的干预,与对照组比较,25 mmol·L^(-1)HG组VSMCs活性升高(P<0.001);与25 mmol·L^(-1)HG组比较,HG+20、40和80μmol·L^(-1)藏红花醛组VSMCs活性降低(P<0.05)。细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验,干预48 h后,25 mmol·L^(-1)HG组VSMCs划痕愈合率明显高于对照组(P<0.01),穿过Transwell小室的穿膜细胞数明显增多(P<0.05);与25μmol·L^(-1)HG组比较,HG+20、40和80μmol·L^(-1)藏红花醛组VSMCs划痕愈合率降低(P<0.05),穿膜细胞数减少(P<0.05)。免疫荧光染色,与对照组比较,25 mmol·L^(-1)HG组VSMCs中α-SMA蛋白荧光强度明显减弱(P<0.001),而OPN蛋白荧光强度明显增强(P<0.001);与25 mmol·L^(-1)HG组比较,HG+20、40和80μmol·L^(-1)藏红花醛组VSMCs中α-SMA蛋白荧光强度逐渐增加(P<0.05),OPN蛋白荧光强度逐渐减弱(P<0.05)。Western blotting法,与对照组比较,25 mmol·L^(-1)HG组VSMCs中α-SMA蛋白表达水平降低(P<0.05),PCNA和OPN蛋白表达水平升高(P<0.01);与25 mmol·L^(-1)HG组比较,HG+20、40和80μmol·L^(-1)藏红花醛组VSMCs中α-SMA蛋白表达水平升高(P<0.05),PCNA和OPN蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:藏红花醛能够抑制高糖诱导的大鼠VSMCs的增殖、迁移和表型转换。 展开更多

关键词 糖尿病 血管病变 胸主动脉平滑肌细胞 细胞迁移 细胞增殖

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重组人酸性成纤维生长因子对离体小鼠胸主动脉的弱缩血管作用及其机制 被引量：5

10

作者 庄岚 李校堃 +4 位作者 许华 黄亚东 沈兵 刘建军 叶春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期127-128,共2页

关键词 重组人酸性成纤维生长因子 胸主动脉 内皮细胞 平滑肌细胞 收缩

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大鼠胸主动脉中膜的细胞构筑

11

作者 张放鸣 何光篪 刘正津 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期44-47,共4页

应用血管银染铺片和计算机图像分析等技术，对大鼠胸主动脉中膜肌层构筑进行了研究。结果显示，正常大鼠胸主动脉中膜两弹力膜间，平滑肌一般排列成三层，肌层间呈相互交错的网络状结构，环形、螺旋形走向的肌纤维共存，由近内膜部向近... 应用血管银染铺片和计算机图像分析等技术，对大鼠胸主动脉中膜肌层构筑进行了研究。结果显示，正常大鼠胸主动脉中膜两弹力膜间，平滑肌一般排列成三层，肌层间呈相互交错的网络状结构，环形、螺旋形走向的肌纤维共存，由近内膜部向近外膜部，各层平滑肌细胞的交角逐渐减小。这一构筑有助于增强动脉壁的应力和张力，以适应血压的变化。 展开更多

关键词 胸主动脉 平滑肌细胞 构筑

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运动影响ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的主动脉超微结构观察 被引量：2

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作者 袁凌燕 陆爱云 卢昌亚 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期193-197,共5页

目的观察运动对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成中主动脉壁超微结构的影响。方法对30只8周龄ApoE基因敲除小鼠(ApoE^(-/-)小鼠)饲以“西方饮食”饲料建立AS模型,30只C57BL/6J小鼠为同源对照鼠,分为C57安静组(CC组,n=15)、C57运动... 目的观察运动对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)形成中主动脉壁超微结构的影响。方法对30只8周龄ApoE基因敲除小鼠(ApoE^(-/-)小鼠)饲以“西方饮食”饲料建立AS模型,30只C57BL/6J小鼠为同源对照鼠,分为C57安静组(CC组,n=15)、C57运动组(CE组,n=15)、ApoE^(-/-)小鼠安静组(AC组,n=15)和ApoE^(-/-)小鼠运动组(AE组,n=15)。两个运动组进行12周中等强度跑台运动,前6周运动量由10m/min×30min渐增为13m/min×60min,后6周以稳定的运动量(13m/min,60min)进行运动,每周5次。12周实验结束后,采用透射电镜观察各组小鼠主动脉内膜、中膜、内皮细胞、平滑肌细胞结构。结果ApoE^(-/-)小鼠安静组动脉壁损伤严重,内皮细胞出现受损、变质、脱落,细胞内连接不紧密。内皮下间隙增宽,内弹力膜破坏和消失。中膜平滑肌结构破坏,合成型平滑肌较多。ApoE^(-/-)小鼠运动组大部内皮细胞的腔面光滑平坦,内皮细胞损害较轻,内皮下仍见泡沫细胞,但层数较AC组少,中膜平滑肌以收缩型为主。结论运动可改善动脉粥样硬化内皮和平滑肌细胞的超微结构改变,减少主动脉的病损,从而发挥抗AS作用。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 运动 主动脉 超微结构 内皮细胞 平滑肌细胞 APOE^-/-小鼠

