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小鼠胚胎成纤维细胞分离培养研究被引量：5: 1; 作者庄淑珍吕芳 +1 位作者潘巍张富春《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第6期729-733,共5页; 为探索实验室影响小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）分离和培养的因素,取昆明白小鼠胚胎分离成纤维细胞,利用体外培养体系,对不同胎龄、不同血清浓度、不同胰蛋白酶浓度和作用时间对MEF分离及培养的影响进行研究,观察MEF的生长形态及其生物学... 展开更多; 关键词小鼠胚胎成纤维细胞分离培养生物学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠胚胎成纤维细胞对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：2: 2; 作者耿智敏姬乐 +1 位作者郑见宝王林《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期286-289,共4页; 目的探讨小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)是否具有肿瘤相关成纤维细胞相似的生物学活性。方法原代培养MEF并经细胞免疫组化法鉴定α-SMA的表达情况;收集培养48h无血清高糖DMEM培养基上清并制备条件培养基MEF-CM,根据实验中Lewis肺癌细胞(LLC)... 展开更多; 关键词小鼠胚胎成纤维细胞 LEWIS肺癌细胞肿瘤微环境肿瘤相关成纤维细胞细胞增殖细胞凋亡细胞培养; 在线阅读下载PDF 职称材料

蛋白磷酸酶2A催化亚基α在小鼠胚胎成纤维细胞迁移中的作用研究被引量：1: 3; 作者王庆华王生存 +4 位作者李斌刘春吴刘成王旭邵义祥《动物医学进展》北大核心 2016年第6期49-54,共6页; 利用体外基因敲除技术检测小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)周期和迁移能力的变化,探究蛋白磷酸酶2A的Cα亚基在MEFs细胞迁移过程中的作用。用Cαfl/fl的纯合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取E12.5d的胚胎制作小鼠胚胎成... 展开更多; 关键词蛋白磷酸酶2A 小鼠胚胎成纤维细胞细胞迁移细胞周期; 在线阅读下载PDF 职称材料

真核表达载体pEGFP-N1-kin17的构建及其在Zmpste24^(-/-)小鼠胚胎成纤维细胞内的表达: 4; 作者郑慧玲崔红晶 +2 位作者余磊黄颖刘新光《中国医药科学》 2014年第13期34-37,127,共5页; 目的构建人kin17基因真核表达载体pEGFP-N1-kin17,将载体转染至野生型及Zmpste24基因缺失的小鼠胚胎成纤维上皮细胞,荧光显微镜观察kin17蛋白表达情况。方法用高保真DNA聚合酶,从pCMV-kin17载体中扩增获取人kin17 cDNA编码序列,将其克隆... 展开更多; 关键词 kin17 GFP Zmpste24 小鼠胚胎成纤维细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达的影响被引量：7: 5; 作者尹志红王恩峰 +1 位作者白瑞庞全海《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期218-224,共7页; 旨在研究RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)黑素皮质素受体1(Melanocortin-1receptor,MC1R)基因表达的影响;以MC1R基因作为影响哺乳动物毛色性状的候选基因,通过RNA干扰(RNAi)技术抑制小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达。合成3对针对小鼠ME... 展开更多; 关键词小干扰RNA 黑素皮质素受体1基因小鼠胚胎成纤维细胞抑制率; 在线阅读下载PDF 职称材料

