目的观察亚低温后处理对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)模型胰岛素降解酶(IDE)的影响。方法采用随机数字表法将生长状态良好的N2a细胞分为对照组、模型组和低温组(n=60),对照组在正常条件下培养,其余2组先氧糖剥夺...目的观察亚低温后处理对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)模型胰岛素降解酶(IDE)的影响。方法采用随机数字表法将生长状态良好的N2a细胞分为对照组、模型组和低温组(n=60),对照组在正常条件下培养,其余2组先氧糖剥夺培养3 h后,模型组在正常条件下复糖复氧,低温组于32℃低温下复糖复氧24 h后再在正常条件下复糖复氧。各组于复糖复氧24 h和48 h时,用流式细胞学检测细胞凋亡率,乳酸脱氢酶检测细胞毒性,分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,ELISA法检测β淀粉样蛋白(Aβ)浓度,Western blot和qRT-PCR法检测IDE蛋白和mRNA相对表达。结果与对照组比较,模型组和低温组24 h和48 h细胞凋亡率、细胞毒性和Caspase-3活性明显升高(P<0.05),IDE表达明显降低(P<0.05),模型组Aβ浓度明显升高(P<0.05);与模型组相比,低温组24 h和48 h细胞凋亡率、细胞毒性、Caspase-3活性和Aβ浓度明显降低(P<0.05),IDE蛋白(0.24±0.01 vs 0.12±0.00,0.33±0.01 vs 0.17±0.01)和mRNA(0.67±0.02 vs 0.48±0.01,0.63±0.02 vs 0.41±0.01)相对表达明显升高(P<0.05)。结论亚低温后处理可以减轻小鼠N2a细胞OGD/R模型损伤,该机制可能与上调IDE的表达,减少Aβ的生成,减少细胞凋亡率有关。展开更多
目的构建用于评估神经母细胞瘤患儿生存预后的临床预测模型。方法从美国国立癌症研究所的“监测、流行病学和最终结果”(Surveillance,Epidemiology,and End Results,SEER)数据库中收集2000—2019年间公开发布的神经母细胞瘤患儿临床资...目的构建用于评估神经母细胞瘤患儿生存预后的临床预测模型。方法从美国国立癌症研究所的“监测、流行病学和最终结果”(Surveillance,Epidemiology,and End Results,SEER)数据库中收集2000—2019年间公开发布的神经母细胞瘤患儿临床资料,将筛选后的数据按2∶1的比例随机划分为训练集和验证集。采用单因素和多因素Cox比例风险回归模型确定预后相关因素,构建神经母细胞瘤预后预测模型并绘制列线图。采用一致性指数(C指数)、受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积(area under curve,AUC)和校准曲线评估列线图的辨别和校准能力,采用决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)评价列线图的临床实用性。结果多因素Cox回归分析结果显示:年龄1~5岁(HR=3.595,95%CI:2.122~6.091)或≥5岁(HR=4.556,95%CI:2.566~8.091)、肿瘤长径≥7.5 cm(HR=1.934,95%CI:1.347~2.777)、肿瘤位于肾上腺和腹膜后(HR=1.520,95%CI:1.029~2.247)、肿瘤转移(HR=5.263,95%CI:2.146~12.907)和未接受手术治疗(HR=1.866,95%CI:1.225~2.833)为神经母细胞瘤患儿预后不良的独立危险因素。将上述变量纳入预测模型并绘制列线图,进行1、3、5年的总生存率预测。预测模型在训练集和验证集中的C指数分别为0.803和0.785,训练集中ROC曲线在1、3、5年的总生存率预测AUC值分别为0.782、0.829、0.842,验证集中分别为0.748、0.807、0.855。DCA曲线表明,列线图的预测概率阈值在0.1~0.6之间时,使用列线图预测神经母细胞瘤患儿的预后更准确。结论年龄≥1岁、肿瘤长径≥7.5 cm、肿瘤原发于肾上腺和腹膜后、存在远处转移和未接受手术治疗是神经母细胞瘤患儿预后不良的独立危险因素,据此构建的预测模型能较为准确地预测神经母细胞瘤患儿预后,为临床决策提供参考。展开更多
文摘目的观察亚低温后处理对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)模型胰岛素降解酶(IDE)的影响。方法采用随机数字表法将生长状态良好的N2a细胞分为对照组、模型组和低温组(n=60),对照组在正常条件下培养,其余2组先氧糖剥夺培养3 h后,模型组在正常条件下复糖复氧,低温组于32℃低温下复糖复氧24 h后再在正常条件下复糖复氧。各组于复糖复氧24 h和48 h时,用流式细胞学检测细胞凋亡率,乳酸脱氢酶检测细胞毒性,分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,ELISA法检测β淀粉样蛋白(Aβ)浓度,Western blot和qRT-PCR法检测IDE蛋白和mRNA相对表达。结果与对照组比较,模型组和低温组24 h和48 h细胞凋亡率、细胞毒性和Caspase-3活性明显升高(P<0.05),IDE表达明显降低(P<0.05),模型组Aβ浓度明显升高(P<0.05);与模型组相比,低温组24 h和48 h细胞凋亡率、细胞毒性、Caspase-3活性和Aβ浓度明显降低(P<0.05),IDE蛋白(0.24±0.01 vs 0.12±0.00,0.33±0.01 vs 0.17±0.01)和mRNA(0.67±0.02 vs 0.48±0.01,0.63±0.02 vs 0.41±0.01)相对表达明显升高(P<0.05)。结论亚低温后处理可以减轻小鼠N2a细胞OGD/R模型损伤,该机制可能与上调IDE的表达,减少Aβ的生成,减少细胞凋亡率有关。