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胰岛素对离体大鼠胸主动脉血管张力的影响 被引量：1

13

作者 王静 王海华 胡钱国 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期34-36,共3页

制备离体大鼠胸主动脉环,分有内皮组和去内皮组,采用离体血管灌流技术,观察胰岛素对去氧肾上腺素(PE)和氯化钾(KCl)预收缩的胸主动脉环收缩张力的影响。结果表明胰岛素对PE预收缩的胸主动脉环产生浓度依赖性的舒张作用,且有内皮组和去... 制备离体大鼠胸主动脉环,分有内皮组和去内皮组,采用离体血管灌流技术,观察胰岛素对去氧肾上腺素(PE)和氯化钾(KCl)预收缩的胸主动脉环收缩张力的影响。结果表明胰岛素对PE预收缩的胸主动脉环产生浓度依赖性的舒张作用,且有内皮组和去内皮组间无显著差异。胰岛素对KCl预收缩的胸主动脉环没有显著影响。胰岛素对PE预收缩的胸主动脉环有非内皮依赖性舒张作用。 展开更多

关键词 胰岛素 胸主动脉环 血管平滑肌细胞 内皮细胞

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DL0805抑制血管紧张素Ⅱ通过Ca^(2+)依赖和非Ca^(2+)依赖途径引起的大鼠胸主动脉环收缩

14

作者 李莉 袁天翊 +4 位作者 郭晶 方莲花 杨海光 张莉 杜冠华 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第3期398-403,共6页

目的探讨Rho激酶抑制剂DL0805抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)收缩大鼠胸主动脉环的机制。方法体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC),在有/无1.8 mmol/L Ca2+的环境下采用Fura2/AM荧光探针法测定... 目的探讨Rho激酶抑制剂DL0805抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)收缩大鼠胸主动脉环的机制。方法体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC),在有/无1.8 mmol/L Ca2+的环境下采用Fura2/AM荧光探针法测定细胞内游离钙(intracellular calcium,[Ca2+]i)的变化。应用Western blotting检测大鼠胸主动脉环肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(myosin phosphatase target subunit 1,MYPT1)和Akt蛋白磷酸化,以及Rho激酶1(Rho kinase 1,ROCK1)蛋白表达水平。结果 DL0805(1、10μmol/L)抑制AngⅡ(100 nmol/L)引起的VSMC细胞内钙释放和外钙内流。DL0805(25、50μmol/L)抑制AngⅡ(100 nmol/L)引起的MYPT1和Akt磷酸化水平以及ROCK1蛋白表达水平增高。结论 DL0805能抑制AngⅡ通过Ca2+依赖和非Ca2+依赖途径引起的大鼠胸主动脉环收缩。 展开更多

关键词 DL0805 血管紧张素Ⅱ 大鼠胸主动脉环 细胞内游离钙 RHO激酶 血管平滑肌细胞

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氧化低密度脂蛋白改变载脂蛋白E基因敲除小鼠血管平滑肌细胞中miR-133a及其靶基因的表达 被引量：1

15

作者 高松 李杨欣 +3 位作者 吴菡婧 Harnath Shelat Michael Wassler 耿永健 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2080-2080,共1页

关键词 血管平滑肌细胞 载脂蛋白 miR-133a 基因敲除小鼠 小鼠细胞 内膜平滑肌细胞 鼠主动脉 血管内膜 APOE 酶消化法

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多肽化合物urantide对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉和VSMC中Ⅳ型胶原表达的影响

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作者 毕红东 谢亚芹 +4 位作者 崔海鹏 刘凯 孙晓旭 王途 赵娟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期342-346,473,共6页