灰毡毛忍冬乙醇提取物减缓D–半乳糖致小鼠胚胎成纤维细胞氧化应激的效果: 6; 作者韩少凡程满 +5 位作者王懿文陈彦超朱登峰彭国平饶力群汪启明《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期43-51,78,共10页; 为探讨灰毡毛忍冬乙醇提取物对D–半乳糖诱导小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)氧化应激的保护作用及其潜在机制,通过广泛靶标代谢组测序和高效液相色谱法检测灰毡毛忍冬乙醇提取物中活性物质,采用20 mg/mL的D–半乳糖处理MEF细胞,建立细胞衰老模... 展开更多; 关键词灰毡毛忍冬乙醇提取物 D–半乳糖小鼠胚胎成纤维细胞线粒体氧化应激; 在线阅读下载PDF 职称材料

人网膜脂肪干细胞与小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1体外增殖分化对比观察: 7; 作者李肖晓刘波 +1 位作者阿尔孜古丽·吐尔逊张明琛《山东医药》 CAS 2021年第36期36-40,共5页; 目的比较人网膜脂肪干细胞与小鼠胚胎成纤维细胞(3T3-L1)体外增殖分化情况。方法使用胶原酶消化法提取人网膜脂肪干细胞,复苏冻存的3T3-L1,进行培养,显微镜观察细胞在培养瓶中的生长过程,拍照记录细胞密度、形态;将两种细胞接种入96孔板... 展开更多; 关键词脂肪干细胞前体脂肪细胞人网膜脂肪干细胞小鼠胚胎成纤维细胞细胞增殖细胞分化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠胚胎成纤维细胞分离培养研究被引量：5: 1; 作者庄淑珍吕芳潘巍张富春; 机构新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室/新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐市新市区疾病预防控中心; 出处《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第6期729-733,共5页; 基金国家自然科学基金项目(30360062) 中国博士后科学基金项目(2005038619); 文摘为探索实验室影响小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）分离和培养的因素,取昆明白小鼠胚胎分离成纤维细胞,利用体外培养体系,对不同胎龄、不同血清浓度、不同胰蛋白酶浓度和作用时间对MEF分离及培养的影响进行研究,观察MEF的生长形态及其生物学特性。结果表明,在实验室条件下,12.5-14.5 d胎龄的小鼠胎儿MEF分离效果最好;最佳培养基为DMEM添加15%小牛血清;第3代细胞增殖最旺盛;室温条件下,0.125%胰蛋白酶消化MEF时间以8-10 min为宜。在培养ES细胞时,应选择第3-5代的MEF作为饲养层细胞。研究获得了可在实验室分离制备MEF的方法,为实验室进一步分离培养ES细胞奠定基础。; 关键词小鼠胚胎成纤维细胞分离培养生物学特性; Keywords mouse embryonic fibroblasts isolation culture biological characteristics; 分类号 S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠胚胎成纤维细胞对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：2: 2; 作者耿智敏姬乐郑见宝王林; 机构西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科西安交通大学医学院第一附属医院普外科; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期286-289,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30971340)~~; 文摘目的探讨小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)是否具有肿瘤相关成纤维细胞相似的生物学活性。方法原代培养MEF并经细胞免疫组化法鉴定α-SMA的表达情况;收集培养48h无血清高糖DMEM培养基上清并制备条件培养基MEF-CM,根据实验中Lewis肺癌细胞(LLC)细胞培养基不同,分为MEF条件培养基组、DMEM组,应用MTT法检测不同培养基对LLC增殖率的影响;再根据5-Fu作用与否,进一步应用流式细胞仪检测不同培养基对LLC凋亡的影响。结果成功获得原代培养的MEF,表达α-SMA;MEF-CM较DMEM能够明显促进LLC细胞增殖(P<0.05);MEF-CM较DMEM能够明显抑制LLC细胞凋亡,并能够明显拮抗5-Fu的肿瘤杀伤作用(P<0.05)。结论 MEF是一种活化的成纤维细胞,具有肿瘤相关成纤维细胞相似的生物学活性,有促进LLC增殖及抑制凋亡的作用,可以作为肿瘤相关成纤维细胞用于肿瘤微环境的研究。; 关键词小鼠胚胎成纤维细胞 LEWIS肺癌细胞肿瘤微环境肿瘤相关成纤维细胞细胞增殖细胞凋亡细胞培养; Keywords mouse embryonic fibroblast （MEF） Lewis lung carcinoma cell tumor microenvironment tumorassociated fibroblasts proliferation apopotosis cell culture; 分类号 R733.5 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蛋白磷酸酶2A催化亚基α在小鼠胚胎成纤维细胞迁移中的作用研究被引量：1: 3; 作者王庆华王生存李斌刘春吴刘成王旭邵义祥; 机构南通大学实验动物中心南通大学附属医院儿科; 出处《动物医学进展》北大核心 2016年第6期49-54,共6页; 基金江苏省高校自然科学研究项目(11KJB180010) 江苏省高校自然科学研究项目(14KJB180018) 江苏省高校自然科学研究项目(15KJB180015); 文摘利用体外基因敲除技术检测小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)周期和迁移能力的变化,探究蛋白磷酸酶2A的Cα亚基在MEFs细胞迁移过程中的作用。用Cαfl/fl的纯合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取E12.5d的胚胎制作小鼠胚胎成纤维细胞。利用表达Cre重组酶(Ad-Cre-EGFP)以及GFP荧光蛋白(Ad-EGFP)的腺病毒载体,对P3代MEFs进行感染,分别用PCR,RT-PCR和Western blot方法进行基因型鉴定。同时利用流式分选技术检测感染后MEFs的细胞周期的变化,利用细胞划痕试验检测了其细胞迁移能力的变化。结果显示,胰酶消化的方法成功获得了小鼠胚胎成纤维细胞,DNA,RNA和蛋白水平的鉴定获得了3对3的野生型和基因敲除MEFs。流式分选发现Ad-Cre处理的MEFs与Ad-EGFP处理的MEFs相比,处于G2期的细胞比例为30.8%±2.57%,高于Ad-EGFP MEFs的23.9%±2.46%,并且细胞碎片的比例也远高于后者。划痕试验表明,Cα亚基缺失后细胞迁移能力下降,12h就显著低于对照组。结果表明,腺病毒携带的Cre重组酶能够在体外有效地敲除掉MEFs中的蛋白磷酸酶2A的Cα亚基,PP2ACα亚基的缺失会导致MEFs细胞周期倾向于阻滞在G2期,并会降低细胞迁移的能力。; 关键词蛋白磷酸酶2A 小鼠胚胎成纤维细胞细胞迁移细胞周期; Keywords protein phosphatase 2A mouse embryonic fibroblast cell migration cell cycle; 分类号 S852.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名真核表达载体pEGFP-N1-kin17的构建及其在Zmpste24^(-/-)小鼠胚胎成纤维细胞内的表达: 4; 作者郑慧玲崔红晶余磊黄颖刘新光; 机构广东省医学分子重点实验室广东医学院衰老研究所广东医学院生物化学与分子生物学研究所; 出处《中国医药科学》 2014年第13期34-37,127,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30672205 81170327) 广东省自然科学基金重点项目(9252402301000002); 文摘目的构建人kin17基因真核表达载体pEGFP-N1-kin17,将载体转染至野生型及Zmpste24基因缺失的小鼠胚胎成纤维上皮细胞,荧光显微镜观察kin17蛋白表达情况。方法用高保真DNA聚合酶,从pCMV-kin17载体中扩增获取人kin17 cDNA编码序列,将其克隆至pEGFP-N1载体中,经酶切、连接、转化后,挑取阳性克隆进行菌液进行PCR、菌液质粒双酶切及测序鉴定;将成功构建的GFP-kin17表达载体转染Zmpste24-/-MEFs,荧光显微镜观察kin17蛋白的核定位情况。结果 pEGFP-N1-kin17转化细菌克隆测序结果完全正确;将载体转入MEFs后,可以通过荧光显微镜观察到kin17蛋白的表达。结论成功构建GFP融合的kin17真核表达载体,该载体为kin17蛋白的研究提供工具。本实验中载体pEGFP-N1-kin17在野生型和Zmpste24-/-MEFs中均成功表达。