目的:探讨多肽化合物urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠胸主动脉和血管平滑肌细胞(VSMC中Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的影响,阐明其防治AS的作用机制。方法:180只Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=30)和AS模型组(n=150),采用高脂饲料喂养和腹腔注... 目的:探讨多肽化合物urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠胸主动脉和血管平滑肌细胞(VSMC中Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的影响,阐明其防治AS的作用机制。方法:180只Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=30)和AS模型组(n=150),采用高脂饲料喂养和腹腔注射维生素D3(VD3)的方法建立大鼠AS模型。150只AS模型鼠随机分为AS组、氟伐他汀(Flu)组和urantide组(3、7和14d组)(n=30)。免疫组织化学法检测大鼠胸主动脉壁内ColⅣ的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清和尿液中羟脯胺酸(HYP)水平。体外培养的VSMC随机分为正常对照组、尾加压素(UⅡ)(10-8 mol·L-1)组、Flu组和urantide (10-10～10-6 mol·L-1)组,ELISA法检测各组大鼠VSMC培养上清中ColⅣ水平。结果:各组大鼠胸主动脉内膜下不规则斑块内ColⅣ表达水平比较差异有统计学意义(F=35.09,P<0.01)。与正常对照组比较,AS组大鼠主动脉中ColⅣ表达水平明显升高(P<0.01);urantide组ColⅣ阳性染色强度和范围较AS组均减少(P<0.01)。各组大鼠血清和尿液中HYP水平比较差异有统计学意义(F=24.38,P<0.01;F=26.72,P<0.01)。与正常对照组比较,AS组大鼠血清中HYP水平明显升高(P<0.01),尿液中HYP水平明显降低(P<0.01);与AS组比较,urantide组大鼠血清中HYP水平均明显降低(P<0.01),尿液中HYP水平明显升高(P<0.01),接近或优于Flu组水平。各组大鼠VSMC培养上清中ColⅣ水平比较差异有统计学意义(F=31.04,P<0.01)。与正常对照组比较,UⅡ组大鼠VSMC培养上清中ColⅣ水平明显升高(P<0.01);与UⅡ组比较,urantide组大鼠VSMC培养上清中ColⅣ水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:urantide可抑制AS大鼠胸主动脉和VSMC中ColⅣ的表达,缓解AS病变程度,为临床应用urantide治疗AS提供了实验依据。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 尾加压素Ⅱ URANTIDE 胸主动脉 血管平滑肌细胞 Ⅳ型胶原

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普罗托品对大鼠血管平滑肌收缩反应及细胞内游离钙浓度的影响 被引量：6

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作者 李斌 吴芹 +2 位作者 孙安盛 石京山 黄燮南 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1097-1099,共3页

目的　探讨普罗托品(protopine ,Pro)对大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响。方法　采用无Ca2 + 复Ca2 + 的实验法,间接观察Pro对大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ] i)的可能影响,再利用钙荧光指示剂Fura 2 AM负载的培养大... 目的　探讨普罗托品(protopine ,Pro)对大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响。方法　采用无Ca2 + 复Ca2 + 的实验法,间接观察Pro对大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ] i)的可能影响,再利用钙荧光指示剂Fura 2 AM负载的培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,直接观察在Pro存在下,对去甲肾上腺素(NA)和高钾所致的[Ca2 + ] i 的升高的影响。结果　在无钙Krebs液中,Pro 10、3 0、10 0 μmol L对NA所致血管条的短暂收缩均有明显的浓度依赖性抑制作用,对复Ca2 + 后NA所诱发的持续收缩也呈剂量依赖性抑制作用。在Fura 2 AM负载血管平滑肌细胞的实验表明,Pro (5 0 μmol L ,10 0 μmol L)对静息时的[Ca2 + ] i 无明显影响;在有外钙存在条件下,Pro 5 0 μmol L能明显降低NA所致[Ca2 + ] i 的升高,对KCl引起的[Ca2 + ] i升高有降低趋势;当Pro的浓度增加到10 0 μmol L时,对NA和KCl引起的[Ca2 + ] i 升高均有明显的抑制作用。结论　Pro可能通过抑制Ca2 + 释放和(或)Ca2 + 内流来降低NA和高钾所致血管平滑肌[Ca2 + ] i 的升高,从而抑制血管平滑肌的收缩反应。 展开更多

关键词 普罗托品 细胞内游离钙 大鼠胸主动脉条 血管平滑肌细胞

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卡托普利对血管平滑肌细胞结构和钙的影响 被引量：2

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作者 齐建华 章鲁 +4 位作者 王军 顾培坤 黄明智 金正钧 王新明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期229-232,共4页