; 关键词 kin17 GFP Zmpste24 小鼠胚胎成纤维细胞; Keywords kin17 GFP Zmpste24 Mouse embryonic fibroblasts; 分类号 R346 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达的影响被引量：7: 5; 作者尹志红王恩峰白瑞庞全海; 机构山西农业大学动物科技学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期218-224,共7页; 基金国家自然科学基金项目(30972223 31272628); 文摘旨在研究RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)黑素皮质素受体1(Melanocortin-1receptor,MC1R)基因表达的影响;以MC1R基因作为影响哺乳动物毛色性状的候选基因,通过RNA干扰(RNAi)技术抑制小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达。合成3对针对小鼠MEF中MC1R基因的瞬时干扰siRNA,采用反向转染法将siRNA转染入MEF,取转染siRNA 48h后的小鼠胚胎成纤维细胞提取总RNA和总蛋白,并通过QRT-PCR技术和Western bolt检测MC1RmRNA和其蛋白的相对表达量;结果显示,siRNA1组和siRNA2组的MC1R mRNA相对表达量和MC1R蛋白表达量显著低于空白对照组(P<0.05),但siRNA3组表达不显著;本试验利用反向转染方法,成功地对体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞进行siRNA转染。MC1R基因与蛋白的抑制情况相一致,说明siRNA1和siRNA2对MC1R的抑制效果确实有效,并筛选出有显著干扰效果的siRNA,为进一步研究MC1R在毛色发育过程中的调控机理提供科学依据。; 关键词小干扰RNA 黑素皮质素受体1基因小鼠胚胎成纤维细胞抑制率; Keywords siRNA MC1R MEF inhibition ratio; 分类号 S865.13 [农业科学—野生动物驯养]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名灰毡毛忍冬乙醇提取物减缓D–半乳糖致小鼠胚胎成纤维细胞氧化应激的效果: 6; 作者韩少凡程满王懿文陈彦超朱登峰彭国平饶力群汪启明; 机构湖南农业大学生物科学技术学院中国科学院生物物理研究所隆回县农业农村局; 出处《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期43-51,78,共10页; 基金湖南省高层次聚集工程创新创业人才项目(2021RC5006) 湖南农业大学“双一流”建设基金(SYL2019021)。; 文摘为探讨灰毡毛忍冬乙醇提取物对D–半乳糖诱导小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)氧化应激的保护作用及其潜在机制,通过广泛靶标代谢组测序和高效液相色谱法检测灰毡毛忍冬乙醇提取物中活性物质,采用20 mg/mL的D–半乳糖处理MEF细胞,建立细胞衰老模型,试验设置对照组(0 mg/mL的D–半乳糖)、模型组(20 mg/mL的D–半乳糖)、灰毡毛忍冬乙醇提取物组(100、500、1000μg/mL的灰毡毛忍冬乙醇提取物添加20 mg/mL的D–半乳糖)、阳性对照组(50μg/mL的三七总皂苷添加20 mg/mL的D–半乳糖),按照试验分组,将细胞在37℃、5%的CO_(2)培养箱中培养48 h,检测细胞抑制率、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、线粒体膜电位(MMP)和线粒体活性氧(mtROS)水平,以及p53、p16、线粒体复合体基因、Bcl–2、Caspase–3的表达水平。结果表明:灰毡毛忍冬乙醇提取物中含有酚酸、黄酮、有机酸、萜类等大量活性物质;与对照组相比,模型组细胞抑制率显著增加,细胞数量显著减少,MMP下降,mtROS水平增加,SOD含量降低,MDA含量增加,线粒体复合体蛋白NDUFV1和抑凋亡蛋白Bcl–2明显下降,Caspase–3明显上升;与模型组相比较,灰毡毛忍冬乙醇提取物组和阳性对照组有效降低了细胞抑制率,显著提高了细胞数量和SOD活性,降低了MDA含量,提高MMP水平,降低mtROS含量,有效降低p53、p16、Caspase–3的蛋白水平,升高Bcl–2、NDUFV1的蛋白水平。说明在MEF细胞中,灰毡毛忍冬乙醇提取物可通过增加线粒体复合体I蛋白富集和减缓细胞凋亡来减弱D–半乳糖所诱导的氧化应激效应。