为调查卡托普利（Ｃａｐ）的特殊血管效应和探讨其机制，用电镜和图象技术观察口服Ｃａｐ对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）超微结构和Ｃａ２＋的影响。用Ｃａｐ治疗ＳＨＲ１６ｗｋ，降低主动脉中膜厚度（１０... 为调查卡托普利（Ｃａｐ）的特殊血管效应和探讨其机制，用电镜和图象技术观察口服Ｃａｐ对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）超微结构和Ｃａ２＋的影响。用Ｃａｐ治疗ＳＨＲ１６ｗｋ，降低主动脉中膜厚度（１０４．７±６．６μｍｖｓ１３５．７±８．１μｍ）和改善ＡＳＭＣ的异常超微结构征象如异形核、线粒体肿胀和管状结构扩张以及降低ＡＳＭＣＣａ２＋浓度。故Ｃａｐ有阻止ＳＨＲ主动脉中膜肥厚和改善ＳＨＲＡＳＭＣ异常性超微结构的特殊血管效应。而降ＡＳＭＣＣａ２＋可能部分与它的特殊效应有关。 展开更多

关键词 胸主动脉 钙 卡托普利 超微结构 平滑肌细胞

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ATG5介导内皮细胞外泌体调控平滑肌细胞增殖 被引量：1

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作者 李征远 胡培 +2 位作者 周琳 单勐也 郭兴荣 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第11期1718-1724,共7页

目的探究ATG5介导人脐静脉内皮细胞外泌体对小鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法利用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注消化法获得原代人脐静脉内皮细胞;利用组织块贴壁法分离原代小鼠胸主动脉平滑肌细胞;利用超速离心法提取内皮细胞外泌体;利用... 目的探究ATG5介导人脐静脉内皮细胞外泌体对小鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法利用0.1%Ⅱ型胶原酶灌注消化法获得原代人脐静脉内皮细胞;利用组织块贴壁法分离原代小鼠胸主动脉平滑肌细胞;利用超速离心法提取内皮细胞外泌体;利用共聚焦高内涵成像分析仪示踪平滑肌细胞摄取内皮细胞外泌体;利用siRNA干扰内皮细胞ATG5蛋白表达;利用高内涵DPC成像模式分析平滑肌细胞增殖能力。结果成功得到活性好、纯度高的人脐静脉内皮细胞和小鼠胸主动脉平滑肌细胞。超速离心法获得的内皮细胞外泌体经免疫印迹鉴定,呈Hsp70、TSG101、CD9和CD63阳性。高内涵示踪结果显示平滑肌细胞在共培养30 min后开始摄取内皮细胞外泌体,共培养4 h后,平滑肌细胞摄取的外泌体明显增多。高内涵监测结果显示,与对照组比较,ATG5干扰组内皮细胞分泌的外泌体在浓度为200μg/ml时能够明显抑制平滑肌细胞的增殖。结论ATG5可通过介导内皮细胞外泌体调控平滑肌细胞增殖。 展开更多

关键词 人脐静脉内皮细胞 小鼠胸主动脉平滑肌细胞 外泌体 ATG5

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穹窿主体蛋白对血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：1

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作者 童星 江斌 +1 位作者 柏惠 陈琪 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期539-543,共5页

目的 :探讨穹窿主体蛋白(major vault protein,MVP)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法:分离培养野生型小鼠VSMCs,用血小板源性生长因子(PDGF-BB)或15%胎牛血清(FBS)刺激VSMCs增殖,Western blot检测... 目的 :探讨穹窿主体蛋白(major vault protein,MVP)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法:分离培养野生型小鼠VSMCs,用血小板源性生长因子(PDGF-BB)或15%胎牛血清(FBS)刺激VSMCs增殖,Western blot检测VSMCs的MVP表达水平,同时检测特异性分化标记物α-SMA和SM22α表达水平。然后用PDGF-BB刺激人主动脉平滑肌细胞(HAo SMCs),检测MVP的表达差异。再分别分离培养野生型小鼠和MVP敲除型小鼠的VSMCs,通过CCK8细胞增殖实验检测两者的增殖能力;同时用si RNA干扰的方法,使HAo SMCs中MVP低表达,检测其增殖能力的变化。结果:用PDGFBB或15%FBS刺激VSMCs后,MVP表达水平呈浓度和时间依赖性下降,α-SMA和SM22α表达水平也相应降低。MVP缺失或低表达情况下,VSMCs的增殖能力均下降。结论:MVP在VSMCs增殖中起了重要作用。 展开更多

关键词 穹窿主体蛋白 小鼠主动脉平滑肌细胞 人主动脉平滑肌细胞 增殖

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