; 关键词灰毡毛忍冬乙醇提取物 D–半乳糖小鼠胚胎成纤维细胞线粒体氧化应激; Keywords Lonicera macranthoides ethanol extract D-galactose mouse embryonic fibroblasts mitochondrion oxidative stress; 分类号 R285.5 [医药卫生—中药学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人网膜脂肪干细胞与小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1体外增殖分化对比观察: 7; 作者李肖晓刘波阿尔孜古丽·吐尔逊张明琛; 机构新疆医科大学健康管理学院新疆医科大学第一附属医院临床研究院中国科学院大学附属宁波市华美医院内分泌科; 出处《山东医药》 CAS 2021年第36期36-40,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(81760161)。; 文摘目的比较人网膜脂肪干细胞与小鼠胚胎成纤维细胞(3T3-L1)体外增殖分化情况。方法使用胶原酶消化法提取人网膜脂肪干细胞,复苏冻存的3T3-L1,进行培养,显微镜观察细胞在培养瓶中的生长过程,拍照记录细胞密度、形态;将两种细胞接种入96孔板,定时加入CCK-8试剂,测定吸光值,绘制生长曲线;将两种细胞诱导为成熟脂肪细胞,油红O染色后,观察脂滴分布。结果人网膜脂肪干细胞1~3代细胞倍增时间6 d,随着传代次数增多,细胞贴壁后停止增殖,第4天出现老化凋亡;复苏后3T3-L1倍增时间48 h,每72 h传代1次。根据人网膜脂肪干细胞和3T3-L1的吸光值,二者的指数增长期分别为第2~5天、第2天,平台期分别为第6~8天、第3~10天,人网膜脂肪干细胞第9天进入衰亡期。人网膜脂肪干细胞和3T3-L1经过10天成脂诱导分化,油红染色后均可见红染的脂滴,两种细胞均可分化为成熟脂肪细胞,并且在诱导过程中出现漂浮裂解,贴壁细胞减少。结论与3T3-L1相比,人网膜脂肪干细胞也具有成脂分化的能力,但增殖能力有限。; 关键词脂肪干细胞前体脂肪细胞人网膜脂肪干细胞小鼠胚胎成纤维细胞细胞增殖细胞分化; Keywords adipose-derived stem cells precursor adipocytes human omental adipose stem cells mouse embryonic fibroblasts cell proliferation cell differentiation; 分类号 R318.15 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	小鼠胚胎成纤维细胞分离培养研究	庄淑珍吕芳潘巍张富春	《新疆农业科学》 CAS CSCD	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	小鼠胚胎成纤维细胞对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响	耿智敏姬乐郑见宝王林	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	蛋白磷酸酶2A催化亚基α在小鼠胚胎成纤维细胞迁移中的作用研究	王庆华王生存李斌刘春吴刘成王旭邵义祥	《动物医学进展》北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	真核表达载体pEGFP-N1-kin17的构建及其在Zmpste24^(-/-)小鼠胚胎成纤维细胞内的表达	郑慧玲崔红晶余磊黄颖刘新光	《中国医药科学》	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	RNAi对小鼠胚胎成纤维细胞中MC1R基因表达的影响	尹志红王恩峰白瑞庞全海	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	7	在线阅读下载PDF 职称材料
6	灰毡毛忍冬乙醇提取物减缓D–半乳糖致小鼠胚胎成纤维细胞氧化应激的效果	韩少凡程满王懿文陈彦超朱登峰彭国平饶力群汪启明	《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人网膜脂肪干细胞与小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1体外增殖分化对比观察	李肖晓刘波阿尔孜古丽·吐尔逊张明琛	《山东医药》 CAS	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料